CC BY
153
УДК: 611.842:615.212.7]-08 П'1двальна У.€.
СТРУКТУРН1 ОСОБЛИВОСТ1 СУДИННО1 ОБОЛОНКИ ОЧНОГО ЯБЛУКА ЗА УМОВ ДОВГОТРИВАЛОГО ОП1О1ДНОГО ВПЛИВУ В ЕКСПЕРИМЕНТ1
Львiвський нацiональний медичний унiверситет iменi Данила Галицького
У фаховш л'1тератур'1 трапляються суперечливi в'домост'! щодо тривалого впливу опюШв на структуру органе. Трапляються лише поодинок розробки проблеми розвитку патолог'чних зм/'н органа зору внаслдок впливу наркотичних засоб'т. Метою дослдження е встановлення особливостей структури та ланок гемомiкроциркуляторного русла судинноУ оболонки очного яблука за умов 6-тижневого впливу опюУду в експеримент!'. Матерiал досл'дження представлений препаратами очей 24 щур'т з iн'екованим судинним руслом, мкро- та ультратонкими зрiзами судинноУ оболонки очного яблука. Результати досл'дження св'дчать про глибою деструктивн/ змни структури усх в'ддШв судинноУ оболонки. Капшярний компонент зруйнований, артероли звивистпросвт Ух нерiвномiрний, стнка Ух потовщена, склерозована, венули розширен та деформован¡. Сполучна тканина судинноУ оболонки представлена дезорганзованою основною речовиною пдвищеноУ електронноУ щiльностi та значною кшькютю колагенових волокон. Зменшення, порiвняно з контролем, д'аметра артерол, щiльностi стки обмiнних судин, артероло-венулярного коефiцiента, а також збльшення д'аметра венул, коефiцiента звивистост/ артерол, показника троф1'чно'У активност/ тканини пдтверджують розвиток деструктивних зм/'н судинноУ оболонки очного яблука пд впливом налбуфну. Ключов1 слова: судинна оболонка, очне яблуко, опюТ'д, щур.
Стаття е фрагментом плановоУ науково-дослiдноi' роботи на тему «Структура органiв та Ух кровоносного русла в онтогенезi, пiд дiею лазерного опромнення та фармацевтичних засобiв, при порушеннях кровопостачання, реконструктивних операц/ях та цукровому дiабетi» (номер державноУ реестрацУУ 0110Ш01854), що виконуеться на кафедрi нормальноУ анатомУУ Львiвського нацонального медичного унiверситету iменi Данила Галицького згiдно з державним планом та програмою впродовж 2010-2014 рр.
Вступ
Проблема ошоТ'дноТ наркоман' набула характеру розгорнутого епiдемiчного процесу. У зв'язку з чим в краТнах европи розроблена антинаркотична стратепя подолання проблеми виникнення полiетiологiчноТ патологи [7,8]. Переважно дослщження стосуються со^ального, юридичного та психолопчного аспек^в, не акцентуючи увагу на те, що суттeвi метаболiчнi та структуры змши, рання швалщиза^я i смертнють хворих з опю'Тдною залежнютю потребують вивчення патогенетичних механiзмiв розвитку та прогресування множинних полюрганних коморбщних сташв [1].
У фаховш лiтературi трапляються поодинок та суперечливi вщомосп щодо тривалого впливу опю'Тфв на структуру оргашв [2,9], зокрема дослщжено мiкроструктурнi змши в язиц^ викликан впливом малих доз опюТ'ду [3], в тимуа та селезшц [4]. Розроблений споаб моделювання поведшкових реакцш в експериментальних тварин при хрошчному впливi опюТ'ду [5]. Щодо ураження очного яблука, то на даний час трапляються лише поодинок розробки проблеми розвитку патолопчних змш органа зору внаслщок впливу наркотичних засобiв, зокрема вивчаються змши функци зору в оаб з отатною наркомаыею [6]. Мета дослщження - встановити особливост структури та ланок гемомiкроциркуляторного русла судинно'Т оболонки очного яблука за умов 6-тижневого впливу опюТ'ду в експериментк
Матерiали та методи дослщження
Дослщження виконан на 24 статевозртих бтих щурах-самцях, вком 4,5-7,5 мюя^в i масою тта 130-150 г. Введення налбуфшу проводили внутршньом'язево за наступною схемою: I тиждень - 8 мг/кг, II тиждень - 15 мг/кг, III тиждень - 20 мг/кг, IV тиждень - 25 мг/кг, V тиждень - 30 мг/кг, VI тиждень - 35 мг/кг [5]. Забiр матерiалу проводили через 6 тижшв введення препарату. Контролем слугували 9 бтих щурiв, яким вводили фiзiологiчний розчин.
