CC BY
66
Таблица 2
Клеточный состав различных зон белой пульпы селезенки интактных крыс и при пероральном применении токсической дозы селенита натрия и после отмены его (М±8)
Параметры Контроль So2 So6 So14
Центры размножения
Общее кол-во клеток 59,55±1,39 77,58±2,75* 78,04±3,2* 79,93±1,57*
Лимфобласты 8,40±0,43 11,50±2,15* 11,15±1,39* 7,97±0,79
Средние лимфоциты 7,99±0,77 14,55±0,97* 27,15±1,07* 27,95±0,86*
Малые лимфоциты 36,09±0,86 41,87±0,82* 26,23±1,29* 33,89±1,48*
Макрофаги 0,97±0,06 0,99±0,11 1,92±0,13* 0,90±0,15
Ретикулярные клетки 4,13±0,79 4,34±0,43 2,20±0,32* 3,23±0,64
Плазматические клетки 0,95±0,11 0,02±0,04* 0,66±0,13* 0,11±0,02*
Митозы 1,02±0,04 1,93±0,15* 1,12±0,21 1,21±0,19
Дегенерирующие клетки 0 2,38±0,47* 7,61±1,05* 4,67±0,43*
Периа ртериальные лимфоидные муфты
Общее кол-во клеток 78,92±2,69 83,15±2,02* 86,31±2,98* 64,50±1,63*
Лимфобласты 3,29±0,67 3,51±0,62 4,09±0,67 3,82±0,47
Средние лимфоциты 8,14±0,77 18,05±0,75* 19,31±1,29* 9,65±0,97
Малые лимфоциты 53,35±1,72 53,55±1,29 54,73±1,22 42,83±0,71*
Макрофаги 0,96±0,5 0,64±0,39* 0,70±0,32 0,62±0,43*
Ретикулярные клетки 10,35±0,82 4,70±0,97* 4,77±0,86* 5,06±0,82*
Плазматические клетки 1,70±0,21 1,55±0,24 1,49±0,17 1,31±0,24
Митозы 1,13±0,13 1,09±0,11 1,13±0,06 1,04±0,04
Дегенерирующие клетки 0 0,06±0,04* 0,09±0,06* 0,17±0,09*
Примечание: * - отличие достоверно при сравнении с аналогичными показателями контроля (р<0,05)
Рис.2 Структурная организация селезенки на 6 сутки после перорального введения селенита натрия (увеличение площади белой пульпы). Окраска гематоксилином и эозином. 06.10, ок.15.
В клеточном составе центров размножения лимфоидных узелков и периартериальных лимфоидных муфт увеличивается по сравнению с контролем число лимфобластов, средних лимфоцитов, плазматических клеток, макрофагов (табл.2). Эти преобразования в селезенке указывают, что она находится в повышенной иммунологической активности, усилены ее барьерная и детокси-кационная функции [4,5].
Таким образом, можно отметить, что лимфоидные органы одними из первых реагируют на экзогенные факторы, причем структурно-функциональные изменения этих органов, в большинстве случаев, носят черты общей стереотипии. Однако неспецифический характер ответа подвержен изменениям в связи с характером действующего фактора и функциональной специализации органа.
Литература
1.Бородин Ю.И. // Хирургия, морфология, лимфология. 2009. Т.6, №11. С.8—11.
2.Дюсембаева А.Т. // Хирургия, морфология, лимфология. 2009. Т.6, №11. С.60-62.
З.Залавина С.В. // Морфология. 2008. Т.133, №3. С.45-46.
4.Идрисов А.А., Омаров С.Т., Досаев Т.М. // Хирургия, морфология, лимфология. 2007. Т.4, №.7. С.74-75.
5.Судзиловский Ф.В., Груздева ОН. // Морфология. 2000. Т.117, №3. С.117.
6.Шакирова Г.Р., Муфазалова Н.А., Шакирова СМ // Морфологические ведомости. 2009. №3. С.153.
7.ЯрилинА.А. // Иммунология. 2003. №2. С.117.
