CC BY
29
© Коллектив авторов, 1999 УДК 616.33-006.6-033.2:616-097
С. В. Овсянников, Е. В. Артамонова, Н. А. Огнерубов,
И. А. Васин, H. Н. Тупицын, 3. Г. Кадагидзе,
G. Moldenhauer
СУБПОПУЛЯЦИИ ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ КЛЕТОК РЕГИОНАРНЫХ ЛИМФОУЗЛОВ ПРИ МИКРОМЕТАСТАЗАХ РАКА ЖЕЛУДКА
Липецкий областной онкологический диспансер; Воронежская государственная медицинская академия им. H. Н. Бурденко; Онкологический научный центр им. H. Н. Блохина РАМН;
Deutsches Krebsforschungszentrum, Heidelberg, Germany
Состояние регионарных лимфоузлов и уровень лимфоидной инфильтрации опухоли традиционно рассматриваются как косвенное отражение показателей местного иммунитета при раке желудка [17].
Установлено, что реактивные изменения, заключающиеся в гиперплазии паракортикальной (Т-кле-точной) зоны или фолликулов (В-клетки) регионарных лимфоузлов, обычно ассоциированы с более благоприятным прогнозом у больных раком желудка [4, 7, 13, 16] и практически не наблюдаются при наличии метастазов в соответствующих лимфоузлах [4, 7, 13]. Данные относительно динамики изменения макрофагов и плазматических клеток в регионарных лимфоузлах, пораженных метастазами рака желудка, не столь однозначны [11, 13].
Эти результаты получены на морфологическом уровне. Возможности современной диагностики метастатического поражения регионарных лимфоузлов при раке желудка и оценки субпопуляций иммуно-компетентных клеток значительно шире. Методами иммуногистохимии с применением высокоспецифичных моноклональных антител (МКА) к эпителиальным и опухолеассоциированным антигенам рака желудка обнаруживаются так называемые микрометастазы рака желудка в регионарные лимфоузлы. Под микрометастазами понимают минимальное метастатическое поражение лимфоузла (одна или несколько опухолевых клеток, расположенных разрозненно или в виде небольших комплексов), не улавливаемое стандартным гистологическим методом, но выявляемое с применением МКА [3, 5, 6, 8|. Уточнен субпопуляционный составтуморинфиль-трирующих лимфоцитов при раке желудка во взаимосвязи с процессом активации этих клеток [9, 12, 18]. Иммунофенотипирование стало использоваться для характеристики иммунокомпетентных клеток регионарных лимфоузлов при опухолях 115].
В связи с изложенным в настоящей работе нами предпринята попытка охарактеризовать состав иммунокомпетентных клеток регионарных лимфоузлов с микрометастазами рака желудка. С этой целью было
S.V.Ovsiannikov, E.V.Artamonova, N.A.Ognerubov,
I.A. Vasin, N.N.Tupitsyn, Z.G.Kadagidze,
G. Moldenhauer
IMMUNOCOMPETENT CELL POPULATIONS IN REGIONAL LYMPH NODES WITH MICROMETASTASES OF GASTRIC CANCER
Lipetsk Regional Cancer Center;
N.N. Burdenko Voronezh State Medical Academy;
N. N. Blokhin Cancer Research Center, RAMS;
Deutsches Krebsforschungszentrum, Heidelberg,
Germany
Regional lymph node status and tumor lymphoid infiltration are traditionally considered indirect evidence of local immunity characteristics in gastric cancer [17].
The reactive changes such as paracortical (T-cells) or follicular (B-cells) hyperplasia in regional lymph nodes are usually associated with a more favorable prognosis of gastric cancer [4,7,13,16] and are practically not found in cases with lymph node metastases [4,7,13]. However, findings concerning changes in macrophages and plas-mocytes in regional lymph nodes affected by gastric cancer metastasis are equivocal [11,13].
The findings in question have been obtained at morphological levelw^ile diagnostic potential of to-day techniques is rrilrcrigreater. Immunohistochemical assay using high-specificity monoclonal antibodies (MAb) to epithelial and tumor-associated antigens of gastric cancer can discover micrometastases to regional lymph nodes. The micrometastasis is a minimal metastatic lesion of a lymph node (one or several tumor cells located separately or in small groups) undetectable by standard histological tests but recognizable by reactivity with MAbs [3,5,6,8]. A more accurate characterization of tumor-infiltrating lymphocyte subpopulations in relation to their activation was made in [9,12,18]. Immunophenotyping of regional lymph node immunocompetent cells in cancer patients was performed in [15].
