Судебно-медицинское значение альгологического исследования, возможности использования конфокальной микроскопии

Нигматуллин Н.Ш.; Губеева Е.Г.

ОБМЕН ОПЫТОМ

Н.Ш. Нигматуллин, Е.Г. Губеева СУДЕБНО-МЕДИЦИНСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ АЛЬГОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ, ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ КОНФОКАЛЬНОЙ МИКРОСКОПИИ

ГКУЗ «Республиканское бюро судебно-медицинской экспертизы» МЗ Республики Татарстан

(нач. - к.м.н. Н.Ш. Нигматуллин)

Одним из распространенных видов смерти, особенно в летнее время, является утопление. По Республике Татарстан в 2009 году исследовано 234 погибших от утопления, что составило 5,1% от структуры всей насильственной смерти [6]. Зачастую диагностика причины смерти при обнаружении трупов в воде, особенно имеющих признаки гниения, бывает затруднена и требует комплексного подхода для решения поставленных перед экспертом задач [5]. Из применяемых в судебной медицине на сегодняшний день методов альгологическое исследование (обнаружение и идентификация диатомовых водорослей), остается приоритетным и позволяет судить об аспирационном типе утопления [1, 7].

Диатомеи представляют собой одноклеточные водоросли, имеющие внешнюю твердую кремнеземную оболочку (панцирь), размерами от 4 до 2000 мкм. Такой панцирь выдерживает действие высоких температур, концентрированных кислот и щелочей. Панцирь состоит из двух почти равных частей. Наружная, большая часть панциря - эпитека, подобно крышке заходит своими краями на внутреннюю половину - гипотеку. Эпитека и гипотека состоят из створки и пояскового ободка. Створки и их концы бывают самых различных очертаний. Особенности строения панциря диатомей заложены в основу их классификации [2, 5].

При утоплении в минерализатах внутренних органов находят диатомовый планктон, сходный с планктоном водоема, в котором наступила смерть. Видовое разнообразие диатомей в большом круге кровообращения определено водной средой, в которой произошло утопление [3]. В кровяное русло жидкость проникает в среднем через 40 секунд после начала утопления. Из этого следует, что выявление планктона в организме возможно уже спустя названный срок [4]. Если диатомеи в легких не найдены, то и в большом круге кровообращения их быть не должно. Обнаружение диатомей в легких и в большом круге кровообращения свидетельствует об аспирационном типе утопления.

У следователей иногда возникает необходимость определить место наступления гибели человека в водоеме. Реки и озера чаще всего имеют притоки, которые привносят свой видовой состав диатомовых водорослей. Диато-меи, попавшие в кровоток в результате аспирации воды, могут быть выявлены при альгологическом исследовании во внутренних органах, в частности в почке, а также в костном мозге, крови, содержимом пазухи основной кости. Обнаружение в органах и тканях створок диатомей и определение их рода, вида и подвида дает возможность установить место утопления и тем самым помогает реконструировать произошедшие события. В течение года отмечено значительное разнообразие диатомей, что связано с периодичностью роста и размножения водорослей в воде. Видовая детализация диатомовых водорослей, определение степени их развития имеет большое значение для решения вопроса о давности наступления смерти. Однако использование в практической деятельности судебно-медицинских экспертов микроскопии в проходящем свете зачастую не позволяет увидеть в полном объеме панцирь диатомей, не выявляет детали тонкой структуры его сворок, пояска и ободка (рис. 1а). В связи с вышеизложенным морфологические особенности, обнаруженных в минерализате диатомей, бывают не достаточными для того, чтобы определить их вид и подвид.

С целью поиска путей улучшения качества альго-логического анализа нами была предпринята попытка изучения возможности применения новых способов микроскопии. Были исследованы минерализаты внутренних органов погибших от утопления с помощью конфокальной сканирующей системы нового поколения ИиоУ1е'№ ТУШ «ОЫМРШ» (Япония). В системе используются современные диодные лазеры, покрывающие весь спектр наиболее часто используемых флуоресцентных меток - 405 нм, 473 нм, 559 нм, 635 нм. Кроме того, конфокальная микроскопия позволяет выявлять собственную люминесценцию объектов без применения окраски, а также увидеть трехмерное изображение объекта.

* ¿.V

и'

4

Рис. 1. Циклотелла нарядная (Cyclotella comta Kutz) 23ц, конфокальный микроскоп FluoView FV10i, х 600, Leica DM 1000.

а - световая микроскопия (микроскоп Leica DM 1000); б - аутолюминесценция, в - совмещение фазового контраста и аутолюминесценции, г - фазовый контраст (б, в, г - микроскоп FluoView FV10i «OLIMPUS»).