STRUCTURAL CHANGES IN DIFFERENT LYMPHOID ORGANS WHILE VARIOUS EXPERIMENTAL EXOGENOUS INFLUENCES UPON THE ORGANISM
I.N. PUTALOVA, S.N. SHIROCHENKO, O.V. NIKITENKO, A.P. SUSLO
Omsk State Medical Academy Anthroponomy Department
The influence of exogenous factors (wound process, mechanical damage, the effects of toxic doses of sodium selenite) on the
structural transformation of the lymphoid organs was studied on Wistar rats. The results show the complex dynamics and a wide range of structural reforms, depending on the type and strength of a stressor. Lymphoid organs are among the first ones to respond to exogenous factors, and structural and functional changes in these organs, in most cases, have lines of the general stereotypy.
Key words: lymphoid organs, wound process, mechanical damage, sodium selenite.
УДК 591.463.05
СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ КРЫС ПРИ АДАПТАЦИИ ОРГАНИЗМА К НИЗКИМ СЕЗОННЫМ ТЕМПЕРАТУРАМ
И.Ю. САЯПИНА*
Изучена структурно-функциональная организация предстательной железы крыс в процессе адаптации организма к низким сезонным температурам. При адаптации к холоду предстательная железа проявляет морфологические признаки повышенной функциональной активности. Окислительный стресс, вызванный низкими температурами, может ограничивать компенсаторные возможности простаты, приводя к нарушению баланса процессов пролиферации, дифферен-цировки и гибели клеток железистого эпителия.
Ключевые слова: адаптация, предстательная железа, окислительный стресс
Общее охлаждение организма ведет к снижению общего и местного иммунитета, тем самым создаются благоприятные условия для конгестивных изменений в органах малого таза, в связи с чем, холодовому фактору отводится весомая роль в этиологии острого и хронического простатита. Согласно данных медицинской статистики в России хроническим простатитом страдает до 35% мужчин трудоспособного возраста, у 7-36% больных он осложнён везикулитом, эпидидимитом, расстройствами мочеиспускания, репродуктивной и половой функций [4]. С точки зрения медицинской географии наиболее подвержены хроническому простатиту жители городов, расположенных в местностях с низкими сезонными температурами, особенно в сочетании со значительными перепадами температур и высокой влажностью [6]. Заболеваемость хроническим простатитом в данной популяции составляет уже не 35%, а 72%, что ещё раз указывает на роль холодового фактора в развитии данной патологии. Однако морфологические изменения предстательной железы при адаптации организма к низким сезонным температурам не достаточно изучены, что объясняется естественными препятствиями для взятия образцов ткани простаты человека для морфологического анализа. В подобных случаях для изучения процессов адаптации организма к экстремальным факторам среды на первое место выходят экспериментальные методы исследования, позволяющие моделировать большинство из экстремальных воздействий на организм; при этом экспериментальные методы дают уникальную возможность получить материал для морфологического исследования и экстраполировать полученные результаты на человека.
Цель исследования - изучение в эксперименте структурно-функциональной организации предстательной железы крыс при адаптации организма к низким сезонным температурам.
Материалы и методы исследования. Эксперимент был проведён на белых половозрелых крысах-самцах с массой тела 200-250г. В основу эксперимента была положена модель общего охлаждения животных при температуре -15°С по 3 часа ежедневно в течение 4 недель. Режим охлаждения был выбран с учётом возникновения в таких условиях у подопытных животных выраженных биохимических и морфологических изменений [8], а срок охлаждения соответствует стадии адаптации организма к действию холода [1,2]. Контролем служили интактные животные, содержащиеся в стандартных температурных условиях вивария.
