CC BY
11
УДК 616-092.9:616.314.17-008.1 Шнайдер С.А.
СТАН НЕСПЕЦИФ1ЧН01 РЕЗИСТЕНТН0СТ1 0РГАН13МУ ПРИ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМУ ПАР0Д0НТИТ1
Одеський нацiональний медичний уыверситет
В po6omi до^джено тiол-дисульфiдне спiввiдношення в тканинах пародонту i сироватцi Kpoei при моделю-eaHHi хронiчного пародонтиту у iнтактних тварин i щурiв з радiацiйно-iндукованою нестабшьнктю геному. З'ясовано, що у щурiв зрадiацiйно-iндукованою нестабшьтстю геному тiол-дисульфiдне спiввiдношення в спо-лучнт тканинi i еттелп слизовог оболонки ясен i сироватцi кровi зменшуеться на бшьш рантх строках вiд-творення пародонтиту. Вiдновлення тiол-дисульфiдного спiввiдношення в тканинах пародонту у щурiв з нестабшьтстю геному не вiд6уваеться протягом чотирнадцяти дi6 тсля завершення моделювання пародонти-ту.
KnrcwoBi слова: пародонтит, тюл-дисульфщна система, нестабтьнють геному
Робота виконана в рамках науково-до^дноГ роботи кафедри г'стологп, цитологи та ембрiологii' Одеського нац/ональ-ного медичного ушверситету, «Морфогенез епiтелiальноi' та сполучноТ тканин за фiзiологiчних та патологiчних умов» (№ держреестрацп: 0109U008570).
рини були розподтеш на групи: I) нащадки штактних тварин, II) нащадки у-опромЫених щурiв. У тварин першоТ i другоТ групи вщтворювали хрошчний генералiзований пародонтит за допомогою моделi зниженоТ жувальноТ функцп. Тварини знаходились на пастоподiбному рацюы харчування (65 г на добу) протягом 30 дiб [1]. Окрему групу порiвняння складали Ытактш тварини: нащадки Ытактних i у-опромЫених тварин, у яких не вщтворювали пародонтит. Тварин виводили з експерименту на 7, 14, 21 i 30-ту добу моделювання пародонтиту, а також на 7 i 14-ту добу по завершен моделювання пародонтиту (вщповщно 37 та 44-а доба вщ початку експерименту).
Для отримання потомства у-опромЫених щурiв, сам^в та самок перед спарюванням пiддавали фракцiонованому у-опромЫенню на
гамматерапевтичнш установцi АГАТ-Р по 0,1 Гр кожн 72 години до досягнення сумарноТ дози 1,0 Гр. Наявнють у тварин, отриманих вiд у- опромЫених щурiв, нестабiльностi геному з'ясовували за допомогою мiкроядерного тесту [11, 3]. Другу експеримен-тальну групу i вiдповiдну частину групи порiвняння формували лише з тварин у яких дiагностовано радiацiйно-iндуковану нестабтьнють геному.
Пюля виведення тварин з експерименту у них вщсепаровували дтянку слизовоТ оболонки ясен нижньоТ щелепи, а також видаляли фрагмент щелепи для подальшоТ декальцинаци, фiксували в 10% нейтральному формалiнi, заливали в парафн готували постiйнi гютолопчш препарати за загальноприйнятою методикою, зрiзи забарвлювали гематоксилЫом-еозином [14] та за Баррнетом i Зелiгманом [2].
В еттелп i сполучнiй тканин слизовоТ оболонки ясен визначали вмют сульфгiдрильних i дисульфiдних груп за методом Баррнетта i Зелiнгмана [2], в сироватц кровi методом зворотного амперометрично-го титрування [6], визначали тюл-дисульфщне спiввiдношення, за яким оцшювали стан неспецифiчноТ резистентностi органiзму [6]. Для гальгасноТ оцiнки вмiсту сульфгщрильних i дисульфiдних груп в тканинах пародонту, за допомогою свтового мiкроскопа "Zeiss Axiostar plus" i сис-теми вiдеоаналiзу зображень отримували електронне зображення полiв зору дослщжуваних мiкропрепаратiв i визначали iнтегральну оптичну щтьнють забарвлених компонентiв з використанням програмного забезпечення „ВидеоТест-Мастер" (ООО „ВидеоТесТ", Росiя).
