CC BY
7DOI: 10.25690/VETPAT.2022.24.70.010 УДК 619:615.015.38 Индюхова Е. Н.
СУБХРОНИЧЕСКАЯ ТОКСИЧНОСТЬ ПЕРОРАЛЬНОГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ ИВЕРМЕКТИНА И БУТАФОСФАНА НА КРЫСАХ
Ключевые слова: субхронический эксперимент, пороговая доза, кровь, метаболизм.
Резюме: Субхроническая токсичность препарата Ивербутан изучена на 40 белых аутбредных крысах-самцах. Исследуемый препарат вводили крысам в виде раствора внутрижелудочно ежедневно в течение 14 суток. На них испытаны следующие дозы: 1400 (первая опытная группа), 700 (вторая опытная группа) и 350 мг/кг (третья опытная группа). Дозы были рассчитаны методом Кербера по результатам острого опыта, проведенного ранее. Лабораторные животные из контрольной группы препарат не получали. В программу изучения субхронической токсичности перорального препарата на основе ивермектина и бутафосфана включены следующие критерии оценки организма лабораторных животных: физиологический и этологический статусы, мор-фофизиологические и физиолого-биохимические показатели крови, динамика прироста массы тела, макроскопическая оценка органов и их массовые коэффициенты. Установлено достоверное изменение процента прироста живой массы у экспериментальных крыс из первой опытной группы по сравнению с контролем. На первые сутки после длительного введения препарата выявлено статистически достоверное отличие массового коэффициента печени крыс, получивших дозу 1400 мг/кг. Кроме того, в крови у крыс из первой опытной группы установлена тенденция к снижению концентрации гемоглобина на 3,7 %, количества эритроцитов на 4,0 %, активности а-амилазы на 16,9 %, тенденция к повышению концентрации общего билирубина на 6,8 %, концентрации креатинина на 3,6 %, мочевины на 9,2 %, глюкозы на 17,3 %, активности лактатдеги-дрогеназы на 6,1 %, АСТ на 3,7 % и достоверное повышение активности щелочной фосфатазы в 1,6 раза (Р<0,05) по сравнению с контролем. Через десять суток после длительного введения препарата вышеуказанные параметры крови и значения массовых коэффициентов печени у крыс из первой опытной группы достоверно не отличались от параметров контрольной группы, что свидетельствует об обратимости гепатотоксического эффекта. В связи с этим дозу 1400 мг/кг можно считать пороговой, а дозы 700 и 350 мг/кг - недействующими (безопасными).
Введение
Доклинические исследования новых лекарственных препаратов должны содержать определённый спектр токсикологических исследований. Основная цель субхронической токсичности - выявить чувствительные к действию изучаемого препарата органы и ткани у лабораторных животных, а также оценить обратимость токсических эффектов. Это необходимо для проведения широких клинических испытаний лекарственных средств на целевых видах животных, в частности, для создания основ обоснованного прогноза риска проведения заявленных исследований [1, 2].
Представленная работа является продолжением серии исследований по изучению фармако-токсикологических свойств нового противопаразитарного препарата Ивербутан [3, 4]. Ранее изложены результаты изучения острой пероральной токсичности исследуемого препарата [4]. Так,
при пероральном введении опытным животным Ивербутана среднесмертельная доза (ЛД50), рассчитанная по методу Кербера, составила 5600 мг/кг массы тела мышей и 7000 мг/кг массы тела крыс (4 класс опасности по ГОСТ 12.1.007-76). Средне-смертельная доза, рассчитанная по методу Миллера и Тейнтера, составила 5292,0 ± 1058,6 (4233,4^6350,6) мг/кг массы тела мышей и 6463,2 ± 1496,9 (4966,3^7960,1) мг/кг массы тела крыс (3 класс опасности по ГОСТ 12.1.007-76) [4]. Данные результаты явились основанием для проведения дальнейших доклинических токсикологических испытаний перорального препарата Ивербутан на лабораторных животных.
В связи с этим цель работы: изучить влияние лекарственного препарата на основе ивермектина и бутафосфана (Ивер-бутана) на организм крыс при многократном внутрижелудочном введении в субхроническом опыте.
Материалы и методы исследований
Эксперимент проводили в виварии ВНИИП - филиала ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН. Субхроническую токсичность лекарственного средства Ивербутан изучали на белых аутбредных крысах-самцах. Сформированы три опытные и одна контрольная группы по десять голов в каждой.
Исследуемое лекарственное средство вводили лабораторным животным в виде раствора внутрижелудочно ежедневно в течение двух недель. На них были испытаны следующие дозы 1400, 700 и 350 мг/кг (1/5, 1/10 и 1/20 от LD50 = 7000 мг/кг, рассчитанной методом Кербера по результатам острого опыта [4]). Исследуемый раствор вводили с помощью внутрижелудоч-ного зонда в следующих дозах 0,140, 0,070 и 0,035 мл на 100 г массы животного, что соответствует дозам 1400, 700 и 350 мг/кг. При этом одна группа лабораторных животных служила интактным контролем.
