CC BY
27
Реферат
ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ МЕЛАКСЕНА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПАРОДОНТИТЕ
Лабунец А.И., Тюпка Т.И., Кононенко Н.Н.
Ключевые слова: мелатонин, пародонтит, перекисное окисление липидов
Целью исследования явилось изучение влияния мелаксена (синтетического аналога мелатонина) на состояние процессов перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы при экспериментальном пародонтите. Эксперименты проведены на 30 белых крысах. Состояние процессов пероксидации липидов оценивали по активности церулоплазмина и антиоксидантно-прооксидантному индексу сыворотки крови.
Установлено, что лечебное применение мелаксена при пародонтите приводит к снижению активности перекисного окисления липидов и активации механизмов антиоксидантной защиты, о чем свидетельствует нормализация антиоксидантно-прооксидантного индекса.
Summary
PATHOGENETIC SUBSTANTIATION FOR APPLICATION OF MELAXEN IN EXPERIMENTAL PARODONTITIS Labunets A.I., Tiupka T.I., Kononenko N.N. Keywords: melatonin, parodontitis, lipid peroxidation
This research was aimed to study the effect of Melaxen (synthetic analog of melatonin) on the processes of lipid peroxidation and antioxidant systems under experimental parodontitis. Experiments were carried out on 30 white rats. The condition of lipid peroxidation processes was estimated by ceruloplasmin activity and blood serum antioxidant-pro-oxidant index. It was established the administration of Melaxen in parodontitis led to decrease of lipid peroxidation activity and to activation of antioxidant protection mechanisms, that was proved by the normalization of antioxidant-pro-oxidant index.
УДК 616.831-005.1-092.9-08
МакаренкоА.Н., Федулова Л.В., Чернуха И.М., Лисицын А.Б.
СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ВОССТАНОВИТЕЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ В ЦНС У КРЫС С ИНТРАЦЕРЕБРАЛЬНОЙ ПОСТТРАВМАТИЧЕСКОЙ ГЕМАТОМОЙ (ГЕМОРРАГИЧЕСКИМ ИНСУЛЬТОМ) НА ФОНЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ТЕРАПИИ
Киевский национальный университет им. Тараса Шевченко; ГНУ ВНИИМП им. В.М. Горбатова Россельхозакадемии
На первом этапе экспериментов установлено, что у крыс с интрацеребральной посттравматической гематомой (геморрагическм инсультом, ГИ) через 7 месяцев после операции наблюдаются нарушения обучения и памяти, ориентировочно-исследовательского поведения и двигательной активности, повышенный уровень тревоги. Морфологичиские исследования показали, что у этих крыс определяется выраженная активация восстановительных процессов в пятом и, особенно, третьем слое сенсомоторного неокортекса. Определяется увеличение нейроглиального индекса пирамидных нейронов и гигантских пирамидных нейронов правого полушария (область моделирования ГИ) по сравнению с левым (без ГИ) и мозгом контрольных ложнооперированных животных. На втором этапе установлен положительный эффект применения в остром периоде развития патологии нейропро-текторного средства «Церебрал», лекарственного препарата «Нооглютил» и мяса свиней, перенесших геморрагический инсульт. Отмечено амбивалентное влияние на нервные клетки ипси- и контрала-терального полушария животных, которым в остром периоде вводили «Церебрала» и мясной продукт, в то время как у крыс, которым вводили «Нооглютил», этот эффект представлен преимущественно в отношении инсультного полушария. При терапии Церебралом отмечено фармако-протекторное влияние и повышение устойчивости пирамидных нейронов сенсомоторной коры в сравнении с результатами, полученными у инсультной группы животных.
Ключевые слова: геморрагический инсульт, поведение, память, морфология, «Церебрал», «Нооглютил», мясо экспериментальных свиней-реконвалесцентов.
Известно, что комплексное лечение последст- особенностях развития отдаленных последствий ин-вий инсульта, как правило, не приводит к полному сульта, таких как интеллектуально-мнестические на-выздоровлению пациента. В частности, у 60%-70% рушения, непсихотические расстройства и когнитив-больных в отдаленном периоде после инсульта отме- ное снижение [16]. В современной эксперименталь-чается развитие осложнений, приводящих к стойкой ной фармакологии моделируют, главным образом, постинсультной инвалидизации, повышается риск острый инсульт [2,9,15], а развивающихся в цНс на-возникновения повторного инсульта [10,11,14]. Одной рушения в отдаленном периоде после инсульта изу-из причин недостаточной эффективности лекарст- чены недостаточно.
венной терапии постинсульных состояний может быть Целью настоящего исследования в первой се-
отсутствие четких представлений о патогенетических рии эксперимента явилось изучение морфофункцио-
нальных особенностей (поведения и памяти, структурно-функциональных и нейроглиальных взаимоотношений) в соматосенсорной области неокортекса крыс через семь месяцев после моделирования ин-трацеребральной посттравматической гематомы (геморрагического инсульта (ГИ)). Во второй серии - исследование последствий введения животным в остром периоде развития геморрагического инсульта препаратов «Церебрал» и «Нооглютил», а также мяса свиней-реконвалесцентов на морфофункциональные особенности в соматосенсорной области неокортекса крыс через семь месяцев после моделирования ин-трацеребральной посттравматической гематомы.