Уах тварин утримували в умовах вiварiю Львiвського нацiонального медичного ушверситету iменi Данила Галицького, експерименти проведет у вщповщносп з положенням ¿вропейсько'Т конвенцiТ щодо захисту хребетних тварин, яких використовують в експериментальних та шших наукових цтях (Страсбург, 1986), Директиви Ради европи 86/609/ЕЕС (1986р.), Закону Укра'Тни №3447 - IV «Про захист тварин вщ жорстокого поводження», загальних етичних принципiв експеримен^в на тваринах, ухвалених Першим нацюнальним конгресом УкраТни з бiоетики (2001р.).
Матерiал дослiдження представлений препаратами очей щурiв з iн'eкованим судинним руслом, мiкро- та ультратонкими зрiзами судинно'Т оболонки очного яблука.
Для ш'екцп кровоносного русла очного яблука застосовували ш'екцшну масу, яка складалася зi сумiшi 20% розчину коларголу та глщерину у спiввiдношеннi 2:1. Просвптення оболонок очного яблука проводили в глщериш з 96% етиловим спиртом у стввщношены 1:1 впродовж 3 дiб, потiм у чистому глщериш. Для морфометричного аналiзу стану гемомiкроциркуляторного русла судинно'Т
оболонки очного яблука використовували наступи ктькюы критерп: дiаметр мiкросудин, артерюло-венулярний коефщент, коефiцieнт звивистостi, щiльнiсть атки обмiнних судин, показник трофiчноТ активност тканини. Статистичне опрацювання результатiв дослщження проводили на комп'ютерi за допомогою пакета прикладних програм для медико-бюлопчних та епiдемiологiчних дослiджень «InStat». Зрiзи очного яблука фарбували гематоксилiном i еозином. Препарати вивчали та фотографували при збiльшеннi мiкроскопа: об'ектив х 8, окуляр х 15. Для фотографування мiкропрепаратiв використовували комп'ютерну систему «Aver Media». Ультраструктурне дослiдження судинноТ оболонки ока щура проводили на електронному мiкроскопi УЕМВ-100К (УкраТна) при прискорюючм напрузi 75 кВ i збiльшеннях на екранi мiкроскопа х 4000. Ультратоню зрiзи готували на ультрамiкротомi УМТП - 3М за допомогою скляних ножiв, виготовлених на приладi ССН-1.
Результати та Тх обговорен ня
При дослiдженнi гемомiкроциркуляторного русла райдужки через 6 тижнiв введення налбуфшу судиннi петлi капiлярноТ петлястоТ сiтки зiничного краю райдужки втрачають нiжний, звивистий малюнок i часто обриваються бiля зiничного краю райдужки, осктьки руйнуеться капiлярний компонент петлк Розширюються артерiоло-венулярнi анастомози i кров з артерюл скидаеться у венозне русло, минаючи зруйноваы кагнляри (рис. 1).
Рис. 1 Гемомкроциркуляторне русло райдужки очного яблука блого щура за умов 6- тижневого введення налбуф'!ну.
Мкрофото. Зб.: об. х 20, ок. х5.
Спостер^аеться змша калiбру i щтьносл судин, порушення Тх цтосп, що пiдтверджуeться морфометричними показниками. Дiаметр петлi зiничного краю райдужки зростае до 19,6±0,5 мкм (р<0,05), артерiоло-венулярний коефiцiент зменшуеться до 0,732±0,004 (р<0,05), коефiцiент звивистостi артерюл зростае до 0,62±0,02 (р<0,05). Ще глибшi змiни гемомiкроциркуляторного русла виявлено у вшкових вiдростках та власне судиный оболонцi через 6 тижыв експерименту. 1х капiлярне русло зруйноване, спостер^аеться облiтерацiя капiлярiв, геморагiТ, мiкроаневризми. Щiльнiсть сiтки обмiнних судин рiзко зменшуеться i становить 57,6±12,0 (р<0,05). Венули власне судинноТ оболонки розширеы, капiляри зруйнованi, а збереженi фрагменти капiлярiв рiзко розширенi, дiаметр Тх подекуди становить 20,0±10,0 мкм, щтьысть сiтки обмiнних судин зменшена до 60,4±2,4 (р<0,05), а показник трофiчноТ активностi тканини збiльшуеться до 60,1±2,8 мкм (р<0,05) .