Ежедневно в течение двух недель проводили мониторинг физиологического и этологического статусов у крыс [5]. На 15 и 24-е сутки эксперимента по пять крыс из каждой группы подвергали эвтаназии и отбирали пробы крови для определения мор-фофизиологических и физиолого-биохи-мических показателей, используя методы, изложенные в издании И. П. Кондра-хина (2004). Также в указанные сроки субхронического эксперимента проводили макроскопическое исследование органов (лёгких, сердца, кожи, селезёнки, печени,
почек, желудка и кишечника), определяли их массу, а также массовые коэффициенты. Массу тела у лабораторных животных определяли на 1, 7, 14 и 24-е сутки опыта. Заявленные манипуляции проведены с соблюдением международных требований [6, 7]. Статистическая обработка полученных цифровых данных проведена с использованием ^критерия Стьюдента.
Результаты и обсуждение
Выраженных изменений в физиологическом и этологическом статусе у крыс в течение субхронического эксперимента не отмечено. Частота и глубина дыхательных движений, а также частота сердечных сокращений соответствовали физиологическим нормам. Приём корма и воды у животных из опытных групп был без изменений. Реакция на различные раздражители (звук, свет и др.) была адекватной.
Динамика массы тела крыс представлена на графике, при этом достоверных изменений по данному показателю у животных не выявлено (рисунок).
Показатели массы животных из первой, второй и третьей опытных и контрольной групп на первые сутки введения препарата составляли, соответственно: 237,20 ± 2,97 г, 234,50 ± 3,81 г, 235,30 ± 3,79 г и 231,50 ± 3,21 г, что обуславливает однородность сформированных экспериментальных групп животных [8].
Выявлено достоверное изменение процента прироста живой массы у лаборатор-
Рисунок. Динамика массы тела лабораторных животных в течение двух недель
ных животных из первой опытной группы по сравнению с контрольными аналогами: 22,49 ± 3,13 % против 30,36 ± 1,23 %; Р <0,05 (табл. 1).
При макроскопическом исследовании органов крыс из опытных групп по сравнению с контролем изменений не выявлено. Интегральный показатель, который используют для оценки состояния внутренних органов - это массовые коэффициенты органов. На 15-е сутки эксперимента установлено статистически достоверное отличие только массового коэффициента печени лабораторных животных, получивших дозу 1400 мг/кг: (3,69 ± 0,05 против 3,27 ± 0,08 в контроле; Р <0,05). Следует отметить, что на 24-е сутки субхронического эксперимента достоверных изменений в показателях массовых коэффициентов печени, почек, селезёнки, лёгких и сердца не выявлено.
Результаты морфофизиологических исследований крови крыс, проведённых в течение субхронического эксперимента на 15 и 24-е сутки, представлены в таблице 2.
Достоверных изменений по морфофи-зиологическим параметрам крови крыс из опытных групп по сравнению с контролем на 15-е сутки эксперимента не установлено. Наряду с этим в крови у крыс из первой, второй и третьей опытных групп установлена тенденция к снижению концентрации гемоглобина на 3,7; 4,5; 4,9 % и количества эритроцитов на 4,0; 5,1; 3,8 % соответственно по сравнению с контролем.
Кроме того, в крови лабораторных животных определена тенденция к повышению количества тромбоцитов у первой опытной группы на 8,2 %, у второй - 12,7 % и у третьей - 15,3 % соответственно по сравнению с контрольной группой. Указанные изменения морфофизиологических показателей крови крыс из опытных групп свидетельствуют о дестабилизации гомеоста-за в их организме и о нарушении механизмов адаптации на фоне испытанных доз.
Через десять суток после длительного введения изучаемого раствора оценка морфофизиологических показателей лабораторных животных из опытных групп показала отсутствие достоверных изменений по сравнению с данными контрольных аналогов (табл. 2). Однако в крови лабораторных животных сохранена тенденция к повышению количества тромбоцитов у первой опытной группы на 13,3 %, у второй - 13,8 % и у третьей - 12,7 % соответственно по сравнению с контрольной группой.
В таблице 3 отражены некоторые фи-зиолого-биохимические параметры крови лабораторных животных после многократного перорального введения Ивербу-тана.