Методика исследования
Исследования выполнены на белых крысах самцах, линии Вистар, массой 180-210 г в начале эксперимента и 350 - 420 г при его завершении.
В эксперименте острый аутогеморрагический инсульт моделировали в области внутренней капсулы правого полушария [2,8]. Крысам, наркотизированным хлоралгидратом (200 мг/ кг, в/б) при помощи специального устройства (мандрен-нож) и стереотаксиса осуществляли деструкцию мозговой ткани в области capsule interna, (координаты Н=4 мм, L=3.0 мм, А=1,5 мм от брегмы по атласу G. Paxinos) с последующим (через 2-3 минуты) введением, в место повреждения, крови, взятой из-под языка (0,02- 0,03 мл). Ложно оперированным животным проводили скальпирование и трепанацию черепа.
На первом этапе животные были разелены на III группы: I- интактные животные, потреблявшие обще-виварный рацион, II- ложнооперированные, III- крысы с ГИ. Через 7 месяцев у выживших животных (8 ин-тактных крыс, 8 ложнооперированных и 12 крыс с ГИ) регистрировали поведение и состояние животных по стандартным методикам, традиционно используемым в нейропсихофармакологии [2,3].
На втором этапе животные были разделены на VI групп (n=52): I - ЛОЖ(п=8); II—животные с ГИ, леченые «Нооглютилом», который вводили по 10 мг/кг, спустя 3 часа после операции, и с 1-х по 3-и сутки (n=11), III - животные с ГИ, леченые «Церебралом» по 0,1 мг/кг со 2-х по 7 сутки, а также «Верапамилом» (по 10мг/кг внутрижелудочно) с 7-х по 14-е сутки (n=10); IV - группа животных с ГИ, которым в рацион ввели мясо свиней-реконвалесцентов по 5 гр на животное со 2-х по 7-е сутки (n=10); V - крысы с ГИ, потреблявшие общевиварный рацион^=7), VI - интактные крысы (n=8).
Через 7 месяцев у выживших животных (8 ин-тактных крыс, 3 ложнооперированных и 25 крыс с ГИ) регистрировали поведение и состояние животных по стандартным методикам, традиционно используемым в нейропсихофармакологии [2,3]. Неврологический статус у крыс определяли с использованиеми метода Me Grow в модификации И. В. Ганнушкиной [4], ориентировочно-исследовательское поведение и двигательную активность - в открытом поле, уровень тревожности в условиях методики приподнятого крестообразного лабиринта ПКЛ), обучение и память изучали, используя методику условного рефлекса пассивного избегания УРПИ) (Lafayette Instrument Co.,США), после обучения тест проводили на 1-е, 7-е и 14-е сутки. [14].
В первой серии экспериментов через 72 часа, во второй серии через 14 суток после завершения изучения поведения и памяти крыс декапитировали, извлекали головной мозг и проводили морфологическое
исследование неокортекса. Материал фиксировался в 10% растворе нейтрального формалина и заливался в парафин. Фронтальные гистологические срезы головного мозга толщиной 7 мкм окрашивали гематоксилином и эозином, тионином (по Нисслю), азур П-эозином, синим Эванса - пикриновой кислотой и кислым фуксином (по Новели) [6,11]. Морфометрию клеток соматосенсорного неокортекса проводили, измеряя площади и периметры пирамидных (III слой) и гигантских пирамидных (V слой) нейронов. Оценивали количество глиоцитов, прилежащих к этим клеткам (нейроглиальный индекс). В исследовании были использованы микроскоп Olympus BX51 с цифровой камерой Olympus C4040ZOOM и компьютер с программным обеспечением Olympus BP-Soft3,2. Статистическую обработку результатов морфометрических исследований проводили с использованием стандартных статистических методов [1,9].
Результаты исследований
В первой серии экспериментов изучение поведения животных через 7 месяцев после ГИ показало, что у крыс с ГИ, потреблявших общевиварный рацион, наблюдались незначительные нарушения неврологического статуса в сравнении с контрольной группой ложнооперированных животных. Так, если у лож-нооперированных крыс слабые неврологические нарушения наблюдались в 30% случаев, то в группе с ГИ этот показатель составлял 50%. При этом ни в одной из групп не отмечались грубые нарушения неврологического статуса. При регистрации ориентировочно-исследовательского поведения в открытом поле показано, что у крыс с ГИ через 7 месяцев после операции сумма всех показателей поведения (горизонтальные перемещения, вертикальная активность, обследование отверстий) была в 1,3 раза меньше, чем в контрольной группе ложнооперированных крыс и составляла 16,48±1,08, в контроле -19,80 ±2,21. Вместе с тем, у животных с ГИ отмечалось изменение стратегии поведения в приподнятом крестообразном лабиринте.