The purpose of this study was to characterize immunocompetent cell populations in regional lymph nodes with micrometastases of gastric cancer. We studied T-cells (CD7) and their subpopulations (CD4 and CD8), B-cells (CD 19), plasmocytes (marked cytoplasmatic expression of CD38) and macrophages (Dll+) from 23 regional lymph nodes with a minimal amount of gastric cancer metastatic cells as detected immunohistochcmically (by expression ofcarcinoembryonic antigen - CEA, HMFG-1, Egp34) but undetectable by histological study.
Materials and Methods. The study was performed in 70 regional lymph nodes (including 23 with and 47 without metastases by histological and immunohistological findings) from gastric cancer patients undergoing radical (R1-R3) or palliative surgery. The patients were managed at the Abdominal Surgery Department, Lipetsk Regional Cancer Center.
проведено изучение Т-клеток (CD7) и их субпопуляций (CD4 и CD8), В-клеток (CD 19), плазматических клеток (яркая цитоплазматическая экспрессия CD38) и макрофагов (D11+) в 23 регионарных лимфоузлах, в которых минимальные количества опухолевых метастатических клеток рака желудка были обнаружены только иммуногистохимически (экспрессия раковоэмбрионального антигена — РЭА, HMFG-1, Egp34), но не гистологически.
Материалы и методы. Исследование проведено на 70 регионарных лимфоузлах (из них 23 с микрометастазами и 47 без метастазов, по данным гистологии и иммуногистохимии), полученных от больных раком желудка во время радикальных (Rl — R3) или паллиативных оперативных вмешательств. Больные проходили лечение в отделении абдоминальной хирургии Липецкого областного онкологического диспансера.
Распределение лимфоузлов по группам в соответствии с нумерацией, предложенной Японским научным обществом по изучению рака желудка (цит. по [2]), было следующим (в числителе — количество лимфоузлов с микрометастазами, в знаменателе — количество лимфоузлов без гистологических и иммунологических признаков метастазов): №1, 2—3/4; №3—0/2; №4—0/9; №5—0/6; №6-1/1; №7-3/9; №8-2/3; №9-1/0; №10-2/3; №11-3/1; №12-4/2; №13-0/5; №14-1/1; № 16-3/1.
Удаленные во время операции лимфоузлы делили на 2 части, одна из которых подвергалась стандартному гистологическому исследованию, другая — иммуногистохимическому. Выявление опухолевых клеток в лимфоузлах проводили методом непрямой иммунофлюоресценции на криостатных срезах лимфоузлов.
Для визуализации метастатических клеток использовали МКА НЕА-19 (РЭА), МКА НЕА-125 (общеэпителиальный антиген, Egp34), любезно предоставленные G. Moldenhauer (Германия) в ходе сотрудничества [10], и отечественные МКА ИКО-25 к HMFG-1 [1].
Субпопуляции иммунокомпетентных клеток исследовали на основании экспрессии CD7 (все Т-клетки), CD4 (Т-хелперы/ин-дукторы), CD8 (Т-супрессорные и цитотоксические), CD19 (все В-клетки), CD38 (плазматические клетки) и D11 (макрофаги [14]). Выделяли следующие типы реакции иммунокомпетентных клеток: норма, гиперплазия, деплеция.
Результаты и обсуждение. На основании проведения иммуногистохимических исследований регионарных лимфоузлов от больных раком желудка было отобрано 23 лимфоузла с наличием микрометастазов рака желудка (по данным гистологии, опухолевые клетки отсутствовали).
Во всех этих случаях метастатические клетки были представлены единичными опухолевыми элементами или небольшими комплексами. Количество метастатических клеток было крайне малым, и эти клетки не могли снизить содержание Т-, В-клеток, плазмо-цитов и макрофагов в лимфоузле за счет простого их замещения. Следовательно, в данной группе изменения в лимфоузлах могут рассматриваться как реакция на начальные стадии метастатического процесса.
Наиболее ранним иммунологическим отражением метастатического процесса в лимфоузле является снижение общих Т-клеток (CD7) и Т-супрессорно/цито-токсических (CD8) клеток в сравнении с непораженными лимфоузлами, различия статически значимы (табл. 1). При этом частота гиперплазии Т-зон и С04+-клеток также снижается, в то время как частота гиперплазии С08+-клеток отмечается с равной частотой в пораженных и непораженных лимфоузлах.
