0Оригинальная статья УДК 616-092.9
https://doi.org/10.57034/2618723X-2024-03-05
Структурные особенности суставного хряща самок-крыс Вистар с хронической сердечной недостаточностью и ожирением
К.В. Корочина*, В.С. Полякова, Т.В. Чернышева, И.Э. Корочина
ФГБОУ ВО «Оренбургский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Оренбург, Россия *E-mail: [email protected]
Резюме. Цель исследования — изучить структурно-функциональные особенности суставного хряща самок-крыс Вистар после воспроизведения экспериментального остеоартрита (ОА) по авторской методике. Эксперимент выполнен на 10 самках-крыс Вистар в возрасте 8 мес, составляющих контрольную (л=5) и опытную (л=5) группы. Опытным животным проводили курс инъекций 1% раствора мезатона в дозе 0,1 мл на протяжении 2 нед с последующим плаванием, затем животных помещали на 2 мес в тесные клетки с обеспечением высококалорийного питания. После выведения из эксперимента выполняли морфологическое исследование суставного хряща коленных суставов крыс с использованием гистохимических и морфометрических методов. У животных с сосудисто-метаболическими нарушениями наблюдалась структурно-функциональная перестройка хряща в виде утраты зональности, гипертрофии и кластеризации хондроцитов, их апоптоза с формированием пустых лакун, уменьшения метахромазии экстрацеллюлярного матрикса, поражения базофильной линии, раз-волокнения и повреждения поверхности хряща с уменьшением его средней толщины. При сравнении с результатами моделирования ОА в прошлых сериях эксперимента было выявлено, что самцы более восприимчивы к заболеванию по сравнению с самками. Таким образом, при воспроизведении хронической сердечной недостаточности и ожирения у самок-крыс Вистар в хрящевой ткани коленных суставов развиваются дегенеративно-дистрофические изменения, соответствующие раннему ОА. Определены структурно-функциональные особенности суставного хряща в зависимости от пола животных.
Ключевые слова: хрящ, морфология, эксперимент, модель, остеоартрит Благодарности. Работа выполнена без спонсорской поддержки.
Для цитирования: Корочина К.В., Полякова В.С., Чернышева Т.В., Корочина И.Э. Структурные особенности суставного хряща самок-крыс Вистар с хронической сердечной недостаточностью и ожирением. Лабораторные животные для научных исследований. 2024; 3. 59-65. https://doi.org/10.57034/ 2618723X-2024-03-05.
Original article
Structural features of articular cartilage in female Wistar rats with chronic heart failure and obesity
K.V. Korochina*, V.S. Polyakova, T.V. Chernysheva, I.E. Korochina
Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education "Orenburg State Medical University" of the Ministry of Health of the Russian Federation, Orenburg city, Russia *E-mail: [email protected]
Abstract. Purpose was to study structural and functional characteristics of articular cartilage in female Wistar rats after reproducing experimental osteoarthritis (OA) using the author's method. The experiment was performed on 10 female Wistar rats 8 months old, and covered control and experimental groups (л=5). Experimental animals were given a course of injections of 1% 0.1 ml mesatone solution for 2 weeks, followed by swimming, then the animals were placed in cramped cages for 2 months with high-calorie nutrition. When
© Корочина К.В., Полякова В.С., Чернышева Т.В., Корочина И.Э., 2024
experiment was finished, histopathological study of knee articular cartilage in rats was performed using histochemical and morphometry methods. In animals with vascular-and-metabolic disorders, structural and functional reorganization of cartilage was observed. There were zonal composition loss, chondrocytes hypertrophy and clustering, cell's apoptosis with empty lacunae forming, a decrease in metachromasia of extracellular matrix, damage to tidemark, defibration and damage to cartilage surface with decrease in its average thickness. When compared with the results of OA modeling in previous series of experiments, it was revealed that male rats were more susceptible to the disease compared to females. Thus, when chronic heart failure and obesity are reproduced in female Wistar rats, degenerative-and-dystrophic changes corresponding to early OA develop in cartilage tissue of knee joints. The structural and functional characteristics of articular cartilage were determined depending on the sex of animals.