Для гистологического исследования фрагменты ткани дорсальной и латеральных долей простаты крыс, являющихся морфологическими эквивалентами простатических желёз человека, фиксировали в 10% нейтральном формалине, обезвоживали и заливали в парафин согласно стандартной гистологической схеме. Для обзорной микроскопии готовые парфиновые срезы простаты окрашивали гематоксилином и эозином, нейтральные полисахариды и гликопротеины выявляли при помощи ШИК-
* Амурская ГМА, 675000, г. Благовещенск, ул. Горького, 95. Тел. 4162525356, e-mail: irina6336@mail.ru
реакции, активность индуцибельной NO-синтетазы (iNOS) определяли на парафиновых срезах иммуногистохимическим методом с использованием моноклональных антител (Lab Vision, USA), продукты реакции визуализировали диаминобензидином (Хема, Россия), срезы контрастировали гематоксилином. Активность ШИК-реакции и иммуногистохимической реакции на NO-синтетазу оценивали по оптической плотности, выраженной в условных единицах. Для определения оптической плотности использовали систему компьютерного анализа микроскопических изображений, состоящую из светового микроскопа «Микромед 1», цифровой камеры DCM 130, персонального компьютера на базе Intel Pentium и программного обеспечения ВидеоТест -Морфология 5.0. Как морфологический метод применялось исследование полутонких срезов, для получения которых образцы ткани простаты фиксировали в 2,5% глютаральдегиде, пост-фиксировали в 4-окиси осмия и заливали в смесь эпона и аралди-та. Готовые полутонкие срезы окрашивали метиленовым синим.
Биохимическое исследование включало определение в плазме крови продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) -диеновых конъюгатов (ДК), малонового диальдегида (МДА), гидроперекисей липидов (ГЛ) и основного компонента антиокис-лительной системы (АОС) витамина Е. ДК определялись в липидных экстрактах из крови по поглощению при 233нм, ГЛ определяли по способности окислять ионы Fe2+ с последующей цветной реакцией на Fe3+ с тиоционатом аммония, МДА по цветной реакции с тиобарбитуровой кислотой, витамин Е по цветной реакции с ионами Fe3+ и дипиридилом. Статобработка количественных данных велась с использованием t-критерия Стьюдента.
Результаты и их обсуждение. При обзорной микроскопии в дорсальной и боковых долях простаты крыс определяются секреторные отделы альвеолярно-трубчатого типа, разделённые тонкими прослойками рыхлой соединительной ткани. Секреторные отделы имеют складчатый рельеф, в большинстве случаев их выстилает многорядный высокопризматический эпителий. На тангенциальных срезах в местах формирования складок, вдающихся в просвет концевых отделов, эпителиальная выстилка выглядела как многослойная. Высокопризматический эпителий концевых отделов без резкой границы переходит в низкопризматический, а затем кубический эпителий, выстилающий выводные протоки железы. В просвете концевых отделов простаты в следовых количествах обнаруживается секрет, имеющий мелкозернистую структуру и окрашивающийся слабо оксифильно, в части концевых отделов секрет отсутствует. В выводных протоках секрет накапливается в виде гомогенной субстанции, окрашивающейся уже более оксифильно. Концевые отделы и выводные протоки окружены циркулярно расположенными гладкими мио-цитами, которые в латеральных долях простаты образуют 1-2 слоя; в дорсальной простате мышечная строма вокруг секреторных отделов выражена лучше, и образована 2-3 слоями клеток. В прослойках соединительной ткани, разделяющей концевые отделы и выводные протоки железы, присутствуют многочисленные кровеносные и лимфатические сосуды, симпатические ганглии.
Рис. 1. Простата интактных крыс. В эпителий концевых отделов преобладают высокопризматические главные клетки с ядрами овальной формы, смещёнными к базальному полюсу. Цитоплазма в зоне комплекса Гольджи просветлена, содержит мелкие секреторные вакуоли. Полутонкий срез. Окраска метиленовым синим, х 1000
При исследовании полутонких срезов в составе эпителия секреторных отделов обнаруживаются клетки трёх типов - главные, базальные и нейроэндокринные. Главные клетки призмати-
ческой формы, очень высокие, имеют ядра овальной формы, которые смещены к базальному полюсу (рис. 1). В ядрах преобладает эухроматин, гетерохроматин рассеян по всему объёму ядра в виде мелких гранул, небольшое количество гетерохроматина прилежит к ядерной оболочке, ядрышки хорошо выражены. В апикальных частях цитоплазмы главных клеток и в зоне комплекса Гольджи располагаются секреторные вакуоли небольших размеров (рис. 1). Базальные клетки встречаются редко, чаще всего они имеют треугольную форму, их гиперхромные ядра округлой или неправильной формы окружены тонким ободком цитоплазмы. Среди нейроэндокринных клеток, присутствующих в составе эпителия концевых отделов, встречаются клетки как открытого, так и закрытого типа. Их можно визуализировать по наличию секреторных гранул в цитоплазме. Гранулы нейроэндокринных клеток достаточно плотные, имеют насыщенную базофильную окраску. Нейроэндокринные клетки открытого типа имеют длинные апикальные цитоплазматические отростки, достигающие поверхности эпителиального пласта, они выделяют свой секрет в просвет концевого отдела. Нейроэндокринные клетки закрытого типа не достигают поверхности эпителия, имеют треугольную или неправильную форму. Иммуноцитохи-мическими методами в секреторных гранулах нейроэндокринных клеток простаты выявляются серотонин, соматостатин и кальци-тонин, осуществляющие паракринную регуляцию сократительной активности гладких миоцитов стромы и секреторной активности железистого эпителия простаты [7,10,12].
