CC BY
23
клинический опыт
81
DOI: 10.23868/202004020
связь полиморфизма генов TNF, MMP9, CYBA с субклиническими изменениями артериальной стенки и факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний
А.А. Акопян1, К.И. Кириллова1, И.Д. Стражеско2, Л.М. Самоходская1, С.Л. Леонов3 Е.М. Гельфанд3, А.Г. Сорокина1, Я.А. Орлова1
1 Медицинский научно-образовательный центр Московского
Поступила: 05.11.2019
Принята к печати: 18.05.2020 Опубликована on-line: 01.07.2020
государственного университета им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
2 Российский геронтологический научно-клинический центр Российского национального исследовательского медицинского университета
им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия
3 Алтайский государственный технический университет им. И.И. Ползунова, Барнаул, Россия
association of tnf, mmp9, cyba polymorphism with subclinical arterial wall changes and cardiovascular diseases risk factors
A.A. Akopyan1, 2, K.I. Kirillova1, I.D. Strazhesko2, 1, L.M. Samokhodskaya1, S.L. Leonov3, E.M. Gelfand3, A.G. Sorokina1, I.A. Orlova1
1 Medical Scientific and Educational Center of M.V. Lomonosov Moscow State University, Moscow, Russia
2 Russian Clinical and Research Center of Gerontology, N.I. Pirogov Russian National Research Medical University, Moscow, Russia
3 I.I. Polzunov Altai State Technical University, Barnaul, Russia
e-mail: a.alexandrova18@gmail.com
Сердечно-сосудистые заболевания являются ведущей причиной смертности во всем мире. К факторам риска, приводящим к развитию сердечно-сосудистых заболеваний, относятся субклинические изменения артерий. Одну из ключевых ролей в развитии субклинических изменений артериальной стенки и сердечно-сосудистых заболеваний играет хроническое воспаление и окислительный стресс. Вклад полиморфных вариантов генов, связанных с усилением этих процессов с параметрами состояния артериальной стенки (скорость пульсовой волны, толщина комплекса интима-медиа, эндотелий-зависимая вазо-дилатация, наличие атеросклеротических бляшек) и факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний, изучен недостаточно. Цель работы: с помощью межгруппового анализа и построения моделей множественной логистической регрессии исследовать связь полиморфизма -238G>A гена TNF, -15620>T гена MMP9 и а214Т>С гена CYBA с параметрами изменения артериальной стенки и факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний у 160 относительно здоровых лиц разного возраста.
У пациентов с генотипом GG полиморфизма -238G>A гена TNF был отмечен более низкий уровень альдостерона (p=0,021), более высокие показатели гликированного гемоглобина (p=0,02) и инсулиноподобного фактора роста (p=0,032). Пациенты с генотипом СТ полиморфизма 1562С>Г гена MMP9 чаще страдали ожирением (p=0,05). У пациентов с генотипом CC и ТС полиморфизма а214Т>С гена CYBA была обнаружена меньшая длина теломер лейкоцитов (p=0,011). Связи полиморфных вариантов генов TNF, MMP9 и CYBA с параметрами изменения артериальной стенки выявить не удалось. Была показана связь полиморфизма -238G>A гена TNF и полиморфизма -15620>T гена MMP9 с метаболическими параметрами, а также полиморфизма а214Т>С гена CYBA с длиной теломер лейкоцитов.
Ключевые слова: артериальная жесткость, длина теломер лейкоцитов, полиморфизм гена TNF, полиморфизм гена MMP9, полиморфизм гена CYBA.
Chronic inflammation and oxidative stress play key role in arterial wall changes and cardiovascular diseases. There is limited evidence on influence of genotypes, which are correlated with сhronic inflammation and oxidative stress at arterial wall changes (pulse wave velocity, carotid artery intima-media thickness, endothelium-dependent vasodilation, presence of atherosclerotic plaques) and risk factors of cardiovascular diseases. We examined association of TNF-238G>A polymorphism, MMP9 -1562D>T polymorphism, CYBA c^M^TC polymorphism with arterial wall changes and risk factors of cardiovascular diseases in 160 healthy people of different ages. GG genotype of TNF -238G>A polymorphism was associated with lower levels of aldosterone (p=0,021), higher levels of glycated haemoglobin (p=0,02) and insulin-like growth factor (p=0,032). CT genotype of MMP9 -15620>T polymorphism was associated with most commonly found obesity (p=0,05). CC and TC genotypes of CYBA c^M^TC polymorphism were associated with shorter leucocyte telomere length (p=0,01 1 ). There wasn't found any association of TNF, MMP9, CYBA polymorphism with arterial wall changes. Association was found between TNF -238G>A polymorphism and MMP9 -15620>T polymorphism with metabolic parameters, CYBA c^M^TC polymorphism with leucocyte telomere length.
Keywords: arterial stiffness, leucocyte telomere length, TNF polymorphism, MMP9 polymorphism, CYBA polymorphism.