Keywords: cartilage, morphology, experiment, model, osteoarthritis
Acknowledgements. The study was performed without external funding.
For citation: Korochina K.V., Polyakova V.S., Chernysheva T.V., Korochina I.E. Structural features of articular cartilage in female Wistar rats with chronic heart failure and obesity. Laboratory Animals for Science. 2024; 3. 59-65. https://doi.org/10.57034/2618723X-2024-03-05.
Введение
Остеоартрит (ОА) — это самая распространенная патология суставов в России и других странах, которая имеет огромное медико-социальное и экономическое значение для населения и государства в целом. По статистике, во всем мире уровень распространенности ОА увеличился на 9,3% в период с 1990 по 2017 г. и, по прогнозам, по мере старения населения будет продолжать расти [1]. В России данные, касающиеся истинной распространенности ревматических заболеваний,полученные в ходе эпидемиологического исследования, по ОА превысили результаты официальной статистики в 5 раз [2].
Исследования ОА у человека столкнулись с рядом особенностей данного заболевания, в частности, трудностью диагностики ранних стадий, ограничениями неинвазивных методов, что определило потребность в проведении экспериментальных исследований на животных [3]. Первые модели ОА были разработаны для изучения структурных аспектов этого заболевания, затем в эксперименте оценивали влияние различных факторов риска, симптомов на разных животных в зависимости от целей исследования [4]. При этом особенностям полового диморфизма при моделировании ОА не уделялось должного внимания.
Несмотря на то, что у женщин регистрируется более выраженная боль по сравнению с мужчинами, а распространенность ОА у них выше, в экспериментах на животных для изучения патогенеза и эффективности лечения чаще всего используют именно самцов [3]. Считается, что половые гормоны играют важнейшую роль в развитии ОА, и зарубежные исследования выявили серьезные гендерные расхождения между ОА у человека и животных. Так, в работе Н^. Ма и соавт. [5] показано, что в хирургической модели ОА путем дестабилизации медиального мениска выраженность заболевания была больше у самцов-мышей по сравнению с самками. Было показано, что овари-
эктомия, хирургическое удаление яичников, увеличивает восприимчивость к ОА. Напротив, у самцов, подвергшихся орхиэктомии, симптомы, подтверждающие ОА, менее тяжелые, чем у неоперированных животных. Сходные результаты продемонстрировала другая работа [6], где повреждение суставов развивалось у животных обоего пола, но у самок оно прогрессировало медленнее. По данным ряда источников зарубежной литературы [7, 8], самцы мышей и крыс оказались более восприимчивы к ОА-подобной дегенерации суставов с использованием разных способов моделирования заболевания. В отечественной литературе [9] гендерный аспект воспроизведения ОА в эксперименте практически не освещен, а исследования, которые включали животных обоего пола, не представили сравнительную характеристику ОА у самок и самцов.
Очевидно, что хирургические ятрогенные методы приведут к значительным структурным дегенеративно-воспалительным изменениям суставов независимо от пола животных. Однако не до конца понятен половой диморфизм экспериментального ОА нетравматического генеза. Прежде мы разработали технологию моделирования ОА у самцов-крыс Вистар 8-месячного возраста, основанную на использовании сосудистого и метаболического факторов [10], однако остается неясным, насколько эффективен данный способ для воспроизведения заболевания у самок.
Цель исследования — изучить структурно-функциональные особенности суставного хряща (СХ) самок-крыс Вистар после воспроизведения сосудисто-метаболических нарушений в эксперименте.