Distribution of the lymph nodes according to the classification of Japanese Research Society for Gastric Cancer (cited from [2]) was as follows (ratio of micrometastasis-positive lymph nodes to lymph nodes free from histological or immunological evidence of metastasis): No. 1,2
- 3/4; No.3 - 0/2; No.4 - 0/9; No.5 - 0/6; No.6 - 1/1; No.7 - 3/9; No.8
- 2/3; No.9 1/0; No.10 - 2/3; No.ll 3/1; No.12 - 4/2; No. 13 -0/5; No. 14 - 1/1; No.16 - 3/1.
Half of the resected nodes were studied by standard histological technique and the others were investigated immunohistochemically. Lymph node metastatic cells were detected by indirect immunofluorescence in node cryostatic sections.
The MAb HEA-19 (CEA), HEA-125 (common epithelial antigen, Egp34) used in this study were kindly supplied by G.Moldenhauer (Germany) within the joint project [10], the MAb ICO-25 to HMFG-1 was of domestic manufacture [ 1 ].
Immunocompetent cell subpopulations were studied by expression of CD7 (all T-cells), CD4 (T-helpers/inducers), CD8 (T-suppressors and cytotoxic cells), CD 19 (all B-cells), CD38 (plasmocytes) and D11 (macrophages [ 14]). The immunocompetent cell response was evaluated as normal, hyperplasia or depiction.
Results and Discussion. Twenty three lymph nodes were found positive for micrometastases of gastric cancer basing on results of immunohistochemical study (no tumor cells were detected histologically).
In all these nodes the metastatic cells were seen as solitary neoplastic elements or small clusters. The metastatic cells were present in a very small amount and failed to reduce node T-, B-cells, plasmocytes or macrophages by simple replacement. Therefore, the changes in this lymph node group may be considered a response to early metastatic disease.
Reduction in the content of common T-cells (CD7) and T-suppressor/cytotoxic (CD8) lymphocytes as compared to intact nodes was the earliest immunological sign of lymph node metastatic affection, the difference being statistically significant (table 1). Frequency of T- and CD4+-cell zone hyperplasia was also decreased while CD8+- hyperplasia was found at a similar frequency in the affected and intact nodes. B-cells demonstrated the same trends as the T- (CD7) lymphocytes. There were no specific changes in plasmocyte concentration in metastasis-positive versus -negative nodes.
Reduction in macrophage content was observed less frequently in micrometastasis-positive than in intact nodes (the difference being close to significant, p=0.07).
Analysis of lymph node cell immunoreactivity with respect to antigen phenotype of micrometastasis cells discovered the following.
HEA-125-Positive Micrometastasis-Associated Changes in Lymph Node Lymphoid Cell Subpopulations. Since histological study failed to find metastases in 11 lymph nodes with HEA-125+ cells this group was classified as micrometastasis-positive. Characterization of immunocompetent subpopulations was performed in regional lymph nodes with HEA-125+ micrometastases of gastric cancer in comparison with lymph nodes free from HEA-125+ cells in node-negative (histologically) cases.
T-cells (total CD7) and macrophages (total D11) were the first cell types demonstrating reactivity to HEA-125+ metastasis (table 2). As to these cell populations the difference with intact nodes was statistically significant. The nodes with HEA-125+ micrometastases showed
Таблица 1 ТаЫе1
Субпопуляции иммунокомпетентных клеток в лимфоузлах с микрометастазами рака желудка Immunocompetent cell subpopulations in lymph nodes with micrometastases of gastric cancer
Антиген Тип изменений Метастаз + Метастаз - P
РП7 Снижение/Increase 5/18 (27,8) 2/39(5,1)
L/U / Повышение/Decrease 3/18(16,7) 23/39 (59,0) 0,003
РГ)4 Снижение/Increase 3/19(15,8) 5/44(11,4)
\_/ L/4- Повышение/Decrease 6/19(31,6) 25/44 (56,8) 0,17
гпя Снижение/Increase 11/18 (61,1) 10/40(25,0)
V_/LvO Повышение/Decrease 3/18(17,0) 7/40(18,0) 0,02
РП1 Q Снижение/Increase 3/19 (15,8) 3/44(6,8)
v Lf 1 v7 Повышение/Decrease 5/19(26,3) 22/44 (50,6) 0,17
ГПЧ8 Снижение/Increase 8/21 (38,1) 13/46(28,3)
UL/OO Повышение/Decrease 4/21 (19,0) 11/46(23,9) 0,71
П1 1 Снижение/Increase 4/20 (20,0) 16/45(36,6)
LJ I I Повышение/Decrease 10/20 (10,0) 11/45 (24,4) 0,07
Antigen Change Metastasis* Metastasis- P
Примечание. В скобках указано процентное соотношение. Note. Numbers in parentheses show percentage.