Как видно на таблице 1, в отличие от крыс контрольной группы, проводивших около 30 секунд в открытых не защищенных рукавах лабиринта, опытные животные с ГИ вовсе не заходили туда, а осуществляли только один заход в темную камеру и проводили в ней почти все время эксперимента. Подобное поведение свидетельствует о повышенном уровне тревожности у этих крыс. Обучение условной реакции пассивного избегания показало, что при воспроизведении рефлекса почти все ложнооперированные животные (83,3%) помнили об ударе током в темной камере и не заходили туда или заходили с большим латентным временем рефлекса. В то время как в опытной группе о ситуации помнило только 16,6% крыс. Остальные животные с коротким латентным временем рефлекса заходили в темную «опасную» камеру. Эти данные свидетельствует о выраженных нарушениях у крыс с ГИ процессов обучения и воспроизведения памятного следа на модели условного рефлекса пассивного избегания через 7 месяцев после операции.
Морфологическое исследование пирамидных нейронов III и V слоев соматосенсорного неокортекса проводилось через 7 месяцев после ГИ и через 2 дня после регистрации поведения. Данные о характере морфологических изменений пирамидных нейронов III и V слоев соматосенсорного неокортекса опытных
и контрольных животных представлены в таблице 2.
Таблица 1
Поведение крыс в приподнятом крестообразном лабиринте через 6 месяцев после геморрагического инсульта. 1 этап исследования
Показатели поведения Контроль (ложнооперированные крысы) Опыт (крысы после ГИ)
Латентное время первого захода в рукав (сек.) 5,4±1,0 9,83±2,53*
Время, проведения в закрытых рукавах (сек.) 28,2±11,5 0
Время, проведения в открытых рукавах (сек.) 185,3±30,3 290,2±2,53
Количество заходов в открытые рукава 1,3±0,3 0
Количество заходов в закрытые рукава 1,8±0,4 1*
*-достоверность отличий от контроля при Р<0,05 (критерий Маина-Уитни)
Таблица 2
Поведение крыс в приподнятом крестообразном лабиринте через 6 месяцев после геморрагического инсульта.
2-й этап исследования
Показатели поведения Ложно оперированны, n=3 ГИ,n=6 ГИ+Нооглютил, n=5 ГИ+Церебрал, n=7 ГИ+ Мясо, n=7
Через 6 месяцев после ГИ
Время нахождения на центр. площадке 10±5,13 6,6±5,88 16,0±11,66 5,43±2,92 2,43±1,6
Время нахождения в открытых рукавах (с) 21,65±21,67 11,0±8,72 39,0±19,9 51,43±35,3 15,71 ±11,52
Число заходов в открытые рукава 1,0±1,0 0,8±0,49 1,4±0,75 3,29±2,12 1,43±1,03
Число заходов в закрытые рукава 4,0±3,0 3,0±2,0 2,2±0,8 3,71±1,46 2,71 ±1,19
Суммарный показатель заходов 5,0±4,0 3,8±2,33 3,6±1,47 7,0±3,45 2,71 ±1,19
Показано, что в правом полушарии по сравнению с левым животных с ГИ и правым полушарием ложнооперированных крыс наблюдается увеличение площади и периметра тел и ядер пирамидных нейронов III слоя соматосенсорного неокортекса. (табл.3). В отличие от пирамидальных нейронов III слоя, в V слое неокортекса отмечается статистически достоверное увеличение только площади и периметра ядер клеток правого полушария. Полученные результаты свидетельствуют о более выраженной активации восстановительных процессов, протекающих в пирамидных нейронах III слоя в сравнении с V в отдаленном периоде экспериментального ишрацереб-
рального аутогеморрагического инсульта и согласуются с данными литературы о различном влиянии экспериментального инсульта на клетки III и V слоев сенсомоторного неокортекса [5].
Известно, что при остром инсульте, резко возрастает нейроглиальный индекс, что отражает инициацию патогенетических процессов, оказывающих повреждающее действие на нейроны в условиях острой ишемии [5,11,12]. В настоящем исследовании показано увеличение нейроглиального индекса пирамидных и гигантских пирамидных нейронов правого полушария (область моделирования ГИ) по сравнению с левым (без ГИ) и мозгом контрольных ложнооперированных животных (табл.3).
Таблица 3
Морфометрические показатели пирамидных и гигантских пирамидных нейронов соматосенсорного неокортекса.
1 серия экспериментов
Подгруппа Морфометрические параметры, мкм2 Нейроглиал ьный индекс
Площадь нейрона Периметр нейрона Площадь ядра Перимет рядра
Пирамидные нейроны
Правое полушарие (области ГИ) 192,29±3,45* 85,22±1,14* 88,96±3,65* 42,33 ±1,22* 1,03 ±0,08*
Левое полушарие (без ГИ) 171,37 ±4,87 79,55± 1,77 74,52± 2,05 38,83 ± 0,62 0,58 ± 0,08
Правое полушарие (контрольные крысы без ГИ) 188,12 ±3,01 88,13 ±1,09 92,17 ±2,34 40,91±0,83 0,56 ± 0,09
Гигантские пирамидные нейроны
Правое полушарие (области Г И) 220,03± 4,27 86,61± 1,13 97,3 1± 1,68* 43,77±0,4 0* 1,06 ±0,07*
Левое полушарие (без ГИ) 210,71±6,32 84,5 1± 1,89 87Д9±2,84 41,43±0,82 0,47 ± 0,08
Правое полушарие (контрольные крысы без ГИ) 228,14±3,84 83,86±1,09 94,76± 1,88 43,62±0,6 6 0,57 ± 0,07
*- р<0,05 по сравнению с контрольным полушарием.