Хронiчний генералiзований пародонтит ниш залишаеться складною медико-соцiальною проблемою [17]. Останым часом захворюванiсть на пародонтит зростае [4]. Швидгасть прогресування захворю-вання, темпи втрати зубiв залежать вiд локальних фактсрв: особливостi розташування зубiв, та загаль-них факторiв: вiк, курiння [21], наявност супутнiх со-матичних захворювань [10]. Визначальним при цьому може бути загальний стан оргашзму [7, 19]. З Ышого боку останшми роками доведена залежнiсть мiж три-валим перебiгом хронiчного пародонтиту i виникнен-ням кардiологiчних захворювань [18]. Тривале запа-лення в тканинах пародонту спричиняе надходження прозапальних цитоюшв до загального кровотоку, що спричиняе виникнення системних ефекпв [15, 20]. Системы ефекти бтьш виразн при вщсутност адекватного лiкування захворювання [13], у той час як своечасне ефективне лiкування зменшуе вiрогiднiсть розвитку серцево-судинних захворювань [8]. Дово-дяться також кореляцiйнi зв'язки мiж хронiчним паро-донтитом i цукровим дiабетом [16].
Складною проблемою також е природний пато-морфоз захворювання, спричинений впливом неспри-ятливих фактсрв довктля [9].
Мультифакторiальнiсть захворювання ускладнюе його дiагностику, профiлактику та лкування, що потребуе розробки нових пiдходiв до оцiнки ризику виникнення захворювання [12], i потребуе пошуку штегральних показникiв оцiнки стану органiзму i тканин пародонта. Таким показником може бути оцЫка стану неспецифiчноí резистентност за показниками стану тiол-дисульфiдноí системи, але дат про стан зазначено'1' системи при рiзних умовах виникнення i прогресування пародонтиту обмеженi, що потребуе подальших дослiджень.
Мета дослщження: визначити змiни неспецифiчноí резистентностi оргашзму i тiол-дисульфiдноí системи тканин пародонту при експериментальному пародонтит у радiацiйно- i стрес-уражених щурiв.
Матерiали та методи дослщження
Експериментальнi дослiдження проведет на 98 статевозртих самцях щурiв лiнií Вiстар, у вiдповiдностi до науково-практичних рекомендацм з утримання лабораторних тварин i роботи з ними та положень «европейсько1 конвенцií про захист хребет-них тварин, яга використовуються для експеримен-тальних та наукових цтей».
У вiдповiдностi до мети та задач дослщження тва-
Том 11, Випуск 3 89
Актуальш проблеми сучасно!' медицини
Оцiнку достовiрностi вiдмiнностей дослiджуваних показникiв проводили за допомогою дисперсiйного аналiзу. В раз^ якщо нульова гiпотеза вiдкидалась, для подальшого аналiзу використовували критерiй Ньюме-на-Кейлса [5].
Результата дослiдження та 1х обговорення
В результатi проведених дослщжень з'ясованi особливостi змiн неспецифiчноí резистентностi органiзму та стану тюл-дисульфщно'' системи тканин пародонту при моделюванн пародонтиту у iнтактних
Тiол-дисульфiдне ств^дн>
тварин (контрольна група) та у тварин з радiацiйно-Ыдукованою нестабтьнютю геному (дослiдна група). У тварин першо'' групи тiол-дисульфiдне спiввiдношення сироватки кровi i сполучно'' тканини слизово'' оболонки ясен зменшуеться лише на 30-ту добу експерименту; епiтелiю на 21-шу i 30-ту. Вiдновлення зазначених показнигав спостерiгали вже через 7 дiб пiсля завершення вiдтворення пародонтиту (табл. 1).
