CC BY
38
Таким образом, полученные в нашей работе данные могут оказаться полезными в понимании gpl 30-опосредовапных механизмов роста ряда неходжкинских В-клеточных лимфом. Роль ИЛ-6 в патогенезе этих лимфом не является чем-то неожиданным. ИЛ-6 — это мощный ростовой и дифференциро-вочный фактор В-клеток [14]. Он играет центральную роль в росте опухолевых клеток при множественной миеломе [7], а также в развитии болезни Кастельмана [18]. ИЛ-6 синтезируется опухолевым окружением при крупноклеточных лим-фомах, ассоциированных со СПИДом [3], и его ингибирование может оказывать противоопухолевый эффект [4].
Известно, что gp80 экспрессирован у значительной части больных В-ХЛЛ и ряда больных В-клеточными лимфомами низкой степени злокачественности [11]. В настоящей работе нами впервые показана высокая частота экспрессии и активации аР-рецепторного комплекса ИЛ-6 при лимфомах из клеток мантии фолликулов лимфоузлов. Эти данные нуждаются в дополнительной проверке с точки зрения того, насколько «активированный эпитопный фенотип» молекулы gpl30 реально отражает функционирование рецептора. Более того, не совсем понятно, способствует ли gpl30-onocpeAOBaHHbm сигнал росту и выживанию злокачественных лимфоцитов мантии. Эти вопросы в настоящее время нами изучаются. Их клиническая актуальность обусловлена тем, что мантийноклеточные лимфо-мы, диагностированные на основе принципов REAL-классифи-кации [6], характеризуются наихудшим прогнозом среди В-клеточных лимфом. Пятилетняя выживаемость при лимфомах из клеток мантии не превышает 30% [15], и адекватных подходов к лечению на сегодняшний день не существует.
Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований.
ЛИТЕРАТУРА /REFERENCES
1. Тупицын Н. Н. //Иммуногистохимическая диагностика опухолей человека. (Руководство для врачей-морфологов) /Ред. Петров С. В., Киясов А. А. — Казань, 1998. — С. 138—153.
2. Autissier P., De Vas J., Liautanl J., Tupitsyn N. ct al. /'/Intern. Immunol. — 1998, —Vol. 10.— P. 1881—1889.
© Коллектив авторов, 1999 УДК 616.441 -006.6-073.916;681.3
I Г. Глазкова, Л. Ф. Романова, Е. Е. Станякина, С. В. Ширяев
СТАТИСТИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА УРОВНЕЙ ТИРЕОИДНЫХ ГОРМОНОВ И ОПУХОЛЕВЫХ МАРКЕРОВ В ДИАГНОСТИКЕ УЗЛОВЫХ ОБРАЗОВАНИЙ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
НИИ клинической онкологии
Щитовидная железа (ЩЖ) является жизненно важным органом, она отвечает за продукцию гормонов, обеспечивающих полноценное физическое, половое и интеллектуальное
cance since mantle-cell lymphomas diagnosed by the REAL classification [6] have the poorest prognosis of all B-cell lymphomas with the 5-year survival 30% or less [15] and there is no adequate treatment of the disease so far.
This study was supported by the Russian Foundation for Fundamental Research.
3. Emilie D., Peuchmaur М., Maillot М. C. et al., //J. clin. Invest. — 1990. — Vol. 86. — P. 148—159.
4. Emilie D., Coumbaras J., Raphael M. et al. //Blood. — 1991. — Vol. 80. — P. 498—504.
5. Ferlin-Bezombes М., Jourdan М., Liautanl J. et al. //J. Immunol. — 1998. — Vol. 161. — P. 2692—2699.
6. Harris N. L„ Jaffe E. S., Stein H. et al. //Blood. — 1994. — Vol. 84, N 5. — P. 1361—1392.
7. Kawano M„ Hirano Т., Matsuda T. et al. //Nature. — 1988. — Vol. 332. — P. 83—85.
8. Kishimoto Т., Akira S., Narasaki S. et al. //Blood. — 1995. — Vol. 86, N 4. — P. 1243—1254.
9. Klein B. //Cuit. Opin. Haematol. — 1998.— Vol. 5. — P. 186—191.
10.Klein B., Zhang S. G., Jourdan M. et al. //Blood. — 1989. — Vol. 73. — P. 517—526.
W.Lavabre-Bertrand Т., Exbrayat C„ Liautard J. ct al. //Brit.
J. Haematol. — 1995. — Vol. 91. — P. 871—877.
12.Liautard J., Gaillard J. P., Mani J. C. et al. //Eur. Cytokine
Network. — 1994. — Vol. 5. — ■ P. 293—300.
13.Liautard./., Sun R. X., Cotte N. et al. //Cytokine. — 1997. — Vol. 9, N4. — P. 233—241.
14.Snick V. //Ann. Rev. Immunol. — 1990. — Vol. 8. — P. 253—257. 15.The Non-Hodgkin’s lymphoma classification project //Blood. — 1997. — Vol. 89. — P. 3909—3918. lb.Tupitsyn N. N.. Frenkel M. A., Rudinskayu T. D. et al. //Int. J. Cancer. — 1996. — Vol. 68, N 2. — P. 160—163.
17.Tupitsyn N.. Kadagidze Z, Gaillard J.-P. et al. //J. clin. Lab. Hacmat. — 1998. — Vol. 20. — P. 345—352.
18.Yoshizaki K., Matsuda Т., Nishimoto N. ct al. //Blood. — 1989. -- Vol. 74. — P. 1360—1367.