Известно, что маркером холестаза является активность в крови щелочной фос-фатазы, наибольшее количество которой локализуется в эндотелии желчевыводя-щих путей. Заявленное обусловлено нарушением функции гепатоцитов [9, 10]. Так,
Таблица 1. Процент к исходной массе тела животных, %
№ животного Контрольная группа Первая опытная группа Вторая опытная группа Третья опытная группа
1 29,07 35,65 33,80 26,91
2 23,68 21,05 41,44 23,93
3 29,37 25,0 29,15 27,23
4 36,86 20,34 37,50 33,05
5 26,27 25,23 33,47 26,32
6 30,45 10,59 29,82 32,89
7 34,91 40,80 42,13 28,57
8 32,16 8,98 36,80 39,02
9 32,03 18,60 14,89 25,20
10 28,83 18,64 43,15 32,73
М ± т 30,36 ± 1,23 22,49 ± 3,13* 34,22 ± 2,65 29,59 ± 1,48
Примечание: здесь и далее * - Р <0,05
Таблица 2. Морфофизиологические показатели крови крыс
в течение субхронического эксперимента, (п=5)
Показатели Сутки эксперимента Контрольная группа Дозы, мг/кг
1400 700 350
Гематокрит, % 15-е 46,12 ± 0,64 44,32 ± 0,46 44,66 ± 0,57 44,04 ± 0,48
24-е 45,94 ± 0,41 43,16 ± 1,10 44,20 ± 0,67 44,34 ± 0,50
Гемоглобин, г/л 15-е 151,80 ± 4,34 146,20 ± 3,80 145,0 ± 3,73 144,40 ± 2,89
24-е 150,80 ± 2,31 151,80 ± 1,98 151,60 ± 1,91 153,60 ± 1,94
Эритроциты, х1012/л 15-е 8,16 ± 0,12 7,83 ± 0,10 7,74 ± 0,12 7,85 ± 0,07
24-е 8,07 ± 0,12 7,93 ± 0,10 7,72 ± 0,15 7,82 ± 0,10
Лейкоциты, х109/л 15-е 11,02 ± 0,53 11,34 ± 0,43 8,48 ± 0,89 9,04 ± 0,77
24-е 10,16 ± 0,28 9,94 ± 0,30 10,34 ± 0,17 10,20 ± 0,26
Тромбоциты, х109/л 15-е 665,20 ± 13,77 719,80 ± 23,43 749,60 ± 29,93 767,20 ± 36,61
24-е 648,20 ± 29,38 734,60 ± 19,61 737,60 ± 19,44 730,20 ± 21,52
Лейкограмма
Палочкоядерные нейтрофилы, % 15-е 0,20 ± 0,20 0,80 ± 0,37 0,60 ± 0,24 0,20 ± 0,20
24-е 0,40 ± 0,24 0,60 ± 0,24 0,20 ± 0,20 0,40 ± 0,24
Сегментоядер-ные нейтрофилы, % 15-е 25,0 ± 1,38 28,0 ± 1,41 27,80 ± 1,16 33,40 ± 3,19
24-е 28,60 ± 0,51 28,80 ± 0,58 28,0 ± 0,71 29,20 ± 0,37
Эозинофилы, % 15-е 0,80 ± 0,37 0,60 ± 0,24 0,40 ± 0,24 0,80 ± 0,20
24-е 1,20 ± 0,20 2,0 ± 0,45 1,60 ± 0,24 0,40 ± 0,24
Моноциты, % 15-е 3,0 ± 0,84 3,60 ± 0,60 2,60 ± 0,24 4,80 ± 0,20
24-е 2,80 ± 0,20 3,80 ± 0,37 4,40 ± 0,60 1,80 ± 0,37
Лимфоциты, % 15-е 71,0 ± 2,12 67,0 ± 2,02 68,60 ± 0,98 60,80 ± 3,09
24-е 67,0 ± 0,45 64,80 ± 0,92 65,80 ± 0,66 68,20 ± 0,37
у крыс из первой опытной группы на 15-е сутки субхронического эксперимента выявлено достоверное увеличение активности щелочной фосфатазы в 1,6 раза (Р <0,05) по сравнению с контролем. Наряду с
этим установлена тенденция к увеличению концентрации общего билирубина в крови у крыс из первой опытной группы на 6,8 % по сравнению с контролем. Описанное изменение концентрации общего билиру-
Таблица 3. Физиолого-биохимические показатели крови крыс в течение субхронического эксперимента, (п=5)
Показатели Сутки эксперимента Контрольная группа Дозы, мг/кг
1400 700 350
Билирубин общий, мкмоль/л 15-е 3,84 ± 0,17 4,10 ± 0,16 3,90 ± 0,19 3,42 ± 0,18
24-е 3,98 ± 0,16 3,96 ± 0,25 3,80 ± 0,24 3,64 ± 0,25
Билирубин прямой, мкмоль/л 15-е 1,02 ± 0,20 0,50 ± 0,08 0,64 ± 0,14 0,70 ± 0,15
24-е 0,90 ± 0,16 0,62 ± 0,11 0,70 ± 0,13 0,58 ± 0,05
Аспартатамино-трансфераза, Е/л 15-е 195,40 ± 9,22 202,60 ± 8,0 180,80 ± 8,49 187,0 ± 10,49
24-е 205,60 ± 12,39 194,80 ± 10,27 185,0 ± 9,04 182,60 ± 7,94
Аланинамино-трансфераза, Е/л 15-е 45,20 ± 2,44 36,20 ± 2,67 36,0 ± 2,51 44,0 ± 2,35
24-е 47,20 ± 2,65 32,60 ± 4,76 34,80 ± 4,32 38,40 ± 4,40