диатомей в свете собственной люминесценции, фазовый контраст, совмещенное изображение фазового контраста и аутолюминесценции значительно превосходили по качеству результаты световой микроскопии этих же объектов (рис. 1 б, в, г). Появилась возможность получать трехмерное изображение панциря диатомей и проводить их детальную идентификацию.

Таким образом, нами определен потенциал применения конфокальной микроскопии при альгологическом исследовании, который позволяет выявлять детали строения панциря диатомей, что помогает устанавливать их вид, подвид. Новые технологии дают возможность В ходе проведенного исследования было установлено, получать высококачественное изображение диатомовых

что панцири диатомовых водорослей обладают аутолюми- водорослей и иллюстрировать результаты исследования

несценцией при облучении лазером 405 нм. Изображения в «Заключении эксперта», что в свою очередь повышает

доказательность экспертизы.

Литература:

1. Асафьева-Макарочкина Н. И. Судебно-медицинское значение фито- и псевдопланктона для диагностики утопления: автореф. дис. ...канд. мед. наук - Саратов, 1954. - 25 с.

2. Забелина М. М., Киселев И. А., Прошкина-Лавренко А. И., Шешукова В. С. Диатомовые водоросли. - Москва, 1951. - 615 с.

3. Калашников Д. П., Горностаев В. Д. Новые лабораторные методы в подготовке и исследовании диатомового планктона // Судебно-медицинская экспертиза. - 2007. —№5, — С.39-42.

4. Климов Р. А. Судебно-медицинское обоснование танатогенеза и конкретизация причин смерти при утоплении в пресной воде: автореф. дис. ...канд. мед. наук-М.,1970. -25 с.

5. Лысый В. И. Диагностика смерти отутопления. - Красноярск, 2005. -26 с.

6. Нигматуллин Н. Ш., Спиридонов В. А. Судебно-медицинская служба Республики Татарстан в 2009 году. - Казань, 2010. - 91 с.

7. Тимченко Г. П. О механизмах смерти при утоплении в пресной воде и некоторых путях ее диагностики: автореф. дис. ..канд. мед. наук. - Л., 1975. - 25 с.

Н.Ш. Нигматуллин, Е.Г. Губеева ОБНАРУЖЕНИЕ ЖЕЛЕЗА В ПОВРЕЖДЕНИЯХ РЕНТГЕНОСПЕКТРАЛЬНЫМ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫМ АНАЛИЗОМ КАК ПРИЧИНА ВОЗМОЖНЫХ ОШИБОК ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ ТРАВМИРУЮЩЕГО ПРЕДМЕТА

ГКУЗ «Республиканское бюро судебно-медицинской экспертизы» МЗ Республики Татарстан

(нач. - к.м.н. Н.Ш. Нигматуллин)

На сегодняшний день в практической деятельности судебно-медицинских экспертов сложилась определенная схема исследования повреждений и оценки данных, полученных в ходе лабораторных анализов. Морфологические особенности ран, причиненных тупыми твердыми предметами, хорошо описаны в литературных источниках и освоены экспертами [1, 2]. Рентгеноспектральный флуоресцентный анализ (РСФА) позволяет определять микроэлементный состав частиц и металлизацию в зонах повреждений, идентифицировать орудия травмы по элементному составу следообразующей поверхности [5]. Контактное взаимодействие травмирующего предмета с кожей сопровождается оставлением следов его элементного состава [4]. Обнаружение в повреждении превышения, в сравнении с контролем, железа в дополнение к четкой морфологической картине, отобразившей действие тупого твердого предмета, дает основание считать, что его контактирующая поверхность имела в составе железо.

Получив подобное заключение, следователи изымают молотки, трубы и другие металлические предметы.

В нашей практической деятельности встречались случаи травм с наличием в повреждении всех морфологических признаков, отображающих действие тупого твердого предмета с ограниченной контактирующей поверхностью. Инородные включения в повреждениях не были обнаружены. При РСФА в краях повреждений выявлено достоверное превышение железа. Как предполагаемый травмирующий предмет была предоставлена бутылка из под шампанского из стекла зеленого цвета, на которой имелись следы крови потерпевшего. В ходе проведенного сравнительно исследования следов отпечатков от ребра дна бутылки и подлинных повреждений было установлено их сходство по форме, размеру, характеру краев и др. Это послужило поводом для проведения рентгеноспектрального исследования фрагмента бутылки. Были получены спектры наружной поверхности и скола

Похожие темы научных работ по прочим медицинским наукам , автор научной работы — Нигматуллин Н. Ш., Губеева Е. Г.

Текст научной работы на тему «Судебно-медицинское значение альгологического исследования, возможности использования конфокальной микроскопии»