В-клетки имеют ту же направленность изменений, что и T-(CD7) клетки. Специфических изменений содержания плазмоцитов в зависимости от наличия/отсутствия метастазов не выявлено.
Интересна динамика изменений макрофагов в лимфоузлах: сниженное содержание этих клеток в микрометастатически пораженных лимфоузлах отмечалось реже, чем в интактных (различия близки к достоверным, р = 0,07).
Проведен анализ особенностей иммунореактивности клеток лимфоузлов в зависимости от антигенного фенотипа клеток микрометастаза.
Изменения субпопуляций лимфоидных клеток лимфоузлов, ассоциированые с НЕА-125-позитивными микрометастазами. В 11 лимфоузлах при наличии НЕА-125+-клеток гистологические данные свидетельствовали об отсутствии метастаза. Эта группа расценена как микрометастазы. Оценили состав субпопуляций иммунокомпетентных клеток в регионарных лимфоузлах, пораженных НЕА-125+-мик-рометастазами рака желудка. Еруппой сравнения служили лимфоузлы без HEA-125-позитивных клеток у больных с отсутствием метастазов в регионарные лимфоузлы (по данным гистологического исследования).
Первыми клеточными типами, реагирующими на НЕА-125+-метастазы, были Т-клетки (суммарно по CD7) и макрофаги (суммарно по D11) (табл. 2). Именно для этих двух популяций клеток получены достоверные отличия в сравнении с интактными лимфоузлами. При наличии НЕА-125+-микрометас-тазов практически не наблюдается гиперплазии пара-кортикальной зоны (9,1% случаев), в то время как в интактных регионарных лимфоузлах этот показатель встречался в 6 раз чаще (57,1%).
practically no paracortical hyperplasia (9.1%) while the intact nodes had the hyperplasia 6-fold as frequently (57.1%).
T-zone depletion was found twofold more frequently in HEA-125+ nodes than in intact nodes (18.2% vs 9.5%, respectively). However, minimal lymph node affection by HEA-125+ metastatic cells did not necessarily affect the T-lymphocyte subpopulational composition and sometimes occurred in parallel with follicular hyperplasia.
It was somewhat unexpected to encounter absolutely no plasmocytic or macrophageal reactivity to HEA-125+ micrometastasis, with the differences for macrophages (Dll) being statistically significant (p=0.02). The macrophageal reactivity was detected in 22% of the intact and in none of the HEA-125+ regional lymph nodes. These findings suggest that plasmocytes and macrophages may remain inactive at early stage of metastasis development but response to it later.
CEA+ (HEA-19) Micrometastasis-Associated Changes in Regional Lymph Node Cell Subpopulations. 24 of 82 lymph nodes studies with H EA-19 M Ab were positive including 11 with no histological evidence of micrometastasis.
The nodes with CEA+ micrometastasis (MAb HEA-19) presented with statistically significant changes in total T-cells (CD7) (table 3). The node cell subpopulational changes were identical to those found in nodes with HEA-125+ micrometastasis.
HMFG-1+ (ICO-25) Micrometastasis-Associated Changes in Regional Lymph Node Cell Subpopulations. The group of lymph nodes with HMFG-1 + metastasis was the largest (32 nodes) mainly due to the marked cytoplasmatic reactivity of metastatic cells easily seen owing to ICO-25. There were 18 nodes with HMFG-1+ micrometastases.
Таблица 2 Table2
Реакция иммунокомпетентных клеток регионарных лимфоузлов на НЕА-125+-микрометастазы рака желудка Lymph node immunocompetent cell response to HEA-125+ micrometastases of gastric cancer
Маркер Тип реакции HEA-125+ HEA- 125- P
абс. % абс. %
Повышение/Increase 1 9,1* 24 57,1
CD7 HopMa/Normal 8 72,7 14 33,3 0,01
Снижение/Decrease 2 18,2 4 9,5
Повышение/Increase 4 36,4 26 55,3
CD4 HopMa/Normal 6 54,5 16 34,0 0,44
Снижение/Decrease 1 9,1 5 10,6
Повышение/Increase 2 18,2 8 18,2
CD8 HopMa/Normal 4 36,4 23 52,3 0,56
Снижение/Decrease 5 45,5 13 29,5
Повышение/Increase 3 30,0 22 46,8
CD19 HopMa/Normal 6 60,0 20 42,6 0,58
Снижение/Decrease 1 10,0 5 10,6
Повышение/Increase 0 0 13 26,5
CD38 HopMa/Normal 7 63,6 22 44,9 0,15
Снижение/Decrease 4 36,4 14 28,6
Повышение/Increase 0 0 11 22,4
D11 HopMa/Normal 9 90 21 42,9 0,02
Снижение/Decrease 1 10 17 34,7
No. % No. %
Markers Response HEA-125+ HEA-125- P
*Указан процент соответствующего типа реакции иммунокомпетентных клеток в пределах группы метастатических (НЕА-125+) или неметастатических лимфоузлов.
