CC BY
83
ИНФЕКЦИОННАЯ ИММУНОЛОГИЯ
ИНФЕКЦИОННАЯ ИММУНОЛОГИЯ
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014 УДК 615.371:579.862.1].015.44
Ахматова Н.К., Грубер И.М., Ахматов Э.А., Черкасова Л.С., Игнатова О.М., Михайлова Н.А. СТАФИЛОКОККОВАЯ ВАКЦИНА: ВЛИЯНИЕ НА КИЛЛЕРНУЮ АКТИВНОСТЬ
лейкоцитов и неспецифическую резистентность
ФГБУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» РАМН, 105064, г Москва, Россия
Перспективным направлением профилактики и терапии стафилококковой инфекции является разработка препаратов, активирующих иммунокомпетентные клетки, повышающих защитные силы организма. Разработана противостафилококковая вакцина, оказывающая как специфическое, так и неспецифическое действие на иммунную систему.
В работе представлены данные о влиянии вакцины на киллерную активность мононуклеарных лейкоцитов и ее действие на гетерологичный патоген, свидетельствующее об активации врожденного иммунитета.
Ключевые слова: NK-клетки; «Стафиловак»; иммунофенотип; K562.
Promising direction for prevention and therapy of staphylococcal infection is the development of preparations that activate immune cells, enhancing the body's defenses. Developed anti-staphylococcal vaccine, which has as specific as a nonspecific effect on the immune system.
The article presents data on the effect of the vaccine on the killer activity of mononuclear leukocytes and its effect on a heterologous pathogen, indicating the activation of innate immunity.
Key words: NK-cells; Staphylovac; immunophenotype; K562
Введение. Следствием нерационального использования антибиотиков является колонизация госпитальных штаммов микробов с высоковирулентными и инвазивными свойствами. К тому же антибактериальные препараты могут способствовать развитию иммуносупрессивных состояний со снижением защитных сил организма. Эти факторы нередко приводят к формированию вторичных иммунодефицитных состояний с затяжным течением, хронизацией воспалительных процессов, повышением частоты обострений и осложнений [1-3]. Поэтому поиск эффективных препаратов для профилактики и терапии стафилококковой инфекции, включающей средства как специфической, так и неспецифической защиты, представляет особый интерес. Перспективным направлением является разработка препаратов, активирующих лимфоциты, натуральные киллеры и другие факторы естественной резистентности организма при иммунодефицитных состояниях.
Препаратом, отличающимся специфическим действием в отношении стафилококковой инфекции, а также оказывающим неспецифическое действие на эффекторную систему иммунитета, является сухая бесклеточная стафилококковая вакцина “Стафиловак”, разработанная в ФГБУ НИИВС им. И.И. Мечникова РАМН [4]. Вакцина содержит патоге-нассоциированные молекулярные структуры, влияющие на различные звенья иммунной системы [5]. В настоящее время проведены доклинические испытания вакцины “Стафило-вак”.
Цель - изучить механизм действия вакцины “Стафило-вак” на цитотоксическую активность мононуклеарных лейкоцитов (МЛ) селезенок мышей и неспецифическую резистентность.
Материалы и методы. В работе использовали вакцину “Стафиловак”, образцы которой по разработанной технологии были приготовлены ФГУП «НПО “Микроген”» Минз-
Для корреспонденции: Ахматова Н.К., e-mail: anelly@mail.ru For correspondence: Akhmatova NK., e-mail: anelly@mail.ru
драва России (серия У2) и ФГБУ НИИВС им. И.И. Мечникова РАМН (серия 51 - препарат сравнения); мышей линий СВА массой 10-12 г и BALB/с массой 16-18 г (самцы) из питомника филиал Андреевка ГУ НЦБМТ РАМН, содержащихся в условиях вивария ФГБУ НИИВС им. И.И. Мечникова РАМН. Животных выводили из эксперимента под эфирным наркозом в соответствии с “Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных”. В каждой группе исследовали по 10 мышей.
Суспензию МЛ мышей получали, гомогенизируя селезенку мышей линии СВА в 5 мл среды RPMI-1640 (“ПанЭ-ко”, Россия). Клетки осаждали центрифугированием при 4°С 1500 об/мин в течение 10 мин. Осадок ресуспендировали и удаляли эритроциты гипотоническим шоком: к осадку добавляли 900 мкл дистиллированной воды и перемешивали 10 с, затем добавляли 100 мкл 10-кратного раствора Хенк-са (МПБП, Россия). После лизиса эритроцитов спленоциты осаждали и дважды отмывали средой RPMI-1640. Спленоци-ты представляют совокупность МЛ, состоящих преимущественно из Т- и В-лимфоцитов [6].