Увеличение объема ядер клеток, наблюдаемое в настоящем исследовании, обусловлено не прогрес-сированием нейродегенеративных процессов в пира-
мидных нейронах правого полушариях, а, учитывая морфофункциональное состояние этих клеток и их ядер, визуально оцениваемое по форме и ядерно-
цитоплазматическим отношениям, тинкториальным свойствам (отсутствие гиперхроматоза), в первую очередь свидетельствует об активации восстановительных процессов в неокортексе крыс спустя 7 месяцев после моделирования острого геморрагического инсульта. Вместе с тем, сохранение повышенного нейроглиального индекса может свидетельствовать и о негативных тенденциях альтерации нейронов в отдаленном периоде постинсультного восстановления.
Во второй серии экспериментов было установлено, что препараты «Нооглютил» и «Церебрал» увеличивали время нахождения животных в открытых не защищенных рукавах лабиринта, животные, потреблявшие постинсультную свинину, проводили большую часть времени в темных рукавах лабиринта.
Обучение условной реакции пассивного избегания показало, что при воспроизведении рефлекса через 24 часа после воспроизведения 70% ложнооперированных животных помнили об ударе током в темной камере и не заходили туда или заходили с большим латентным временем рефлекса, на 7-е и 14-е сутки этот показатель снизился и составил 67% соответственно. В то время как в опытной группе, леченые «Церебралом» животных с ГИ через 24 часа о ситуации помнило 100% крыс, на 7-е и 14-е сутки количество животных не зашедших в камеру уменьшилось и составило 70% (рис.1). Эти данные свидетельствует о выраженных нарушениях у крыс с ГИ процессов обучения и воспроизведения памятного следа на модели условного рефлекса пассивного избегания через 7 месяцев после операции. Памятный след болевого раздражения через 24 часа после выработки отрицательного опыта на установке УРПИ полностью сохранялся почти у всех крыс, леченных «Церебра-
лом» в остром периоде развития патологии, но на 7-е и 14-е сутки этот показатель также снизился до 69,7%. При применении мяса свиней-реконвалесцентов в остром периоде, 80% животных отчетливо помнили об электрическом стимуле, нанесенном в темной камере, и не заходили в нее на 7-е и 14-е сутки. Количество животных, которым в остром периоде вводили «Нооглютил», не зашедших в камеру, через 24 часа после обучения составило 78%, дальнейшее наблюдение выявило дополнительное снижение числа животных, не зашедших в темную камеру, в сравнении с данными 1-х суток и составил 40% соответственно.
100 9001 И 801
* 70-
I I 60-
m m 50-
Ï ä 40-
o 3
¡S SJ 30-
S 1 20-
10 0
7-е сутки время, сутки
□ ЛОЖ □ ГИ □ Нооглютил □ Церебрал ■ Мясо опытное
Рис.1 Воспроизведение УРПИ у крыс через 7 месяцев после геморрагического инсульта. 2 серия опытов
Морфологическое исследование пирамидных нейронов V слоя соматосенсорного неокортекса проводилось через 7 месяцев после ГИ и через 14 дней после регистрации поведения. Данные о характере морфологических изменений пирамидных нейронов V слоя соматосенсорного неокортекса опытных и контрольных животных представлены в таблице 4.
Табл. 4
Изменение морфометрических показателей нейронов V полушария сенсомоторного неокортекса. 2 серия экспериментов
Группа Ипсилатеральное полуша рие Контралатеральное полушарие
Площадь клетки Площадь ядра НГИ Площадь клетки Площадь ядра НГИ
Интактные 146,60±11,79а 58,72±2,73 0,82±0,22 0,82±0,22
Л/О 447,46±34,36а 237,49±16,49а 0,80±0,07 418,85±29,16а 171,96±10,76а 0,84±0,06
ГИ+ комбикорм 301,31±16,57а 139,39±6,33а 0,88±0,06 217,45±15,62а 111,53±6,23а 0,96±0,03
ГИ+ Нооглютил 447,79±23,09а 201,34±9,93а 0,92±0,05а 350,14±23,81а 138,49±9,21а 0,96±0,03
ГИ+ Церебрал 435,65±31,25а 209,53±17,13а 0,83±0,07 430,46±18,83а 183,58±13,41а 0,79±0,07b
ГИ+Мясо 350,19±16,28а 177,11 ±8,78а 0,71 ±0,07 333,32±24,03а 146,89±13,65а 0,60±0,07a,b
а - достоверно по отношению к интактным (р<0,05). b - достоверно по отношению к контролю (ГИ) (р<0,05).