Мочевина, ммоль/л 15-е 4,34 ± 0,18 4,74 ± 0,14 4,36 ± 0,11 4,80 ± 0,19
24-е 4,28 ± 0,27 4,46 ± 0,29 4,24 ± 0,30 4,90 ± 0,29
Креатинин, мкмоль/л 15-е 50,60 ± 1,69 52,40 ± 1,47 48,40 ± 2,01 48,0 ± 1,92
24-е 49,60 ± 1,96 52,20 ± 2,15 48,20 ± 1,59 49,60 ± 1,91
Общий белок, г/л 15-е 69,40 ± 2,25 72,20 ± 3,46 73,60 ± 3,41 71,80 ± 3,02
24-е 69,20 ± 2,65 71,60 ± 1,44 68,20 ± 1,62 70,60 ± 2,04
Щелочная фосфатаза, Е/л 15-е 222,20 ± 12,22 356,40 ± 31,28* 224,20 ± 12,11 284,60 ± 19,84
24-е 251,80 ± 10,24 283,0 ± 11,23 280,80 ± 17,61 285,0 ± 20,60
а-Амилаза, Е/л 15-е 636,0 ± 24,62 528,40 ± 35,39 547,80 ± 42,46 538,40 ± 41,31
24-е 631,0 ± 15,32 605,80 ± 11,39 553,60 ± 24,51 551,20 ± 25,80
Глюкоза, ммоль/л 15-е 4,28 ± 0,32 5,02 ± 0,26 4,58 ± 0,26 4,96 ± 0,21
24-е 4,32 ± 0,12 4,54 ± 0,17 4,34 ± 0,12 5,02 ± 0,26
Лактатдегидро-геназа, Е/л 15-е 1393,60 ± 120,05 1478,40 ± 159,98 1387,40 ± 135,09 1244,40 ± 87,57
24-е 545,60 ± 11,65 562,20 ± 17,83 541,60 ± 12,11 549,60 ± 17,79
бина в крови указывает на возможные нарушения экскреторной функции печени у крыс [9].
Также у животных из первой опытной
группы отмечен рост активности аспарта-таминотрансферазы на 3,7 % по сравнению с контролем, очевидно, это связано с повышением напряженности обменных
процессов за счёт увеличения интенсивности ряда реакций, обуславливающих взаимосвязи между углеводным и белковым обменами [11] у крыс из первой опытной группы.
Кроме того, у животных из первой опытной группы в крови можно отметить тенденцию к увеличению концентрации креатинина на 3,6 % и мочевины на 9,2 % по отношению к контролю. Синтез мочевины протекает преимущественно в печени, где осуществляется основной путь обезвреживания аммиака. Последний образуется в ходе реакций дезаминирования аминокислот, глутамата, распада пурино-вых, пиримидиновых оснований и др. [12]. Возможно, преобладание именно доли де-заминирования аминокислот обуславливает повышение мочевины в крови у крыс. Это свидетельствует о возрастании напряжённости функционирования печени и почек у крыс, очевидно, на фоне введения дозы 1400 мг/кг.
В крови у лабораторных животных из первой опытной группы определено повышение активности лактатдегидрогеназы на 6,1 % по сравнению с контролем. Лак-татдегидрогеназа является конечным ферментом в реакции бескислородного гликолиза. Очевидно, преобладание доли именно этого энергетического пути у крыс из первой опытной группы. Выявленные изменения активности обсуждаемого фермента в крови у крыс из первой опытной группы, очевидно, обусловлены снижением эффективности оксигенации крови (табл. 2). Известно, что при гепатопатиях различного генеза отмечают нарушение функционирования эритроцитарной системы [13].
Оценивая интенсивность углеводно-энергетического обмена у крыс из первой опытной группы, можно выделить тенденцию к снижению активности -амилазы на 16,9 % и увеличение концентрации глюкозы на 17,3 %. Возможно, повышение концентрации глюкозы в крови крыс является следствием выраженной стресс-реакции [14], которая развилась на фоне внутриже-лудочного введения препарата. Кроме того, указанные изменения концентрации глюкозы в организме крыс свидетельствуют о перспективах её перерасхода в условиях наращивания интенсивности энергетического обмена, что необходимо для реализации механизмов адаптации на фоне применения препарата.
