CC BY
36
УДК 616.9
СВЯЗЬ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ИММУННОГО И МИКРОЭЛЕМЕНТНОГО СТАТУСОВ У БОЛЬНЫХ ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКОЙ С ПОЧЕЧНЫМ СИНДРОМОМ
Г. М. Хасанова, А. В. Тутельян, Д. А. Валишин
Изучена связь показателей клеточного иммунитета и микроэлементного статуса у больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом. Обследовано 135 больных среднетяжелой и тяжелой формой ГЛПС. Иммунофенотипирование лимфоцитов периферической крови осуществлялось методом прямой иммунофлуоресценции с помощью проточного цитофлуориметра. Содержание микроэлементов (цинка, селена, алюминия, свинца, ртути, кадмия) проводили с помощью масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой. Выявили прямые корреляционные связи между Zn, Se и СD16+, 56+; между цинком и уровнем СD3+ и СD4+ и отрицательные корреляционные связи между РЬ, А1, Cd и уровнем СD16+, 56+; концентрацией свинца, алюминия и уровнем СD3+ и СD4+, свидетельствующие об отрицательном влиянии изменений микроэлементного статуса при ГЛПС на показатели клеточного иммунитета.
В патогенезе геморрагической лихорадки с почечным синдромом (ГЛПС) иммунные механизмы занимают одно из ведущих мест. Данные об изменениях в клеточном звене иммунитета при ГЛПС противоречивы [2; 4]. Исследований особенностей взаимоотношений между иммунитетом и обеспеченностью микроэлементами у больных ГЛПС не проводили. Учитывая вышеизложенное, была поставлена цель исследования — изучить связь показателей клеточного иммунитета и микроэлементного статуса у больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом.
Материалы и методы. В исследование включили 135 больных, находившихся на стационарном лечении в МУ «Городская клиническая больница № 13» г. Уфы с серологически подтвержденным методом непрямых флуоресцирующих антител диагнозом ГЛПС, из них 109 мужчин (80,7 %) и 26 женщин (19,3 %). Возраст обследованных 18 — 55 лет (средний возраст 37,4 ± 2,6 года). Среднетяжелая форма выявлена у 73 больных (54,1 %), тяжелая — у 62 (45,9 %). Контрольную группу составили 30 практически здоровых лиц, сопоставимых по полу и возрасту.
Иммунофенотипирование лимфоцитов периферической крови осуществлялось методом прямой иммунофлуоресценции с помощью проточного цитофлуориметра «FACS Calibur» (фирма «Becton Dickinson», США) c помощью реагентов фирмы «Becton Dickin-
son» с характеристикой основных маркеров иммунокомпетентных клеток (CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD25+, CD3+/HLA-DR, индекс CD4/8).
Параллельно с исследованием показателей иммунитета изучали содержание микроэлементов в плазме крови. Определяли концентрацию цинка, селена, алюминия, свинца, ртути, кадмия, стронция с помощью масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ICP-MS; Elan-9000, PerkinElmer, США).
Математическую обработку результатов исследования проводили с использованием стандартного статистического пакета программ Statistica 7.0 for Windows. Среднее значение М и ошибку среднего значения m вычисляли в Microsoft Excel. Степень взаимосвязи между признаками оценивали методом корреляционного анализа по Спирмену путем вычисления коэффициента корреляции (r). Различия считались статистически значимыми при р < 0,05.
Результаты. При исследовании субпо-пуляционного состава лимфоцитов было выявлено, что у больных среднетяжелой и тяжелой формами ГЛПС в период максимально выраженных клинических проявлений (олигурический) наблюдается уменьшение абсолютного числа Т-клеток (CD3+), субпопуляции хелперов/индукторов (CD4+) и иммунорегуляторного коэффициента по сравнению с контрольной группой и снижение числа субпопуляций натуральных киллеров (CD16+). В полиурическом периоде
© Хасанова Г. М., Тутельян А. В., Валишин Д. А., 2013
ГЛПС отмечается увеличение изучаемых субпопуляций лимфоцитов.