Через 6 тижыв введення щурам налбуфшу пстолопчне дослщження пщтверджуе глибокi деструктивнi змши судинноТ оболонки очного яблука. Товщина власне судинноТ оболонки змiнена за рахунок досить пухкого розмщення колагенових та еластичних волокон в ТТ сполучый тканинi. Мiж волокнами значно зменшена ктькють клiтинних елементiв, трапляються поодинокi фiбробласти, макрофаги. Переважають тонкостшы, розтягненi венули. Стiнка артерiол потовщена, склерозована. Подекуди стiнка капiлярiв пошкоджена i спостерiгаеться вихiд кровi за межi судин (мiкрокрововиливи). Виявлено багато капiлярiв, в яких елементи кровi вiдсутнi, а в iнших -агрега^я еритроцитiв. Характерним е виражений паравазальний набряк. Глибок змiни виявлено й у вшковому тiлi. Волокна сполучноТ тканини розмiщенi пухко, мiж ними залягають поодинокi фiбробласти i макрофаги. Венули рiзко розширенi, контури Тх нерiвномiрнi. Артерiоли звивистi, стшки Тх склерозованi, потовщенi, в бтьшост з них спостерiгаеться агрегацiя еритроци^в, адгезiя. Капiляри вiйкового вiдростка переважно зруйноваы, стшки Тх перервы. Виразний периваскулярний набряк, крововиливи. Ештелш, що вкривае вмковий вiдросток, дезорганiзований, фрагментований. М'язовий шар вшкового тiла стоншений. Шари райдужки чiтко не диферен^юються. Венули райдужки також розширенi, контури Тх нерiвнi, покрученi. Навколо судин спостер^аеться значний набряк. Внутрiшнiй пограничний шар райдужки розшаровуеться, стоншуеться i розриваеться. Контури шару переднього еттелш нерiвномiрнi, звивистi, шар перервний. Зовышнш пограничний шар стоншений. Волокна сполучноТ тканини розмщеы пухко, спостерiгаеться набряк, склероз (рис. 2).
Рис. 2 Судинна оболонка очного яблука блого щура за умов 6-тижневого введення налбуфну. Мкрофото. Забарвлення
гематоксилном I еозином. Зб.: об. х 8, ок. х 15.
Ультра1^кроскотчне дослщження пщтверджуе виражен порушення у 1^кроциркуляторному ру^ судинноТ оболонки очного яблука щура внаслщок довготривалого опющного впливу. Просвiти значноТ кiлькостi гемокапiлярiв заповненi сладжами еритроцитiв, якi перебувають в тiсному контактi мiж собою та люменальною поверхнею ендотелiальних кттин. Цитоплазма ендотелiоцитiв наповнена преципiтатами та коагулятами. Базальна мембрана гемокапiлярiв е потовщеною, розшарованою, мiстить електронно-щiльнi депозити. Розшароваш частини базальноТ мембрани гемокапiлярiв часто перебувають в прямому контакт iз колагеновими волокнами. При спостереженш артерiолярних дiлянок мiкроциркуляторного русла вшкових вiдросткiв судинноТ оболонки через 6 тижнiв введення налбуфiну виявляються артерюли, ендотелiоцити яких мають стоншену цитоплазму ^ в бiльшостi випадкiв, своею ядровмюною частиною глибоко випинають в просв^ артерiоли. Вiдзначено, що в ядрах пошкоджених ендотелiоцитiв, якi перебувають в стаж карюрексису, переважае гетерохроматин, в них пошкоджена нуклеолема. 