Материал и методы
Исследование было одобрено локальным этическим комитетом ФГБОУ ВО «Оренбургский государственный медицинский университет» Минздрава России (выписка из протокола № 215 от 08.12.18). Эксперимент проводился
в лабораторных условиях на 10 крысах Ви-стар женского пола в возрасте 8 мес, составляющих контрольную (л=5) и опытную (л=5) группы. Животные были получены из питомника лабораторных животных «Рапполово» Национального исследовательского центра «Курчатовский институт» («Курчатовский институт»-ПИЯФ-ПЛЖ «Рапполово»), они содержались в стандартных условиях вивария с контролируемой температурой, влажностью и 12-часовым циклом день—ночь. Пищу и воду лабораторным животным предоставляли ad libitum, питание включало овощи 10 г, зерно 10 г, комбикорм 27 г в день. Контрольная группа в течение всего времени эксперимента находилась в условиях вивария без каких-либо дополнительных воздействий. В опытной группе крыс моделировали нетравматический ОА по разработанной раннее авторской методике [10]. Сначала животным проводили курс ежедневных подкожных инъекций 1% раствора мезатона в дозе 0,1 мл на протяжении 2 нед с последующим плаванием в течение 20 мин для развития хронической сердечной недостаточности, затем животных помещали на 2 мес в тесные клетки с обеспечением высококалорийного питания, формируя ожирение. Диета включала пшено, сдобу, жареный на растительном масле картофель, сырое свиное сало, шоколад, фундук, печенье, подсолнечную халву, так что калорийность составляла не менее 55% углеводов, не менее 30% жиров и не менее 9% белков от рациона питания. Контроль клинического состояния животных и регистрацию массы тела проводили ежедневно. Через 2 мес (так как этого времени было достаточно для формирования сосудисто-метаболических изменений по данным моделирования на самцах в прошлых сериях экспериментов) животных выводили из эксперимента и декапитировали после применения эфирного наркоза.
Для морфологического исследования у крыс были взяты внутренние органы (сердце, печень, почки, легкие) и коленные суставы, которые осматривали макроскопически, затем материал фиксировали в 10% нейтральном формалине и подвергли гистологической проводке. На ротационном микротоме МПС-2 готовили парафиновые срезы толщиной 5-6 мкм, окрашивали гематоксилином и эозином, 0,5% толуидиновым синим (pH 7,3) и проводили контроль (обработка гиалуронидазой). В ходе микроскопического исследования изучали состояние гиалинового хряща на большебер-цовой и бедренной кости коленного сустава. В рамках морфометрического метода с помощью окуляр-микрометра МОВ-1-1.5*у 4,2 определяли толщину СХ наиболее нагружаемой зоны, а именно медиального отдела плата большеберцовой кости, а также толщину его отдельных зон, среднее количество хондро-цитов в изогенной группе.
Статистическую обработку полученных данных проводили с применением непараметрических методов программы Statistica 10.0. Количественные данные представляли в виде медианы, верхнего и нижнего квартилей Ме (025-075). Для проверки достоверности различий между исследуемыми группами использовали ^-критерий Манна—Уитни. Уровень значимости р=0,05.
Результаты
Клиническая оценка состояния крыс выявила признаки застоя после курса моделирования хронической сердечной недостаточности (одышка после незначительной физической активности, отечность лап, ци-анотичность ушек). После моделирования ожирения средняя масса опытных животных составила 420 (400-490) г, средний прирост около 28 (20-35)%. Средняя масса животных контрольной группы была 250 (205-293) г.
Результаты исследования внутренних органов выявили развитие в опытной группе ряда структурных изменений по сравнению с контролем (рис. 1). В сердце отмечены расширение сосудов венулярного отдела микро-циркуляторного русла, признаки вакуолярной дистрофии в кардиомиоцитах, кариолизиса, кариорексиса, плазмокоагуляции, свидетельствующие об очаговой гибели клеток. В печени синусоиды расширены, балочное строение нарушено, гепатоциты с выраженными признаками жировой дистрофии, видны зоны некроза и активизации в ней клеток Купфера.
Макроскопическое исследование коленных суставов животных обеих групп не выявило видимых изменений.