Введение
Сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) являются ведущей причиной заболеваемости и смертности во всем мире, в том числе и в Российской Федерации [1]. К важным факторам риска развития ССЗ относятся субклинические изменения артериальной стенки: повышение артериальной жесткости, утолщение комплекса интима-медиа, появление атеросклеротических бляшек, эндотелиальная дисфункция [2]. Связь таких традиционных факторов
риска как гликемия натощак, липидный профиль, параметры периферического и центрального артериального давления, наличие сахарного диабета 2 типа, ожирения и артериальной гипертензии c субклиническими изменениями артериальной стенки не вызывает сомнения. В последние годы активно изучается роль новых факторов риска ССЗ: инсулин плазмы крови, инсулиноподобный фактор роста, длина теломер лейкоцитов [3], связь которых с субклиническими изменениями артериальной
стенки была показана в работах ряда авторов [4-6]. Кроме того, усиление хронического воспаления и окислительный стресс также относятся к факторам, влияющим на состояние артериальной стенки [2]. Вклад полиморфизма генов в развитие ССЗ изучен недостаточно. В то же время имеется ряд работ, в которых описана связь генов фактора некроза опухоли-а (ФНО-а), матриксной металлопротеиназы 9 типа (ММП 9) и легкой цепи цитох-рома b с ишемической болезнью сердца (ИБС) [7-9], ишемическим инсультом [10, 11], артериальной гипер-тензией [12]. Изучение связи полиморфизмов именно этих генов с субклиническими изменениями артериальной стенки представляется важным в связи с тем, что эти гены кодируют белки, участвующие в развитии хронического воспаления и окислительного стресса. Данные процессы лежат в основе старения (субклинических изменений) артерий. Выявление факторов, включая генетические, тесно связанных с изменениями артериальной стенки, позволит выделить группу лиц, нуждающихся в самых эффективных мерах профилактики ССЗ. Целью работы было изучение связи полиморфизма генов ФНО-а (TNF), ММП 9 (MMP9) и легкой цепи цитохрома b (CYBA) со скоростью пульсовой волны, толщиной комплекса интима-медиа, эндотелий-зависимой вазодилатацией, наличием атеросклеротических бляшек и факторами риска ССЗ у относительно здоровых людей разного возраста.
Материал и методы
В исследование были включены 160 человек (55 мужчин и 105 женщин) в возрасте от 25 до 82 лет, обратившихся в МНОЦ МГУ имени М.В. Ломоносова для профилактического осмотра в 2018-2019 гг. Критериями исключения были любые известные хронические неинфекционные заболевания, в том числе ССЗ, артериальная гипертензия 3 степени, онкологические заболевания, а также регулярный прием антигипертензивных, гиполи-пидемических, сахароснижающих и других препаратов, беременность и период лактации, отказ от участия в исследовании. Все пациенты подписывали информированное согласие на участие в исследовании. Протокол исследования был одобрен локальным этическим комитетом МНОЦ МГУ (протокол № 5 от 10.09.2018).
Всем пациентам измеряли антропометрические показатели: окружность талии и бедер, их соотношение, вес, рост; уровень систолического и диастолического артериального давления (САД, ДАД) измеряли на калиброванном приборе с использованием плечевой манжеты (HEM-7200 M3, Omron Healthcare, Kyoto, Japan). Артериальную гипертензию диагностировали при значении САД>140 мм рт. ст. и (или) ДАД>90 мм рт. ст.
Скорость пульсовой волны и параметры центрального артериального давления (центральное систолическое и диастолическое, пульсовое и центральное среднее артериальное давление) определяли методом аппланационной тонометрии на приборе SphygmoCor 9.0 hardware (Atcor, Sydney). Значение скорости пульсовой волны >10 м/с считали повышенным. Ультразвуковое исследование каротид-ных артерий проводили с применением системы PHILIPS EPIQ 5 (Нидерланды). Наличие атеросклеротических бляшек диагностировали как фокальное утолщение стенки сосуда более чем на 50% по сравнению с окружающими участками стенки сосуда или как фокальное утолщение комплекса интима-медиа более чем на 1,5 мм, выступающее в просвет сосуда. Значение толщины комплекса интима-медиа >0,9 мм считали повышенным. Эндотелий-зависимую вазодилатацию определяли с помощью пробы с реактивной гиперемией, используя систему PHILIPS EPIQ
5 (Нидерланды). За эндотелиальную дисфункцию принимали эндотелий-зависимую вазодилатацию <10%.
Биохимические параметры крови: общий холестерин (ОХ), холестерин липопротеидов высокой плотности (ХС ЛПВП), триглицериды (ТГ), глюкоза натощак, креа-тинин, гликированный гемоглобин (НЬА1с) и альбумин мочи определяли рутинными методами. Значение липопротеидов низкой плотности (ХС ЛПНП) вычисляли по формуле: ХС ЛПНП=ОХ-(ТГ/2,2+ХС ЛПВП). За альбуминурию принимали значение альбумина мочи >30 мг/л. Сахарный диабет 2 типа диагностировали при значении глюкозы натощак >7,0 ммоль/л или НЬА1с>6,5%. Иммунореактивный инсулин крови определяли методом хемилюминесценции. Индекс инсулинорезистентности HOMA рассчитывали по формуле: концентрация глюкозы натощак (ммоль/л) х иммунореактивный инсулин натощак (мкЕД/л)/22,5. Инсулинорезистентность диагностировали при HOMA>2,5. Инсулиноподобный фактор роста определяли с помощью твердофазного хемилюминесцентного иммуноферментного анализа, альдостерон крови — иммуноферментным методом.
Длину теломер лейкоцитов на геномной ДНК определяли методом ПЦР в режиме реального времени с использованием реактивов фирмы Applied Biosystems (США) [13]. Аллельные варианты генов выявляли методом ПЦР в режиме реального времени с применением наборов фирмы ДНК-Технология (Россия) для генов TNF и mMp9 и наборов фирмы Applied Biosystems (США) для гена CYBA. ДНК выделяли из образцов цельной крови с помощью набора Qiagen DNA blood mini kit (Германия) согласно инструкции фирмы-производителя.
Статистический анализ
Статистическую обработку результатов проводили с использованием пакета статистических программ SPSS version 11.0 for Windows (SPSS, Inc., Chicago, IL, США). Для параметров с нормальным распределением приведены значения среднего (M) и стандартное отклонение среднего (SD), для параметров с распределением, отличным от нормального, — медиана (Ме), нижний (LQ) и верхний (UQ) квартили. Распределение на нормальность проверяли по критерию х2 Пирсона. При сравнении двух групп с различными генотипами различия оценивали с помощью критерия х2 Пирсона, при сравнении трех групп с различными генотипами использовали метод дисперсионного анализа и критерий Круксала-Уоллиса. Для оценки влияния исследуемого показателя с учетом вклада остальных влияющих переменных применяли метод построения модели многофакторной логистической регрессии. Логистическую регрессионную модель строили с принудительным включением набора всех факторов, затем методом исключения Вальд строили урезанную модель с уменьшенным количеством факторов. Различия считали статистически значимыми при значении p<0,05.