1нша частина ендотелiальних клiтин, що прилягае до базальноТ мембрани, дезоргашзована, а Тх цитоплазма наповнена преципiтатами та коагулятами. Ядра ендотелiальних клiтин неправильно!' форми, утворюють значну ктьюсть випиыв. Зауважено також, що люменальна поверхня ендотелюци^в утворюе значну кiлькiсть дрiбних мiкроворсинок, а цитоплазма мiстить вакуолiзованi мiтохондрiТ, в нiй мало рибосом, полюом, пiноцитозних мiхурцiв. Мiжклiтиннi контакти мiж ендотелiальним клiтинами дезорганiзованi, школи виявляються дiлянки базальноТ мембрани, що не прикрит цитоплазмою ендотелiоцита. Базальна мембрана нерiвномiрно потовщена, нечiтка. До перифершних шарiв стiнки артерiол прилягае дезоргаызована сполучна тканина, насичена пучками колагенових волокон. Люменальна поверхня ендотелiальних кттин венул утворюе мiкроворсинки, а цитоплазма вмщуе незначну кiлькiсть пшоцитозних пухирцiв, локальнi скупчення рибосом i полiсом, розширенi канальцi гранулярноТ ендоплазматичноТ сiтки. Ядра ендотелiоцитiв заповненi в основному гетерохроматином та покрик дезоргаызованою нуклеолемою. Ядра утворюють куполоподiбнi випини. Базальна мембрана ендотелюцилв потовщена, подекуди розшарована, нечiтка. Сполучна тканина судинноТ оболонки представлена дезоргашзованою основною речовиною пщвищеноТ електронноТ щiльностi та значною ктьюстю колагенових волокон. Виявлено пщвищеноТ електронноТ щiльностi фiбробласти, цитоплазма яких заповнена ппертрофованими
Рис. 3 Гемокапляр райдужки очного яблука блого щура за умов 6- тижневого введення налбуфну. Електронна
мкрофотограф'т. Зб. 4000.
Висновки
Таким чином, макро-, мiкро-, та електронно^кроскотчне дослщження судинноТ оболонки
очного яблука бтого щура за умов 6-тижневого введення налбуфшу показало глибок деструктивнi змши структури ycix и вiддiлiв. Судинна оболонка ока знаходиться на стадп декомпенсаций коли капшярний компонент зруйнований, артерюли звивистi, просв^ Ух нерiвномiрний, стiнка Ух потовщена, склерозована, венули розширенi та деформоваш.
Сполучна тканина судинноУ оболонки представлена дезоргашзованою основною речовиною пiдвищеноТ електронноУ щiльностi та значною кiлькiстю колагенових волокон
Зменшення, порiвняно з контролем, дiаметра артерiол, щiльностi сiтки обмшних судин, артерiоло-венулярного коефiцieнта, а також збтьшення дiаметра венул, коефiцieнта звивистост артерiол, показника трофiчноТ активностi тканини свщчать про деструктивнi змiни судинноУ оболонки очного яблука пщ впливом налбуфшу.
Лтература
1. Овчаренко Н.А. Динамические изменения показателей цитолиза, холестаза и липидограммы у наркозависимых больных / Н.А. Овчаренко, Л.Л. Пинский, Т.Н. Радченко [и др.] // УкраУнський журнал кшшчноТ та лабораторноУ медицини. - 2012. - Т. 7, № 4. - С. 116119.
2. Думброва Н.Е. Ультраструктурные изменения элементов хориоретинального комплекса глаза крыс после действия метилового спирта / Н.Е. Думброва, Н.И. Молчанюк // Офтальмологический журнал. - 2009. - № 5. - С. 54-57.
3. Онисько 1.О. Мiкроструктурнi змши в язиц^ викпикаш впливом малих доз отощу протягом 42-ох i 56-ти aí6 (експериментальне дослщження) / 1.О. Онисько, Р.М. Онисько, А.П. Король [та ш.] // Вюник морфологи. - 2013. - Т. 19, № 2. - С. 280-285.
4. Клименко Н.А. Морфофункциональное состояние тимуса и селезлнки при воспалении на фоне действия неселективного блокатора опиоидных пептидов налоксона / Н.А. Клименко, И.В. Сорокина, И.А. Савенко [и др.] // Експериментальна i кшшчна медицина. - 2010. - № 1. - С. 10-15.