Таблиця 1
ня при експериментальному пародонтитi (М±т, п=7, ум.од.)
Група Доба спостереженя Тюл-дисульфщне сглввщношення
Сполучна тканина Еп1тел1й Сироватка кров1
1 1нтактн1 3,3±0,12 3,1 ±0,09 4,1 ±0,14
7 3,25±0,13 3,12±0,11 4,05±0,15
14 3,21 ±0,13 2,99±0,09 4,01 ±0,14
21 3,1 ±0,12 2,65±0,08 *2, 3 3,8±0,13
30 2,9±0,11 *3 2,33±0,07 *2, 3 3,5±0,12 *3
37 3,0±0,11 2,67±0,12*23 4,23±0,11 *2
44 3,28±0,12 3,15±0,11 *2 4,1 ±0,14
II Ытактнл 3,21 ±0,13 3,15±0,1 4,03±0,15
7 3,2±0,12 2,68±0,11*1,2,3 4,02±0,13
14 3,02±0,15 2,51 ±0,12*1,2,3 3,81 ±0,15
21 2,42±0,11*1,2,3 2,14±0,10*1,2,3 3,41 ±0,12*1,2,3
30 2,05±0,09*123 2,03±0,09*13 3,11 ±0,12*1,3
37 2,15±0,08*13 2,15±0,09*13 3,31±0,13*13
44 2,47±0,10*1,2,3 2,58±0,11*1,2,3 3,80±0,15*2
Примiтки: *1 - р<0,05 поменяно з експериментальною групою I;
** - р<0,05 порiвняно з попереднiм строком спостере *3 - р<0,05 порiвняно з нтактними тваринами.
У тварин з радiацiйно-iндукованою нестабтьнютю геному зменшення тюл-дисульфщного стввщношен-ня сполучно'' тканини i еттелю слизово'' оболонки ясен, а також сироватки кровi при вщтворенш пародонтиту вщбувалося ранше, шж у тварин першо'' групи. Так, у тварин дослщно'' групи в сполучшй тканинi на 21-шу добу експерименту тюл-дисульфщне спiввiдношення було меншим, шж у тварин першо'' групи на 21, 9 %, на 30-ту добу - на 29,3 %. В еттелп слизово'' оболонки ясен тварин дослщно''' групи стввщношення сульфгщрильних груп до дисульфiдних було меншим, шж у iнтактних тварин вже на сьому добу експерименту. Порiвняно з тваринами першо'' групи, на сьому добу в еттели зменшу-валося тiол-дисульфiдне спiввiдношення на 14,1%, максимальна рiзниця спостерiгалася на 21-шу добу i складала 19,2 %
В сироватц кровi тварин дослщно''' групи тюл-дисульфщне стввщношення було статистично вiрогiдно меншим, шж у iнтаткних тварин на 21-шу добу вщтворення пародонтиту, у тварин контрольно'' групи - на 30-ту. У тварин дослщно''' групи на 21-шу добу тюл-дисульфщне стввщношення було менше, шж у щурiв контрольно'' групи на 10,3 %, на 30-ту добу - на 11,1 %.
Важливим також е те, що у тварин контрольно'' групи тюл-дисульфщне стввщношення у слизовм оболонц ясен та сироватц кровi вщновлювалося до показнигав Ытактних тварин на сьому добу по завершены моделювання пародонтиту. У тварин дослщно''' групи на 14-ту добу по завершены вщтворення пародонтиту тюл-дисульфщне стввщношення сироватки кровi вщновлювалося до показнигав Ытактних тварин,
в сполучшй тканинi i епггелп слизово'' оболонки ясен не вiдбувалося його вщновлення. Так тiол-дисульфiдне спiввiдношення сполучно'' тканини слизово'' оболонки ясен складало 75,3 %, епiтелiю - 81,9 % вщ показникiв iнтактних тварин.