Результаты и обсуждение
Клиническая характеристика 1 60 пациентов, включенных в исследование, представлена в табл. 1.
Связь полиморфизма -238G>A гена TNF
c ^стоянием артериальной стенки и факторами
риска сердечно-сосудистых заболеваний
Ген TNF расположен на коротком плече 6 хромосомы в локусе 6p21.33. Однонуклеотидный полиморфизм -238G>A гена TNF представляет собой замену гуанина
таблица 1. Клиническая характеристика пациентов, включенных в исследование
Показатель Общая группа (n=160)
Возраст (лет), M±SD 50,42±13,34
Мужчин (n, %) 55 (34,4)
ОТ/ОБ, M±SD 0,86±0,1
Ожирение (n, %) 41 (25,63)
САД (мм рт. ст.), M±SD 126,26±17,11
ДАД (мм рт. ст.) M±SD 79,28±10,65
Центральное САД (мм рт. ст.) M±SD 116,95±18,11
Центральное ДАД (мм рт. ст.) M±SD 79,86±11,32
Центральное пульсовое АД (мм рт. ст.) Meд. (Нкв-Вкв) 34,0 (28,0-42,0)
Центральное среднее АД (мм рт. ст.) M±SD 95,44±13,11
АГ (n, %) 44 (27,5)
ОХ (ммоль/л), M±SD 3,85±1,02
ХС ЛПНП (ммоль/л), M±SD 3,85±1,02
ХС ЛПВП (ммоль/л), M±SD 1,20±0,32
ТГ (ммоль/л), Me (LQ-UQ) 0,97 (0,71-1,39)
ГН (ммоль/л), Ме (LQ-UQ) 5,30 (4,90-5,80)
НвА1с (%), Me (LQ-UQ) 5,20 (5,00-5,55)
ИРИ (мкЕД/л), Ме (LQ-UQ) 7,40 (5,60-10,70)
НОМА, Ме (LQ-UQ) 1,80 (1,34-2,57)
ИР (n, %) 44 (28,2)
СД 2 (n, %) 21(13,13)
Креатинин (мкмоль/л), М±SD 84,11±15,59
ИПФР-1 (нг/мл), Mе (LQ-UQ) 143,50 (112,00-190,25)
Альдостерон (пг/мл), Mе (LQ-UQ) 72,00 (39,75-117,25)
АМ (мг/л), Ме (LQ-UQ) 8,15 (5,00-14,00)
АУ (n, %) 7 (5,5)
ДТЛ, M±SD 9,82±0,44
СПВ (м/с), M±SD 10,74±2,58
СПВ > 10 м/с (n, %) 58,75
ТКИМ (мм), Ме (LQ-UQ) 0,7 (0,58-0,80)
ТКИМ>0,9 мм (n, %) 22 (14,8)
АСБ (n, %) 67 (45)
ЭЗВД (%), M±SD 10,76±3,55
ЭД (n, %) 58 (39,7)
Полиморфизм -238G>A гена TNF, генотипы GG/GA/AA (n, %) 149 (93,75); 9 (5,63); 1 (0,63)
Полиморфизм -1562С>Т гена MMP9, генотипы СС/СТ/ТТ (n, %) 105 (65,63); 51 (31,86); 4 (2,5)
Полиморфизм с.214Т>С гена CYBA, генотипы ТТ/ТС/СС (n, %) 20 (12,5); 69 (43,13); 71 (44,38)
Примечание: ОТ/ОБ — отношение окружности талии к окружности бедер; САД — систолическое артериальное давление; ДАД — диастолическое артериальное давление; АГ — артериальная гипертензия; ОХ — общий холестерин; ХС ЛПНП — холестерин липопротеидов низкой плотности; ХС ЛПВП — холестерин липопротеидов высокой плотности; ТГ — триглицериды; ГН — глюкоза натощак; НвА1с — гликированный гемоглобин; ИРИ — иммунореактивный инсулин плазмы крови; НОМА — индекс инсулинорезистентности; ИР — наличие инсулинорезистентности; СД 2 — сахарный диабет 2 типа; ИПФР-1 — инсулиноподобный фактор роста; АМ — альбумин мочи; АУ — альбуминурия; ДТЛ — длина теломер лейкоцитов; СПВ — скорость пульсовой волны; ТКИМ — толщина комплекса интима-медиа; АСБ — наличие атеросклеротических бляшек; ЭЗВД — эндотелий-зависимая вазодилатация; ЭД — эндотелиальная дисфункция.
