CC BY
14
залежно вщ ступеня !х диференщаци становить 0 : 3,43 : 6,24 : 89,55 : 0,78 (табл.) вiдрiзняються вщ аналопчних показниюв у людини [1], де в цитограмах пара базальт клггини не зустрiчаються, близько 60 % складають промiжнi клггини, до 10 % - поверхневi i близько 30 % припадае на роговi лусочки. Визначеннi особливосп кл^инно! оргашзацн ясенних епiтелiоцитiв у кл^инному складi цитограм ясен свиней в нормi та визначенi вiдсотковi спiввiдношення рiзних класiв клiтин характеризують функцiональну належнiсть слизово! оболонки до жувального типу.
Встановленi тинкторiальнi особливостi ясенних епiтелiоцитiв у цитограмах свиней дозволяють вiднести слизову оболонку ясен до жувального типу. Визначене вщсоткове сшввщношення епiтелiоцитiв вiдрiзняеться вщ аналогiчного для людини в сторону переважання поверхневих клiтин (у людини в цитограммах основну масу складають промiжнi ештелюцити, а кiлькiсть поверхневих е мшмальною).
1. Hasiuk NV, Yeroshenko HA. Zastosuvannia morfolohichnykh metodiv doslidzhennia u diahnostytsi ta prohnozuvanni klinichnoho perebihu heneralizovanoho parodontytu. Metodychni rekomendatsii. 2015. 22.
2. Lapach SN, Chubenko AV, Babich PN. Statisticheskie metodyi v mediko-biologicheskih issledovaniyah s ispolzovaniem Exel. 2000, Kiev: Morion: 320.
3. Obschie eticheskie printsipyi eksperimentov na zhivotnyih: materialyi I Natsionalnogo kongressa po bioetike. 2001. - K.: NANU. - 16 c.
4. Becker ST, Do'rfer C, Graetz C, Buhr WD, Wiltfang J, Podschun R. A pilot study: microbiological conditions of the oral cavity in minipigs for peri-implantitis models. Laboratory Animals. 2011; 45:179-183. DOI: 10.1258/la.2011.010174.
5. Declercq P, Petre' D, Gordts B, Voss A. Complicated community-acquired soft tissue infection by MRSA from porcine origin. Infection 2008; 36:590-592.
6. Gasyuk NV, Yeroshenko GA. Feature of cellular composition of the gums in generalized periodontitis. CBir MegmnHn i 6iojiorii. 2015, 1 (48): 17-20.
7. Zitzmann NU, Berglundh T. Definition and prevalence of peri-implant diseases. J Clin Periodontol 2008; 35: 286-91.
ЦИТОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ЭПИТЕЛИЯ ДЕСНЫ СВИНЕЙ В НОРМЕ Попович И.Ю., Петрушанко Т.А., Ерошенко Г.А., Жага А.Н
В работе были изучены особенности клеточного состава десен свиней в норме. Установленные тинктори-альные особенности десневых эпителиоцитов в цитограммах свиней позволяют отнести слизистую оболочку десны к жевательному типу. Процентное соотношение эпителиоцитов отличается от аналогичного для человека в сторону преобладания поверхностных клеток в мазках (у человека в цитограммах основную массу клеток составляют промежуточные эпителиоциты, а количество поверхностных минимальна).
Ключевые слова: слизистая оболочка десен, свиньи, цитограмма.
Стаття надшшла 12.08 2017 р.
CYTOLOGICAL FEATURES OF THE EPITHELIA OF
THE PIG'S GUMS IN THE NORM Popovych I.Yu., Petrushanko T.A., Yeroshenko G., Zhaga A.N.
In the research the features of the cellular composition of the pig's gums were studied. The established tinctorial features of the gingival epitheliocytes in the pigs' cytograms make it possible to classify the gingival mucosa as a masticatory type. The percentage ratio of epithelial cells differs from a similar for a human in the direction of the prevalence of surfical cells in smears (in humans' cytograms the majority of cells are intermediate epitheliocytes, and the amount of surfical cells is minimal).
Key words: mucosa of the gums, pigs, cytogram.
Рецензент Гасюк Н.В.