Для выявления цитотоксической активности МЛ селезенок мышей использовали тест восстановления 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия бромида (МТТ) [17], суть которого заключается в способности живых клеток превращать растворимый желтый бромид МТТ в нерастворимые пурпурно-синие внутриклеточные кристаллы МТТ-формазана (МТТ-ф). Цитотоксическую активность МЛ определяли на линии опухолевых клеток К562. МЛ предварительно культивировали в полной среде RPMI-1649 в течение 48 ч в присутствии стафилококковых препаратов различной концентрации (1, 10, 100 мкг/мл). Опухолевые клетки (3-104 в 1 мл) инкубировали в культуральной среде с МЛ в соотношении 1:5 в плоскодонных 9б-луночных микропланшетах (Costar, Франция) 18 ч при 37°С и 4% СО2. Затем в лунки добавляли 20 мкл рабочего раствора витального красителя МТТ (Fluka, ) в концентрации 5 мг/мл. После 3-4-часовой инкубации в СО2-инубаторе планшеты центрифугировали при 200 g
- 143 -
ИММУНОЛОГИЯ № 3, 2014
Таблица 1
Цитотоксическая активность МЛ селезенок мышей при культивировании ex vivo в присутствии различных серий вакцины "стафиловак"
Препарат, вводимый в культуру МЛ Концентрация препарата, мкг/мл Цитотоксическая активность NK, (%)±m
Серия У2 1 24,4±2,3
10 33,5 ± 2,7*
100 49,5±4,3*
Серия 51 1 25,7±3,1
10 36,6±3,2*
100 51,7±4,8*
Контроль (интактные - 22,6±2,4
МЛ - без добавления препарата)
Примечание. Здесь и в табл. 2, 4: * - р < 0,05 по сравнению с показателями в контрольной группе по /-критерию Стьюдента.
(5 мин), удаляли супернатант и в лунки добавляли по 150 мкл диметилсульфоксида (Serva). По оптической плотности при X 540 нм, измеряемой на мультискане MS (Labsystem, Финляндия), рассчитывали процент лизиса опухолевых клеток (процент цитотоксичности).
ЦИ = 1 - (ОП(э+м) - ОПэ)/ОПм • 100%, где ОП(э+м) - значение оптической плотности в опытных сериях; ОПэ - значение оптической плотности в лунках с клетками-эффекторами; ОПм - значение оптической плотности в лунках с клетками-мишенями.
Культивирование клеток К562.
В работе использовали NK-чувствительную линию опухолевых клеток К562 (эритробластный лейкоз человека). Опухолевые клетки-мишени культивировали в ПКС (RPMI-1640 с добавлением 2 мМ L-глутамина, 5% фетальной сыворотки крупного рогатого скота и 0,1 мг/мл гентамицина сульфат) (“ПанЭко”, Россия) при 37°С в атмосфере 4% СО2. Клетки поддерживали в логарифмической фазе роста постоянным пассированием культуры через каждые 2-3 сут.
Иммунизацию мышей линии СВА проводили внутрибрюшинно (в/б) однократно, вводя по 0,2 мг вакцины “Ста-филовак”. Через разные интервалы времени (24 и 48 ч) у животных под эфирным наркозом извлекали селезенку для исследования киллерной активности МЛ.
Иммунофенотип МЛ селезенок мышей оценивали при помощи проточного цитометра FC-500 (Beckman Culter, США) с применением моноклональных антител (Caltag Laboratories, США) к соответствующим антигенам. Клетки отмывали холодным фосфатно-солевым буфером и окрашивали FITC-(флюоресцеинизотиоционат) и РЕ-(фикоэритрин) меченными антителами согласно инструкции производителя. На клетках, полученных из селезенок мышей, исследовали экспрессию молекул СD3, CD4, CD8, CD16, CD25, CD38, CD56, CD57, CD58 и HLA-DR, а также дифференцировоч-ных антигенов с использованием двойной метки CD3-FITC и СD16-PЕ.
Гейт (окно) популяции клеток устанавливали на основе комбинации прямого и бокового светорассеяния и размера клеток. При учете результатов подсчитывали 10 000 клеток в гейте.