5. Пат. №76564 U УкраУна, МПК А 61 К 31/00 СпоЫб моделювання фiзичноТ о^ощно!' залежност у щурiв/ заявники: Онисько Р.М., Пальтов 6.В., Фк В.Б., Вшьхова 1.В., Кривко Ю.Я., Якимiв Н.Я., Фпъкало О.С. ; патентовласник Львiвський нацiональний медичний ушверситет iменi Данила Галицького. - №u201207124; заявл. 12.06.2012; опубл. 10.01.2013, Бюл. №1.
6. Якимiв Н.Я. Мiкроструктурна характеристика райдужно-рогiвкового кута очного яблука щурiв при ошоУдному впливi / Н.Я. Якимiв, Ю.Я. Кривко // Свiт медицини та бюлогп. - 2013. - № 4. - С. 117-120.
7. Drug testing at school and in the workplace, final publication containing all texts produced and adopted by Committee in ethical issues and professional standards on the subject. Council of Europe, Pompidou Group: P-PG/Ethics. 2008. 5E.
8. Drugs Action Plan for 2009-2012. Notices from European Union institutions and bodies / Of. J. Eur. Union. IV (Notices). - 2008. - Vol. 326. -P. 7-25.
9. Experimental model of ocular hypertension in the rat :study of the optic nerve capillaries and action of hypotensive drugs / D. Florentina, A. Villena, L. Vidal [et al.] // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. - 2010. - Vol. 51, № 2. - P. 946-951.
Реферат
СТРУКТУРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ СОСУДИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ГЛАЗНОГО ЯБЛОКА В УСЛОВИЯХ ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ ОПИОИДА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ Пидвальна У.Е.
Ключевые слова: сосудистая оболочка, глазное яблоко, опиоид, крыса.
В научной литературе сведения о продолжительном воздействии опиоидов на структуру органов противоречивы. Имеются лишь единичные разработки проблемы развития патологических изменений органа зрения вследствие воздействия наркотических средств. Целью исследования является установление особенностей структуры и звеньев гемомикроциркуляторного русла сосудистой оболочки глазного яблока в условиях 6-недельного воздействия опиоида в эксперименте. Материал исследования представлен препаратами глаз 24 крыс с иньецированным сосудистым руслом, микро- и ультратонкими срезами сосудистой оболочки глазного яблока. Результаты исследования свидетельствуют о глубоких деструктивных изменениях структуры всех отделов сосудистой оболочки. Капиллярный компонент разрушен, артериолы извилистые, просвет их неравномерный, стенка их утолщена, склерозированна, венулы расширены и деформированы. Соединительная ткань сосудистой оболочки представлена дезорганизованным основным веществом повышенной электронной плотности и значительным количеством коллагеновых волокон. Уменьшение, по сравнению с контролем, диаметра артериол, плотности сетки обменных сосудов, артериоло-венулярного коэффициента, а также увеличение диаметра венул, коэффициента извилистости артериол, показателя трофической активности ткани подтверждают развитие деструктивных изменений сосудистой оболочки глазного яблока под влиянием налбуфина.
Summary
STRUCTURAL CHARACTERISTIC OF UVEA UNDER PROLOGNED MODELLED OPIOIDS EXPOSURE Pidvalna U. Ye.
Keywords: vascular tunic, eyeball, opioid, rat.
Present-day special literature provides contradictory information on prolonged effect produced by opioids on the structure of body organs. There are only a few of the reports focusing on the development of pathological changes in the organ of vision caused the impact of narcotic medicines. The aim of the study is to find out the characteristics of the structure and components of hemomicrocirculatory bed in uvea in a 6-week modelled exposure to the opioids. The material of the study included specimens of 24 rats with injected vascular bed, micro- and ultrathin sections of uvea. The findings demonstrate deep destructive changes in all the parts of the choroid. Capillary component is destroyed, the arterioles are sinuous, their lumen is uneven, their walls are thickened and sclerotic, and venules are dilated and deformed. The decrease in the diameter of the arterioles, the density of vascular network, arterioles-venular ratio, as well as increasing the diameter of venules, arterioles tortuosity factor, the index of the trophic activity of the tissue compared with the control group confirm the development of destructive changes in uvea caused by nalbuphine.