Анализ полученных результатов по морфофизиологическим, физиолого-био-
химическим показателям крови и массовым коэффициентам печени у крыс из первой опытной группы по сравнению с контролем свидетельствует о том, что испытанная доза 1400 мг/кг при длительном пероральном введении Ивербутана крысам проявила гепатотоксический эффект.
При проведении физиолого-биохими-ческого исследования крови через десять суток после длительного введения препарата не установлено значимых изменений в параметрах крови у экспериментальных крыс (табл. 3).
Таким образом, изменения физиолого-биохимических параметров крови у крыс из первой опытной группы (доза 1400 мг/ кг) носили обратимый характер.
Выводы и заключение
В субхроническом опыте в течение эксперимента выраженных изменений в физиологическом статусе и поведении не отмечено. Установлена значимая разница процента прироста живой массы экспериментальных животных из первой опытной группы по сравнению с контрольными аналогами: 22,49 ± 3,13 % против 30,36 ± 1,23 % (Р <0,05). После длительного введения препарата выявлено статистически достоверное отличие массового коэффициента печени крыс, получивших дозу 1400 мг/кг (3,69 ± 0,05 % против 3,27 ± 0,08 % в контроле; Р <0,05). Кроме того, в крови у крыс из первой опытной группы установлена тенденция к снижению концентрации гемоглобина на 3,7 %, количества эритроцитов на 4,0 %, активности -амилазы на 16,9 %, тенденция к повышению концентрации общего билирубина на 6,8 %, концентрации креатинина на 3,6 %, мочевины на 9,2 %, глюкозы на 17,3 %, активности лактат-дегидрогеназы на 6,1 %, АСТ на 3,7 % и достоверное повышение активности щелочной фосфатазы в 1,6 раза (Р <0,05) по сравнению с контролем. Через десять суток после длительного введения раствора вышеуказанные параметры крови и значения массовых коэффициентов печени у крыс из первой опытной группы статистически достоверно не отличались от параметров контроля, что свидетельствует об обратимости гепатотоксического эффекта.
В связи с этим дозу 1400 мг/кг можно считать пороговой, а дозы 700 и 350 мг/кг - недействующими (безопасными), обусловленными с учётом физиологических аспектов.
Библиографический список:
1. Сорокина А. В. Опыт проведения клинико-лабораторных исследований в доклинической оценке безопасности лекарств (часть 1: гематологические исследования) / А. В. Сорокина, С. В. Алексеева, Н. В. Еремина, А. Д. Дурнев // Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. - 2019. - Т. 9. - № 3.
- С. 197-206. DOI 10.30895/1991-2919-2019-9-3197-206
2. Индюхова Е. Н. Токсикологическая оценка комплексного инсектоакарицидного препарата «Неотерика Протекто 12» / Е. Н. Индюхова, М. В. Арисов, É Б. Арисова, И. А. Степанова // Российский паразитологический журнал. - 2018.
- Т. 12. - № 3. - С. 60-66. DOI 10.31016/1998-84352018-12-3-60-66.
3. Арисов М. В. Моделирование рецептуры комбинированного препарата при паразитозах птиц с оптимизацией их обмена веществ и неспецифической резистентности / М. В. Арисов, А.
B. Кожина, Е. Н Индюхова // XII научно-практическая конференция памяти профессора В. А. Ромашова «Современные проблемы общей и прикладной паразитологии» 1-2 ноября 2018. Сборник научных трудов. - Воронеж. - 2018. -
C. 92-97.
4. Индюхова Е. Н. Изучение острой токсичности лекарственного препарата для ветеринарного применения Ивербутан / Е. Н. Индюхова, Г. Б. Арисова, И. П. Белых, Д. С. Поселов, А. А. Степанов // Российский паразитологический журнал. - 2021. - Т. 15. - № 3 - С. 76-82. DOI 10.31016/1998-8435-2021-15-3-76-82
5. Абрашова Т. В. Справочник. Физиологические, биохимические и биометрические показатели нормы экспериментальных животных / Т. В. Абрашова, Я. А. Гущин, М. А. Ковалева и др. -СПб.: Изд-во «ЛЕМА», 2013. - 116 с.
6. Директива 2010/63/EU Европейского парламента и совета Европейского Союза от 22 сентября 2010 года по охране животных, используемых в научных целях.
7. European Convention for the Protection of Vertebrate Animais Used for Experimental and other Scientific Purposes (ETS 123). Strasbourg, 1986.