Микроскопическое исследование суставов крыс контрольной группы установило, что гиалиновый хрящ, покрывающий больше-берцовую и бедренную кость, имел ровную целостную поверхность, четкое зональное строение (рис. 2, а). Уплощенные хондроциты поверхностной зоны размещались в 1-2 ряда, в промежуточной зоне они формировали изо-генные группы по 2-3 клетки, которые располагались «столбиками» для равномерного распределения нагрузки на сустав, в глубокой зоне чаще встречались гипертрофированные хондроциты. Единичные клетки были некроти-зированы, так что на их месте визуализировались пустые лакуны. Зона кальцифицирован-ного хряща отделялась базофильной линией, которая прерывалась единичными клетками или удваивалась на отдельных участках. Глубже этой зоны находилась субхондральная костная ткань. Матрикс хряща имел гомогенное строение, внутри изогенной группы был сла-бобазофильным, на остальных участках преобладала оксифилия.
При окрашивании толуидиновым синим вся зона некальцифицированного хряща имела
фиолетовую окраску, характеризуя явление метахромазии, глубже базофильной линии в кальцифицированном хряще метахромазия ослабевала, сохраняясь преимущественно в матриксе изогенных групп.
Микроскопическое исследование СХ крысы опытной группы выявило структурно-функциональные изменения по сравнению с контролем, локализованные преимущественно в медиальных отделах на большеберцовой поверхности (рис. 2, б). Сама поверхность хряща была неровной, волнообразной, с участками истирания и разволокнения. Зональное строение было нарушено. Поверхностные хондро-циты были единичными или отсутствовали. Остальные клетки пролиферировали, формируя хаотично расположенные скопления-кластеры по 4-6 хондроцитов, многие из них были в состоянии гипертрофии или некроза. Базофильная линия была нечеткой и прерывистой, на отдельных участках не визуализировалась. В кальцифицированном хряще преобладали гипертрофированные клетки с мелкими ядрами или пустые лакуны. Межклеточный матрикс сохранял гомогенность (за исключе-
нием поверхностной зоны), занимал большие пространства между изогенными группами и имел базофильный оттенок, в то время как внутри изогенной группы и в зоне каль-цифицированного хряща он был преимущественно оксифильным.
При окраске толуидиновым синим наблюдалось отсутствие окрашивания поверхностной и частично промежуточной зон хряща. При этом по сравнению с контролем метахромазия проникала в кальцифицированный хрящ, демонстрируя значительное фиолетовое окрашивание в матриксе изогенных групп данной зоны.
Результаты морфометрического метода исследования представлены в таблице 1.
Морфометрический анализ выявил, что средняя толщина СХ в опытной группе достоверно меньше, чем в контрольной, при этом наблюдается перераспределение его зон с уменьшением поверхностной, промежуточной зон и тенденцией к увеличению участка кальцифицированного хряща. Среднее количество хондроцитов в изогенной группе опытных крыс было достоверно больше по сравнению с контролем, что под-
Рис. 1. Микропрепараты внутренних органов крысы после моделирования хронической сердечной
недостаточности и ожирения: а — сердце; б — печень; окраска гематоксилином и эозином, х600
Рис. 2. Микропрепараты суставного хряща крыс исследуемых групп:
а — контрольная группа; б — опытная группа; окраска гематоксилином и эозином, х300
Таблица 1. Морфометрия суставного хряща крыс исследуемых групп [данные представлены в виде медианы, верхнего и нижнего квартилей, Ме (025-075)]
Показатель Контрольная группа Опытная группа Достоверность различий, р
Общая толщина хряща, мкм 385 (355-407) 289 (274-340) 0,034
Толщина поверхностной зоны хряща, мкм 39 (25-45) 19 (18-25) 0,048
Толщина промежуточной зоны хряща, мкм 263 (248-280) 166 (155-178) 0,002
Толщина кальцифицированного хряща, мкм 85 (80-108) 103 (94-115) 0,185
Среднее количество хондроцитов в изогенной группе 3 (2-3) 6 (4-7) 0,009
тверждает пролиферацию и кластеризацию клеток хряща.