1-е сутки
У ложнооперированных крыс отмечается незначительные изменения площади клеток и ядер гигантских пирамидных нейронов V слоя сенсомоторного неокортекса, как в ипси- так и в контралатеральном полушарии. При этом площади клеток пирамидных нейронов V слоя неокортекса составляли соответственно 447,46±34,36 мкм2 и 418,85± 29,16 мкм2, а площади ядер гигантских пирамидных нейронов соответственно 237,49±16,49 мкм2 и 171,96 ±10,76 мкм2. В то же время площадь нейронов (по аналогичным показателям) у инсультных животных составляли 301,31±16,57 мкм2 и 217,45±15,62 мкм2, т.е. резко сократились (почти в 1,5-2 раза), площади ядер пирамидных нейронов уменьшилась соответственно до 139,39±6,33 мкм2 и 111,53±6,23 мкм2.
У инсультных крыс, по сравнению с ложноопе-рированными, отмечается уменьшение количества живых и увеличение количества погибших нейронов в ипсилатеральном полушарии с 27,1±9,18 мкм2 до 44,93±15,5 мкм2, а в контралатеральном полушарии соответственно с 27,15 ±8,97 мкм2 до 44,62±13,77 мкм2. Следовательно, у инсультных животных существенно нарушается соотношение нейронального состава V слоя сенсомоторной области коры больших полушарий головного мозга как в контралатеральном, так, особенно, в ипсилатеральном полушарии. Следует отметить, что через 7 месяцев после моделирования острого геморрагического инсульта, количество погибших глиальных клеток в ипсилатеральном полушарии V слоя сенсомоторного неокортекса у ин-
сультных и ложнооперированных животных отличается мало, и составляет соответственно, 13,44±5,19% и 14,35±5,8%, в то время как, в контралатеральном полушарии соотношение несколько иное - соответственно 16,25±6,17% и 12,43±5,24%. Т.о. в контралате-ральном полушарии отмечается большая сохранность глиоцитов, что, в частности, отражается в ма-лоизменяемости показателя нейроглиального индекса (НГИ) V слоя сенсомоторного неокортекса у инсультных животных.
Препарат Нооглютил в ипсилатеральном полушарии обеспечил морфологическую стабилизацию площади клеток и ядер пирамидных нейронов V слоя сенсомотроного неокортекса, составивших 447,79±23,09 мкм2 и 201,34±9,93 мкм2 (у инсультных животных соответственно только 301,31±16,57 мкм2 и 139,39±6,33 мкм2). В контралатеральном полушарии эти показатели были значительно хуже и составляли у животных I группы соответственно только 350,14 ±15,62 мкм2 и 139,49±9,21 мкм2 против 217,45±15,62 мкм2 и 111,53±6,23 мкм2 у животных групп сравнения.
Было обнаружено амбивалентное, т.е. биполу-шарное влияние «Церебрала» и мяса свиней-реконвалесцентов на нервные клетки ипси- и контра-латерального полушария животных, которым в остром периоде вводили, в то время как у крыс, которым вводили «Нооглютил», этот эффект представлен преимущественно в отношении инсультного полушария. При терапии Церебралом отмечается фармако-протекторное влияние и повышение устойчивости пирамидных нейронов сенсомоторной коры в сравнении с результатами, полученными у инсультной группы животных. В первом случае гибель нейронов в ипси-латеральном полушарии уменьшается с 44,93±15,5% до 36,9±12,83%, а в контралатеральном полушарии с 40,62±13,77% до 33,45±11,03%.
Следует подчеркнуть, что, несмотря на то, что мясной продукт уступает обоим препаратам сравнения по эффективности своего фармакотерапевтиче-ского действия и по «выживаемости» лечебного действия, которое, в частности, подтверждается морфо-метрическими исследованиями, при исследовании продукта показано частичное протекторное влияние данного продукта на площадь клетки и ядра не только ипси-, но и контралатерального полушарий. Данные показатели в ипсилатеральном полушарии составили 350,19±16,28мкм2 и 177,11±8,78мкм2, а в контралате-ральном - соответственно 333,22±24,03мкм2 и 146,89±13,65мкм2.
Таким образом, в результате проведенных исследований на первом этапе экспериментов установлено, что при регистрации поведения животных через 7 месяцев после операции, моделирующей интраце-ребральную посттравматическую гематому (геморрагический инсульт), у крыс наблюдалось нарушение ориентировочно-исследовательского поведения, повышение уровня тревожности, нарушение памяти, замедленность и вялость движений. Вместе с тем, у животных не отмечалось нарушений координации движений и каких-либо серьезных неврологических отклонений. Эти изменения развивались на фоне незавершенных процессов постинсультного восстанов-
ления нейроглиальных взаимоотношений, характерной особенностью которых является преобладание активных процессов в нервных клетках III слоя сен-сомоторного неокортекса животных, перенесших геморрагический инсульт. Комплекс представленных выше изменений, по-видимому, является одной из причин более тяжелого течения и развития осложнений при повторном инсульте.