*, Percentage of respective immunocompetent cell response within the metastatically affected (HEA-125+) or intact lymph nodes.
В группе НЕА-125+-лимфоузлов деплеция Т-зон отмечалась вдвое чаще, чем в интактных лимфоузлах (18,2 и 9,5% соответственно). Вместе с тем минимальное поражение лимфоузлов НЕА-125+ метастатическими клетками еще не ведет к изменению состава субпопуляций Т-лимфоцитов лимфоузла и нередко (в 30% случаев) возникает на фоне фолликулярной гиперплазии.
Несколько неожиданным было обнаружение полного отсутствия выраженной плазмоклеточной и ма-крофагальной реакции на НЕА-125+-микрометаста-зы, причем данные, полученные на макрофагах (Dl 1), были статически значимы (р = 0,02). В интактных регионарных лимфоузлах макрофагальная реакция наблюдалась в 22% случаев, в то время как при наличии НЕА-125+-метастазов она отсутствовала. Эти данные позволяют предположить, что на начальных этапах метастатического процесса плазматические клетки и макрофаги могут оставаться интактны-ми, что, однако, не исключает их последующей реакции на метастаз.
Изменения субпопуляций клеток регионарных лимфоузлов, ассоциированные с РЭА+ (НЕА-19)-микроме-тастазами. Изучены 82 лимфоузла с помощью МКА НЕА-19. Положительная реакция отмечена в 24 лимфоузлах, причем в 11 из них данные были расценены
The cases with HMFG-1+ micrometastases follow the common trend of primary affection of T-cell-associated immunity (table 4). T-cell (CD7) depletion was detected in 27% of the nodes with HMFG-1+ micrometastases, i.e. threefold as frequently as in intact nodes (8.3%), the difference being close to significant (p=0.07). The HMFG-1 + lymph nodes were also characterized by coexistence of metastatic cells and T-cell hyperplasia which was observed in 20% of the cases. The nodes presented with a higher frequency of HMFG-1+ micrometastasis in parallel with hyperplasia of other cell types. Interestingly, that the HMFG-1+ micrometastasis produced the greatest inhibition effect on T-suppressor/cytotoxic cells: a reduction in CD8+ cells was found in 60% of the nodes, the difference being close to significant. It seems that HMFG-1 + micrometastasis-associated processes are characteristic of the earliest stages of interactions of lymphoid and neoplastic cells in lymph nodes. The HMFG-1+ micrometastases failed to produce any damaging effect on plasmocytes or macrophages.
Our findings are in agreement with morphological studies demonstrating the presence of marked (histologically detectable) metastases to be related to reduction in T- and B-cell zones of lymph nodes [4,7,13,16]. Our data (are not shown here) suggest that the histologically identifiable metastases cause reduction in all T-cell subpopulations
Таблица 3 Table 3
Реакция иммунокомпетентных клеток регионарных лимфоузлов на РЭА+-микрометастазы рака желудка Lymph node immunocompetent cell response to CEA+ micrometastases of gastric cancer
Маркер Тип реакции HEA-19+ HEA-19- P
абс. % абс. %
Повышение/Increase 1 9,1 24 53,3
CD7 HopMa/Normal 8 72,7 16 35,6 0,029
Снижение/Decrease 2 18,2 5 11,1
Повышение/Increase 3 27,3 27 52,9
CD4 HopMa/Normal 6 54,5 18 35,3 0,3
Снижение/Decrease 2 18,2 6 11,8
Повышение/Increase 2 18,2 8 17,4
CD8 HopMa/Normal 3 27,3 23 50,0 0,34
Снижение/Decrease 6 54,5 15 32,6
Повышение/Increase 2 18,2 25 49,0
CD19 Норма/ІМогтаІ 8 72,7 21 41,2 0,14
Снижение/Decrease 1 9,1 5 9,8
Повышение/Increase 1 9,1 13 23,6
CD38 HopMa/Normal 5 45,5 26 47,3 0,43
Снижение/Decrease 5 45,5 16 29,1
Повышение/Increase 0 0 13 24,1
D11 HopMa/Normal 8 80 23 42,6 0,069
Снижение/Decrease 2 20 18 33,3
No. % No. %
Markers Response HEA-19+ HEA-19- P
как наличие микрометастаза (отсутствие гистологического подтверждения метастаза).