Изучение микроэлементного статуса у больных ГЛПС в олигурическом периоде выявило повышение концентрации токсич-
При анализе корреляций между концентрацией микроэлементов и показателями иммунитета у больных среднетяжелой формой ГЛПС установлено следующее: между цинком и уровнем Т-лимфоцитов-хелперов существует прямая сильная связь (г = +0,75, р < 0,05); концентрация цинка находится в прямой связи с уровнем Т-лимфоцитов (г = = +0,73, р < 0,05) и натуральных киллеров (г = +0,64, р < 0,05); выявлена прямая сильная связь между концентрацией селена и натуральными киллерами (г = +0,71, р < 0,05); между алюминием и уровнем Т-лимфоци-тов определена отрицательная средняя связь (г = -0,53, р < 0,05); концентрация алюминия находится в отрицательной средней связи с уровнем Т-лимфоцитов-хелперов
ных микроэлементов — алюминия, свинца, ртути, кадмия, стронция и снижение эссенци-альных микроэлементов — цинка и селена, прямо коррелирующее с тяжестью течения болезни (таблица).
(г = -0,57, р < 0,05) и с уровнем натуральных киллеров (г = -0,55, р < 0,05); между кадмием и уровнем натуральных киллеров выявлена отрицательная сильная связь (г = = -0,71, р < 0,05); уровень свинца находится в отрицательной средней связи с уровнем натуральных киллеров (г = -0,67, р < 0,05), уровнем Т-лимфоцитов (г = -0,65, р < 0,05) и с уровнем Т-лимфоцитов-хелперов (г = = -0,72, р < 0,05). У больных тяжелой формой ГЛПС отмечалось усиление выявленных корреляционных связей, т. е. сильнее прослеживалось влияние нарушения микроэлементного баланса на показатели иммунитета.
Обсуждение. Снижение концентрации селена и цинка в разгар ГЛПС можно объяснить повышенным расходом данных
Таблица
Содержание микроэлементов в крови при среднетяжелой и тяжелой формах ГЛПС (М ± т)
Микроэлемент Тяжесть заболевания Период заболевания Контроль
лихорадочный олигурический полиурический
Цинк, мг/л Сред. 0,85 ± 0,06 0,62 ± 0,05* 0,70 ± 0,06* 0,89 ± 0,07
Тяжел. 0,69 ± 0,04* 0,44 ± 0,03** 0,58 ± 0,04**
р сред-тяж р < 0,05 р < 0,05 р > 0,05
Селен, мкг/л Сред. 86,4 ± 7,1** 49,2 ± 3,5** 62,1 ± 5,3** 115,2 ± 9,1
Тяжел. 64,3 ± 6,2** 32,5 ± 3,1** 48,2 ± 4,2**
р сред-тяж р < 0,05 р < 0,05 р < 0,05
Алюминий, мкг/ л Сред. 3,9 ± 0,23** 6,93 ± 0,62** 4,74 ± 0,42** 0,9 ± 0,08
Тяжел. 6,7 ± 0,56** 9,8 ± 0,82** 7,2 ± 0,64**
р сред-тяж р < 0,05 р < 0,05 р < 0,05
Свинец, мг/л Сред. 0,114 ± 0,01* 0,169 ± 0,015** 0,126 ± 0,01* 0,026 ± 0,002
Тяжел. 0,234 ± 0,02** 0,265 ± 0,02** 0,179 ± 0,01**
р сред-тяж р < 0,05 р < 0,05 р < 0,05
Кадмий, мкг/л Сред. 0,073 ± 0,007* 0,095 ± 0,006* 0,054 ± 0,005* 0,02 ± 0,001
Тяжел. 0,097 ± 0,009* 0,12 ± 0,01* 0,078 ± 0,007*
р сред-тяж р < 0,05 р < 0,05 р < 0,05
Примечание. * достоверность при сравнении с аналогичным показателем в контрольной группе р < 0,05; ** достоверность при сравнении с аналогичным показателем в контрольной группе р < 0,01.