Виразнють пошкодження структур пародонту, оцЫена при гiстологiчних дослiдженнях, корелюе зi змiнами тiол-дисульфiдноí системи. У тварин дослщно''' групи в бтьш рант строки виявлено дезоргашзацю колагенових волокон перюдонту, по-рушення цiлiсностi еппемального зубо-ясеневого з'еднання.
Отриманi данi свщчать про те, що за умов пщтримання стану неспецифiчноí резистентностi на належному рiвнi, в тканинах пародонту не вщбуваеться зменшення тiол-дисульфiдного стввщношення, що забезпечуе бтьшу резистентiсть тканин пародонту i зменшуе темпи прогресування ек-спериментального пародонтиту. Пiдтримання неспецифiчноí резистентностi органiзму на належному рiвнi також може протидiяти виникненню систем-них ефектiв тривалого переб^у пародонтиту.
Висновки
У щурiв з нестабтьнютю геному при вщтворенш пародонтиту вщбуваеться бтьш штенсивне i в бтьш рант строки виснаження функцюнальних резервiв тiол-дисульфiдноí системи тканин пародонту, що спричиняе бтьш швидке прогресування пародонтиту.
Перспективи подальших дослщжень
На пiдставi отриманих даних розробити методи прогнозування переб^у пародонтиту, ризику виник-
нення системних ускладнень захворювання, оцшки ефективносл лiкування.
Лiтература
1. Воскресенский О.Н. Доклиническое изучение средств профилактики и лечения пародонтита (пародонтопротек-торов). Методические рекомендации / Воскресенский О.Н. - К. : Авиценна, 2002. - 16 с.
2. Гланц С. Медико-биологическая статистика / Гланц С. - М.
: Практика, 1998. - 459 с.
3. Микроскопическая техника / Под ред. Д.С. Саркисова, Ю.Л. Перова. - М. : Медицина, 1996. - 544 с.
4. Соколовский В.В. Тиолдисульфидное соотношение крови
как показатель состояния неспецифической резистентности организма / Соколовский В. В. - СПб. : Медицинская академия последипломного образования, 1996. - 33 с.
5. Сычева Л.П. Новый подход к диагностике мутагенных и
канцерогенных свойств факторов окружающей среды / Л.П. Сычева, В.С. Журков, Ю.А. Рахманин // Гигиена и санитария. - 2003. - № 6. - С. 87-90.
6. Шнайдер С.А. Роль рад1ац1йно-1ндукованоТ нестаб1льност1
геному в патоморфоз1 хроычного пародонтиту / С.А. Шнайдер, В.О. Ульянов // Актуальн проблеми транспор-тно'1' медицини. - 2010. - № 4. - С. 89-93.
7. Peruzzo D.C. A systematic review of stress and psychological
factors as possible risk factors for periodontal disease / D.C. Peruzzo, B.B. Benatti, G.M. Ambrosano [at al] // J. Periodontol. - 2007. - № 8. - Р. 1491-1504.
8. Barrnett R.J. Histochemical dmonstration of sulphydryl and
disulfide groups of protein / R.J. Barrnett, A.M. Seligman // J. Nat. Cancer Inst. - 1954. - V. 14, № 4. - P. 769-803.
9. Chen F.M. Periodontal tissue engineering and regeneration:
current approaches and expanding opportunities / F.M.Chen, Y.Jin // Tissue. Eng. Part. B. Rev. - 2010. - № 2. - Р. 219-255.
10. Thomas P. Effect of dietary intervention on human micronucleus frequency in lymphocytes and buccal cells / P.Thomas, J.Wu, V.Dhillon, M. Fenech // Mutagenesis. -2011. - № 1. - Р. 69-76.