DOI 10.26724 / 2079-8334-2017-4-62-165-168 УДК 616.71-007.234-076:616.61-036
В. Ф. Черемкчна. А. I. Бере'.някова Iliiirioiiii.imiiiii ф:1|>м:пкг..........и унми-ришч. м. Хафкм»
СТАН АГРЕГАЦП ТРОМБОЦИТ1В I Д1Я 1НТЕРЛЕЙК1Н1В 4 ТА 6 ПРИ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМУ АЛЬВЕОЛ1Т1
e-mail: cheremishav@gmail.com
В робот! представлен результати по виявленню взаемозв'язкв мiж bmîctom цитокшв та функцiональною активнiстю тромбоцитiв у щурiв з порушенням o6MiHy KicTKOBOï тканини пародонта при альвеолiтi. При цьому захворюваннi тдвищуеться рiвень 1Л-4, скорочуеться час досягнення максимальноï швидкосл агрегацiï при концентрацiï АДФ 2,5 мкмоль/л, а також виявляеться взаемозв'язок мiж ступенем агрегацiï тромбоцитiв та рiвнем 1Л-6 при концентрацiï АДФ 10,0 мкмоль/л.
Ключов1 слова: агрегащя тромбоципв, iнтерлейкiни, кiсткова тканина, альвеолгг.
Одне i3 найважливiших мiсць у патогенетичних механiзмах розвитку остеопорозу вщпрають порушення в системах регуляци гомеостазу, змш кiстковоï тканини та визначають розвиток напрямiв цих процесiв. Провщну роль при цьому вiдводиться мiжклiтинним медiаторам
- цитокшам, як мають tíchí взаемозв'язки Í3 тромбоцитарною ланкою гемостазу. Тригером запуску змш метаболiзму, фiналом яких стае переваження резорбци кютково1 тканини над процесами li синтезу е запалення. Тiсний зв'язок запалення як прояву активносп iмунноl системи з мехашзмами системи гемостазу дозволяе розглядати тромбоцити як учасниюв цих явищ.
В тепершнш час встановлено залежнiсть процешв втрати кютково1 маси у пащенпв похилого вiку вiд змiн гомеостазу кальщю, функщонально1 активностi тромбоцитiв та лшщного обмiну [5]. Пiдвищення агрегацшно! здатностi тромбоцитiв при iстотному зниженш мшерально1 щiльностi кютково1 тканини стае значущим фактором ризику несприятливого переб^у i прогнозу iшемiчноl хвороби серця. Тому АДФ-iндукована агрегацiя тромбоцитiв розглядаеться як показник, найбiльш залежний вщ рiвня мшерально1 щiльностi кютково1 тканини та переважний для ощнки стану судинно-тромбоцитарно! ланки гемостазу у таких пащенпв [1].
Якщо проблема взаемозв'язку процесiв синтезу цитокiнiв з агрегащею кров'яних клiтин дослiджуеться вже досить широко [10, 12], то вивчення впливу цих процешв на змши стану сполучно1 (кютково1) тканини ще знаходиться на початковому етапi [2].
Метою роботи було виявлення взаемозв'язюв мiж вмiстом iнтерлейкiнiв 4 i 6 та функщональною активнiстю тромбоцитiв у щурiв з альвеолiтом.
Матерiал та методи дослщження. Експерименти проведено на 2-х групах бших нелiнiйних щурах-самцях масою 240,0±30,0 г, по 20 тварин в кожнш групi. Альвеолiт викликали за методикою Гаврилова В.О. [2]. Кров для дослщження агрегаци тромбоципв брали шприцом iз серця. Тварин евтаназували за допомогою етамiнал-натрiевого наркозу [8].
1ндуковану агрегацiю тромбоцитiв дослщжували з використанням компьютеризованого аналiзатора агрегаци тромбоцитiв «SOLAR 2110» (Бiлорусь). У якост iндуктора використовували аденозиндифосфат (АДФ) у концентраци 2,5, 5,0 та 10,0 мкмоль/л. Запис агрегатограм проводили при 37°С протягом 10 хв. Наступний аналiз агрегацшно1 криво1 включав до себе визначення таких показниюв: 1) ступеню агрегацп' - максимального % св^лопропускання плазми; 2) часу досягнення максимальное' швидкостi агрегацп' - часу досягнення максимального % св^лопропускання; 3) швидкостi агрегацп', яку розраховували через 30 с пiсля початку агрегацп тромбоципв. Оцiнку агрегацшно1 активносп тромбцитiв визначали за методом [7].
Рiвень iнтерлейкiнiв у кровi визначали тсля закiнчення моделювання порушень юстково1 тканини iмуноферментним методом за допомогою наборiв фiрми «Вектор-Бест».