8. Бирюкова Н. П. Общие принципы доклинической оценки антигельминтных препаратов для ветеринарного применения / Н. П. Бирюкова, Т. В. Бахмутова, Е. В. Лысенко, В. В. Напалкова // Российский журнал Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. - 2018.
- № 4 (28). - С. 85-94. DOI 10.25725Zvet.san.hyg. есо1.201804013
9. Пазиненко К. А. Динамика биохимических и цитологических показателей крови крыс при моделировании хронической алиментарной ме-тионин-обусловленной гомоцистеинемии / К. А. Пазиненко, Н. Н. Чучкова, М. В. Сметанина и др. // Биомедицина. - 2021. - Т. 17. - № 2. - С. 46-57.
10. Саптарова Л. М. Накопление тяжелых металлов в печени крыс в процессе хронической интоксикации медно-цинковой колчеданной рудой / Л. М. Саптарова, Ф. Х. Камилов, О. А. Князева, Э. Н. Когина // Вестник Башкирского университета. - 2017. - Т. 22. - № 1. - С. 90-92.
11. Шидловский А. С. Варианты механизмов изменения активности трансаминаз: клиническая интерпретация / А. С. Шидловский, А. И. Салта-нов // Вестник интенсивной терапии. - 2015. - № 1. - С. 22-32.
12. Гончаров Н. В. Адаптивные биохимические изменения эритроцитов крысы после цикла принудительного плавания с применением экстракта зеленого чая и аммонийного преконди-ционирования / Н. В. Гончаров, И. В. Миндук-шев, А. В. Новожилов и др. // Российский физиологический журнал им. И. М. Сеченова. - 2018.
- Т. 104. - № 12. - С. 1428-1441. DOI 10.1134/ S086981391812004X
13. Сысуева А. В. Изменение морфометрических показателей эритроцитов крови при патологиях печени у собак и кошек / А. В. Сысуева // Ветеринарная медицина. - 2008. - № 4. - С. 21-23.
14. Дерхо М. А. Влияние металлотоксикоза и вибрационного стресса на состояние углеводного обмена в организме мышей / М. А. Дерхо, Т. И. Середа // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. - 2015. - № 6 (56). - С. 255-258.
References:
1. Sorokina A. V Opyit provedeniya kliniko-laboratornyih issledovaniy v doklinicheskoy otsenke bezopasnosti lekarstv (chast 1: gematologicheskie issledovaniya) [Experience in clinical and laboratory studies during preclinical drug safety assessment (Part 1: Hematological Studies)] / A. V Sorokina, S. V Alekseeva, N. V Eremina, A. D. Durnev // Vedomosti Nauchnogo tsentra ekspertizyi sredstv meditsinskogo primeneniya. - 2019. - T. 9. - # 3. - S. 197-206. DOI 10.30895/1991-2919-2019-9-3-197-206
2. Indyuhova E. N. Toksikologicheskaya otsenka kompleksnogo insektoakaritsidnogo preparata «Neoterika Protekto 12» [Toxicological evaluation of the complex insectoacaricidal drug "Neoterica Protecto 12"] / E. N. Indyuhova, M. V Arisov, G. B. Arisova, I. A. Stepanova // Rossiyskiy parazitologicheskiy zhurnal. - 2018. - T. 12. - # 3. -S. 60-66. DOI 10.31016/1998-8435-2018-12-3-60-66.
3. Arisov M. V. Modelirovanie retsepturyi kombinirovannogo preparata pri parazitozah ptits s optimizatsiey ih obmena veschestv i nespetsificheskoy rezistentnosti [Simulated formulation of a combined drug against parasitosis of birds with optimization of their metabolism and nonspecific resistance] / M. V. Arisov, A.
V Kozhina, E. N Indyuhova // XII nauchno-prakticheskaya konferentsiya pamyati professora
V A. Romashova «Sovremennyie problemyi obschey i prikladnoy parazitologii» 1-2 noyabrya 2018. Sbornik nauchnyih trudov. - Voronezh. -2018. - S. 92-97.
4. Indyuhova E. N. Izuchenie ostroy toksichnosti lekarstvennogo preparata dlya veterinarnogo primeneniya Iverbutan [Study of acute toxicity of the drug for veterinary use, Iverbutan] / E. N. Indyuhova, G. B. Arisova, I. P. Belyih, D. S. Poselov, A. A. Stepanov // Rossiyskiy parazitologicheskiy zhurnal. - 2021. - T. 15. - # 3 - S. 76-82. DOI 10.31016/1998-8435-2021-15-3-76-82
5. Abrashova T. V Spravochnik. Fiziologicheskie, biohimicheskie i biometricheskie pokazateli normyi eksperimentalnyih zhivotnyih [Handbook. Physiological, biochemical and biometric indicators of the norm of experimental animals] / T. V. Abrashova, Ya. A. Guschin, M. A. Kovaleva i dr. - SPb.: Izd-vo «LEMA», 2013. - 116 s.