Таблица 5
Смертность и выживаемость животных с ГИ, в течении 7 месяцев, после ОНМК. 2-я серия
Группа животных Количество животных
всего выживших погибших,% от общего
Интактные 10 10 0
Ложнооперированные 8 6 25
ГИ+комбикорм 7 3 43
ГИ+Нооглютил 11 5 55
ГИ+Церебрал 10 7 30
ГИ+Мясо 10 7 30
На втором этапе экспериментов установлено отчетливое нейропротекторное действие «Нооглюти-ла», которое с учетом морфологических данных, но без показателей выживаемости и данных неврологических тестирований, можно было бы рассматривать как весьма эффективный. В то же время низкая выживаемость, функциональная недостаточность мозга животных при использовании тестовых заданий и, особенно, данных гистоструктуры свидетельствует о том, что лечебно- восстановительное действие препарата, достигнутое сразу после его назначения, в остром периоде инсульта, является недостаточным, и не сохраняется в отдаленном периоде перенесенного цереброваскулярного патологического процесса. Необходимо также подчеркнуть, что более выраженное антиинсультное действие препарата «Церебрал», по сравнению с «Нооглютилом», объясняется, в первую очередь, его отчетливым действием на оба полушария, и, в равной мере, в то время, как фармакологическое действие «Нооглютила» направлено преимущественно, на ипсилатеральное полушарие. При терапии «Церебралом» отмечается фармакопротектор-ное влияние и повышение устойчивости пирамидных нейронов сенсомоторной коры в сравнении с результатами, полученными у инсультной группы животных.
Исследованное мяса от свиней-реконвалесцентов показало достоверное наличие нейропротекторного эффекта, выражавшегося в полифункциональном характере действия мясного сырья, что было установлено в предыдущих исследованиях [7,13]. Хотя степень нейропротекторного действия ниже, чем у препаратов сравнения, однако мясо и не преследует цели заменить препарат. Его можно использовать в восстановительной неврологии с целью реабилитации нарушенных неврологических функций, в качестве рационального питания пациентов с ЦВЗ в остром и отдаленном периодах заболевания, а также при многих других формах острых и хронических неврологических патологий.
Благодарность
Авторы статьи выражают благодарность зав. кафедрой гистологии и эмбриологии Национального медицинского университета им. А. А. Богомольца, чл.-корр. АМН Украины проф. Ю.Б.Чайковскому и зав. НИЛЦ университета проф. А.Н.Гробовому за методическую и консультативную помощь, оказанную в ходе выполнения морфологического раздела работы.
Литература
1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрiя / Автандилов Г.Г. -
М. : Медицина, 1990. - 384 с.
2. Воронина Т.А. Руководство по экспериментальному (доклини-
ческому) изучению новых фармакологических веществ / Т.А.Воронина, Р.У. Островская. - М. : Медицина, 2005. - С. 253-263.
3. Гарибова Т.Л. Эффект нооглютила у крыс с интрацеребраль-
ной посттравматической гематомой (геморрагическим инсультом) / Т.Л. Гарибова, И.П. Галаева, Т.А. Воронина [и др.] // Экспер. и клин. фармакол. - 2003.- №2.- С.45-48.
4. Ганнушкина И.В. Патофизиологические механизмы нарушений
мозгового кровообращения и новые направления в их профилактике и лечении / И.В.Ганнушкина // Неврология и психиатрия. - 1996. - № 1. - С. 14-18.
5. Гусев Е.И. Механизмы повреждения ткани мозга на фоне ост-
рой фокальной ишемии / Е.И. Гусев, В.И. Скворцова, А.В. Коваленко, М.А. Соколов // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. - 1999. - Вып. 2. - С. 65-69.
6. Косицкий Г.И. Гистология, цитология и эмбриология / Косицкий
Г.И. - М. : Медицина, 1988. - 368 с.
7. Лисицын А. Б. Лечебно-восстановительное действие мясного
продукта в остром периоде развития интрацеребрального
геморрагического инсульта / А.Б. Лисицын, И.М. Чернуха, А.Н. Макаренко [и др.] // Вест.РАСХН. - 2009. - №1. - С.89-91.
8. Макаренко А.Н. Способ моделирования геморрагического ин-
сульта / А.Н. Макаренко, Н.С. Косицын, С.В. Карпенко, В.А. Мишина. А.с. № 1767518 от 03.11.1990 г.
9. Мишалов В. Г. Комплексное лечение облитерирующих заболе-
ваний периферических артерий / В.Г.Мишалов, Д.С. Миргородский // Сердце и сосуды. - 2005. - №1.-С.101-104.
10. Румянцева С.А. Иммунокоррекция гнойновоспалительных ос-
ложнений церебрального инсульта: учебно-методическое пособие / С.А. Румянцева, А.А. Коваленко. - М. : Мед. книга, 2006. - 20 с.
11. Скворцова В.И. Ишемия головного мозга / В.И.Скворцова, Е.И.Гусев. - М. : Медицина, 2001. - 328 с.
12. Цинзерлинг А.В. Современные инфекции. Патологическая анатомия и вопросы патогенеза : [руководство] / Цинзерлинг А.В. - СПб. : Сотис, 1993. - 263 с.
13. Чернуха И.М. Сравнительное изучение терапевтических эф-
фектов мяса и мозга свиней при острых нарушениях мозгового кровоснабжения. Обеспечение продовольственной безопасности России через наукоемкие технологии переработки мясного сырья / И.М.Чернуха, Л.В.Федулова. - М. : 2009. -С. 220-224.