Статистичну обробку цифрових результатiв дослiджень проводили з використанням методiв варiацiйноl статистики пакету програм Statistica 8.0 - статистичного методу two-way ANOVA (Fisher LCD post-hoc test). Результата представлен як Mean±SEM, статистично вiрогiдним вважали рiвень р < 0,05 [3]. Експериментальш машпуляци проводили у вiдповiдностi з принципами Свропейсько1 конвенци про захист хребетних тварин (Страсбург, 1986), «Загальними принципами експерименпв на тваринах», схваленими I Нащональним конгресом з бюетики (Ки1в, 2001) [6] та вимогами «Порядку проведення науковими установами дослав, експериментiв на тваринах» (2012).
Результати дослщження та Тх обговорення. При дослщженш рiвня iнтерлейкiну 4 (1Л-4) було виявлено, що у щурiв з альвеолiтом вiн пiдвищився порiвняно з контрольною групою тварин в 1,5 рази (р<0,05) (рис.). Рiвень 1Л-6 у щурiв з альвеолггом не вiдрiзнявся вiд рiвня контролю (рис.). При концентраци шдуктора агрегаци АДФ 2,5 мкмоль/л ступшь агрегацп тромбоципв, час
досягнення максимальное' агрегаци та швидюсть агрегацп' у щурiв з моделлю альвеолiту майже не вiдрiзнявся вiд показникiв контролю (табл. 1). При концентраци АДФ 5,0 мкмоль/л у щурiв з моделлю альвеол^у час агрегаци скорочувався порiвняно з часом тварин контрольное' групи. Iншi показники агрегацп' мали тенденщю до зниження порiвняно з контролем (табл. 2).
yci показники агрегаци тромбоципв при концентраци iндуктора агрегаци 10,0 мкмоль/л у тварин з альвеол^ом також мали тенденщю до зниження порiвняно з показниками контрольное' групи тварин (табл. 3). Крiм того, було виявлено, що у тварин контрольное' групи юнуе кореляцшний негативний зв'язок мiж ступенем агрегаци при концентраци шдуктора 10 мкмоль/л та рiвнем 1Л-6 (k=-0,97) (p<0,05).
10 5 0
1Л-4 1Л-6
контроль □ щури з альвеолам
Рис. Ршень штерлейкшв 4 та 6 у щурш з альвеол1 том.
Таблиця 1
Показники агрегацй тромбоци^в у щурiв з експериментальним альвеол^ом при
Групи тварин Показники агрегацп
Стутнь агрегацп, % Час досягнення максимально! швидкосп агрегацй, с Швидюсть агрегацй, %/хв
Контроль 45,1±10,54 85,2±7,12 59,1±21,42
Щури з альвеолггом 41,6±8,71 81,9±7,31 66,2±19,44
Таблиця 2
Показники агрегацп тромбоцилв у щурiв з експериментальним альвеол^ом при
Групи тварин Показники агрегацй
Стутнь агрегацй, % Час досягнення максимально! швидкосп агрегацй, с Швидюсть агрегацй, %/хв
Контроль 80,4±8,92 132,7±8,08 107,4±10,41
Щури з альвеолггом 77,82±4,38 130,6±6,7 100,8±7,3
Таблиця 3
Показники агрегацп тромбоцилв у щурiв з експериментальним альвеол^ом при
Групи тварин Показники агрегацп
Стушнь агрегацй, Час досягнення максимально! Швидюсть агрегацй,
% швидкосп агрегацп, с %/хв
Контроль 90,5±6,22 202,5±4,63 108,5±11,33
Щури з альвеолггом 88,4±6,1 200,0±10,0 104,8±10,2
У щурiв з альвеол^ом тако! кореляцп вже не спостер^алося. Таким чином, у тварин з альвеол^ом виявлено пiдвищення рiвня 1Л-4, скорочення часу досягнення максимально! швидкосп агрегацй при концентрацп АДФ 5,0 мкмоль/л, а також наявшсть взаемозв'язку мiж ступенем агрегацй тромбоцитiв та рiвнем 1Л-6 при концентрацп АДФ 10,0 мкмоль/л.
