CC BY
22
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XV, № 2, 2019
статистически достоверны (р=0,05). Данные 7 пациентов более +30 дней после алло-ТГСК повторно направлены на анализ. Отмечено, что из 4 пациентов со смешанным химеризмом у 2 пациентов наблюдается переход в возрастающий смешанный химеризм и 2 пациента вышли на полный донорский химеризм. У 1 пациента выявили отрицательную динамику приживления, переход на смешанный донорский химеризм.
Выводы. Информативность всех локусов метода позволяет в ранние сроки определить состояние кроветворения у пациента в пост-транплантационный период. Анализ гемопо-этического химеризма определяет развитие рецидива, отторжение трансплантата, а также характер течения болезней «трансплантат против хозяина», что облегчает задачу клиницистам при определении правильной тактики лечения после ТГСК.
Б. В. Бидерман1, У Л. Джулакян1, Д. А. Королева1, Е. Е. Звонков1, Е. А. Никитин2, А. Б. Судариков1
1 Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва
2 Государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Городская клиническая больница им. С. П. Боткина» Департамента здравоохранения г. Москвы
СТЕРЕОТИПНЫЕ АНТИГЕННЫЕ РЕЦЕПТОРЫ ПРИ ВКЛЕТОЧНЫХ ЛИМФОПРОЛИФЕРАТИВНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ
Введение. Исследования последних 20 лет показали значительную роль влияния антигена в патогенезе В-клеточных лимфопролифера-тивных заболеваний. Сужение репертуара генов вариабельного региона тяжелой цепи иммуноглобулинов (IGHV) может рассматриваться как доказательство вовлечения ограниченного набора антигенов или суперантигенов в развитие лимфом. Для некоторых заболеваний, например, для хронического лимфоцитарного лейкоза (ХЛЛ), показано существование более 200 подгрупп антиген-связывающих участков опухолевых IGHV среди неродственных случаев — «стереотипных» антигенных рецепторов (САР). 19 таких наиболее распространенных подгрупп составляют более 12 % всех случаев ХЛЛ. Для других лимфом также показано существование САР.
Цель. Сравнить особенности опухолевых IGHV и образованные ими САР при ХЛЛ, лим-фоме из клеток мантийной зоны (ЛМЗ) и при селезеночной форме лимфомы из клеток маргинальной зоны (СЛКМЗ).
Материалы и методы. В исследование включено 680 пациентов с В-ХЛЛ, 38 с СЛКМЗ и 40 с ЛМЗ. Мутационный статус генов ИГ всех пациентов был исследован в ФГБУ «НМИЦ Гематологии» МЗ РФ с 2006 по 2019 гг. Нуклеотидные последовательности генов ИГ определяли согласно методике, рекомендованной ERIC.
Результаты. Мы подтвердили существенные различия в репертуаре генов IGHV для
ХЛЛ, ЛМЗ и СЛКМЗ. Так, при ХЛЛ наиболее распространенными ЮНУ-генами являются 10НУ1-69, ЮНУ1-2 (большинство случаев без мутаций) и ЮНУ3-30, ЮНУ4-34, ЮНУ3-23 (в основном, подвергаются соматической гипермутации) — они встречаются у 40% пациентов. Наиболее часто САР встречаются при ХЛЛ у пациентов с немутированными ЮНУ-генами. Самыми распространенными подгруппами в нашей группе пациентов были CLL#1 (гены 1,5 и 7 семейств, исключая ЮНУ1-69), СЬЬ#2 (ЮНУ3-21), СЬЬ#6,7,9 (ЮНУ1-69). Наиболее распространенной подгруппой с мутированными генами и, соответственно, с благоприятным прогнозом, является СЬЬ#4 (ЮНУ4-34). В нашей выборке ЛМЗ наиболее распространенными генами являются ШНУ4-34, ШНУ3-21, ШНУ3-23, ЮНУ3-30, ЮНУ4-59-57 % всех пациентов. При этом, в отличие от ХЛЛ, ген ЮНУ4-34 чаще был немутированным. Мы обнаружили 3 пары пациентов с последовательностями СОЯ3-регионов, отвечающими признакам САР. У этих пар были перестройки ЮНУ4-34/ ЮН02-2/ЮН|6 (М^#1), 10НУ3-21/ЮН03-3/ ЮЩ6 (МСЬ#2), ЮНУ4-59/ЮЩ6 (МСЬ#3). Также выявлен один пациент с СОЯ3, высокогомологичным, описанным в литературе, случаем с перестройкой ЮНУ4-34/ЮН01-26/ЮН|6 (МСЬ#4). В группе СЛКМЗ самым частым геном являяется ЮНУ1-2-50 % всех случаев. При этом, для нашей выборки этой нозологии характерна строго аллель ЮНУ1-2*04, в то время как при
VВсероссийская научно-практическая конференция с международным участием «ГЕНЕТИКА ОПУХОЛЕЙ КРОВЕТВОРНОЙ СИСТЕМЫ -ОТ ДИАГНОСТИКИ К ТЕРАПИИ»
ХЛЛ эта аллель составляет % от всех случаев использования данного гена. Кроме того, при СЛКМЗ, в отличие от ХЛЛ, для ЮНУ1-2 количество мутированных и немутированных случаев одинаково. Возможно, по этой причине, несмотря на столь сильное сужение репертуара как ЮНУ-, так и ЮНО-генов (высоко представлены гены ЮНО3-3 и ЮНО3-10), в нашей подгруппе выявлено всего 2 пары пациентов с последовательностями СОЯ3-регионов, соответствующими признакам САР (перестройки ЮНУ1-2*04/1ОНО3-3/ЮН|5 и ЮНУ1-2*04/1ОНО3-3/ ЮН|5). При сравнении последовательностей САР между рассматриваемыми нозологиями было выявлено, что в подавляющем большинстве случаев они являются специфичными для конкретных заболеваний — не только на уровне
Санкт-Петербург 26-27 апреля 2019 г.