Таблица 2
Динамика цитотоксической активности МЛ селезенок мышей при однократном введении в/б вакцины "стафиловак"
Период исследования после введения Цитотоксическая активность NK по отношению к линии клеток К562, КМ/КЭ 1:5, (%) ± m
препаратов Серия У2 Серия 51
Через 24 ч Через 48 ч 74,3±3,8* 66,5±3,8* 71,3±4,2* 62,4±4,2*
Контроль (интактные мыши) 32,4±2,8
Неспецифическую резистентность мышей оценивали после введения мышам линии BALB/c однократно в/б вакцины “Стафиловак” в дозе 0,4 и 0,1 мг в объеме 0,5 мл 0,9% раствора натрия хлорида. Контрольные мыши получали 0,5 мл 0,9% раствора натрия хлорида. Через 24 ч опытных и контрольных мышей заражали в/б 4 дозами Klebsiella pneumoniae 16 в 0,4% голодном агаре. Наблюдение за животными проводили в течение 10 дней. Учитывали процент выживших животных и определяли LD50 [8].
Статистическую обработку данных проводили при использовании /-критерия Стьюдента и критерия согласия Пирсона х2, используя стандартный пакет статистических программ Windows 2008 (StatSoft 8.0). Различия рассматривали как значимые при p < 0,05.
результаты. В экспериментах изучали способность вакцины «Стафиловак» к индукции киллерной активности МЛ.
На первом этапе наших исследований определяли способность стафилококковой вакцины усиливать цитотоксическую активность МЛ селезенок мышей по отношению к опухолевым клеткам эритобластного лейкоза К562 (табл. 1) в эксперименте ex vivo.
Как видно из табл. 1, с повышением концентрации исследуемых препаратов повышалась и киллерная способность натуральных киллеров (NK), т. е. отмечен дозозависимый эффект стафилококковых вакцин на функциональную активность МЛ. При этом доза препаратов, равная 10 и 100 мкг/мл, вызывала статистически значимое повышение цитотоксической активности МЛ по сравнению с таковым в контрольной группе. Минимальная доза исследуемых препаратов существенно не влияла на цитотоксический потенциал NK, но при этом все равно наблюдали тенденцию к повышению киллерной способности эффекторов. Существенных отличий в способности повышать цитотоксический потенциал NK у исследованных серий препаратов не выявили.
При культивировании МЛ селезенок мышей в присутствии исследуемых препаратов различной концентрации отметили стимуляцию функциональной активности МЛ по отношению к NK-чувствительной линии опухолевых клеток.
Далее исследовали киллерную активность МЛ селезенок мышей после введения в/б вакцины «Стафиловак». Результаты, полученные при изучении цитотоксической активности МЛ селезенок при воздействии стафилококковой вакцины серии У2 и препарата сравнения серии 51, приведены в табл. 2 и свидетельствуют о том, что оба препарата стимулировали NK-активность МЛ селезенок мышей. Максимальную активность наблюдали через 24 ч после введения препаратов, и она была выше, чем в контроле; при этом через 48 ч цитотоксическая активность, постепенно снижаясь, оставалась
Таблица 3
влияние вакцины "стафиловак" на иммунофенотип МЛ селезенок мышей
Показатель Иммунофенотип МЛ, %
МЛ МЛ + серия У2 МЛ + серия 51
CD3 40,53,8 57,6±3,6* 60,3±4,2*
CD4 22,61,3 26,3±2,1 25,2±1,3
CD8 17,2±1,1 30,8±3,6* 33,5±3,1*
CD16 16,81,5 29,6±3,7 30,1±3,3
CD25 6,7±0,8 22,7±2,3* 21,5±3,4
CD38 26,9±2,2 52,3±3,4* 58,2±4,4*
CD56 11,3±0,5 51,8±3,3* 54,7±3,9*
CD57 19,3±1,5 31,8±2,2* 25,5±1,6*
CD58 29,6±2,9 51,4±2,4* 47,3±2,7*
MHCII 12,8±2,5 44,7±3,7* 50,2±4,1*
CD3/CD16 3,3±0,4 6,3±0,4* 7,1±0,7*
Примечание. * - статистически значимые различия (p<0,05) по /-критерию Стьюдента для сопряженных пар признаков по сравнению с МЛ.