У оргашзм^ при рiзних ситуацiях, каскад пiдвищення рiвнiв цитокiнiв починаеться з прозапальних цитоюшв - 1Л1, фактору некрозу пухлини, поим 1Л-6. Пiсля цього настае тдвищення рiвня протизапальних цитокiнiв, одним з яких ранiше вважали 1Л-4. Але останнi дослiдження дозволяють припустити, що 1Л-4 е регуляторним цитокшом iз плейотропними ефектами, який до того ж сам може активувати 1Л-6 [11, 12]. Запальний процес, як правило, супроводжуеться тдвищенням стероидов в кровi, якi здатнi модулювати синтез цитокiнiв [10, 12]. Пщвищення вмiсту 1Л-4 у щурiв з альвеол^ом можна пояснити саме впливом стероидов.
Крiм того, тромбоцити шсля !х активацп здатнi видiляти низку цитоюшв [9], що може додавати внесок до цих процешв. Це пояснюе наявнiсть зв'язку мiж агрегацшною активнiстю тромбоцитiв та концентрацiею прозапального 1Л-6.
Висновки
1. При альвеолт виявлено ланки взаемозв'язку системи цптоюшв та функцюнально! активностi тромбоцитiв, якими е тдвищення рiвня 1Л-4, скорочення часу агрегацп та максимально! швидкосп агрегацп при концентрацп iндуктора 2,5 мкмоль/л.
2. При альвеолт встановлено зв'язок мiж ступенем активностi агрегацп тромбоцинв та рiвнем прозапального цитоюну 1Л-6 при концентрацп' iндуктора АДФ 10 мкмоль/л.
1. Aranovich A. M. Trombotsitarnyiy gemostaz pri distraktsionnom oseosinteze / A. M. Aranovich, E. V. Trofimova, S. L. Sashenkov // Izvestiya Chelyabinskogo nauchnogo tsentra. - 2005. - Vyip. 4 (30). - S. 208-211.
2. Aleksenko E. Yu. Narusheniya trombotsitarnogo zvena gemostaza i tsitokinovogo balansa u bolnyih osteoartrozom v sochetanii s arterialnoy gipertenziey / E. Yu. Aleksenko, A.V. Govorin, S.M. Tsvinger // Kazanskiy med. zhurnal. - 2011. - T. 92, No. 3. - S. 305-308.
3. Gubler E. V. Primenenie neparametricheskih kriteriev statistiki v mediko-biologicheskih issledovaniyah / E. V. Gubler, A. A. Genkin // - L. : Meditsina, - 1973. - 141 s.
4. Havrylov V. O., Luzin, V. I., Haidash, D. I. (2011). Sposib modeliuvannia alveolitu nyzhnoi shchelepy u laboratornykh tvaryn (shchuriv): Patent na korysnu model Ukrainy № 61488621815 A, MPK (2011.01) A61K6/00, 14, 10.
5. Zaharova N. O. Agregatsionnaya funktsiya trombotsitov u lits starshih vozrastnyih grupp s ishemicheskoy boleznyu serdtsa na fone starcheskogo osteoporoza / N.O. Zaharova, O.G. Yakovlev, S.N. Bryilyakova // Klinicheskaya gerontologiya. - 2003. - T. 9, No. 4. - S. 23-25.
6. Obschie eticheskie printsipyi eksperimentov na zhivotnyih: materialyi I Natsionalnogo kongressa po bioetike, - 2001. - K.: NANU. - 16 c.
7. Pat. 77372 Ukraina, MPK 601N 33/86 (2006.01). Sposib otsinky ahrehatsiinoi aktyvnosti trombotsytiv / S. B. Pavlov, N. M. Babenko, M. V. Kumechko, L. V. Chernykh. Patent vid 11.02.2013. - Biul. No. 3. - S. 3-4.
8. Reznikov O. H. Biotychna ekspertyza doklinichnykh ta inshykh naukovykh doslidzhen, shcho vykonuiutsia na tvarynakh: metod. rekomendatsii / O. H. Reznikov, A. I. Soloviov [ta in.] // Visnyk farmakolohii ta farmatsii. - 2006. - No. 7. - S. 47-61.
9. Ceciliani F. The systemic reaction during inflammation: the acute-phase proteins / F. Ceciliani, A. Giordano, V. Spagnolo // Protein Pept. Lett. - 2002. - Vol.9 (3). - P. 211-223.
10. Chamorro A. Role of inflammation in stroke and atherothrombosis / A. Chamorro // Cerebrovasc. Dis. - 2004. - Vol. 17, Suppl 3. - P. 15.
11. Lee Y.W. Gene expression profile in interleukin4-stimulated human vascular endothelial cells / Y.W. Lee, S.Y. Eum, K.C. Chen [et al.] // Molecular Medicine. - 2004. - Vol. 10, № 1-6. - P. 19-27.