14. Kappelle I.G. Stroke / I.G.Kappelle, H.B. Van Der Worp // Neurol.
Neurosci. Rep. - 2004. - V. 4, № 1. - P. 36-41.
15. Fellow S. Validation of open : closed arm entries in an elevated
plus-maze as a measure of anxiety in the rat / S.Fellow, C Ph.hopin, S.E.File, M.Briley // Neurosci Meth J. - 1985. - № 14. -P. 149-167.
16. Robinson R.G. The clinical neuropsychiatry of stroke: cognitive, behavioral, and emotional disorders following vascular brain injury / R. G. Robinson // Cambridge University Press - 1998.
Реферат
СТРУКТУРНО-ФУНКЦ1ОНАЛЬН1 ОСОБЛИВОСТ1 В1ДНОВЛЮВАЛЬНИХ ПРОЦЕС1В В ЦНС У ЩУР1В З 1НТРАЦЕРЕБРАЛЬНОЮ ПОСТТРАВМАТИЧНЮ ГЕМАТОМОЮ (ГЕМОРАГ1ЧНИМ 1НСУЛЬТОМ) НА ТЛ1
експериментально! терапи
Макаренко А.Н., Федулова Л.В., Чернуха И.М., Люицин А.Б.
Ключовi слова: геморапчний Ысульт, поведшка, пам'ять, морфолопя, «Церебрал», «Нооглютт», м'ясо експери-ментальних свиней-реконвалесцен^в.
На першому етап експеримен^в встановлено, що у щурiв з Ытрацеребральною посттравматичною гематомою (геморапчним шсультом, Г1) через 7 мюя^в пюля операци спостер^аються порушення пам'ят^ орiентовно-дослщноТ поведшки та руховоТ активности пщвищений рiвень тривоги. Морфолопчш дослщження показали, що у цих щурiв визначаеться виражена актива^я вщновних процеав у п'ятому i, особливо, третьому шарi сенсомоторного неокортекса. Визначаеться збтьшення нейроггмального Ыдексу трамщних нейрошв i пгантських трамщних нейрошв право!' пiвкулi (область моделювання Г1) в порiвняннi з лiвим (без Г1) i мозком контрольних хибнооперо-ваних тварин. На другому етат встановлений позитивний ефект застосування в гострому пер^ розвитку патологи нейро-протекторного засобу «Церебрал», лкарського препарату «Нооглютт» i м'яса свиней, яга перенесли геморапчний шсульт. Вщзначено амбiвалентний вплив на нервовi кттини md- i контралатеральноТ пiвкулi тварин, яким в гострому пер^ вводили «Церебрал» i м'ясний продукт, у той час як у щурiв, котрим вводили «Нооглютт», цей ефект представлений переважно вщносно ЫсультноТ пiвкулi . При терапи «Церебралом» зазначено фа-рмакопротекторний вплив i пщвищення стшкост трамщних нейрошв сенсомоторноТ кори в порiвняннi з результатами, отриманими у ЫсультноТ групи тварин.
Summary
STRUCTURAL AND FUNCTIONAL CHARACTERISTICS OF REGENERATIVE PROCESSES IN CNS OF RATS WITH CEREBRAL POST-TRAUMATIC HEMATOMA (HEMORRHAGIC STROKE) AGAINST BACKGROUND OF EXPERIMENTAL THERAPY
Makarenko A.N., Fedulova L. V, Chernukha I.M., Lisitsyn A.B.
Key words: hemorrhagic stroke, behavior, memory, morphology, "Cerebral", "Nooglutil", pigs, reconvalescents, During the first stage of the experiments it was found out the rats with intracerebral post-traumatic hematoma (hemorrhagic stroke) in 7 months after the surgeries showed the impairments of learning, memory and cognitive behavior, disorientation, disorders in motor functions, increased anxiety. Morphological studies revealed the rats were determined to have marked activation of regenerative processes in the 5th and especially in the 3rd layers of sensomotor neocortex.
There was an increase of neuroglial index in pyramidal neurons and giant pyramidal neurons of the right hemisphere (the region exposed to modeled hemorrhagic stroke) in comparison with the left hemisphere (the region which was not exposed to modeled hemorrhagic stroke) and the brain of control pseudo-operated animals.
During the second stage we registered the positive effect produced by neuroprotector "Cerebral", "Nooglutin", and meat of pigs experienced hemorrhagic stroke in the acute period of the pathology. It should be stressed the ambivalent effect produced by "Cerebral" and meat on the nerve cells of homolateral and contralateral hemisphere in animals was registered, while this effect was observed mainly regarding the stroke-injured hemisphere in rats which were administered 'Nooglutin". The therapy with "Cerebral" was registered to produce pharmacoprotective effect and increase in resistance of pyramidal neurons of sensomotor cortex compared to the results obtained in stroke-modeled animals.
УДК: [611.316-092.9:615.243]: 615.372 Манько А.М., Сухомлин А.А.