Обсуждение
Проведенное исследование выявило, что СХ контрольной группы в целом соответствует паттерну здоровой ткани (за исключением, особенностей базофильной линии). В опытной группе наблюдается структурно-функциональная перестройка хряща под воздействием неблагоприятных факторов — моделирования хронической сердечной недостаточности и ожирения. Пораженный СХ теряет свою толщину, его поверхность становится неровной, прерывистой и соответственно менее устойчивой к нагрузкам. Поверхностные хондро-циты, ответственные за регенерацию и рост толщины хряща, разрушаются, что, вероятно, также вносит вклад в снижение его толщины. Остальные клетки начинают компенсаторно пролиферировать и гипертрофироваться, нарушая зональное строение и формируя крупные кластеры. Функциональная активность клеток и состав межклеточного вещества меняются, о чем свидетельствуют базофилия матрикса при окрашивании гематоксилином и эозином и изменение метахромазии при окрашивании толуидиновым синим. Последний метод направлен на выявление содержания гликоза-миногликанов. Исходя из полученных данных, можно заключить, что их продукция клетками и содержание в матриксе уменьшаются со стороны поверхности хряща. В то же время за счет повреждения базофильной линии и «переориентации» хондроцитов в зоне кальцинированного хряща интенсивность метахромазии возрастает. Выявлена в целом тенденция к увеличению толщины кальцифицированной зоны хряща, вероятно, ввиду компенсаторных процессов. Также обращает внимание увеличение количества пустых лакун и некротизированных клеток в опытной группе, что подтверждает неблагоприятное воздействие экспериментальных факторов.
Таким образом, воспроизведение хронической сердечной недостаточности и ожирения у самок-крыс Вистар вызывает структурную
перестройку хряща, соответствующую ранним ОА-изменениям. Это подтверждает состоятельность авторского подхода к воспроизведению суставной патологии у животных на основании использования сосудистого и метаболического факторов, имитирующих метаболический фенотип заболевания человека.
При сопоставлении результатов моделирования ОА на самках крыс по сравнению с самцами из предыдущих серий эксперимента можно выделить следующие особенности. Макроскопическая оценка состояния суставов у животных обоего пола не выявила изменений. При микроскопическом анализе патологические признаки в обоих случаях наблюдались в наиболее нагружаемой зоне сустава — медиальном мыщелке большеберцовой кости. Поверхностная (тангенциальная) зона СХ у самцов с экспериментальным ОА отсутствовала, определялось множество разветвленных фиссур, проникающих в промежуточную зону вплоть до кальцифицированного хряща. У самок тангенциальная зона отсутствовала частично либо была значительно тоньше по сравнению с контролем, определялись неразветвленные неглубокие фиссуры на одну треть промежуточной зоны, не достигающие кальцифицирующего хряща соответственно. СХ самцов был гипо-клеточным, с обилием пустых лакун, в то время как у самок хондроциты пролиферировали и формировали кластеры (вероятно, компенсаторно) с единичными пустыми лакунами. Каль-цифицированный хрящ животных обоего пола содержал гипертрофированные хондроциты и имел тенденцию к оссификации, базофиль-ная линия в обоих случаях была прерывистой, нечеткой, местами отсутствовала. Разволок-нение матрикса СХ было более определенным у самцов. При окрашивании толуидиновым синим у животных обоего пола интенсивность метахромазии уменьшалась со стороны поверхностной зоны и усиливалась/появлялась в зоне кальцифицированного хряща, причем у самцов наблюдались более выраженные изменения окраски, свидетельствуя о более явном нарушении содержания гликозаминогликанов в матриксе СХ. Таким образом, можно заключить, что структурные изменения в суставах при воз-
действии одинаковых факторов оказались более значительными у самцов.