При наличии в регионарных лимфоузлах РЭА+-микрометастазов (МКА НЕА-19) происходят достоверные изменения общего содержания Т-клеток (СБ7) (табл. 3). В целом изменения субпопуляцион-ного состава клеток лимфоузлов практически идентичны таковым в случае НЕА-125+-микрометастазов.
Изменения субпопуляций клеток регионарных лимфоузлов, ассоциированные с НМРС-1+ (ИКО-25)-мик-рометастазами. НМЕО-1+-группа метастазов рака желудка в лимфоузлы была самой многочисленной (32 лимфоузла), что во многом объясняется ярким цитоплазматическим типом реакции метастатических клеток, которые при использовании МКА ИКО-25 легко визуализируются; 18 лимфоузлов были расценены как имеющие НМРС-1+-микрометастазы.
В случаях с НМЕС-1+-микрометастазами подтверждается общая тенденция к повреждению в первую очередь общего Т-клеточного звена иммунитета (табл. 4). Деплеция Т-клеток (С07) при наличии НМ ЕС-1+- микрометастазов наблюдалась в 27% лимфоузлов, что в 3 раза выше, чем аналогичный показатель в интакт-ных лимфоузлах (8,3%). Различия близки к достоверным (р = 0,07). Вместе с тем особенность НМРС-1+-лимфатических узлов состоит в том, что метастатические клетки могут сосуществовать с Т-клеточной гиперплазией в 20% случаев. Более частой является также возможность развития микрометастазов с подобным
(CD4, CD7, CD8) and B-cells (CD19), but the plasmo-cytic and macrophageal reactions may be differently directed and rather intense. Therefore, the lymphoid cell response to micrometastases may be considerably different from that to histologically detectable metastases. The differences include the absence of CD4- and B-cell (CD 19) depletion and the absence of marked macrophageal or plasmocytic reactivity. The earliest signs ofT-cell (CD7) depletion are associated with T-suppressor/cytotoxic cells (CD8). Our findings suggest the following pattern of changes in immunocompetent cell composition with metastasis progression: reduction in CD7 mainly due to CD8-lymphocytes; no macrophageal or plasmocytic response; depletion of T- and B-cell components with possible increase in plasmocytic and macrophageal reactivity.
In summary, all the three markers (ICO-25, HEA-19 and HEA-125) expressed on micrometastases of gastric cancer affect common T-cells (CD7) in lymph nodes. This leads to reduction in T-zones of metastatically affected lymph nodes and T-cell hyperplasia in metasta-sis-free nodes. The selective inhibition of T-suppres-sor/cytotoxic cells was associated with HMFG-1 + micrometastasis immunophenotype. In contrast, Egp34+ and CEA+ phenotypes of regional lymph node micrometastasis of gastric cancer were associated with the absence of marked macrophageal and, to a lower extent, plasmocytic reactivity.
Таблица 4 Table 4
Реакция иммунокомпетентных клеток регионарных лимфоузлов на HMFG-1 +-микрометастазы рака желудка Lymph node immunocompetent cell response to HMFG-1 + micrometastases of gastric cancer
Маркер Тип реакции ИКО-25+ ИКО-25- P
абс. % абс. %
Повышение/Increase 3 20 18 50
CD7 Норма/Ыогта! 8 53,3 15 41,7 0,07
Снижение/Decrease 4 26,7 3 8,3
Повышение/Increase 5 31,3 21 51,2
CD4 HopMa/Normal 9 56,3 14 34,1 0,3
Снижение/Decrease 2 12,5 6 14,6
Повышение/Increase 3 20,0 6 16,2
CD8 HopMa/Normal 3 20,0 20 54,1 0,066
Снижение/Decrease 9 60,0 11 29,7
Повышение/Increase 4 25,0 20 48,8
CD19 Норма/І^огтаІ 9 56,3 19 46,3 0,12
Снижение/Decrease 3 18,8 2 4,9
Повышение/Increase 3 16,7 12 27,9
CD38 HopMa/Normal 8 44,4 20 46,5 0,49
Снижение/Decrease 7 38,9 11 25,6
Повышение/Increase 2 11,8 8 19,0
D11 HopMa/Normal 12 70,6 19 45,2 0,21
Снижение/Decrease 3 17,6 15 35,7
No. % No. %
Markers Response HMFG-1 + HMFG-1- P
фенотипом на фоне гиперплазии других клеточных компонентов лимфоузла. Интересно отметить, что НМРС-1+-микрометастазы наиболее сильно подавляли Т-супрессорно-цитотоксическое звено в лимфоузлах: в 60% случаев С08+-клетки были снижены, различия близки к достоверным. Возможно, на примере 11М FG-1 +-микрометастазов прослеживаются самые ранние этапы взаимодействия лимфоидных и опухолевых клеток в лимфоузле. Плазмоклеточные и макро-фагальные звенья при появлении НМFG-^-микро-метастазов не страдают.