- 144 -
ИНФЕКЦИОННАЯ ИММУНОЛОГИЯ
Таблица 4
Влияние стафилококковой вакцины серии У2 на неспецифическую резистентность мышей в опыте защиты от заражения K. pneumoniae 16
Иммунизация Заражение K. pneumoniae 16
вакцина доза, мкг доза, млн выжило/ заражено % выживших LD5„ отличия с контролем по х2*
У2 100 0,36 10/10 100 5,8Н06 X2 = 6,302,
1,1 10/10 100 р = 0,012;
3,3 2/10 20
10 0/10 0
400 0,36 10/10 100 6,7Н06 X2 = 14,486;
1,1 10/10 100 р < 0,001
3,3 8/10 80
10 0/10 0
Контроль 0,9% рас- 0,36 10/10 100 0,52-106
твор натрия 1,1 0/10 0
хлорида 3,3 0/10 0
10 0/10 0
значительно выше, чем в контроле. Активность изученных серий вакцины не различалась между собой и была выше активности контроля в 2,3-2,05 и 2,2—1,9 раза (соответственно через 24 и 48 ч).
При исследовании иммунофенотипа установили, что добавление в среду культивирования МЛ селезенок стафилококковой вакцины способствовало увеличению количества клеток, экспрессирующих поверхностные антигены цитотоксических лимфоцитов (ЦТЛ) и NK (табл. 3). Значительное количество МЛ периферической крови, инкубированных с исследуемыми сериями вакцины, экспрессировали на своей поверхности активационные антигены CD38 и MHCII. Данные клетки также характеризовались высоким уровнем экспрессии маркеров NK CD56, CD16 и высоким процентным содержанием CD8+-клеток по сравнению с интактными МЛПК. Количество CD8+-, CD16+-, CD38+-, CD56+-, MHCII+-клеток при инкубации МЛ с вакциной повышалось в среднем в 1,5 раза по сравнению с таковым в контроле. Результаты экспериментов продемонстрировали умеренное повышение (по сравнению с таковым в контрольной группе) количества CD3+ и CD4+ Т-клеток в популяции мононуклеаров.
На заключительном этапе провели исследование способности вакцины «Стафиловак» (серия У2) к индукции неспецифической резистентности у мышей по отношению к гетерологичному патогену K.pneumoniae 16. Данные табл. 4 демонстрируют повышение выживаемости иммунизированных стафилококковой вакциной животных при заражении K.pneumoniae. Иммунизирующая доза вакцины, равная 0,4 мг, более эффективно защищала мышей (80% выживаемость) по сравнению с дозой 0,1 мг (20% выживаемость) при заражающей дозе 3,3-106 микробных клеток (6 LD50). Следует отметить, что вакцина «Стафиловак» при заражении K.pneumoniae 16 в дозе, равной 1,1-106 (2 LD50), обеспечивает 100% выживаемость при 100% гибели в контроле (неиммунизированные мыши).
Обсуждение. В результате исследований выявили, что вакцина «Стафиловак» значительно повышает функциональную активность МЛ селезенок мышей. Высокий уровень цитотоксической активности МЛ, активированных вакциной, обусловлен, очевидно, одновременной индукцией ЦТЛ — CD8+ и NK — CD56+-, CD16+-клеток. Как было отмечено в наших предыдущих исследованиях, механизм действия иммуномодуляторов микробного происхождения отличает его от механизма действия интерлейкина-2, вызывающего главным образом генерацию NK-подобных ЛАК-клеток [9, 10]. Активация лейкоцитов под действием вакцины «Стафило-вак» подтверждается также усилением экспрессии активационных и адгезивных молекул (CD38, CD56, CD58, HLA-DR) на их поверхности.
Известно, что в популяции активированных лимфоцитов наряду с ЦТЛ и NK присутствуют NK Т-клетки (NKT), экспрессирующие как маркеры NK (CD16, CD56), так и Т-клеточные диф-ференцировочные антигены (CD3, CD4, CD8) [11—13]. Эту субпопуляцию лимфоцитов обнаруживают в основном при инфекционном процессе в печени и легких, но она практически отсутствует в периферической крови [14—16]. При активации МЛ исследуемыми сериями вакцины “Стафиловак” повышалось содержание двойных позитивных клеток (CD3/CD16), что позволяет отнести их к популяции NKT. Эти данные подтверждаются усилением цитотоксических свойств активированных клеток, поскольку по своей спонтанной киллерной активности NKT значительно превышают МЛ и не уступают в этом отношении ЛАК. Возможно, усилением цитотоксичности NR! и NKT можно объяснить формирование несцифической резистентности у мышей под воздействием вакцины “Стафило-вак” при заражении их гетерологичным патогеном K.pneumoniae 16.