12. Tedgui A. Cytokines in atherosclerosis: pathogenic and regulatory pathways / A. Tedgui, Z. Mallat // Physiol. Rev. - 2006. -Vol. 86. - P. 515-561.
Реферати
СОСТОЯНИЕ АГРЕГАЦИИ ТРОМБОЦИТОВ И ДЕЙСТВИЕ ИНТЕРЛЕЙКИНОВ 4 И 6 ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ АЛЬВЕОЛИТЕ Черемисина В. Ф., Березнякова А. И.
В работе представлены результаты по выявлению взаимосвязей между содержанием цитокинов и функти-ональной активностью тромбоцитов у крыс с нарушением обмена костной ткани пародонта при альвеолите. При этом заболевании повышается уровень ИЛ-4, сокращается время достижения максимальной скорости агрегации при концентрации АДФ 2,5 мкмоль/л, а также имеется взаимосвязь между степенью агрегации тромбоцитов и уровнем ИЛ-6 при концентрации АДФ 10,0 мкмоль/л.
Ключевые слова: агрегация тромбоцитов, интерлейкины, костная ткань, альвеолит.
Стаття надшшла 6.08.2017 р.
DOI 10.26724 / 2079-8334-2017-4-62-168-173 UDС 611.43:576.3:599.323.4
STATE OF PLATELETS AGGREGATION AND THE EFFECT OF INTERLEUKIN 4 AND 6 AT EXPERIMENTAL ALVEOLITIS Cheremisina V. F., Bereznyakova A. I.
The paper presents the results of identifying the relationship between the content of cytokines and the functional activity of platelets in rats with disturbance of the bone marrow periodontal metabolism with alveolitis. At this disease, the level of IL-4 increases, the time reaches the maximum aggregation rate at an ADP concentration of 2.5 micromol/L, and also the relationship between the degree of aggregation of platelets and the level of IL-6 at an ADP concentration of 10.0 ^mol/L.
Key words: platelet's aggregation, interleukins, bone tissue, alveolitis.
Рецензент Срошенко Г.А.
V. G. Cherkasov, I. V. Dzevulska, E. V. Cherkasov, R. F. Kaminsky, V. A. Pastukhova, O. I.
Kovalchuk, Yu. Yu. Trofimenko Bogomolets National Medical University, National University of Physical Education and Sports of Ukraine, Shupyk National Medical Academy, Kyiv, National Pirogov Memorial Medical
University, Vinnitsa
INFLUENCE OF HAES-LX-5% INFUSION SOLUTION ON THE DNA CONTENT OF ENDOCRINE GLANDS CELLS AGAINST THE BACKGROUND OF THERMAL BURN OF
SKIN IN RATS
e-mail: al@nmu.ua
The results of the experimental study of the DNA content by the method of duct DNA cytometry in adenohypophysis, thymus and adrenal glands cells on the background of thermal burn of the skin and correction of the HAES-LX-5% infusion solution in comparison with a similar burn on the background of application of 0.9% solution are given in the article. NaCl. The use of the HAES-LX-5% drug causes a positive polyfactorial effect on the DNA content in adenohypophysis, thymus and adrenal cells. Its effect has specific manifestations in each of the cell groups and provides a balance recovery between the processes of DNA synthesis and apoptosis. So the use of this infusion solution softens the negative impact of the adverse effects of skin burn in adenohypophysis cells, mainly affecting synthetic processes, which is especially manifested in the delay in the development of burn disease. In adrenal cells, the HAES-LX-5% solution more definitely reduces the symptoms of apoptosis from day 7 of the experiment, rather than affecting synthetic processes. The effect of this solution on the content of thymus DNA cells consists in the reducing the parameters of the interval SUB-G0G1 practically in all terms of the experimental study with simultaneous insignificant increase of synthetic processes.
Key words: DNA-cytometry, thermal damage to the skin, rats, solution of HAES-LX-5%, adenohypophysis, adrenal glands, thymus.
The development of new therapies for burn disease is one of the topical issues of modern medicine, which is due to the significant increase in this damage in many countries of the world and, in particular, in Ukraine, especially the thermal nature, which remains extremely difficult during the course and prognosis as a type of burn injury [3, 6, 7, 12]. The search for new treatments for burn disease is also due to the inadequate effectiveness of existing drugs that have their contraindications and complications that may affect the outcome of therapy. One of the main areas of medical therapy for burn inflammation