ШИК-позитивные вещества в предстательной железе выявляются в апикальных частях эпителиоцитов, выстилающих концевые отделы и выводные протоки, в базальных мембранах и гладких миоцитах, окружающих ацинусы и протоки, секрет предстательной железы также содержит большое количество ШИК-позитивных веществ (рис. 2).
Рис. 2. Простата интактных крыс. ШИК-позитивные вещества выявляются в апикальных частях эпителиоцитов концевых отделов и выводных протоков, в базальных мембранах и гладких миоцитах стромы. ШИК-реакция,
х200
Продукты реакции на ¡N08 в простате интактных крыс хорошо определяются в высокопризматическом эпителии концевых отделов, в низкопризматическом и кубическом эпителии выводных протоков (рис. 5), более умеренная реакция характерна для гладкой мышечной ткани, окружающей концевые отделы, выводные протоки, и разделяющей доли предстательной железы. Оксид азота, синтез которого обеспечивает фермент ¡N08, обладает антиоксидантным действием [14], представляя собой систему антиоксидантной защиты местного уровня.
Рис. 3. Простата крыс при адаптации к холоду. «Светлые» эпителиоциты образуют скопления, от апикальных частей главных клеток в просвет железы отшнуровываются фрагменты цитоплазмы . Полутонкий срез. Окраска метиленовым синим, х 1000
При обзорной микроскопии простаты крыс экспериментальной группы в просвете концевых отделов и выводных протоков железы отмечались признаки застоя секрета, выводные протоки в своём большинстве были расширены. В некоторых концевых отделах преимущественно латеральной простаты отмечались явления очаговой десквамации железистого эпителия. Обращает внимание увеличение объёма интерстициальной соединительной ткани с явлениями выраженного фиброза (рис. 3). Соединительная ткань, локализованная между секреторными ацинусами и выводными протоками, отличалась высоким содержанием ШИК-позитивных веществ, причём их накопление более активно происходило в области волокнистых структур, оплетающих концевые отделы железы (рис. 4). Усиление ШИК-реакции характерно и для базальных мембран в составе секреторных отделов.
Рис. 4. Простата крыс при адаптации к холоду. Структуры интерстициальной ткани активно накапливают ШИК-позитивные вещества. Выраженный фиброз интерстиция. ШИК-реакция, х 200
На фоне адаптации к низким температурам в предстательной железе резко угнетается экспрессия ¡N08. Морфологически это проявляется полным отсутствием продуктов реакции в эпителии секреторных отделов и выводных протоков. Структуры предстательной железы имели базофильную окраску различной интенсивности, обусловленную гематоксилином (рис. 6). Отсутствие экспрессии ¡N08 при адаптации к низким температурам указывает на истощение этой антиокислительной системы, реализующей своё действие через генерацию оксида азота.
Рис. 5. Простата интактных крыс. Реакция на iNOS. Продукты реакции хорошо определяются в высокопризматическом эпителии концевых отделов. Окраска гематоксилином, х 200
Анализ полутонких срезов показал неоднородность структурной организации главных секреторных эпителиоцитов, которая проявлялась появлением большого количества «светлых» эпителиоцитов, относящихся к дегенеративным формам. «Светлые» клетки располагались либо поодиночке среди тёмных клеток, либо образовывали скопления из 2-5 клеток (рис. 3). «Тёмные» эпителиоциты проявляли признаки повышенной секреторной активности. По сравнению с контрольной группой, в цитоплазме главных клеток увеличивалось число и размер секреторных вакуолей, зона комплекса Гольджи выглядела гипертрофированной. Ещё одной важной особенностью железистого эпителия простаты крыс экспериментальной группы стало увеличение количества главных клеток, делящихся эндомитозом.