Таким образом, результаты проведенных исследований показали, что вакцина “Стафиловак” индуцирует активацию киллерных свойств мононуклеаров, которые при этом приобретают свойственный им фенотип.
Эти данные свидетельствуют об активации врожденных механизмов иммунной системы под воздействием стафилококковой вакцины, а также о возможности использования вакцины “Стафиловак” как для экстракорпоральной генерации активированных лимфоцитов, так и для активации кил-лерных свойств МЛ клеток in vivo.
Работа выполнена в рамках ФЦП “Развитие фармацевтической и медицинской промышленности Российской Федерации на период до 2020 года и дальнейшую перспективу” по контракту 16.N08.12.1004 “Доклинические исследования лекарственного средства для профилактики и терапии гнойносептических внутрибольничных инфекций, вызываемых условно-патогенными бактериями”.
литература
1. Семенов Б.Ф. Терапевтические вакцины. Российские медицинские вести. 2000; 5(3):26—32.
2. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Иммуномодуляторы: механизм действия и клиническое применение. Иммунология. 2003; 4: 196—203.
3. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Основные принципы иммуномодулирующей терапии. Аллергия, астма и клиническая иммунология. 2000; 1: 9—15.
4. Кузьменко О.М., Ахматов Э.А., Грубер И.М., Кунягина О.А., Лебединская Е.А., Кабановская И.Н., Некрасов А.М., Бродовский М.В., Уткина Н.П. Влияние комплекса антигенов стафилококка на иммунофенотип мононуклеарных лейкоцитов. Медицинская иммунология. 2009; 11(4—5): 321-2.
5. Кузьменко О.М. Характеристика антигенных препаратов, выделенных из вакцинных штаммов Staphylococcus aureus, культивируемых в различных условиях. Дисс. М.; 2010.
6. Boehm T., Hess I., Swann J.B. Evolution of lymphoid tissues. Trends Immunol. 2012; 33(6): 315—21.
7. Zund G., Ye Q., Hoerstrup S.P., Schoeberlein A., Schmid A.C., Grunenfelder J., Vogt P., Turina M. Tissue engineering in cardiovascular surgery: MTT, a rapid and reliable quantitative method to assess the optimal human cell seeding on polymeric meshes. Eur. J. Cardiothorac. Surg. 1999; 15 (4): 519—24.
8. Ашмарин И.П., Воробьёв А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Медгиз; 1962.
9. Лебединская О.В., Велижева Н.П., Доненко Ф.В., Черешнев В.А., Родионов С.Ю., Ахматова Н.К., Шубина И.Ж., Лебединская Е.А., Киселевский М.В. Влияние препарата про-
- 145
ИММУНОЛОГИЯ № 3, 2014
феталь на дифференцировку и функциональную активность мононуклеарных лейкоцитов человека. Клеточные технологии в биологии и медицине. 2006; 2: 108-17.
10. Черешнев В.А., Лебединская О.В., Родионов С.Ю., Ахматова Н.К., Шубина И.Ж., Лебединская Е.А., Гаврилова Т.В., Киселевский М.В. Влияние препарата “Профеталь” на функциональную активность мононуклеарных лейкоцитов и дендритных клеток человека. Медицинская иммунология. 2005; 7(5-6): 525-34.
11. Bhardwaj N. Harnessing the immune system to treat cancer. J. Clin. Invest. 2007; 117(5): 1130-6.
12. Duwaerts C.C., Sun E.P., Cheng C.W., van Rooijen N., Gregory S.H. Cross-activating invariant NKT cells and kupffer cells suppress cholestatic liver injury in a mouse model of biliary obstruction. PLoS One. 2013; 15, 8(11): 79702.
13. Pillai A.B., George T.I., Dutt S., Teo P., Strober S. Host NKT cells can prevent graft-versus-host disease and permit graft antitumor activity after bone marrow transplantation. J. Immunol. 2007; 178 (10): 6242-51.
14. Diefenbach A. Innate lymphoid cells in the defense against infections. Eur. J. Microbiol. Immunol. 2013; 3(3): 143-51.
15. Hudspeth K., Pontarini E., Tentorio P., Cimino M., Donadon M., Torzilli G. The role of natural killer cells in autoimmune liver disease: A comprehensive review. J. Autoimmun. 2013; 46: 5565.