Поступила 15.12.98 / Submitted 15.12.98
T.G.Glazkova, L.F.Romanova, E.E.Stanyakina, S.V.Shiriayev
STATISTICAL EVALUATION OF THYROID HORMONES AND TUMOR MARKERS IN DIAGNOSIS OF THYROID NODULAR LESIONS
Institute of Clinical Oncology
The thyroid is a vital organ that produces hormones contributing to correct physical, sexual and intellectual development and growth, adequate metabolism, functioning of
развитие, рост организма, адекватный обмен веществ, работу многих органов и систем. Являясь одним из главных органов-мишеней радиационного воздействия, ЩЖ обладает исключительной способностью избирательного накопления поступившего в организм йода, в том числе и радиоактивного. Известно, что даже диагностические дозы радиоактивного йода, используемые для оценки его внутритиреоидного обмена в функциональных пробах, могут способствовать озло-качествлению ткани ЩЖ [9].
В последние годы к ЩЖ в медицине привлечено пристальное внимание в связи с ростом тиреоидной патологии в целом, что, вероятно, вызвано последствиями аварии на Чернобыльской АЭС и другими неблагоприятными экологическими факторами [6]. За 20 лет, с 1971 по 1990 г., заболеваемость раком ЩЖ в среднем по нашей стране увеличилась с 3,9 до 5,1 на 100 ООО населения. Женщины оказались в 3—5 раз более подвержены этому заболеванию. Так, в 1995 г. заболеваемость раком ЩЖ по стране для мужчин составила 0,4, а для женщин — 2,0 ( в Москве — 0,5 и 1,7 соответственно) [2, 7].
В проблеме ЩЖ дифференциальная диагностика узловых образований представляет наибольшие трудности [3, 8]. Для ее решения в настоящее время широко применяются ультразвуковые методы, сцинтиграфия, цитологический анализ тонкоигольного пунктата узла, а также метод радиоиммунологического анализа гормонов ЩЖ и гипофиза. Последний обладает достаточно высокой чувствительностью, специфичностью, точностью и воспроизводимостью результатов, а также отсутствием радиоактивной нагрузки на пациента, поскольку производится in vitro [5].
Цель данной работы — статистическая оценка роли основных тиреоидных гормонов и опухолевых маркеров, исследованных методом радиоиммунологического анализа плазмы крови, дифференциальная диагностика злокачественных и доброкачественных заболеваний ЩЖ.
Материалы и методы. Материалом исследования послужили данные
о 124 больных с узловыми образованиями ЩЖ, которым было проведено лечение в ОНЦ РАМН в период с 19R7 по 1996 г. Возраст больных колебался от 20 до 70 лет. Женщин было в 3 раза больше, чем мужчин, что отражает половую структуру заболеваемости для этой патологии. Прослсжсн-ность судьбы больных с диагнозом рака ЩЖ в течение 5 лет и более составила 70%.
Все наблюдения в соответствии с клиническим диагнозом заболевания были разделены на 5 групп. В 1-ю группу вошли 26 пациентов с С-клеточ-ным (медуллярным) раком, во 2-ю — 37 пациентов с фолликулярной и папиллярной формами рака, в 3-ю — 14 пациентов с узловым зобом, в 4-ю — 28 пациентов с аденомами и в 5-ю — 19 пациентов с аутоиммунным тирс-оидитом. Распределение больных в структуре заболеваний ЩЖ приведено на рис. 1.
В настоящей работе изучена роль 7 показателей, оцененных методом радиоиммунологического анализа, содержания в плазме крови следующих гормонов: тиреотропного — ТТГ (МГ1 «ДИАС», Красноярск), трийодтиро-нина — Т3 и тироксина — Т4 (СП «БЕЛОРИС», Беларусь), кальцитони-на — КТ (фирма CIS, Франция), тирсоглобулииа — ТГ и антител к тиреог-лобулину — АтТГ (ПО ИБОХ, Беларусь), раково-эмбрионального антигена — РЭА (СП «БЕЛОРИС», Беларусь). Показатели РЭА, КТ и ТГ одновременно являются и опухолевыми маркерами.
Для статистической обработки данных применен пакет прикладных программ АСТА [4, 6], разработанных в лаборатории медицинской кибернетики ОНЦ РАМН (руководитель Т. Г. Глазкова, 1991 г.). Достоверность результатов подтверждена на основе критериев согласия t Стьюдента, у} Пирсона и точного критерия Фишера [ 1, 10].
many organs and systems of the body. The thyroid is a main radiation target and demonstrates a unique ability to accumulate radioactive iodine. As known, even diagnostic doses of radioactive iodine used to evaluate intrathyroid iodine exchange may promote thyroid tissue malignization [9].
Over the last years there is an increasing interest to the thyroid worldwide due to a rise in thyroid disease prevalence probably caused by the Chernobyl catastrophe and other poor environmental factors [6]. Over the last two decades (1971-1990) thyroid cancer incidence in Russia increased from 3.9 to 5.1 per 100,000 population, with women developing this malignancy 3-5-fold as frequently as men. The 1995 thyroid cancer incidence in men was 0.4 versus 2.0 in women (cf., 0.5 vs 1.7, respectively, in Moscow) [2,7].
Differential diagnosis of thyroid lesions is difficult [3,8]. The diagnostic armamentarium includes ultrasound, scintigraphy, fme-needle biopsy as well as radioimmunological assay of thyroid and pituitary hormones. The last method demonstrates a rather high sensitivity, specificity, accuracy and reproducibility of results while saving the patient from radiation because the tests are made in vitro [5].
The purpose of this study was to evaluate statistically the role of thyroid hormones and tumor markers as studied by immunological assay of blood plasma in differential diagnosis of malignant and benign lesions of the thyroid.