6. Direktiva 2010/63/EU Evropeyskogo parlamenta i soveta Evropeyskogo Soyuza ot 22 sentyabrya 2010 goda po ohrane zhivotnyih, ispolzuemyih v nauchnyih tselyah [Directive 2010/63/EU of the European Parliament and the Council of the
European Union dated 22 September 2010 on the Protection of Animals Used for Scientific Purposes].
7. Vide supra.
8. Biryukova N. P. Obschie printsipyi doklinicheskoy
otsenki antigelmintnyih preparatov dlya veterinarnogo primeneniya [General principles of preclinical evaluation of anthelmintics for veterinary use] / N. P Biryukova, T. V Bahmutova, E. V Lyisenko, V V Napalkova // Rossiyskiy zhurnal Problemyi veterinarnoy sanitarii, gigienyi i ekologii. - 2018. - # 4 (28). - S. 85-94. DOI 10.25725/vet.san.hyg.ecol.201804013
9. Pazinenko K. A. Dinamika biohimicheskih i tsitologicheskih pokazateley krovi kryis pri modelirovanii hronicheskoy alimentarnoy metionin-obuslovlennoy gomotsisteinemii [Dynamics of biochemical and cytological parameters of rat blood in simulated chronic alimentary methionine-induced homocysteinemia] / K. A. Pazinenko, N. N. Chuchkova, M. V Smetanina i dr. // Biomeditsina. - 2021. - T. 17. - # 2. - S. 46-57.
10. Saptarova L. M. Nakoplenie tyazhelyih metallov v pecheni kryis v protsesse hronicheskoy intoksikatsii medno-tsinkovoy kolchedannoy rudoy [Accumulation of heavy metals in the liver of rats during chronic poisoning with copper-zinc pyrite ore] / L. M. Saptarova, F H. Kamilov, O. A. Knyazeva, E. N. Kogina // Vestnik Bashkirskogo universiteta. - 2017. - T. 22. - # 1. - S. 90-92.
11. Shidlovskiy A. S. Variantyi mehanizmov
izmeneniya aktivnosti transaminaz: klinicheskaya interpretatsiya [Alternative mechanisms of changed transaminase activity: clinical interpretation] / A. S. Shidlovskiy, A. I. Saltanov // Vestnik intensivnoy terapii. - 2015. - # 1. - S. 22-32.
12. Goncharov N. V Adaptivnyie biohimicheskie izmeneniya eritrotsitov kryisyi posle tsikla prinuditelnogo plavaniya s primeneniem ekstrakta zelenogo chaya i ammoniynogo prekonditsionirovaniya [Adaptive biochemical changes in rat erythrocytes after a forced swimming cycle with the use of green tea extract and ammonium preconditioning] / N. V. Goncharov, I. V Mindukshev, A. V Novozhilov i dr. // Rossiyskiy fiziologicheskiy zhurnal im. I. M. Sechenova. -2018. - T. 104. - # 12. - S. 1428-1441. DOI 10.1134/ S086981391812004X
13. Syisueva A. V. Izmenenie morfometricheskih pokazateley eritrotsitov krovi pri patologiyah pecheni u sobak i koshek [Changed morphometric parameters of erythrocytes in hepatopathies of dogs and cats] / A. V. Syisueva // Veterinarnaya meditsina. - 2008. - # 4. - S. 21-23.
14. Derho M. A. Vliyanie metallotoksikoza i vibratsionnogo stressa na sostoyanie uglevodnogo obmena v organizme myishey [Influence of metal toxicosis and vibration stress on the state of carbohydrate metabolism in mice] / M. A. Derho, T. I. Sereda // Izvestiya Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. - 2015. -# 6 (56). - S. 255-258.
DOI: 10.25690/VETPAT.2022.24.70.010 Induhova E. N.