В физиологических условиях для главных экзокриноцитов предстательной железы характерен мерокриновый тип секреции.
При адаптации к низким температурам в некоторых концевых отделах железы наблюдались морфологические признаки макро-апокриновой секреции: от апикальной поверхности главных эпителиоцитов отшнуровывались фрагменты цитоплазмы округлой формы, содержащие секреторные вакуоли (рис. 3). Смену типа секреции можно рассматривать как компенсаторноприспособительную реакцию железистого эпителия в условиях действия экстремальных факторов. Некоторые авторы рассматривают такие многочисленные образования в концевых отделах как возможную структурную первооснову для формирования простатических конкрементов и кальцификатов [3].
Рис. 6. Простата крыс при адаптации к холоду. Реакция на ¡N08. Продукты реакции в эпителии секреторных отделов отсутствуют, структуры простаты имеют базофильную окраску, обусловленную гематоксилином. Окраска гематоксилином, х 200
На фоне адаптации к низким температурам мы наблюдали дегрануляцию нейроэндокринных клеток с распределением секреторных гранул по поверхности эпителиального пласта. Согласно общепринятым представлениям секрет нейроэндокринных клеток из гранул попадает сначала в цитозоль, после чего диффундирует в молекулярной форме через плазмалемму клетки наружу. Выделение секрета нейроэндокринных клеток простаты путём экзоцитоза ранее наблюдали [7,10], которые считают данное явление адаптивной реакцией организма на воздействие экстремальных факторов среды. Нейроэндокринные клетки, в отличие от железистых клеток, не чувствительны к андрогенам. Повышение секреторной активности нейроэндокринных клеток вызвано адренергической стимуляцией, которая резко усиливается при адаптации организма к низким температурам [1,2,9].
Активация процессов ПОЛ с одновременным истощением АОС, получившая название «окислительный стресс» при адаптации организма к низким температурам является стереотипной реакцией [2,5]. В нашем случае биохимическое исследование показало (табл.), что на фоне адаптации к холоду повышается содержание конечных продуктов ПОЛ: содержание ГЛ в плазме крови повышалось на 25%, МДА на 24%, содержание основного эндогенного антиоксиданта витамина Е было снижено на 25% (Р<0,05). Окислительный стресс в простате нарушает баланс между процессами пролиферации, дифференцировки и гибели клеток железистого эпителия, являясь фактором, стимулирующим её гиперплазию и канцерогенез [13]. Андрогены поддерживают гомеостаз процессов ПОЛ/АОС в предстательной железе [13], поэтому предположим, что при адаптации к холоду окислительный стресс развивается в простате на фоне относительного дефицита андрогенов.
Таблица 1
Показатели ПОЛ и АОС в эксперименте
Биохимические показатели Контроль Эксперимент
ДК (нмоль/г) ГЛ (нмоль/г) МДА (нмоль /г) Витамин Е (мкг/г) 19,033±1,40б 2б,0б7±1,4б0 4,900±0,379 43,383±4,301 18,95б±0,983 32,7б3±1,813* б,0б7±0,342* 32,48б±2,293*
Примечание: * - различия достоверны по сравнению с контролем при Р<0,05
Заключение. Таким образом, при адаптации организма к низким сезонным температурам предстательная железа находится в состоянии функционального напряжения, на что указывают
увеличение количества эндомитозов в главных экзокриноцитах, увеличение числа секреторных вакуолей в их цитоплазме, гипертрофия зоны комплекса Гольджи, смена мерокринового типа секреции на апокриновый. Адаптация к низким температурам сопровождается выраженным фиброзом интерстициальной соединительной ткани простаты с накоплением ШИК-позитивных веществ, угнетением экспрессии iNOS в предстательной железе, развитием оксидативного стресса. Оксидативный стресс, подтверждённый иммуноцитохимическими и биохимическими методами, рассматривать как фактор, ограничивающий компенсаторно-приспособительный потенциал предстательной железы.