Materials and Methods. The study was performed in 124 cases with thyroid nodular lesions managed at the CRC RAMS during 1987-1996. The patients’ age ranged from 20 to 70 years, the number of women was threefold greater as compared to men which reflected the gender pattern of thyroid pathology. 70% of the cases with thyroid cancer were followed-up for 5 years or more.
The eases were stratified into 5 groups with respect to diagnosis: group
1 consisted of 26 cases with C-ccll (medullary) cancer, groups 2 consisted of 37 patients with follicular and papillary cancers, group 3 consisted of 14 cases with nodular goiter, group 4 comprised 28 adenoma patients and group 5 consisted of 19 patients with autoimmune thyroiditis. Fig. 1 presents distribution of the eases with rcspcct. to thyroid pathology.
1 2
4
Рис. 1. Распределение наблюдений по заболеваниям ЩЖ.
1 — аденома (23%); 2 — аутоиммунный тиреоидит (15%); 3 — медуллярный рак (30%); 4 — дифференцированные формы рака (21 %); 5 — узловой зоб (11 %).
Fig. 1 .Case distribution with respect to thyroid lesion.
1, adenoma (23%); 2, autoimmune thyroiditis (15%); 3, medullary cancer (30%); 4, differentiated carcinoma (21%); 5, nodular goiter (11%).
Таблицаї Tablel
Статистическая характеристика показателей тиреоидного комплекса для заболеваний ЩЖ (X ± т)
Statistical characteristics of the thyroid complex for thyroid lesions (Mean+S.D.)
Рак Заболевания ЩЖ
Показатель медуллярный фолликулярная и папиллярная формы узловой зоб аденома аутоиммунный тиреоидит
n = 26 Г- со II с п = 14 n = 28 n = 19
РЭА, мкг/л CEA, mcg/l 127,2 ± 19,3 4,6 ±0,7 2,7 ± 1,0 4,3 ±0,5 5,8 ± 1,8
КТ, нг/л CT, ng/l 2502 ± 523 5,4 ±0,5 6,5 ± 2,5 5,7 ± 1,2 7,9 ±3,0
ТГ, нг/мл TG, ng/ml 36,2 ±7,3 168,2 ± 33,1 206,1 ±73,2 139,1 ± 24,2 28,1 ±11,4
T4, нмоль/л T4, nmol/l 94,1 ±6,7 105,3 ±5,3 102,4 ±8,5 102,6 ±7,9 81,4 ± 13,8
T3, нмоль/л T3, nmol/l 1,5 ± 0,1 1,7 ±0,4 1,9 ±0,2 1,2 ±0,1 1,6 ±0,2
ТТГ, мЕД/л TSH, mU/l 3,9 ± 1,2 2,2 ±0,5 1,5 ±0,4 3,1 ± 1,4 7,5 ± 2,6
Parameter medullary n = 26 follicular п = 37 nodular goiter n = 14 adenoma n = 28 autoimmune thyroiditis n = 19
Cancer Thyroid lesions
Таблица 2 Table 2
Распределение частоты показателя АтТГ по уровням разведения плазмы крови для заболеваний ЩЖ (в процентах)
Distribution of AbTG (%) with respect to plasma dilution in thyroid lesions
Уровень разведения плазмы, ЕД Медуллярный рак Фолликулярная и папиллярная формы рака Узловой зоб Аденома Аутоиммунный тиреоидит
0 76,9 52,8 71,4 64,3 0
1—10 19,2 22,2 21,4 14,3 0
11 — 100 0 16,6 7,2 3,5 5,3
101 — 1 000 3,9 5,6 0 14,3 42,1
1001—10 000 0 2,8 0 3,6 42,1
Выше 10 000 0 0 0 0 10,5
Plasma dilution (units) Medullary cancer Follicular cancer Nodular goiter Adenoma Autoimmune thyroiditis
Результаты и обсуждение. Средние значения и стандартные ошибки средних для 6 количественных показателей приведены в табл. 1, а распределение последнего (7-го) показателя АтТГ по уровням разведения плазмы крови — в табл. 2.
Как видно из табл. 1 и 2, наибольшие статистические различия средних значений показателей при разных заболеваниях отмечены для РЭА, КТ и АтТГ. Средние значения показателей РЭА (127,2 ± 19,3 мкг/л) и КТ (2502 ± 523 нг/л) при медуллярном раке достоверно (р < 0,01) превысили те же значения при фолликулярной и папиллярной формах рака и при доброкачественных поражениях ЩЖ, при которых значения РЭА колебались от 2,7 до 5,8 мкг/л, а КТ — от 5,4 до 7,9 нг/л.
Wc analyzed plasma concentrations of 7 parameters as measured by radioimmunological assay: thyroid-stimulating hormone, TSH (DIAS, Krasnoyarsk), triiodothyronine, T3, and thyroxine, T4 (BELORIS, Belarus), calcitonin, CT (CIS, France), thyroglobulin, TG, and antibody to thy-roglobulin AbTG (IBOX, Belarus), carcinocmbryonic antigen, CEA (BELORIS, Belarus); the CEA, CT and TG being also tumor markers.
Statistical analysis of data was performed using an ASTA application package [4,6] developed at the Medical Cybernetics Laboratory, CRC RAMS, headed by T.G.Glazkova, in 1991. Significance of differences was assessed by Student’s /-test, Pirson’s x2-tcst and Fisher’s exact test [1,10].
Results and Discussion. Mean values and their standard deviations for 6 quantitative parameters are given in table 1, distribution of AbTG with respect to plasma dilution is shown in table 2.
Уровень АтТГ выше 1000 ЕД достоверно чаще {р < 0,01) наблюдался при аутоиммунном тиреоидите по сравнению со всеми другими заболеваниями (см. табл. 2); в разведениях выше 100 ЕД случаи тиреоидита встретились в 94,7% (против 0—17,9% при других заболеваниях).