При сопоставлении результатов сосудисто-метаболического моделирования ОА и других моделей, по данным обзорной работы [3], основные различия заключались в быстром развитии посттравматических дегенеративных изменений с вовлечением кости (остеофитоз), синовиального воспаления (синовит) при использовании хирургических и инъекционных способов. При этом также у самцов отмечались худшие результаты (то есть более выраженные показатели) по сравнению с самками. В работе [7] при окрашивании толуидиновым синим суставов мышей после перерезки медиальной коллатеральной связки и повреждения мениска (модель ОА) были получены более значимые дегенеративные изменения СХ у самцов и сопоставимый рост остеофитов у животных обоего пола. В исследовании [9] ОА воспроизводили с помощью стерильной иглы, которой травмировали СХ, затем создавали статодина-мическую нагрузку на суставы, заставляя крыс ходить в колесе. Авторы отметили появление явных гистологических признаков ОА с разрушением СХ, утратой его фрагментов, участками потери клеток и окрашивания и нарушением целостности пограничной (базофильной) линии. Полученные изменения являются более выраженными по сравнению с выявленными при нетравматической сосудисто-метаболической нагрузке. К сожалению, авторы работы [9] не указали структурные особенности хряща в сравнительном аспекте у самок и самцов.
Таким образом, были выявлены половые особенности формирования раннего нетравматического ОА в эксперименте. Полученные результаты согласуются с другими источниками литературы, в которых указывалось, что у половозрелых грызунов, в том числе крыс, выраженность ОА-подобных изменений выше у самцов, это предопределяет их приоритетное использование для моделирования ОА.
Заключение
При воспроизведении хронической сердечной недостаточности и ожирения у самок-крыс Ви-стар в хрящевой ткани коленных суставов развиваются дегенеративно-дистрофические изменения, соответствующие ранней стадии ОА, что подтверждает состоятельность авторского подхода к экспериментальному моделированию данного заболевания. Определены структурно-функциональные особенности суставного хряща крыс с ОА в зависимости от пола животных, определяющие приоритетное использование самцов для моделирования данного заболевания.
СПИСОК ИСТОЧНИКОВ
1. Safiri S., Kolahi A-A., Smith E. et al. Global, regional and national burden of osteoarthritis 1990e2017: a systematic analysis of the global burden of disease study 2017 // Ann. Rheum. Dis. 2020. Vol. 79. P. 819-828. DOI: 10.1136/annrheumdis-2019-216515.
2. Галушко Е.А., Насонов Е.А. Распространенность ревматических заболеваний в России // Альманах клинической медицины. 2018. Т. 46. № 1. С. 32-39. [Ga-lushko E.A., Nasonov E.L. Rasprostranennost' revma-ticheskix zabolevanij v Rossii // Al'manax klinicheskoj mediciny. 2018. Vol. 46. N. 1. P. 32-39. (In Russ.)]. DOI: 10.18786/2072-0505-2018-46-1-32-39.
3. Alves-Simoes M. Rodent models of knee osteoarthritis for pain research // Osteoarthritis Cartilage. 2022. Vol. 30. N. 6. P. 802-814. DOI: 10.1016/j.joca. 2022.01.010.
4. van der Kraan P.M. Factors that influence outcome in experimental osteoarthritis // Osteoarthritis Cartilage. 2017. Vol. 25. N. 3. P. 369-375. DOI: 10.1016/j.joca. 2016.09.005.
5. Ma H.L., Blanchet T.J., Peluso D. et al. Osteoarthritis severity is sex dependent in a surgical mouse model // Osteoarthritis Cartilage. 2007. Vol. 15. N. 6. P. 695-700. DOI: 10.1016/j.joca.2006.11.005.
6. Hwang H.S., Park I.Y., Hong J.I. et al. Comparison of joint degeneration and pain in male and female mice in DMM model of osteoarthritis // Osteoarthritis Cartilage. 2021. Vol. 29. N. 5. P. 728-738. DOI: 10.1016/j.joca. 2021.02.007.
7. Temp J., Labuz D., Negrete R. et al. Pain and knee damage in male and female mice in the medial meniscal tran-section-induced osteoarthritis // Osteoarthritis Cartilage. 2020. Vol. 28. N. 4. P. 475-485. DOI: 10.1016/j.joca. 2019.11.003.
8. van Osch G.J. Induction of osteoarthritis by intraarticular injection of collagenase in mice. Strain and sex related differences // Osteoarthritis Cartilage. 1993. Vol. 1. N. 3. P. 171-177. DOI: 10.1016/s1063-4584(05) 80088-3.