КОРЕКЦ1Я МУЛЬТИПРОБЮТИКОМ «СИМБ1ТЕР АЦИДОФШЬНИЙ» ОКСИДАТИВНОГО СТРЕСУ В ОРГАНАХ ПОРОЖНИНИ РОТА ЗА УМОВ ТРИВАЛОГО ЗАСТОСУВАННЯ 1НГ1Б1ТОР1В ПРОТОННО1 ПОМПИ
ВДНЗ Украши "Украшська медична стоматолопчна академiя", м. Полтава
Тривале застосування омепразолу призводить до достовгрного тдвищення вмгсту в плазмI кров1 га-стрину та до активацИ вльно-радикального окиснення в органах порожнини рота. Експеримен-тальна корекцгя мультипробютиком «Симбгтер ацидофшьний» сприяе нормалгзацИ патологгчних змт в органах порожнини рота щургв на тл1 довготривалого введення тггбгтору протонноI помпи омепразолу, про що свгдчить пригшчення вшьно-радикального окиснення.
Ключовi слова: пародонт, слинн залози, «Симб^ер ацидофшьний», омепразол, гiпергастринемiя, оксидативний стрес.
Планова НДР: «Роль бiорегуляторiв у механiзмi розвитку патологiчних змiн органiв системи травлення», № 010911007982
Вступ
Загальновщомо, що будь-який адаптивний або патолопчний процес вщбуваеться на фон утворення активних форм кисню (АФК) та Ытенсифкацп вшьнорадикального окиснення бюсубстра^в. Надмiрна продуга^я АФК або порушення нормального функцюнування систем антиоксидантного захисту викликають посилене окиснювальне ушкодження бюмолекул, що призводить до розвитку оксидативно-го стресу та дисфункци штин i тканин оргаызму. Вважаеться, що посилення процеав перекисного окиснення вказуе на порушення захисно-пристосувальних реакцш оргаызму на клп"инному рiвнi та гомеостазу в цшому. Проте на сьогодншнш день доведено, що в стан оксидативного стресу пщ дiею АФК перекисному окисненню пщлягають не тшьки лтщи, а й, насамперед, бшки клп"ин [3, 9]. Вважаеться, що негативний ефект окисно-модифкованих бшгав у штинах пов'язаний iз тим, що окисненн бтки е джерелом вшьних радикалiв, яга виснажують запаси кпп"инних антиоксидан^в. In vitro показано, що продукти вшьнорадикального окиснення бшгав призводять до окиснювального пошкодження ДНК. При цьому перекисне окиснення бшгав е не тшьки пусковим мехашзмом патолопчних процесiв при стреа, а й найбiльш раным маркером оксидативного стресу. Динамка змЫ продуктiв перекисного окиснення бшгав е вщображенням ступеня окиснювального ураження штин та резервно-адаптацiйних можливостей органiзму [6]. В клiнiчнiй практик для лiкування кислотозалежних захворювань широко за-стосовуються iнгiбiтори протонноТ помпи (1ПП) омепразол, ланзопразол та iншi, якi знижують шлункову секрецю шляхом впливу на Н+/К+-АТфазу, що призводить до зниження шлунковоТ секрецп i, як наслiдок, до розвитку ппергастринемп [10]. Також
гiпергастринемiя спостерiгаеться при розвитку гаст-рин-секретуючих пухлин, зокрема, при синдромi ЗоллЫгера-Еллюона, а також при гiпоацидних станах, наприклад при атрофiчному гастритi. Гiпергастринемiя - один з головних патогенетичних механiзмiв у розвитку пухлин шлунка та iнших вiддiлiв шлунково-кишкового тракту. Доведено, що гiпергастринемiя вiдiграе важливу роль у розвитку ко-лоректального раку [10]. Для корекцiТ патолопчних змш в органах ротовоТ порожнини щурiв в умовах омепразол-iндукованоТ ппергастринемп було обрано мультипробютик «Симбiтер ацидофшьний», основною вщмшнютю якого вщ бактерiотерапевтичних засобiв попереднiх поколiнь е наближення його складу до природшх мiкробiоценозiв вiдкритих бiологiчних систем оргаызму людини та тварин, яга в^зняються полiкомпонентнiстю, широким спектром бюлопчних активностей та взаемовигiдними мiжпопуляцiйними вщносинами [7, 8].
Мета
Метою нашого дослiдження було вивчення впливу довготривалого введення омепразолу на тка-нини пародонта та слинних залоз щурiв, пошук шляхiв корекцiТ патологiчних змЫ за умов розвитку гiпергастринемiТ.
Матерiали i методи дослiдження
Експерименти виконаы на 49 бiлих щурах-самцях вагою 180-220г з дотриманням рекомендацм щодо проведення медико-бiологiчних дослiджень зпдно з ¿вропейською конвенцiею. Тварин утримува-ли на звичайному рацiонi в стандартних умовах вiварiю. Евтаназiю тварин здшснювали пiд уретано-вим наркозом. Дослщним тваринам протягом 28 дiб внутрiшньоочеревинно вводили омепразол ("Sigma", США) дозою 14 мг/кг, «Симбп"ер ацидофшьний» ( 0,14