Средние уровни ТГ при медуллярном раке и аутоиммунном тиреоидите фактически находились в пределах нормы (до 60 нг/мл). При узловом зобе уровень ТГ был достоверно повышен (р < 0,05).
Средний уровень Т4 при всех заболеваниях находился в пределах нормы (81,4 ± 13,8—105,3 ± 5,3 нмоль/л).
Средний уровень Т-. достоверно понижен (р < 0,05) по сравнению с нормой только при аденоме (1,2 ± 0,1 нмоль/л).
Средний уровень ТТГ при аутоиммунном тиреоидите имел тенденцию к росту (7,5 ± 2,6 мЕД/л) по сравнению с остальными заболеваниями, что. вероятно, объясняется гипотиреоидным состоянием больных. При всех морфологических формах рака и аденоме показатель ТТГ находился в пределах нормы (2,2 ± 0,5—3,9 ± 1,2 мЕД/л), а при узловом зобе показатель соответствовал нижним пределам нормы (1,5 ± 0,4 мЕД/л), что, возможно, обусловлено высоким уровнем ТГ и не превышающими верхнюю границу нормы уровнями Т3 и Т4.
Близость средних значений большинства показателей при разных заболеваниях ЩЖ и большой разброс их индивидуальных значений вызвали необходимость изучить корреляции между показателями, которые могли внести дополнительную диагностическую информацию. Идеально каждый показатель должен иметь непосредственную корреляцию с диагнозом.
На рис. 2 приведена дендрограмма [1], то есть граф, который отражает иерархию связи исследуемых показателей с клиническим диагнозом, представленным пятью нозологическими единицами. В нижней части рисунка дана шкала достоверности выявленных связей. Так, на уровне Р = 99% (ошибка составляет менее 1%>) статистически связаны показатели РЭА и КТ (они одинаково дифференцируют заболевания) и, следовательно, один из них (менее информативный) может быть исключен; на 95% уровне достоверности оказались связанными между собой сразу три показателя: 14 (РЭА—КТ), а на уровне 90%) все показатели разделились на два независимых комплекса: Т3 (ТТГ—АтТГ) и ТГ (Т4— (РЭА—КТ)). Однако оказалось, что непосредственно с клиническим диагнозом не связан ни один из 7 показателей (р > 0,1), что свидетельствует о необходимости использовать для дифференциальной диагностики их совокупность.
В поисках дополнительных диагностических критериев были вычислены корреляции Я между парами показателей для каждого из 5 заболеваний. Величина Я может принимать значения от —1 до +1, значение Я, равное нулю, означает отсутствие линейной статистической связи; с увеличением абсолютного значения Я возрастает теснота связи, причем положительное значение Я свидетельствует о прямой связи (с ростом одного показателя растет и второй), а отрицательное значение Я — об обратной связи (с ростом одного показателя второй уменьшается).
С помощью статистических критериев согласия [1, 10] нами выявлены 6 пар показателей, корреляции для которых
TTr/TSH АтТГ /AbTG
Т3
Т4
РЭА/СЕА
КТ/СТ
TT/TG
КЛИНИЧЕСКИЙ
ДИАГНОЗ
ЗАБОЛЕВАНИЙ ЩЖ CLINICAL DIAGNOSIS
Р 90% 95% 99%
Рис. 2. Дендрограмма коррелированности показателей с клиническим диагнозом.
Fig. 2. Tree diagram of parameter-to-clinical diagnosis correlation.
As seen, CEA, CT and AbTG demonstrated the greatest differences with respect to thyroid disease. Mean values of CEA (127.2±T9.3 mcg/1) and CT (2502±523 ng/1) in medullar cancer were significantly (p<0.01) higher as compared to follicular and papillary cancer and benign thyroid lesions with CEA varying from 2.7 to 5.8 mcg/1 and CT from 5.4 to 7.9 ng/1.
AbTG levels higher than 1000 units were significantly (/7<0.01) more frequent in cases with autoimmune thyroiditis as compared to all other lesions (see table 2); the dilutions higher than 100 units were associated with thyroiditis in 94.7%) versus 0-17.9% in other lesions.
Mean TG values were within normal (below 60 ng/ml) in medullar cancer and autoimmune thyroiditis, while increasing significantly (p<0.05) in nodular goiter.
T4 values were within normal range (81.4±13.8-105.3±5.3 nmol/1) in all diseases.
Mean T3 content was significantly decreased (p<0.05) as compared to normal in adenoma only (1.2±0.1 nmol/1).
Mean TSH level in autoimmune thyroiditis demonstrated an increasing trend (7.5±2/6 mU/1) as compared to other diseases probably due to hypothyroidism. The TSH content was within normal range (2.2±0.5-3.9±1.2 mU/1) in all morphological cancer types and near the lower normal limit (1.5±0.4 mU/1) in nodular goiter which was probably due to high TG and normal T3 and T4 levels.
The uniformity of mean values of most parameters irrespective of disease type and the large deviation of individual values made reasonable analysis of correlations between the parameters for diagnostic significance. Ideally each parameter should be directly related to diagnosis.