Литература
1Авцын А.П. и др. Патология человека на Севере. М., 1985.
2Агаджанян Н.А. и др. Экологическая физиология человека. М., 1998.
3Ананьев ВА.и др. // Бюл. экспер. биол. и мед. 2008. Т. 146, № 11. С.573-579.
4Аполихин О.И. и др. // Урология. 2008. № 3. С. 3-9.
5.Доровских В.А. и др. Антиоксиданты в профилактике и коррекции холодового стресса. Благовещенск, 2001.
6.Дорофеев С.Д., Камалов АА. // РМЖ. 2003. Т.11, № 4. С. 229-234.
7.Князькин И.В. и др. Нейроиммуноэндокринология мужской половой системы, плаценты и эндометрия. СПб., 2007.
8.Красавина Н.П. Морфо-функциональная характеристика соединительной ткани органов дыхания при общем охлаждении организма и медикаментозной коррекции: Дис. д-ра мед. наук. Иркутск, 2000.
9Машанов А.А., Булыгин Г.В. // Вест. КрасГАУ. 2006. № 10. С. 170.
10. Супиев А.Т. Нейроэндокринные клетки предстательной железы при старении: Дис... канд. мед. наук. СПб., 2005.
11.Di Sant Agnesse P. // Cancer. 1992. Vol. 70. P. 254-268.
12Krijnen J. et alt. // Histochemistry. 1993. Vol. 100. P. 393-398.
13.Neville N.C. et alt.// Am J Pathol. 2003. Vol. 163, № 6. P.
2513-2522.
14.Steudel W. et alt. // Cell Tissue Res. 1999. Vol. 295. P. 317-329.
THE STRUCTURAL AND FUNCTIONAL ORGANIZATION OF RAT PROSTATE AT THE ADAPTATION OF ORGANISM TO LOW SEASON TEMPERATURES
I.YU. SAJAPINA
Amur State Medical Academy
The structural and functional rat prostate organisation was studied in the course of organism adaptic process to low season temperatures. It was established that the prostate shows morphological signs of increased functional activity at the adaptation to cold. Oxidative stress caused by low temperatures, may limit the compensatory possibilities of the prostate, leading to the imbalance in proliferation, differentiation and cell death of glandular epithelium.
Key words: adaptation, prostate, oxidative stress.
УДК: 611.343-001.6:616-001.20/.17
ДОЗА-ЭФФЕКТЫ ОДНОКРАТНОГО у-ОБЛУЧЕНИЯ И СОСТОЯНИЕ ГОМЕОСТАЗА СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ТОЩЕЙ КИШКИ В ДИНАМИКЕ ПРОЛОНГИРОВАННОСТИ СРОКОВ НАБЛЮДЕНИЯ
О.А. СЛЮСАРЕВА, З.А. ВОРОНЦОВА*
В эксперименте на 225 крысах-самцах после у-облучения в дозах 10, 20, 50 и 100 сГр спустя 1, 180, 365, 545 и 730 суток изучено морфофункциональное состояние слизистой оболочки тощей кишки. Результаты исследования показали, что снижение всех морфоэнзимологических показателей с увеличением дозы у-облучения и пролон-гированности наблюдения позволяет косвенно оценить и адекватно характеризовать конечный альтернативный эффект и соответственно весь комплекс исследования зависимости «доза-эффект». Снижение функциональной активности слизистой оболочки тощей кишки по всем морфологическим показателям с отдаленностью сроков от начала воздействия в эксперименте на весь жизненный цикл животных предполагает преждевременное старение на уровне организма. Ключевые слова: у-облучение, тканевые базофилы, митозы, тощая кишка
* ГОУ ВПО «Воронежская ГМА им.Н.Н. Бурденко» РОСЗДРАВА, кафедра гистологии, 394000 г.Воронеж ул. Студенческая, д.10. тел. 8(4732)53-02-93
Проблема влияния малых доз ионизирующей радиации на живые объекты чрезвычайно интересна не только в теоретическом, но в практическом плане [1—3]. Экспериментальные, клинические и эпидемиологические данные свидетельствуют о высокой бластомогенной эффективности ионизирующих излучений [4,5]. Поэтому влияние облучения на пищеварительную систему - одна из актуальных проблем медицинской науки [6,7]. Тяжесть лучевых поражений определяется скоростью обновления и радиочувствительностью клеток [8,9]. Отдаленная радиационная патология пищеварительного тракта может развиться в результате воздействия внешних источников радиации и инкорпорации радионуклидов [10]. В отдаленные периоды у лиц, пострадавших после аварии на ЧАЭС, отмечалось значительное и частое поражение желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) с преобладанием эрозивного и атрофического хронического гастродуоденита, астенического синдрома, иммунозависимая патология [11,12]. Особый интерес представляют сведения об отдаленных последствиях малых доз облучения, и в последние годы, данный вид патологии привлекает наибольшее внимание [13,14]. Клинические проявления радиационных поражений проявляются структурными изменениями органных образований на клеточном и субклеточном уровне, индивидуальные особенности реагирования которых, позволят выявить наиболее чувствительные из них, для разработки и совершенствования, защитных мер.