Таблица 2. Клиническая характеристика групп пациентов с GG и GA генотипами полиморфизма -238G>A гена TNF
Показатель GG (n=150) GA (n=9) Значение p
Возраст (лет), М±ЭО 50,31±2,13 50,44±9,37 0,771
Мужчин (п, %) 51 (34,23) 3 (33,33) 0,951
ОТ/ОБ, М±80 0,86±0,02 0,89±0,07 0,731
Ожирение (п, %) 39 (26,17) 2 (22,22) 0,793
САД (мм рт. ст.) М±ЭО 126,5±2,75 122,89±11,65 0,599
ДАД (мм рт. ст.), М±80 79,41±1,71 77,78±7,30 0,624
Центральное САД (мм рт. ст.) М±ЭО 117,36±2,97 112,33±11,96 0,590
Центральное ДАД (мм рт. ст.) М±80 80,20±1,86 75,56±7,04 0,218
Центральное пульсовое АД (мм рт. ст.) М±ЭО 37,16±2,11 336,78±8,85 0,883
Центральное среднее АД (мм рт. ст.) М±ЭО 95,81±2,15 91,00±8,35 0,576
АГ (п, %) 42 (28,19) 2 (22,22) 0,697
ОХ (ммоль/л), М±ЭО 5,60±0,18 5,57±0,74 0,890
ХС ЛПНП (ммоль/л), М±80 3,85±0,16 3,81±0,82 0,856
ХС ЛПВП (ммоль/л), М±ЭО 1,20±0,05 1,11±0,24 0,249
ТГ (ммоль/л), Ме (Ш-Ш) 0,98 (0,69-1,39) 0,91 (0,78-2,02) 0,431
ГН (ммоль/л), Ме (ЬО-ЫО) 5,3 (4,9-5,8) 5,3 (4,8-5,9) 0,785
НвА1с (%), Ме (ЬО-ЫО) 5,2 (4,9-5,6) 5,1 (5,1-5,2) 0,020
ИРИ (мкЕД/л), Ме (ЬО-ЫО) 7,30 (5,55-10,45) 10,15 (7,30-15,95) 0,489
НОМА, Ме (Ш-Ш) 1,77 (1,33-2,54) 2,15 (1,60-4,44) 0,655
ИР (п, %) 41 (27,89) 3 (37,5) 0,557
СД 2 (п, %) 20 (13,42) 1 (11,11) 0,841
Креатинин (мкмоль/л), М±80 84,45±2,55 79,56±6,61 0,483
ИПФР-1 (нг/мл), Ме (1_а-Ш) 145 (112-187) 126,0 (109,5-221,5) 0,032
Альдостерон (пг/мл), М±ЭО 72,0 (38,0-115,5) 73,5 (51,5-138,0) 0,021
АМ (мг/л), Ме (1_а-Ш) 9 (5-14) 5 (3-6) 0,056
АУ (п, %) 9 (5-14) 5 (3-6) 0,056
ДТЛ, М±80 9,83±0,07 9,76±0,16 0,417
СПВ (м/с), М±ЭО 8,66±0,34 7,50±0,75 0,514
СПВ>10 м/с (п, %) 20 (14,29) 2 (25) 0,407
ТКИМ (мм), Ме (Ш-Ш) 0,71±0,03 0,72±0,18 0,788
ТКИМ>0,9 мм (п, %) 20 (14,29) 2 (25) 0,407
АСБ (п, %) 61 (43,57) 5 (62,5) 0,295
ЭЗВД (%), Ме (Ш-Ш) 11 (8-13) 9 (7,5-11,75) 0,796
ЭД (п, %) 53 (38,4) 5 (71,4) 0,082
Примечание: ОТ/ОБ — отношение окружности талии к окружности бедер; САД — систолическое артериальное давление; ДАД—диастолическое артериальное давление; АГ — артериальная гипертензия; ОХ — общий холестерин; ХС ЛПНП — холестерин липопротеидов низкой плотности; ХС ЛПВП — холестерин липопротеидов высокой плотности; ТГ — триглицериды; ГН — глюкоза натощак; НвА1с — гликированный гемоглобин; ИРИ — иммунореактивный инсулин плазмы крови; НОМА — индекс инсулинорезистентности; ИР — наличие инсулинорезистентности; СД 2 — сахарный диабет 2 типа; ИПФР-1 — инсулиноподобный фактор роста; АМ — альбумин мочи; АУ — альбуминурия; ДТЛ — длина теломер лейкоцитов; СПВ — скорость пульсовой волны; ТКИМ — толщина комплекса интима-медиа; АСБ — наличие атеросклеротических бляшек; ЭЗВД — эндотелий-зависимая вазодилатация; ЭД — эндотелиальная дисфункция.
на аденин в 238 позиции. ФНО-а запускает процесс воспаления путем образования активных форм кислорода [14]. Было доказано, что терапия антагонистами ФНО-а не только уменьшает воспалительный ответ, но и приводит к снижению жесткости артериальной стенки [15]. ФНО-а влияет на экспрессию 1\1О-синтазы и снижает биодоступность оксида азота, что вызывает развитие эндотелиальной дисфункции [16]. Также было обнаружено, что эндотелиальная
дисфункция связана с альбуминурией [17], а уровень HbAlc ассоциирован с воспалением как у лиц с сахарным диабетом 2 типа, так и у людей без нарушений углеводного обмена [18]. Результаты межгруппового сравнения лиц с генотипами GG и GA полиморфизма -238G>A гена TNF представлены в табл. 2.
У пациентов с GG генотипом были выявлены более низкий показатель альдостерона плазмы (р=0,021)
таблица 3. Клиническая характеристика групп пациентов с СС и СТ генотипами полиморфизма -1562С>Т гена MMP9
Показатель СС (n=105) СТ (n=51) Значение p
Возраст (лет), M±SD 49,95±2,34 51,47±4,04 0,556
Мужчин (n, %) 38 (36,19) 15 (29,41) 0,402
ОТ/ОБ, M±SD 0,85±0,02 0,86±0,03 0,954
Ожирение (n, %) 22 (20,95) 18 (35,29) 0,054
САД (мм рт. ст.) M±SD 125,31±3,13 126,99±4,98 0,656
ДАД (мм рт. ст.) M±SD 79,51±2,01 87,08±2,92 0,579
Центральное САД (мм рт. ст.) М±SD 115,75±3,25 119,13±5,90 0,112
Центральное ДАД (мм рт. ст.) М±SD 80,29±2,54 79,15±3,16 0,527
Центральное пульсовое АД (мм рт. ст.) M±SD 35,45±2,0 39,98±4,63 0,724
Центральное среднее АД (мм рт. ст.) М±SD 95,18±2,53 95,94±3,90 0,757
АГ (n, %) 27 (25,71) 15 (29,41) 0,625
ОХ (ммоль/л), M±SD 5,62±0,22 5,64±0,30 0,755
ХС ЛПНП (ммоль/л), M±SD 3,91±0,20 3,81±0,26 0,891
ХС ЛПВП (ммоль/л), M±SD 1,19±0,06 1,20±0,10 0,993
ТГ (ммоль/л), Me (LQ-UQ) 0,91 (0,67-1,37) 1,10 (0,78-1,46) 0,213
ГН (ммоль/л), Ме (LQ-UQ) 5,3 (5,0-5,8) 5,2 (4,8-5,75) 0,518
НвА1с (%), Me (LQ-UQ) 5,2 (5,0-5,6) 5,1 (4,9-5,4) 0,880
ИРИ (мкЕД/л), Ме (LQ-UQ) 7,35 (5,6-10,4) 7,34 (5,5-10,7) 0,682