Fig.2 is a tree diagram [1 ] reflecting hierarchy of relations between the tested parameters and clinical diagnosis. Significance of the discovered relations is given at the bottom of the figure. As seen, the relationship of CEA and CT
Таблица 3 Table 3
Корреляции уровней гормонов ЩЖ и гипофиза Thyroid and pituitary hormone correlations
Пара показателей Медуллярный рак Фолликулярная и папиллярная формы рака Узловой зоб Аденома Аутоиммунный тиреоидит
T3 -T4/T3-T4 0,47 0,20 0,38 0,59 0,88
Т3 —ПГ/Тз-TSH -0,20 -0,15 0,68 -0,42 -0,52
Т4 - TTr/T4-TSH -0,15 -0.34 0,13 -0,46 -0,58
КТ—ТТГ/CT-TSH -0,21 -0,03 -0,16 -0,03 0,89
РЭА — КТ/СЕА-СТ -0,07 -0.47 -0,17 -0,03 -0,07
РЭА —ТТГ/CEA-TSH -0,21 -0,15 0,19 0,36 -0,05
Parameter pairs Medullary cancer Follicular cancer Nodular goiter Adenoma Autoimmune thyroiditis
достоверно отличаются (р < 0,05) от значений Я при других заболеваниях (табл. 3). Корреляции представлены также на рис. 3 в виде столбиковых диаграмм. Чем выше столбик, тем существенней корреляция.
При анализе парных корреляций выявлена тесная положительная связь пары Т3—Т4 с максимальным значением Я = 0,88 при аутоиммунном тиреоидите. Однако эта связь не несет диагностической нагрузки, так как имеет положительные и достаточно большие значения при всех заболеваниях. Корреляция пары Т, — ТТГ диагностически важна, так как коэффициент Я = 0,68 оказался положительным только при узловом зобе, коэффициенты при всех других заболеваниях оказались отрицательными (от -0,52 до -0,02). Для пары КТ — ТТГ тесная положительная связь (коэффициент Я = 0,89) обнаружена только при аутоиммунном тиреоидите, остальные коэффициенты отрицательные (от -0,21 до -0,03); в то же время выявилась отрицательная корреляция для пары Т4 — ТТГ при тиреоидите (Я -0,58) и аденоме (Я = -0.46) и положительная для РЭА — ТТГ (Я = 0,36) при аденоме. Для папиллярной и фолликулярной форм рака характерна отрицательная корреляция РЭА — КТ (Я = -0.47), которая статистически незначима при всех остальных заболеваниях.
В табл. 4 приведены наиболее важные критерии для дифференциальной диагностики 5 заболеваний ЩЖ. Обсуждая результаты, приведенные в табл. 4. следует отметить следующее:
1) для медуллярного рака типичными являются высокие (выше нормы) значения РЭА (выше 10 мкг/л) и КТ (выше 20 нг/л), в то же время уровни ТТГ, ТГ, Т;, и Ат'ГГ находя тся в пределах нормы, при этом отсутствуют какие-либо связи между показателями (кроме корреляции пары Г, — Т4, проявившейся при всех без исключения заболеваниях);
2) для папиллярной и фолликулярной форм рака характерны низкие (в пределах нормы) значения РЭА и КТ (больше 80% случаев); повышенные (выше 60 иг/мл) значения ТГ (65%) случаев) и в пределах нормы (менее 10 ЕД) значения АтТГ (75% случаев), причем повышенные значения АтТГ (выше 10 ЕД) в 75% случаев сочетались с низкими (менее 60 нг/мл) значениями ГГ; корреляция РЭА — КТ отрицательна;
demonstrates a 99% statistical significance (probability of error is less than 1%), i.e. these parameters are equally powerful in differentiation of thyroid diseases and one of them (less informative) may be excluded from analysis; the link between three parameters T4 - (CEA-CT) has a 95% significance, while at a 90% significance the parameters split into two independent groups: T, - (TSH-AbTG) and TG - (T4 -(CEA-CT)). However, none of the 7 parameters was directly related to clinical diagnosis (/;>0.1) which suggested that several parameters should be used to make the differentiation.
To find additional diagnostic criteria we calculated correlations R between parameter pairs for each of the 5 lesions. R values may range within -1 to +1. R-0 means no linear statistical relationship; the relationship is growing with increase in R absolute value: positive values are indicative of direct relationship (one parameter is increasing together with the other) while negative R demonstrate inverse relationship (one parameter is decreasing as the other is growing).
We used goodness-to-fit criteria [1,10j to find b parameter pairs whose correlations were significantly different (/;<0.05) from R values for other diseases (table 3). These correlations are also presented as a bar diagram in fig.3. The higher the bar the more significant the correlation.
The analysis of pair correlations discovered a close positive relationship of the T,-T4 pair with a maximal 7?=0.88 in autoimmune thyroiditis. However, this relationship has no diagnostic meaning since its value is positive and rather high in all the lesions. The T-.-TSH correlation is diagnostically valuable, because coefficient T^O.68 was positive only in nodular goiter while being negative in all the other lesions (range -0.52 to -0.02). The CT-TSH pair demonstrated a close positive relationship (/?=0.89) only in autoimmune thyroiditis, the remaining coefficients being negative (range -0.21 to -0.03); the T4-TSH pair showed a negative relationship in thyroiditis (R= -0.58) and adenoma (R= -0.46) while the CEA-TSH pair (R=0.36) showed a positive relationship in adenoma. Papillary and follicular cancers were characterized by negative CEA-CT relationship (R= -0.47) which failed to reach statistical significance m all other lesions.