Полученные в работе данные в целом согласуются с результатами морфологических работ, в которых наличие явных (гистологически определимых) метастазов коррелировало с редукцией Т- и В-клеточных зон лимфоузлов [4,7,13,16]. По нашим данным (не приведены в данной статье), наличие метастазов, определяемых гистологически, ведет к снижению всех субпопуляций Т-клеток (CD4, CD7, CD8) и В-клеток (CD 19), но реакции плазматических клеток и макрофагов могут быть разнонаправленными, в том числе и достаточно выраженными. С этих позиций реакция лимфоидных клеток на микрометастазы существенно отличается от таковой на гистологически выявляемые метастазы. Эти различия сводятся к следующему: не отмечается деплеции С04-клеток и В-клеток (CD 19), отсутствуют выраженные макрофагальные и плазмоклеточные реакции. Наиболее ранние проявления деплеции Т-клеток (CD7) ассоциированы
с Т-супрессорным/цитотоксическим компонентом (CD8). На основании полученных данных можно представить следующим образом изменения состава иммунокомпетентных клеток лимфоузлов по мере метастазирования: снижение CD7, главным образом за счет CDS-лимфоцитов; отсутствие реакции макрофагов и плазматических клеток; деплеция Т- и В-клеточных компонентов лимфоузла с возможным нарастанием плазмоклеточных и макрофагальных реакций.
Резюмируя данные, можно отметить, что все три маркера (ИКО-25, НЕА-19 и НЕА-125), экспрессированные на микрометастазах рака желудка, влияют на общие Т-клетки (CD7) лимфоузлов. Происходит редукция Т-зон в метастатически пораженных лимфоузлах и гиперплазия Т-клеток в лимфоузлах с отсутствием метастатических клеток. Избирательное подавление Т-супрессорных/цитотоксических клеток было связано с HMFG-1 +-иммунофенотипом микрометастазов. Напротив, Egp34+- и РЭА+-фенотип микрометастазов рака желудка в регионарные лимфоузлы ассоциировал с отсутствием выраженной реакции макрофагов и в меньшей степени — плазмоцитов.
ЛИТЕРА ТУРА/REFERENCES
1. Барышников А. Ю., Тоневицкий А. Г.// Моноклональные антитела н лаборатории и клинике. — М., 1997.
2. Давыдов М. И., Германов А. Б., Стилиди И. С. и др. // Хирургия. — 1995. — №5. — С. 41—46.
3. Пугачев К. К., Шимбирева И. Б. // Арх. пат. — 1991. — Т. 53, №1. -С. 66-68.