НОМА, Ме (LQ-UQ) 1,8 (1,32-2,53) 1,76 (1,33-2,61) 0,526
ИР (n, %) 28 (27,45) 15 (30) 0,742
СД 2 (n, %) 13 (12,38) 7 (13,73) 0,813
Креатинин (мкмоль/л), М±SD 84,19±2,85 83,7±4,78 0,611
ИПФР-1 (нг/мл), Mе (LQ-UQ) 153,72±12,76 158,91±24,18 0,951
Альдостерон (пг/мл), М±SD 90,24±13,46 94,68±24,8 0,904
АМ (мг/л), Ме (LQ-UQ) 8 (5-15) 9 (5-11) 0,643
АУ (n, %) 6 (7,23) 1 (2,44) 0,277
ДТЛ, M±SD 9,84±0,09 9,79±0,1 0,188
СПВ (м/с), M±SD 8,67±0,41 8,55±0,57 0,859
СПВ > 10 м/с (n, %) 24 (22,86) 10 (19,61) 0,644
ТКИМ (мм), M±SD 0,71±0,04 0,72±0,05 0,631
ТКИМ>0,9 мм (n, %) 14 (14,29) 7 (14,89) 0,921
АСБ (n, %) 45 (45,92) 20 (42,55) 0,702
ЭЗВД (%), M±SD 10,97±0,69 10,42±1,05 0,700
ЭД (n, %) 38 (38,78) 18 (40,91) 0,810
Примечание: ОТ/ОБ — отношение окружности талии к окружности бедер; САД — систолическое артериальное давление; ДАД — диастолическое артериальное давление; АГ — артериальная гипертензия; ОХ — общий холестерин; ХС ЛПНП — холестерин липопротеидов низкой плотности; ХС ЛПВП — холестерин липопротеидов высокой плотности; ТГ—триглицериды; ГН — глюкоза натощак; НвА1с — гликированный гемоглобин; ИРИ — иммунореактивный инсулин плазмы крови; НОМА — индекс инсулинорезистентности; ИР — наличие инсулинорезистентности; СД 2 — сахарный диабет 2 типа; ИПФР-1 — инсулиноподобный фактор роста; АМ — альбумин мочи; АУ — альбуминурия; ДТЛ — длина теломер лейкоцитов; СПВ — скорость пульсовой волны; ТКИМ — толщина комплекса интима-медиа; АСБ — наличие атеросклеротических бляшек; ЭЗВД — эндотелий-зависимая вазодилатация; ЭД — эндотелиальная дисфункция.
и более высокие показатели инсулиноподобного фактора роста (р=0,032) и НЬА1с (р=0,020). В литературе данные по наличию взаимосвязи полиморфизма -238Э>А с ССЗ различаются. Наличие генотипов АА и ЭА повышало риск развития ИБС у пациентов с неалкогольной жировой болезнью печени, и А-аллель данного полиморфизма был ассоциирован с более высокими уровнями липопротеидов низкой плотности и триглицеридов [19]. На основании результатов
мета-анализа, проведенного по данным исследований Азиатской и Европейской популяций, была показана значимая корреляция А-аллеля полиморфизма -238Э>А с предрасположенностью к ишемическому инсульту [10]. По данным другого мета-анализа наличие взаимосвязи генетического полиморфизма -238Э>А с ишемическим инсультом выявлено не было [20]. А-аллель данного полиморфизма снижал риск развития ИБС у некурящих [21].
Связь полиморфизма -15620T гена MMP9 c ^стоянием артериальной стенки и факторами риска сердечнососудистых заболеваний
Ген MMP9 расположен на длинном плече 20 хромосомы в локусе 20q13.12. Полиморфизм -1562С>Т представляет собой однонуклеотидную замену цитозина на тимин в промоторной области гена. Матриксные метал-лопротеиназы являются группой ферментов, участвующих в процессах тканевого ремоделирования и деградации внеклеточного матрикса. ММП 9 влияет на процессы фиброза и воспаления и играет роль в патогенезе ССЗ [22]. У пациентов с Т-аллелем полиморфизма -1562С>Т гена MMP9 отмечали более высокие уровни ММП 9 и более высокий индекс окислительного стресса [23], что могло привести к развитию ожирения [24]. Было доказано, что повышение уровня матриксных металлопротеиназ выявляется у пациентов с артериальной гипертензией [12] и ассоциировано со старением [25]. Клиническая характеристика групп пациентов с генотипами полиморфизма -1562С>Т представлена в табл. 3. Малочисленная группа с генотипом ТТ исключена из анализа.
При межгрупповом сравнении генотипов СС и СТ полиморфизма -1562С>Т гена MMP9 параметры артериальной стенки не отличались. Однако следует отметить, что в группе носителей генотипа СТ имелась тенденция к большей частоте встречаемости ожирения по сравнению с группой пациентов с генотипом СС (35,29% и 20,95%, соответственно, р=0,054). Наши данные согласуются с результатами работ других авторов. В исследовании M. Luizon с соавт. (2016) было показано, что Т-аллель генетического варианта -1562С>Т в сочетании с другими вариантами нуклеотид-ной последовательности гена MMP9 коррелирует с ожирением и влияет на повышение уровня ММП 9 у пациентов с ожирением [26]. Также была обнаружена связь между наличием Т-аллеля и ССЗ. В работе J. Rodriguez-Perez с соавт. (2016) было доказано влияние Т-аллеля и СТ генотипа на риск развития инфаркта миокарда [27]. В мета-анализе была показана ассоциация Т-аллеля у европейцев, а также связь Т-аллеля с ИБС у европеоидной и азиатской рас [28]. W. Yang с соавт. (2015) установили взаимосвязь генотипов СТ и ТТ с артериальной гипертензией [12]. В исследовании K. Buraczynska с соавт. (2015) было выявлено, что у носителей Т-аллеля риск ишемического инсульта возрастает в 1,9 раз [11].