Тз -T4/T3-T4
T3 -TTI7T3-TSH
MP/MC ДР/DC УЗ/NG ЛД/AD AT/AT
T4 - TTr/T4-TSH
1,0 0,8 0,6 -■ 0,4--0,2 0 -0,2 -0,4 -0,6 -0,8 + -1,0
L
-0,15
1,0
0,4
0,2
0
-0,2
-0,4
-0,6
-0,8
-1,0
MP/MC ДР/DC УЗ/NG АД/AD AT/AT KT-TTT/CT-TSH
0,13
-0,34
-0,46
-0,58
1,0 0,8 --0,6 -■ 0,4--0,2 ■■ 0 -0,2 -0,4---0,6 ---0,8 -1,0
-0,03
-0,21
-0,16
-0,03
MP/MC ДР/DC УЗ/NG АД/AD AT/AT
РЭА - KT/CEA-CT
MP/MC ДР/DC УЗ/NG ЛД/AD РЭА —ТТГ/CEA-TSH
0,03 °.°7 |«У!5М*|
■ -0,07 -0,47 -0,17
1,0 0,8 --0,6 0,4 0,2 0 -0,2 -0,4 -0,6 -0,8 -1,0
0,36
0,19
-- -0,21
-0,15
MP/MC ДР/DC УЗ/NG ЛД/AD AT/AT
0,89
AT/AT
-0,41
MP/MC ДР/DC УЗ/NG ЛД/AD AT/AT
Рис. 3. Достоверные корреляции (p < 0,05) между показателями в дифференциальной диагностике 5 заболеваний ЩЖ.
МР — медуллярный рак; ДР — дифференцированные формы рака; УЗ — узловой зоб; АД — аденома; АТ — аутоиммунный тиреоидит. По оси ординат — коэффициент корреляции R с положительным и отрицательным знаком. Темным цветом выделены достоверные корреляции, значимые для дифференциальной диагностики.
Fig. 3. Significant correlations (р<0.05) between the parameters in the differentiation between 5 thyroid lesions.
MC, medullary cancer; DC, differentiated cancer; NG, nodular goiter; AD, adenoma; AT, autoimmune thyroiditis. Numbers on the у axis demonstrate coefficient of correlation R taking positive or negative values. Dark segments show significant correlations for differential diagnosis.
3) при узловом зобе значения РЭА, КТ и ТТГ' практически для всех случаев лежат в пределах нормы, но повышены значения ТГ (в 78% случаев) и Т. (в 50%); типичной для узлового зоба является положительная корреляция Т-, —ТТГ’;
4) для аденомы характерны низкие (в пределах нормы) значения РЭА, КТ, Т4 и АтТГ, показатель Т, в 61%) случаев имеет
Table 4 summarizes most important differentiation criteria for the 5 thyroid lesions in question. Analysis of data in table 4 discovered the following:
1) medullar cancer was characterized by high (above the normal) CEA (more than 10 mcg/1) and CT (more than 20 ng/1) values, while TSH, TG, T3 and AbTG were within the
значения ниже нормы, а ТГ в 68% случаев превышает норму; положительная корреляция обнаружена для пар РЭА — ТТГ, Т3 — Т4, отрицательные — для Т3 — ТТГ и Т4 — ТТГ;
5) аутоиммунный тиреоидит достоверно (р < 0,001) дифференцируется от 4 других заболеваний высоким (выше 1000 ЕД) значением АтТГ (52,6% случаев), а в целом повышенные значения АтТГ (выше 100 ЕД) наблюдались в 94,7% и сочетались с низким уровнем ТГ (менее 60 нг/мл) в 90%) случаев. Кроме того, в 33% случаев при тиреоидите наблюдался сниженный уровень Т4 и в 40% случаев — повышенный уровень ТТГ. При этом заболевании выявлены положительные корреляции пар КТ — ТТГ, Т-. —Т4 и отрицательные — Т3 — ТТГ, Т4 — ТТГ и РЭА — ТТГ.
Из проведенного статистического анализа следует, что папиллярная и фолликулярная формы рака наиболее трудны для диагностики. Фактически они не имеют характерных отличий в исследованных показателях, за исключением превышающего норму уровня ТГ, который встречается в 65% случаев.
Отмечено, что по средним значениям отдельно взятых показателей папиллярная и фолликулярная формы рака имеют больше сходства с доброкачественными заболеваниями ЩЖ (аденомой, узловым зобом) и четко отличаются от медуллярного рака. Их дифференциальная диагностика представляет значительную проблему и требует использования многофакторных математических методов анализа.
Выводы. 1. Статистическая оценка уровней гормонов щитовидной железы, гипофиза и опухолевых маркеров, исследованных методами радиоиммунологического анализа, показала их высокую значимость в качестве неинвазивных тестов в диагностике заболеваний ЩЖ, что подтвердилось клиническими наблюдениями.
2. Высокие уровни РЭА (выше 10 мкг/л) и КТ (выше 20 нг/л) при нормальных уровнях АтТГ (до 10 ЕД) достоверно (р < 0,05) диагностируют С-клеточный (медуллярный) рак. Высокие уровни АтТГ (выше 100 ЕД), сочетающиеся с низкими уровнями РЭА (до 10 мкг/л), КТ (до 10 нг/л) и ТГ (до 60 нг/мл) достоверно (р < 0,05) свидетельствуют об аутоиммунном тиреоидите.
3. Найдены характерные парные корреляции показателей, которые статистически достоверно (р < 0,05) отличны как от нуля, так и от корреляций при других заболеваниях. Так, для папиллярной и фолликулярной форм рака характерна отрицательная корреляция пары РЭА — КТ, для аденомы — положительная РЭА — ТТГ и отрицательные корреляции ТТГ с Т3 и Т4, при аутоиммунном тиреоидите связь показателя ТТГ с КТ положительна, а с РЭА, Т3 и Т4 — отрицательна; для узлового зоба выявлены положительные корреляции ТТГ с Т3; для медуллярного рака достоверных корреляций не найдено.