Цель исследования — выявление пострадиационных эффектов у-облучения и возможности реализации его результативного признака по выбранным критериям, определяющим местный гомеостаз слизистой оболочки тощей кишки в динамике пролонгированности сроков наблюдения.
Материалы и методы исследования. Эксперимент выполнен на 225 белых крысах-самцах с начальным возрастом 4 месяца. Животные испытывали общее однократное и равномерное у-облучение (спектр 1,2 МЭв на установке «Хизотрон» (60Co)) в динамике доз: 10; 20; 50 и 100сГр с мощностью дозы 50 сГр/ч. Эксперимент был поставлен на всю продолжительность жизни животных. Фрагменты тощей кишки извлекали спустя 1; 180; 365; 545; 730 суток после декапитации. Активность ферментов щелочная (ЩФ) и кислая фосфатаза (КФ) в энтероцитах изучали на криостатных срезах. Морфометрию проводили на 25 полях зрения по критерию светооптической плотности специфических гранул с использованием программы Image J. Состояние митотической активности (МА) анализировали по числу митозов (М) в 20 продольно срезанных криптах при окраске парафиновых срезов гематоксилином-эозином. В межкриптальной строме подсчитывали тканевые базофилы (ТБ) с их идентификацией морфофункциональных типов при окраске основным коричневым по М.Г.Шубичу, участвующих в тканевом гомеостазе [15]. Синтез дозовой системы проводили на основе корреляционного адапто-метрического анализа с использованием показателей ферментативной активности энтероцитов эпителиальной выстилки слизистой оболочки тощей кишки, обеспечивающих их метаболизм; показателей митотической активности эпителиоцитов крипт слизистой оболочки тощей кишки и клеточной популяции тканевых базофилов, обеспечивающих местные процессы регуляции, перераспределением морфо-функциональных типов, с соответствующим высвобождением биоактивных веществ антагонистически взаимодействующих.
Результаты и их обсуждение. У контрольных животных в хронодинамике опыта морфоэнзимологические показатели снижались обратно пропорционально возрасту животных. При этом шло снижение общего числа тканевых базофилов (ОЧТБ) и активных форм, с тенденцией к росту безъядерных (Б/я) ТБ. Отметим возрастную динамику, направленную на снижение силы корреляционных связей между изучаемыми показателями. Наиболее сильные связи у контрольных животных, по срокам эквивалентным эксперименту, отмечались между показателями ферментативной активности и ТБ межкриптальной стромы, митотической активностью и активности ферментов ЩФ и КФ.
Через сутки после однократного у-облучения в дозах 10 и 20 сГр отмечалось незначительное снижение активности ЩФ, и резкое ее усиление в дозах 50 сГр и 100 сГр, с большей выраженностью при меньшей дозе (p<0,05). Активность КФ достоверно снижалась после облучения в дозе 10; 50 и 100 сГр, и усиливалась в дозе 20 сГр (p<0,05). При этом МА достоверно снижалась в дозе 10 сГр, и усиливалась с увеличением дозы по отношению к