Связь полиморфизма ^214Т>С гена CYBA c ^стоянием артериальной стенки и факторами риска сердечно-сосудистых заболевания
Ген CYBA расположен на длинном плече 1 6 хромосомы в локусе 16q24.2. Ген CYBA кодирует фермент NADPH-оксидазу, продуцирущий активные формы кислорода в клеточной стенке и усугубляющий развитие окислительного стресса. Окислительный стресс можно охарактеризовать как дисбаланс между оксидантами и антиоксидантами, которые приводят к образованию активных форм кислорода, включая свободные радикалы. Полиморфизм с.214Т>С (p.Y72H) представляет собой однонуклеотидную замену тимина на цитозин в кодирующей части гена, вызывая замену тирозина на гистидин в 72 положении. Результаты межгруппового сравнения лиц с различными генотипами полиморфизма с.214Т>С приведены в табл. 4.
В проведенном нами исследовании у пациентов с генотипом СС и СТ параметры артериальной стенки не отличались. У пациентов с генотипом СС была
отмечена меньшая длина теломер лейкоцитов, чем у пациентов с генотипом ТТ. Теломеры — это концевые участки хромосом, которые состоят из повторяющейся последовательности нуклеотидов TTAGGG и защищают линейные концы хромосом от деградации и слияния, поддерживая стабильность генома. С каждым делением клетки теломеры укорачиваются и при достижении критически низкого показателя длины теломер клетка неспособна к дальнейшему делению и наступает ее старение [29]. Длина теломер лейкоцитов отрицательно коррелирует с возрастом и развитием возраст-ассоци-ированных заболеваний [4]. Установлено, что окислительный стресс приводит к укорочению длины теломер лейкоцитов [30], в том числе у пациентов с ССЗ [31, 32]. Нами было выявлено, что С-аллель ассоциирован с более короткой длиной теломер, что может быть связано с более выраженным окислительным стрессом у пациентов с С-аллелем. Известен вклад коротких теломер и в развитие жесткости артериальной стенки: в работе Y. Ji с соавт. (2016) было обнаружено влияние генотипа СС полиморфизма с.214Т>С на жесткость артериальной стенки у здоровых людей [33].
Для выявления связи состояния артериальной стенки с полиморфизмом изучаемых генов с поправкой на факторы риска ССЗ были построены модели множественной логистической регрессии. В качестве зависимых переменных использовали параметры изменений артериальной стенки (наличие атеросклеротических бляшек, толщина комплекса интима-медиа >0,9 мм, эндотелий-зависимая вазодилатация <10%, скорость пульсовой волны >10 м/с) и связи между ними и изучаемыми генотипами выявлено не было. Были обнаружены следующие взаимосвязи: между наличием атеросклеро-тических бляшек и возрастом (p<0,001, ОШ: 1,141, ДИ: 1,087-1,198), наличием атеросклеротических бляшек и артериальной гипертензией (p=0,002, ОШ: 4,822, ДИ: 1,751-13,216), между толщиной комплекса интима-медиа >0,9 мм и мужским полом (p=0,022, ОШ: 4,776, ДИ: 1,257-18,145), толщиной комплекса интима-медиа >0,9 мм и возрастом (p<0,001, ОШ: 1,165, ДИ: 1,084-1,251), между скоростью пульсовой волны >10 м/с и возрастом (p=0,004, ОШ: 1,189, ДИ: 1,0561 ,339), между эндотелий-зависимой вазодилатацией и возрастом (p=0,003, ОШ: 1,058, ДИ: 1,020-1,098), эндотелий-зависимой вазодилатацией и артериальной гипертензией (p<0,001, ОШ: 4,710, ДИ: 1,983-11,185). Таким образом, была показана положительная корреляция между изменениями параметров артериальной стенки и ранее известными факторами риска, что согласуется с результатами работ других авторов [2, 34].
заключение
Выявлена ассоциация полиморфизма -238G>A гена TNF, полиморфизма -1562С>Т гена MMP9 с метаболическими параметрами и полиморфизма с.214Т>С гена CYBA с длиной теломер лейкоцитов.
Связи полиморфных вариантов генов TNF, MMP9, CYBA с параметрами изменений артериальной стенки обнаружить не удалось. Возможно, требуется проведение более крупных популяционных исследований с включением в анализ малочисленных генотипов.
Благодарности
Работа выполнена в рамках государственного задания МГУ им. М.В. Ломоносова с использованием оборудования, закупленного по Программе развития МГУ.