4. Для показателей РЭА, КТ и АтТГ найдены статистически значимые интервалы значений, которые достоверно диагностируют медуллярный рак и аутоиммунный тиреоидит. Однако дифференциальная диагностика папиллярной и фолликулярной форм рака, аденомы и узлового зоба с помощью отдельных показателей затруднительна и требует их комплексной оценки.
normal range, and no correlation between the parameters (except for the T3-T4 pair that demonstrated correlation in all the diseases);
2) the papillary and follicular cancer cases presented with low (within the normal) CEA and CT values (more than 80%) of the cases), elevated (over 60 ng/ml) TG (65%) and normal (less than 10 units) AbTG {15%) values, the elevated (higher than 10 units) AbTG concentrations in 75% of the cases were associated with low (under 60 ng/ml) TG levels; CEA-CT correlation was negative;
3) practically all the cases with nodular goiter had normal CEA, CT and TSH and elevated TG (78%) and T3 (50%) concentrations; positive T3-TSH correlation was typical of nodular goiter;
4) the adenoma cases had typically low (within normal) CEA, CT, T4 and AbTG levels; T3 was below the normal level in 61% and TG was higher than the normal content in 68% of the cases; the CEA-TSH, T3-T4 pairs showed positive and T3-TSH, T4-TSH pairs negative correlations;
5) autoimmune thyroiditis was differentiated in a statistically significant manner (/;<0.001) from the remaining 4 diseases by high (above 1000 units) AbTG (52.6%) level; elevated AbTG (above 100 units) content was found in 94.7% and was associated with low TG (less than 60 ng/ml) in 90%) of the cases. Besides, 33%o of thyroiditis cases presented with decreased T4 level while 40% had elevated TSH. This lesion was characterized by positive correlation of the CT-TSH, T3-T4 and negative correlation of the T3-TSH, T4-TSH and CEA-TSH pairs.
The analysis shows that papillary and follicular thyroid cancer types are most difficult to differentiate from other thyroid lesions. They have actually no characteristic differences in the tested parameters except for TG elevation which was encountered in 65%> of the cases.
As to mean values of individual parameters the papillary and follicular cancers demonstrated similarity to benign thyroid lesions (adenoma, nodular goiter) and were evidently different from medullary cancer. Their differential diagnosis is a difficult problem and requires multifactorial mathematical analysis.
Conclusions. 1. Statistical analysis of thyroid/pituitary hormone and tumor marker concentrations as measured by radioimmunological assay found these parameters highly valuable non-invasive tests to be used in the diagnosis of thyroid lesions.
2. High CEA (above 10 mcl/1) and CT (above 20 ng/1) together with normal AbTG (lower than 10 units) levels differentiated in a statistically significant manner C-cellular (medullary) cancer. High AbTG (above 100 units) and low CEA (under 10 mcg/1), CT (under 10 ng/1) and TG (under 60 ng/ml) levels are indicative of autoimmune thyroiditis, the difference being statistically significant (/?<0.05).
3. There are characteristic pair correlations which differ from zero and from correlations particular for other lesions in a statistically significant manner (/?<0.05). For instance, papillary and follicular thyroid cancers are characterized by negative correlation of the CEA-CT pair, while adenoma shows positive CEA-TSH and negative TSH-T3 and TSH-T4 correlations, autoimmune thyroiditis demonstrates a positive
Таблица 4 Table4
Типичные значения показателей и парных корреляций для разных заболеваний ЩЖ Typical values of individual parameters and pair correlations with respect to disease type
Заболевание Типичные для указанного заболевания уровни показателей Отношение уровня показателя к норме (N) Частота наблюдений, % Достоверные (p < 0,05) корреляции пары показателей
положительные отрицательные
Медуллярный рак РЭА > 10 мкг/л > N 100
Medullary cancer СЕА > 10 mcg/l
КТ > 20 нг/л > N 100
СТ > 20 ng/l
ТГ < 60 нг/мл N 75
TG < 60 ng/ml
Т3 < 1,5 нмоль/л N 64
То < 1,5 nmol/l
АтТГ < 10 ЕД N 96
AbTG < 10 units
Фоликуллярная РЭА <10 мкг/л N 81 РЭА — КТ
и папиллярная СЕА < 10 mcg/l СЕА-СТ
формы рака КТ < 20 нг/л N 100
Follicular cancer СТ < 20 ng/l
ТГ > 60 нг/мл > N 65
TG > 60 ng/ml
Тг (1,0—1,7) нмоль/л N 70
Т3 (1,0-1,7) nmol/l
АтТГ > 10 ЕД > N 25
AbTG > 10 units
Узловой зоб РЭА < 10 мкг/л N 100 Т3 — ТТГ
Nodular goiter СЕА < 10 mcg/l t3-TSH
КТ < 20 нг/л N 100
СТ < 20 ng/l
ТГ > 60 нг/мл > N 78
TG > 60 ng/ml
Т3 > 1,9 нмоль/л > N 50
Т3 > 1,9 nmol/l
АтТГ < 100 ЕД N 100
AbTG < 100 units
Аденома РЭА < 10 мкг/л N 97 т3-т4 Т3 - ТТГ
Adenoma СЕА < 10 mcg/l Т3-Т4 T3-TSH
КТ < 20 нг/л N 97 т4 - ТТГ
СТ < 20 ng/l T4-TSH
ТГ > 60 нг/мл > N 100
TG > 60 ng/ml
Т3 < 1,2 нмоль/л < N 68
Т3 < 1,2 nmol/l
АтТГ < 10 ЕД N 61
AbTG < 10 units
Аутоиммунный РЭА <10 мкг/л N 78 Т3-Т4 Т3-ТТГ
тиреоидит СЕА < 10 mcg/l Т3-Т4 T,-TSH
Autoimmune КТ < 20 нг/л N 100 КТ -ТТГ Т4 -ТТГ
thyroiditis СТ < 20 ng/l CT-TSH T4-TSH
ТГ < 60 нг/мл N 90 РЭА — ТТГ
TG < 60 ng/ml CEA-TSH
ТТГ > 5,0 мЕД/л > N 63
TSH > 5,0 munits/l
АтТГ > 100 ЕД > N 95
AbTG > 100 units
Disease Typical parameter content Parameter content in relation to normal (N) Percentage of cases positive negative
Significant (р<0.05) correlations of parameter pairs
ЛИТЕРАТУРА /REFERENCES
1. Айвазян С. А., Бухштабер В. М., Ешоков И. С., Мешалкин Л. Д. //Прикладная статистика. Классификация и снижение размерности: Справочник /Под ред. С. А. Айвазяна. — М., 1989. — Т. 3. — С. 254—260.