9. Третьяков А.А., Зиновкин Д.А., Карпенко Ф.Н. и др. Патоморфологическая оценка эффективности внутрисуставного применения растворимых факторов тромбоцитов для лечения экспериментального остео-артрита // Гений ортопедии. 2024. Т. 30. № 1. С. 90-98. [Tretyakov A.A., Zinovkin D.A., Karpenko F.N. et al. Pato-morfologicheskaya ocenka ehffektivnosti vnutrisustav-nogo primeneniya rastvorimykh faktorov trombocitov dlya lecheniya ehksperimental'nogo osteoartrita // Genij ortopedii. 2024. Vol. 30. N. 1. P. 90-98. (In Russ.)]. DOI: 10.18019/1028-4427-2024-30-1-90-98.
10. Корочина К.В., Чернышева Т. В., Полякова В.С. и др. Морфологические аспекты экспериментального остеоартроза сосудисто-метаболического генеза // Морфология. 2017. T. 152. № 6. C. 72-77. [Korochina K.V., Chernysheva T.V., Polyakova V.S. et al. Morfo-logicheskie aspekty ehksperimental'nogo osteoartroza sosudisto-metabolicheskogo geneza // Morfologiya. 2017. Vol. 152. N. 6. P. 72-77. (In Russ.)].
Информация об авторах
К.В. Корочина, кандидат медицинских наук, доцент кафедры внутренних болезней, [email protected],
https://orcid.org/0000-0003-2110-1428 В.С. Полякова, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой патологической анатомии
Т.В. Чернышева, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой внутренних болезней, https://orcid.org/0000-0001-9645-5816
И.Э. Корочина, кандидат медицинских наук, доцент кафедры поликлинической терапии, https://orcid.org/0000-0001-9956-4508 ФГБОУ ВО «Оренбургский государственный медицинский университет» Минздрава России, 460014, Россия, город Оренбург, улица Советская, д. 6.
Information about the authors
K.V. Korochina, PhD, Associate Professor of the Department of Internal Medicine, [email protected],
https://orcid.org/0000-0003-2110-1428
V.S. Polyakova, MD, Professor,
Head of the Department of Pathological Anatomy
T.V. Chernysheva, MD, Professor, Head
of the Department of Internal Medicine,
https://orcid.org/0000-0001-9645-5816
I.E. Korochina, PhD, Associate Professor
of the Department of Outpatient Therapy,
https://orcid.org/0000-0001-9956-4508
Federal State Budgetary Educational Institution
of Higher Education "Orenburg State Medical
University" of the Ministry of Health of the Russian
Federation,
460014, Russia, Orenburg city, Sovetskaya street, building 6.
Вклад авторов в написание статьи
К.В. Корочина — сбор, анализ результатов
работы, надлежащее изучение и решение
вопросов, связанных с достоверностью данных
или целостностью всех частей статьи.
В.С. Полякова — интерпретация результатов
работы, утверждение окончательного варианта
статьи для публикации.
Т.В. Чернышева — существенный вклад
в концепцию или дизайн работы, критический
пересмотр содержания статьи.
И.Э. Корочина — анализ результатов работы, написание текста статьи.
Сведения о конфликте интересов Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Дата поступления рукописи
в редакцию: 02.07.2024
Дата рецензии статьи: 01.08.2024
Дата принятия статьи к публикации: 21.08.2024
Authors contribution
K.V. Korochina — collecting, analyzing the results of work, properly studying and resolving issues related to reliability of data or integrity of all parts of article.
V.S. Polyakova — interpretation of results of work, approval of final article version for publication. T.V. Chernysheva — significant contribution to concept or design of work, critical revision of article content.
I.E. Korochina — analysis of results of work, writing the text of article.
Conflict of interest
The authors declare no conflict of interest requiring disclosure in this article.
Received: 02.07.2024 Reviewed: 01.08.2024 Accepted for publication: 21.08.2024