таблица 4. Клиническая характеристика групп пациентов с ТТ, ТС и СС генотипами полиморфизма с.214Т>С гена СУБД
Показатель TT (n=20) ТС (n=69) CC (n=71) Значение p
Возраст (лет), М±ЭО 51,2±5,61 49,72±3,30 50,87±3,02 0,846
Мужчин (п, %) 6 (30) 24 (34,78) 25 (35,21) 0,951
ОТ/ОБ, М±80 0,852±0,05 0,859±0,02 0,856±0,02 0,953
Ожирение (п, %) 4 (20) 16 (23,19) 21 (29,58) 0,391
САД (мм рт. ст.) М±ЭО 125,05±8,03 126,01±3,80 126,84±4,17 0,908
ДАД (мм рт. ст.) М±80 78,65±6,06 79,71±2,28 79,04±2,49 0,898
Центральное САД (мм рт. ст.) Мед. (Нкв-Вкв) 115,5 (103,5-129,5) 115 (104-128,5) 119 (101-129) 0,983
Центральное ДАД (мм рт. ст.) М±ЭО 78,6±4,67 79,39±2,54 80,71±2,96 0,694
Центральное пульсовое АД, (мм рт. ст.) М±80 37,5±4,14 37,09±3,11 36,98±3,32 0,988
Центральное среднее АД (мм рт. ст.) М±ЭО 94,35±5,22 94,97±2,91 96,25±3,49 0,791
АГ (п, %) 5 (25) 20 (28,99) 19 (26,76) 0,768
ОХ (ммоль/л), М±80 5,27±0,33 5,64±0,27 5,64±0,26 0,396
ХС ЛПНП (ммоль/л), М±ЭО 3,50±0,34 3,85±0,26 3,94±0,24 0,242
ХС ЛПВП (ммоль/л), М±80 1,15±0,15 1,21±0,07 1,20±0,08 0,811
ТГ (ммоль/л), Ме (1_а-Ыа) 1,06 (0,73-1,90) 1,01 (0,67-1,5) 0,89 (0,72-1,26) 0,565
ГН (ммоль/л), М±ЭО 5,43±0,51 5,64±0,27 5,57±0,26 0,765
НвА1с (%), Ме (1_а-Ыа) 5,2 (5,1-5,9) 5,15 (5,0-5,6) 5,2 (4,9-5,4) 0,566
ИРИ (мкЕД/л), Ме (1_а-Ыа) 7,55 (5,6-9,9) 8,3 (5,9-11,6) 6,9 (5,0-9,5) 0,166
нома, Ме (ьа-иа) 2,00 (1,29-2,53) 1,87 (1,38-2,93) 1,72 (1,20-2,51) 0,331
ИР (п, %) 5 (25) 21 (31,82) 18 (25,71) 0,432
СД 2 (п, %) 3 (15) 9 (13,04) 9 (12,68) 0,945
Креатинин (мкмоль/л), М±80 85,05±6,81 84,37±4,11 83,61±3,25 0,92
ИПФР-1 (нг/мл), М±ЭО 170,96±55,96 154,70±15,50 151,44±14,81 0,593
Альдостерон (пг/мл), М±80 83,41±36,17 90,97±18,87 93,97±16,65 0,858
ам (мг/л), Ме (ьа-иа) 11,0 (5,0-20,5) 8,0 (4,0-14,0) 8,3 (6,0-12,5) 0,892
АУ (п, %) 0 (0) 1 (1,85) 6 (10,17) 0,067
ДТЛ, М±ЭО 10,10±0,37 9,79±0,08 9,77±0,08 0,011
СПВ (м/с), М±80 8,38±1,03 8,63±0,52 8,64±0,45 0,875
СПВ>10 м/с (п, %) 4 (20) 17 (24,64) 13 (18,31) 0,361
ТКИМ (мм), М±ЭО 0,72±0,09 0,70±0,05 0,72±0,04 0,782
ТКИМ>0,9 мм (п, %) 4 (22,22) 9 (14,29) 9 (13,24) 0,861
АСБ (п, %) 6 (33,33) 27 (42,86) 34 (50) 0,413
ЭЗВД (%), М±80 11,06±1,34 10,45±0,80 10,97±0,97 0,656
ЭД (п, %) 7 (38,89) 24 (38,71) 27 (40,91) 0,799
Примечание: ОТ/ОБ — отношение окружности талии к окружности бедер; САД — систолическое артериальное давление; ДАД — диастолическое артериальное давление; АГ — артериальная гипертензия; ОХ — общий холестерин; ХС ЛПНП — холестерин липопротеидов низкой плотности; ХС ЛПВП — холестерин липопротеидов высокой плотности; ТГ—триглицериды; ГН — глюкоза натощак; НвА1с — гликированный гемоглобин; ИРИ — иммунореактивный инсулин плазмы крови; НОМА — индекс инсулинорезистентности; ИР — наличие инсулинорезистентности; СД 2 — сахарный диабет 2 типа; ИПФР-1 — инсулиноподобный фактор роста; АМ — альбумин мочи; АУ — альбуминурия; ДТЛ — длина теломер лейкоцитов; СПВ — скорость пульсовой волны; ТКИМ — толщина комплекса интима-медиа; АСБ — наличие атеросклеротических бляшек; ЭЗВД — эндотелий-зависимая вазодилатация; ЭД — эндотелиальная дисфункция.
ЛИТЕРАТУРА [REFERENCES]:
1. Cardiovascular diseases, (n. d.), https://www.who.lnt/ westernpaclflc/health-toplcs/cardlovascular-dlseases.
2. Стражеско И.Д., Акашева Д.У., Дудинская Е.Н. и др. Старение сосудов: основные признаки и механизмы. Кардиоваскулярная терапия и профилактика 2012; 11(4): 93-100. [Strazhesko I.D., Akasheva D.U., Dudlnskaya E.N. et al. Vascular agelng: maln symptoms and mechanlsms. Cardlovascular therapy and prevention 2012; 11(4): 93-100].
3. Harvey A., Montezano A.C., Touyz R.M. Vascular biology of ageing — Implications in hypertension. J. Mol. Cell. Cardiol. 2015; 83: 112-21.
4. Strazhesko I.D., Tkacheva O.N., Akasheva D.U. et al. Growth hormone, insulin-like growth factor-1, insulin resistance, and leukocyte telomere length as determinants of arterial aging in subjects free of cardiovascular diseases. Front. Genet. 2017; 15(8): 198.
5. Sirbu A., Nicolae H., Martin S. et al. IGF-1 and insulin resistance are major determinants of common carotid artery thickness in morbidly obese young patients. Angiology 2016; 67(3): 259-65.
6. McDonnell B.J., Yasmin, Butcher L. et al. The age-dependent association between aortic pulse wave velocity and telomere length. J. Physiol. 2017; 595(5): 1627-35.
7. Pulido-Gomez K., Hernadez-Diaz Y., Tovilla-Zarate C.A. et al. Association of G308A and G238A Polymorphisms of the TNF-a Gene with Risk of Coronary Heart Disease: Systematic Review and Meta-analysis. Arch. Med. Res. 2016; 47(7): 557-72.
8. Morgan A.R., Zhang B., Tapper W. et al. Haplotypic analysis of the MMP-9 gene in relation to coronary artery disease. J. Mol. Med. (Berl.) 2003; 81(5): 321-6.