2. Аксель Е. М., Двойрин В. В., Трапезников И. Н. Статистика злокачественных новообразований в России и некоторых других странах. 1980—1991 гг. — М., 1993.—С. 11—20.
3. Анохин Б. М., Пропп Р. М., Романова Л. Ф. // Пробл. эндокри-нол. 1987. — № 3. — С. 3 -6.
4. Вапник В. К, Глазкова Т. Г., Кощеев В. А. и др. Алгоритмы и программы восстановления зависимостей. —М., 1984.
С. 108—386.
5. Габуния Р. И., Романова Л. Ф., Линкера А. и др. //Мед. радиол. — 1991. — № 7. — С. 29—32.
6. Глазкова Т. Г. //Вестн. ОНЦ РАМН. — 1994. — № 2. —■ С. 3—11.
7. Двойрин В. В., Аксель Е. М., Трапезников Н. И. Заболеваемость злокачественными новообразованиями и смертность от них населения стран СНГ в 1995 г. — М., 1996. — С. ! 1—30.
© Коллектив авторов, 1999 УДК 616.15:616.24-006.6
В. В. Кулаков, М. В. Киселевский, Б. Е. Полоцкий,
Б. В. Пипегин
ИЗУЧЕНИЕ ЦИТОСТАТИЧЕСКОЙ И ЦИТОТОКСИ-ЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ НОРМАЛЬНЫХ ДОНОРОВ И БОЛЬНЫХ РАКОМ ЛЕГКИХ
НИИ клинической онкологии, Институт иммунологии Минздрава РФ
Как известно, нейтрофилы (НФ), представляющие собой наибольшую популяцию клеток периферической крови взрослого человека и являющиеся активными фагоцитирующими клетками, играют исключительно важную роль в защите организма от инфекции. В последнее время появились также данные о том, что они обладают как цитотоксичес-кой, так и цитостатической активностью по отношению к опухолевым клеткам. Так, Т. 1поие и соавт. [17] обнаружили, что после инкубации с супернатантом, полученным от клеток селезенки крыс, инкубированных с конканавалином
А, НФ приобретают способность ингибировать включение рНргимидина в клетки сингенных, аллогенных и ксеноген-ных опухолей. Наиболее сильными стимуляторами туморо-цидных свойств НФ являются форболмиристат ацетат (ФМА) и другие форболовые эфиры [2, 5, 9, 11, 12, 20, 22, 24]. Так, человеческие НФ, стимулированные ФМА, вызывали 40% лизис миелобластоидных клеток К-562, регистрируемый с помощью хромового метода. Кальциевые ионофо-ры усиливали этот цитотоксический эффект [2. 10], то есть
TSH-TG and negative CEA-T3, CEA-T4 correlations, nodular goiter was characterized by a positive TSH-T3 correlation; medullar cancer had no statistically significant correlations.
4. CEA, CT and AbTG have statistically significant ranges to differentiate medullary cancer and autoimmune thyroiditis. However, the differentiation between papillary and follicular cancers, adenoma and nodular goiter using individual parameters is difficult and requires complex analysis.Autoimmune thyroiditis
8. Пачес А. И., Пропп P. М., Шенталь В. В. и др. /УВестн. ОНЦ РАМН. — 1990. — № 1. — С. 37—40.
9. Стрельцова В. П., Москалев Ю. К. Бластомогенное действие ионизирующих радиаций. — М., 1964.
10. Шторм Р. Теория вероятностей. Математическая статистика. Статистический контроль качества /Под ред.
Н. С. Райбмана. — М., 1970. ~~ С. 153—228.
Поступила 02.04.98 / Submitted 02.04.98
V. VKulakov, M.V.Kiselevskv, B.E.Polotsky,
B. V.Pinegin
STUDY OF CYTOSTATIC AND CYTOTOXIC ACTIVITY OF PERIPHERAL NEUTROPHILS FROM NORMAL DONORS AND LUNG CANCER PATIENTS
Institute of Clinical Oncology, Immunology Institute, RF Health Ministry
Neutrophils (NP) are the largest population of peripheral blood in adults, play an active part in phagocytosis and contribute greatly to defense of the body from infection. There is also much evidence of NP cytotoxic and cytostatic activity against tumor cells. T.Inoue et al. [17] reported that after incubation with supernatant of rat splenic cells incubated with concanavalin A the NP acquired the ability to inhibit [!H]-thymidine uptake in syngeneic and xenogeneic tumor cells. The most potent enhancers of NP tumoncidal activity are phorbol myristate acetate (PMA) and other phorbol esters [2,5,9,11,12,20,22,24]. PMA-stimulated human NP induced a 40% lysis of myeloblastoid cells K.-562 as detected by chrome technique. Calcium ionophores enhance the NP cytotoxic effect [2,10] that means that the NP cytotoxicity activation is related to activation of the cell key enzyme, protein kinase C. Activated oxygen forms such as hydrogen peroxide, superoxide radicals, ctc. as well as cytotoxic cell enzymatic systems (e.g., defensins) may also contribute to the cytotoxic effect [4,16].