4. Black М. М., Freeman С., Mark Т. et al. // Cancer. — 1971. —Vol. 27. - P. 703-711.
5. Gusterson B., Ott R. // Lancet. — 1990. — Vol. 336. — P. 434—436.
6. Ishida K, Katsuyama Т., Sugiyama A., Kawasaki S. // Cancer. — 1997. - Vol. 79, N 6. - P. 1069-1076.
7. Kodama Y., Seojima K, Inokuchi K. // Jpn. J. Surg. — 1976. — Vol. 6, N 1 - P. 9-18.
8. Maehara Y, Oshiro Т., Endo K. // Surgery. —1996. — Vol. 119, N 4. - P. 397-402.
9. Maehara Y., Tomisaki S., Oda S. // Int. J. Cancer. — 1997. — Vol. 74, N 2. -P. 224-228.
10. Moldenhauer G., Momburg F., Moller P. et al. // Br. J. Cancer. — 1987.-Vol. 56.-P. 714-721.
© В. И. Кныш, Ю. М. Тимофеев, 1999 УДК 616.352-006.04-089
В. И. Кныш, Ю. М. Тимофеев
ПАХОВЫЕ ЛИМФАДЕНЭКТОМИИ ПРИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЯХ АНАЛЬНОГО КАНАЛА
НИИ клинической онкологии
Злокачественные опухоли анального канала составляют, по данным ОНЦ РАМН, около 11% всех злокачественных опухолей прямой кишки. Основные гистологические типы опухолей следующие: плоскоклеточный рак — 47,2%, аденогенный рак — 24,7%, меланома — 17,8, неэпителиальные злокачественные опухоли (лейомиосаркома, фибросаркома и др.) — 7,6%, карциноиды — 1,8%, злокачественные лимфомы — 0,8% [2]. До сих пор остается неясным вопрос о целесообразности паховых лимфаденэкто-мий при злокачественных опухолях анального канала, о допустимости так называемых профилактических паховых лимфаденэктомий, об объеме паховых лимфаденэктомий, о сроках их выполнения по отношению к экстирпации прямой кишки и др. [3—5].
Приводим наш опыт паховых лимфаденэктомий у 36 больных злокачественными опухолями анального канала, оперированных в ОНЦ РАМН в 1960— 1990 гг. Проанализируем частоту метастатического поражения основных групп лимфоузлов и показания к лимфаденэктомии при различных гистологических типах злокачественных опухолей анального канала.
Плоскоклеточный рак (159 больных). Частота метастатического поражения лимфоузлов у больных плоскоклеточным раком анального канала представлена в табл. 1.
Как видно из табл. 1, плоскоклеточный рак анального канала часто дает метастазы в лимфоузлы, метастатическое поражение лимфоузлов отмечено у 34,6+3,8% всех больных. Наиболее часто поражаются паховые и параректальные лимфоузлы, которые
11. Nakano К. // Acta Pathol. Jpn. - 1976. - Vol. 26, N 1. - P. 17-23.
12. Okamura Т., Kodama Y., Kamegawa T. et al. //Jpn. J. Surg. — 1983. - Vol. 13, N 3. - P. 177-183.
13. Riegrova D., Jansa P. // Neoplasma. — 1982. — Vol. 29, N
4.-P. 481-486.
14. Rudinskaya T. D., Poltoranina V. S., Baranov V. M. et al. // Immunol. Letters. — 1992. — Vol. 33. — P. 1—8.
15. Shimizu Y., Chen J. Т., Shiokawa S. et al. // Nippon Sanka Fujinka Gakkai Zasschi. - 1990. - Vol. 42, N 1. - P. 37-44.
16. Syrjanen K. J., Hjelt L. H. // Scand. J. Gastroenterol. —
1977. - Vol. 12, N 8. - P. 897-902.
17. Syrjanen K. J., Hjelt L. H. // Ibid. - P. 903-909.
18. Tupitsyn N. N., Kadagidze Z. G., Tuichiev I. K. et al. // Exp. Oncol. - 1995. - Vol. 17. - P. 31-36.
Поступила 28.04.98 / Submitted 28.04.98
V I. Knysh, Yu. M. Timofeyev
INGUINAL LYMPH NODE DISSECTION IN ANAL CANCER
Institute of Clinical Oncology
According to CRC RAMS data anal cancer is about 11 % of all rectal malignancies. By histology the tumors are squamous-cell carcinoma (47.2%), adenocarcinoma (24.7%), melanoma (17.8%), non-epithelial malignancies (leiomyosarcoma, fibrosarcoma, etc.) (7.6%), carcinoids (1.8%), malignant lymphoma (0.8%) [2]. There is much dispute [3-5] on reasonability of curative and preventive inguinal lymph node dissection, on extent of inguinal lymphadenectomy and its time after extirpation of the rectum etc.
We have the experience of 36 patients with anal cancer undergoing surgery at the CRC RAMS during 1960-1990. Let us analyze frequency of principal lymph node involvement in respect of anal cancer histology.
Squamous-cell carcinoma - 159 cases. Table 1 presents the rate of lymph node affection in patients with squamous-cell carcinoma of the anus.
As seen, lymph node involvement is a frequent event in patients with squamous-cell carcinoma of the anus to reach 34.6±3.8%. Inguinal and pararectal lymph nodes which are regional for the anal zone are most common metastasis sites. The affection of inguinal lymph nodes was homolateral, i.e. occurred on the side of the tumor, in all the cases, there were no patients with contralateral inguinal lymph node metastasis. In 15 (39.5±7.9%) of 38 patients the lymph node involvement was bilateral. The affection of ileac and paraaortal lymph nodes was bilateral in all the cases, note that these lymph node groups are juxtaregional for the anal zone.
Inguinal lymph node dissection was performed in 20 patients including 6 bilateral lymphadenectomies. This