11. Takada T. Effect of restraint stress on the progression of experimental periodontitis in Rats / T. Takada, N. Yoshinari, S. Sugiishi, [at al.] // J. Periodontol. - 2004. - № 2. - P. 306315.
12. Garlet G.P. Destructive and protective roles of cytokines in periodontitis: a re-appraisal from host defense and tissue destruction viewpoints / G.P. Garlet // J. Dent. Res. - 2010. - № 12. - P. 1349-1363.
13. Jansson H. Studies on periodontitis and analyses of individuals at risk for periodontal diseases / H. Jansson // Swed. Dent. J. Suppl. - 2006. - V. 180. - P. 5-49.
14. König J. Periodontal health in Europe: future trends based on treatment needs and the provision of periodontal services-position paper 1 / J.König, B.Holtfreter, T.Kocher // Eur. J. Dent. Educ. - 2010. - № 1. - P. 4-24.
15. Loos B.G. Systemic effects of periodontitis / B.G. Loos // Ann. R. Australas. Coll. Dent. Surg. - 2006. - № 18. - P. 27-29.
16. Blaizot A. Periodontal diseases and cardiovascular events: meta-analysis of observational studies / A.Blaizot, V J.N.ergnes, S.Nuwwareh [at al.] // Int. Dent. J. - 2009. - № 4. - P. 197-209.
17. A. Foz Moura. Periodontal therapy and biomarkers related to cardiovascular risk / Moura Foz A. [at al.] // Minerva Stomatol. - 2010. - № 5. - P. 271-283.
18. Persson G.R. Perspectives on periodontal risk factors / G.R. Persson // J. Int. Acad. Periodontol. - 2008. - № 3. - P. 7180.
19. Chambrone L. Predictors of tooth loss during long-term periodontal maintenance: a systematic review of observational studies / L.Chambrone, D.Chambrone, L.A.Lima, L.A.Chambrone // J. Clin. Periodontol. - 2010. -№ 7. - P. 675-684.
20. Scannapieco F.A. Does periodontal therapy reduce the risk for systemic diseases? / F.A.Scannapieco, A.P.Dasanayake, N. Chhun // Dent Clin. North. Am. - 2010. - № 1. - P. 163181.
21. Williams R.C. The potential impact of periodontal disease on general health: a consensus view / R.C. Williams, A.H. Barnett, N. Claffey [at al.] // Curr. Med. Res. Opin. - 2008. -№ 6. - P. 1635-1643.
Реферат
СОСТОЯНИЕ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА ПРИ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ
ПАРОДОНТИТЕ
Шнайдер С.А.
Ключевые слова: пародонтит, тиол-дисульфидная система, нестабильность генома
В роботе исследованы изменения тиол-дисульфидного соотношения в тканях пародонта и сыворотки крови при моделировании хронического пародонтита у интактных животных и животных с радиационно-индуцированной нестабильностью генома. Установлено, что у животных с радиационно-индуцированной нестабильностью генома тиол-дисульфидное соотношение в соединительной ткани и эпителии слизистой оболочки десны и сыворотке крови уменьшается в более ранние сроки моделирования пародонтита. Восстановление тиол-дисульфидного соотношения в тканях пародонта у животных с нестабильностью генома не происходит в течение четырнадцати дней после завершения моделирования пародонтита.
Summary
CONDITION OF NONSPECIFIC RESISTANCE IN RATS WITH PERIODONTITIS Shnayder SA
Key words: periodontitis, thiol-disulfide system, genome instability
The research was aimed to study the changes in thiol-disulfide correlation in periodontal tissues and blood serum in modeling chronic periodontitis in intact rats and animals with radiation-induced genome instability. It was found out the decreasing the thiol-disulfide correlation in the connective tissue and epithelium of gingival mucosa, and blood serum in rats with genome instability during the earlier terms of periodontitis designing. Recovery of thiol-disulfide correlation in periodontal tissues in rats with genome instability did not occur during fourteen days after the periodontitis modeled.
Том 11, Выпуск 3
91