176
ВЕСТНИК Мордовского университета | 2013 | № 1—2
микроэлементов. У больных ГЛПС наблюдается усиление интенсивности процессов липопероксидации, что приводит к усиленному расходу антиоксидантных ферментов, например супероксиддисмутазы и глютатион-пероксидазы, а цинк и селен входят в активные центры этих ферментов. По результатам нашего исследования выяснилось, что во всех стадиях ГЛПС, при любой форме заболевания между цинком и показателями СD3+, СD4+ существует сильная положительная корреляционная связь. Наши данные согласуются с данными других исследований [1; 3]. Сильная положительная корреляционная связь между цинком и показателями основных субпопуляций лимфоцитов, возможно, связана с ферментативной ролью Zn в синтезе ДНК и делении клеток. Кроме того, тиму-лин (тимусный гормон), необходимый для созревания Т-лимфоцитов, является цинкза-висимым гормоном. Zn является мощным активатором Т-клеточного иммунитета. Он влияет на пролиферацию и некоторые функции Т-лимфоцитов.
Выраженный дефицит цинка видоизменяет характер распределения свинца между органами и тканями и определяет повышенный выход токсичных микроэлементов из паренхимы почек за счет конкурентных взаимодействий [3]. Накопление токсичных металлов в периоде олигурии при ГЛПС мож-
но объяснить также тем, что нарушается один из основных путей выделения микроэлементов — через почки. Высокие концентрации токсичных микроэлементов в сыворотке крови в олигурическом периоде ГЛПС отрицательно влияют на содержание Т-лимфоцитов и Т-хелперов. Наши данные согласуются с данными М. S. Golub et а1., которые в экспериментах на мышах, находящихся на искусственно обогащенной алюминием диете, выявили значительное снижение содержания Т-хелперов и синтез Т-лимфоцитами ряда ци-токинов, характерных для ТЬ1-клеток [5].
Выводы
1. У больных ГЛПС в олигурическом периоде выявлено повышение концентрации токсичных микроэлементов — алюминия, свинца, ртути, кадмия, стронция и снижение уровня эссенциальных микроэлементов — цинка и селена, прямо коррелирующее с тяжестью течения болезни.
2. У больных ГЛПС выявлены прямые корреляционные связи между Zn, Se и СD16+, 56+; между цинком и уровнем СD3+ и СD4+ и отрицательные корреляционные связи между РЬ, А1, Cd и уровнем СD16+, 56+; концентрацией свинца, алюминия и уровнем СD3+ и СD4+, свидетельствующие об отрицательном влиянии изменений микроэлементного статуса при ГЛПС на показатели клеточного иммунитета.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Иммунная реактивность организма в условиях естественного дефицита цинка / Л. В. Ко-вальчук, В. Л. Сусликов, Л. М. Карзакова [и др.] // Иммунология. 2004. № 6. С. 336 339.
2. Курятникова Г. А. Показатели иммунитета и неспецифической резистентности у больных ГЛПС / Г. А. Курятникова, И. В. Лосева / / Актуальные проблемы природно-очаговых инфекций. Горький, 1988. С. 125 129.
3. Роль нарушений микроэлементного гомеостаза в развитии тубулоинтерстициального нефрита у детей / Т. П. Макарова, С. В. Мальцев, В. С. Валиев [и др.] // Педиатрии. 2001. № 6.
С. 23 26.
4. Huang C. Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome: Relationship Between Pathogenesis and Cellular Immunity / C. Huang, B. Jin, M. Wang // J. Infect. Dis. 1994. Vol. 169, № 4.
Р. 868 870.
5. Influence of Dietary Aluminium on Cytokine Production by Mitogen-stimulated Spleen Cells from Swiss Webster Mice / M. S. Golub, P. T. Takeuchi, M. E. Gershvin [et al.] // Immunopharmacol. Immunotoxicol. 1993. Vol. 15, № 5. Р. 605 610.
Поступила 07.12.2012.