16. Nakagawa R., Nagafune I., Tazunoki Y. et al. Mechanisms of the antimetastatic effect in the liver and of the hepatocyte injury induced by a-galactosylceramide in mice. J. Immunol. 2003; 166 (11): 6578-84.
Поступила 24.03.14
REFERENCES
1. Semenov B.F. Therapeutic vaccine. Russiyskiye meditsinskiye vesti. 2000; 5 (3): 26-32. (in Russian)
2. Khaitov R.M., Pinegin B.V Immunomodulators: mechanism of action and clinical application. Immunologiya. 2003; 4: 196-203. (in Russian)
3. Khaitov R.M., Pinegin B.V. Basic principles of therapies. Allergiya, astma i klinicheskaya immunologiya. 2000; 1: 9-15. (in Russian)
4. Kuz’menko O.M., Akhmatov E.A., Gruber I.M., Kunyagina
O.A., Lebedinskaya E.A., Kabanovskaya I.N., Nekrasov A.M., Brodovskiy M.V., Utkina N.P. Influence of complex antigens of staphylacoccus on immunophenotype of mononuclear leukocytes. Meditsinskaya immunologiya. 2009; 11 (4-5): 321-2. (in Russian)
5. Kuz’menko O.M. Characteristic of Antigenic Preparations Isolated from Vaccine Strains Staphylococcus Aureus, Cultured
under Different Conditions. [Kharakteristika antigennykh preparatov, vydelennykh izvaktsinnykh shtammov Staphylococcus aureus, kul’tiviruemykh v razlichnykh usloviyakh]. Diss. M.; 2010. (in Russian)
6. Boehm T., Hess I., Swann J.B. Evolution of lymphoid tissues. Trends Immunol. 2012; 33(6): 315-21.
7. Zund G., Ye Q., Hoerstrup S.P., Schoeberlein A., Schmid A.C., Grunenfelder J., Vogt P., Turina M. Tissue engineering in cardiovascular surgery: MTT, a rapid and reliable quantitative method to assess the optimal human cell seeding on polymeric meshes. Eur. J. Cardiothorac. Surg. 1999; 15 (4): 519-2-4.
8. Ashmarin I.P., Vorob’yev A.A. Statistical Methods in Microbiological Studies. [Statisticheskiye metody v
mikrobiologicheskikh issledovaniyakh]. Leningrad: Medgiz; 1962. (in Russian)
9. Lebedinskaya O.V., Velizheva N.P., Donenko F.V., Chereshnev V.A., Rodionov S.Yu., Akhmatova N.K., Shubina I.Zh., Lebedinskaya E.A., Kiselevskiy M.V. Influence of profetal on the differentiation and functional activity of human mononuclear leukocytes. Kletochnyye tekhnologii v biologii i meditsine. 2006; 2: 108-17. (in Russian)
10. Chereshnev V.A., Lebedinskaya O.V., Rodionov S.Yu., Akhmatova N.K., Shubina I.Zh., Lebedinskaya E.A., Gavrilova T.V., Kiselevskiy M.V. Effect of the drug “profetal” on the functional activity of mononuclear leukocytes and dendritic cells. Meditsinskaya immunologiya. 2005; 7 (5-6): 525-34. (in Russian)
11. Bhardwaj N. Harnessing the immune system to treat cancer. J. Clin. Invest. 2007; 117(5): 1130-6.
12. Duwaerts C.C., Sun E.P., Cheng C.W., van Rooijen N., Gregory S.H. Cross-activating invariant NKT cells and kupffer cells suppress cholestatic liver injury in a mouse model of biliary obstruction. PLoS One. 2013; 15, 8(11): 79702.
13. Pillai A.B., George T.I., Dutt S., Teo P., Strober S. Host NKT cells can prevent graft-versus-host disease and permit graft antitumor activity after bone marrow transplantation. J. Immunol. 2007; 178 (10): 6242-51.
14. Diefenbach A. Innate lymphoid cells in the defense against infections. Eur. J. Microbiol. Immunol. 2013; 3(3): 143-51.
15. Hudspeth K., Pontarini E., Tentorio P., Cimino M., Donadon M., Torzilli G. The role of natural killer cells in autoimmune liver disease: A comprehensive review. J. Autoimmun. 2013; 46: 5565.
16. Nakagawa R., Nagafune I., Tazunoki Y. et al. Mechanisms of the antimetastatic effect in the liver and of the hepatocyte injury induced by a-galactosylceramide in mice. J. Immunol. 2003; 166 (11): 6578-84.
Received 24.03.14
- 146 -