9. Xu Q., Yuan F., Shen X. et al. Polymorphisms of C242T and A640G in CYBA gene and the risk of coronary artery disease: a meta-analysis. PLos One 2014; 9(1): e84251.
10. Kumar P., Misra S., Kumar A. et al. Association between tumor necrosis factor-a (-238G/A and -308G/A) gene polymorphisms and risk of ischemic stroke: a meta-analysis. Pulse (Basel) 2015; 3: 217-28.
11. Buraczynska K., Kurzepa J., Ksiazek A. et al. Matrix metalloprotein-ase-9 (MMP-9) gene polymorphism in stroke patients. Neuromolecular Med. 2015; 17: 385-90.
12. Yang W., Lu J., Yang L. et al. Association of matrix metalloprotein-ase-9 gene -1562C/T polymorphism with essential hypertension: a systematic review and meta-analysis article. Iran J. Public Health 2015; 44(11): 1445-52.
13. Cawthon R.M. Telomere measurement by quantitative PCR. Nucleic Acids Res. 2002; 30(10): e47.
14. Kamata H., Honda S.I., Maeda S. et al. Reactive oxygen species promote TNF alpha-induced death and sustained JNK activation by inhibiting MAP kinase phosphatases. Cell 2005; 120(5): 649-61.
15. Vlachopoulos C., Gravos A., Georgiopoulos G. et al. The effect of TNF-a antagonists on aortic stiffness and wave reflections: a metaanalysis. Clin. Rheumatol. 2018; 37(2): 515-26.
16. Tao Y., Xiong Y., Wang H. et al. APOC3 induces endothelial dysfunction through TNF-a and JAM-1. Lipids in Health and Disease 2016; 15(1): 153.
17. Huang M.J., Wei R.B., Zhao J. et al. Albuminuria and endothelial dysfunction in patients with non-diabetic chronic kidney disease. Med. Sci. Monit. 2017; 23: 4447-53.
18. Liu S., Hempe J.M., McCarter R.J. et al. Association between inflammation and biological variation in hemoglobin A1c in U.S. Nondiabetic Adults. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2015; 100(6): 2364-71.
19. Cheng Y., An B., Jiang M. et al. Association of tumor necrosis factor-alpha polymorphisms and risk of coronary artery disease in patients with non-alcoholic fatty liver disease. Hepat. Mon. 2015; 15(3): e26818.
20. Wu J., Zhang X., Wang J. et al. Gene polymorphisms and circulating levels of the TNF-alpha are associated with ischemic stroke: a meta-analysis based on 19,873 individuals. International Immunopharmacology 2019; 75: 105827.
21. Hou L., Huang J., Lu X. et al. Polymorphisms of tumor necrosis factor alpha gene and coronary heart disease in a Chinese Han population: Interaction with cigarette smoking. Thrombosis Research 2009; 123(6): 822-6.
22. Yabluchanskiy A., Ma Y., Iyer R.P. et al. Matrix metalloproteinase-9: many shades of function in cardiovascular disease. Physiology (Bethesda) 2013; 28(6): 391-403.
23. Mehde A.A., Mehdi W.A., Yusof F. et al. Association of MMP-9 gene polymorphisms with nephrolithiasis patients. J Clin. Lab. Analys. 2018; 32(1): e22173.
24. Manna P., Jain S.K. Obesity, oxidative stress, adipose tissue dysfunction, and the associated health risks: causes and therapeutic strategies. Metab. Syndr. Relat. Disord. 2015; 13(10): 423-44.
25. Meschiari C.A., Ero O.K., Pan H. et al. The impact of aging on cardiac extracellular matrix. GeroScience 2017; 39(1): 7-18.
26. Luizon M.R., Belo V.A., Fernandes K.S. et al. Plasma matrix metal-loproteinase-9 levels, MMP-9 gene haplotypes, and cardiovascular risk in obese subjects. Mol. Biol. Rep. 2016; 43(6): 463-71.
27. Rodríguez-Pérez J.M., Vargas-Alarcón G., Posadas-Sánchez R. et al. rs3918242 MMP9 gene polymorphism is associated with myocardial infarction in Mexican patients. Genet. Mol. Res. 2016; 15(1): 15017776.
28. Zhang M.M., Chang X.W., Hao X.Q. et al. Association between matrix metalloproteinase 9 C-1562T polymorphism and the risk of coronary artery disease: an update systematic review and meta-analysis. Oncotarget 2018; 9(10): 9468-79.
29. Стражеско И.Д., Ткачева О.Н., Акашева Д.У. и др. Взаимосвязь компонентов метаболического синдрома с параметрами клеточного и сосудистого старения. Российский кардиологический журнал 2014; 6: 30-4. [Strajesko I.D., Tkacheva O.N., Akasheva D.U. et al. Interrelation of metabolic syndrome components with cell and vessel aging parameters. Russ. J. Cardiol. 2014; 6: 30-4].
30. Tian R., Zhang L.N., Zhang T.T. et al. Association between oxidative stress and peripheral leukocyte telomere length in patients with premature coronary artery disease. Med. Sci. Monit. 2017; 23: 4382-90.
31. Fyhrquist F., Saijonmaa O., Strandberg T. The roles of senescence and telomere shortening in cardiovascular disease. Nat. Rev. Cardiol. 2013; 10(5): 274-83.
32. Papapetrou A., Moris D., Patelis N. et al. Oxidative stress and total antioxidant status during internal carotid artery clamping with or without shunting: An experimental pilot study. Med. Sci. Monit. Basic Res. 2014; 21: 200-5.
33. Ji Y., Ge J., Zhu Z. et al. Relationship between C242T polymorphism and arterial stiffness in an apparently healthy population. J. Hum. Hypertens. 2016; 30(8): 488-92.
34. Cheng H.M., Park S., Huang Q. et al. Characteristics on the Management of Hypertension in Asia — Morning Hypertension Discussion Group (COME Asia MHDG), Vascular aging and hypertension: Implications for the clinical application of central blood pressure. Int. J. Cardiol. 2017; 230: 209-13.