SUBCHRONIC TOXICITY OF IVERMECTIN AND BUTAPHOSPHAN-BASED ORAL DRUG IN RATS
Key Words: subchronic experiment, threshold dose, blood, metabolism
Abstract: The subchronic toxicity of Iverbutan was studied on 40 white outbred male rats. The study drug was administered to rats as a solution intragastrically daily for 14 days. The following doses were tested on them: 1400 mg/kg (the first experimental group), 700 mg/kg (the second experimental group) and 350 mg/kg (the third experimental group). The doses were calculated by the Kerber method from the results of an acute experiment conducted earlier. Laboratory animals from the control group did not receive the drug. The program for studying the subchronic toxicity of an oral preparation based on ivermectin and butafosfan includes the following criteria for assessing the body of laboratory animals: physiological and ethological statuses, morphophysiological and physiological-biochemical blood parameters, dynamics of body weight gain, macroscopic assessment of organs and their mass coefficients. A significant change in the percentage of live weight gain in experimental rats from the first experimental group compared with the control was established. On the first day after administration of the drug, a statistically significant difference was found in the mass coefficient of the liver of rats that received a dose of 1400 mg/kg. In addition, in the blood of rats from the first experimental group, there was a tendency to reduce the concentration of hemoglobin by 3.7 %, the number of erythrocytes by 4.0 %, a-amylase activity by 16.9 %, the tendency to increase the concentration of total bilirubin by 6.8 %, creatinine concentrations by 3.6 %, urea by 9.2 %, glucose by 17.3 %, lactate dehydrogenase activity by 6.1 %, AST by 3.7 % and a significant increase in alkaline phosphatase activity by 1.6 times (P<0.05) compared to control. Ten days after administration of the drug, the above blood parameters and values mass coefficients of liver in rats from the first experimental group did not significantly differ from the parameters of the control group, which indicates the reversibility of the hepatotoxic effect. In this regard, a dose of 1400 mg/kg can be considered a cut-off dose, and doses of 700 and 350 mg/kg can be considered inactive (safe).
Сведения об авторе:
Индюхова Евгения Николаевна, канд. биол. наук, заместитель руководителя филиала по инновационной деятельности Всероссийского научно-исследовательского институ-
та фундаментальной и прикладной паразитологии животных и растений - филиала Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный научный центр - Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени К. И. Скрябина и Я. Р. Коваленко Российской академии наук» (ВНИИП -филиал ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН); д. 28, ул. Большая Черемушкинская, г. Москва, Российская Федерация, 117218; e-mail: indyuhova@vniigis.ru
Author affiliation:
Indyuhova Evgenia Nikolaevna, Ph. D. in Biology, Deputy Head of the Branch for Innovation Activities of the All-Russian Research Institute of Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants - Branch of the Federal State Budgetary Scientific Institution «Federal Scientific Center - All-Russian Research Institute of Experimental Veterinary Medicine named after K. I. Skryabin and Ya. R. Kovalenko of the Russian Academy of Sciences» (ARRIP -Branch of the FSBSI of FSC of ARRIEV RAS); house 28, Bolshaya Cheremushkinskaya str., Moscow city, Russian Federation, 117218; e-mail: indyuhova@vniigis.ru
DOI: 10.25690/VETPAT.2022.48.19.008 УДК: 637.074
Лхагважавын Цогтбаатар, Цогтгэрэлийн Менхтуул, Чулуунбатын Оюунцэцэг, Гэлэгсэнгийн Гэрэлцэцэг, Мантатова Н. В.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИЗУЧЕНИЯ КОНЪЮГИРОВАННОЙ ЛИНОЛЕВОЙ КИСЛОТЫ В МЯСЕ МОНГОЛЬСКИХ КОЗ И КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Ключевые слова: пастбищная коза, крупный рогатый скот, конъюгированная линолевая кислота, мышечная ткань, жировая ткань, полуперепончатая мышца бедра, трёхглавая мышца плеча, длиннейшая мышца спины.
Резюме: Конъюгированная линолевая кислота (КЛК) - это соединение различных изомеров ли-нолевой кислоты в первую очередь позиционных и геометрических изомеров, содержащихся в мясе жвачных. Всего идентифицировано более 30 изомеров, но два из них (цис-9, транс-11 и транс-10, цис-12) имеют большое значение для здоровья и составляют более 80 % от общего числа изомеров. КЛК образуются путем изомеризации или биогидрирования жирных кислот корма, микроорганизмами в рубце жвачных животных. Определена КЛК в мясе пастбищных монгольских коз и крупного рогатого скота по анатомическому расположению мышечной ткани в соответствии с возрастом животного, по газовой хроматографии. КЛК в среднем составляла 7,5 мг/г в мясе у двухлетних, 6,4 мг/г в мясе трёхлетних коз. Наиболее высокое содержание КЛК наблюдается в трёхглавой мышце плеча у двухлетней козы, что и составляет 8,8 мг/г, а наименьшее содержание КЛК отмечено в полуперепончатой мышце бедра (6,5 мг/г). В мышечной ткани у монгольского крупного рогатого скота КЛК составляла 5.36-5.86 мг/г, а в жировой ткани 6.07.3 мг/г. Отмечается более высокое содержание КЛК в длиннейшей мышце спины и в полуперепончатой мышце бедра (6,17 мг/г, 6,11 мг/г) у двухлетнего КРС.
Introduction
The world's most developed countries used to compete for increasing the number of marketable animals, per capita productivity
and meat and milk yields, thus the world market was dominated by products from intensive farming. However, quality, composition, health impact and hygienic