аминокислотных последовательностей, но и на уровне перестраиваемых генов. Единственное совпадение было обнаружено между группами ММ1 и ^#64О. СОЯ3-регионы этих групп образованы одинаковым набором генов, имеют схожие мотивы и отличаются только длиной.
Выводы. Наши результаты подтверждают влияние антигенов на патогенез лимфом и показывают, что эти антигены специфичны к различным нозологиям. Для ХЛЛ некоторые САР являются дополнительным прогностическим признаком. Продолжение изучения САР для других нозологий необходимо для развития представлений о роли антигенной стимуляции в лейкемогенезе и может также способствовать разработке новых диагностических и прогностических маркеров для данных заболеваний.
К. В. Богданов, Е. Г. Ломаиа, О. В. Мерзликина., Т. С. Никулина, Ю. В. Миролюбова, Н. Т. Сиордия, А. Ю. Зарицкий
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный Медицинский Исследовательский Центр имени В. А. Алмазова» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Санкт-Петербург
ПРОГРЕССИРОВАНИЕ МИЕЛОИДНОГО ЛЕЙКОЗА АССОЦИИРОВАНО
С ВОЗНИКНОВЕНИЕМ НОВЫХ ОНКОГЕННЫХ МУТАЦИЙ И ИЗМЕНЕНИЕМ ЭКСПРЕССИИ НЕКОТОРЫХ РЕГУЛЯТОРНЫХ ГЕНОВ
Введение. Прогрессия миелолейкоза, сопровождающаяся возникновением нового лейкоз-ного клона клеток с мутацией Cbfb-Myh11/A и полным элиминированием первоначально обнаруженного клона с мутацией Bcr-Abl/p190, описана в научной литературе, но встречается редко. Причина этого явления неизвестна.
Цель исследования. Провести мульти-факторный ПЦР-анализ онкогенных мутаций и уровней экспрессии регуляторных генов у больного ОМЛ. Оценить их возможное влияние на прогрессию заболевания.
Материалы и методы. Костный мозг (КМ) и периферическую кровь (ПК) пациента отбирали в пробирки с напылением ЭДТА: при первичном поступлении, во время лечения, при наступлении ремиссии/рецидива. После экстракции РНК и синтеза кДНК на основе обратной транскрипции было выполнено муль-тифакторное ПЦР-тестирование (TaqMan PCR/ QPCR) для определения уровней экспрессии онкогенов и регуляторных генов. Также проводили цитогенетическое исследование (ЦГ), включая FISH, и иммунофенотипирование поверхностных антигенов (CD-маркеров).
Результаты. Первоначально у больного ОМЛ (38 % бластных клеток) проводили мультифак-торный ПЦР-анализ наиболее распространенных онкогенных мутаций (n=15), что позволило обнаружить слитный онкоген Bcr-Abl/p190. При этом уровень его экспрессии составил 11% и 10 % в КМ и ПК, соответственно. ЦГ исследование, включая FISH, подтвердило наличие Ph-хромосомы или хромосомной транслокации t(9;22)(q34; q11), а также отсутствие каких-либо дополнительных хромосомных нарушений. В это же время количественное определение уровней экспрессии онкогена MycN и некоторых регуляторных генов — Spt16, Apobec3A, Casc5 — позволило обнаружить, что экспрессия первых 3 мишеней, включая MycN, оказалась выше в 1.2, 1.7 и 2.2 раза, а последнего, напротив, ниже в 3.3 раза по сравнению с контрольными образцами (норма). Спустя 1.2 месяца после начала химиотерапии (FLAG+дазатиниб), у пациента была достигнута ПКГ ремиссия и ПМО. При этом уровни экспрессии онкогена MycN и генов-регуляторов вернулись к норме. После выписки пациент продолжал принимать дазатиниб (140 мг) с целью профилактики
