������������ ����. 2024. � 4. �. 73 � 79
�he Veterinarian. 2024; (4): 73 � 79
������� ������
��� 619.615.373.6
DOI: 10.33632/1998-698�_2024_4_73
������������� ������ �������� ��������� ������������������� ��������� ������ ������ ������������-�������� �������� ��������� �������� �������� �����
������� ����������� ������, [email protected]
���������� ��������������� �������� �����������, ������, ���������� ���������
�����, ������������� �� ���������: ������� ����������� ������.
���������. � ������ ������������ ���������� ��������� ������������������ ��������������� �� ������������� ���������, ������� ����������� � ������� ������� �������� ��������������� (����) � ������� ���������� ��������������� (����). ���������� �������� � �������� ������ (��) � ����, ������������� ������������ (���) � ����, ������������-������������� �������� (���) � ���� � ����������-3 (��-3) � ����. ��� ���� �������� ��������� ����������: �� � 1:256, ��� � 1:256, ��� � 1:128, ��-3 � 1:2048. �� ������������� ��������� �������� �������������� �� ���� ��������� �������: ������ � 2338375 � ������� �������� ������ ��� ��������� ����� ��� ��������� ������������������ � ������������ ��������������; ������ � 2116082 � ������� ��������� �����-��������� ��� ������� ��������������� ����������� ��������; ������ � 2112799 � ������� ��������� �������� ��������� �� ��������� ����� ���������. ���������� �����-��������� � �������� �������� ���������� � ������� ���������������������� ������������������ �������. ���������� �������� ������� � ��������, ���������� �� ������� ������ ��������� � ���������� 0,008 ��, ?-���������� 0,005 ��, ?-���������� 0,014 ��, �����-��������� 0,084 ��. ��������� �� ������� �������������� - ���������� 0,016 ��, ?-���������� 0,011 ��, ?-��������� �������������, �����-��������� 0,05 �� � ���������� �� �������� ������ ��������� - ���������� 0,001 ��, ?-���������� 0,018 ��, ?-���������� 0,003 ��, �����-��������� 0,086 ��. ������������ ������ ���������� �������� ���������� ��������������� � ���������. ���������� ��������������� � �������, ���������� �� ������� ������ �������� 59,82 �/�. ���������� �� ������ � ������� ��������, �������������� � 51,33 �/� � 62,95 �/�.
�������� �����: �������� ������, ������������ �����������, ���������-3, ������������-������������� ��������, ��������������, �������������, ���������������������
��� �����������: ������ �. �. ��������� ������������������� ��������� ������ ������ ������������-�������� �������� ��������� �������� �������� ����� // ������������ ����. 2024. � 4. �. 73 � 79. DOI: 10.33632/1998-698�_2024_4_73
COMPARATIVE ANALYSIS OF A METHODS FOR OBTAINING AN IMMUNOGLOBULIN PREPARATION AGAINST ACUTE RESPIRATORY INTESTINAL INFECTIONS OF YOUNG CATTLE
Dmitry Anatolyevich Petrov, [email protected]
Udmurt State Agrarian University, Izhevsk, Russian Federation
Corresponding author: Dmitry Anatolyevich Petrov.
Abstract. The article presents the results of obtaining a polyspecific immunoglobulin from hyperimmune serum, which was studied using the indirect hemagglutination reaction (RNGA) and the hemagglutination inhibition reaction (RTGA). Antibodies to viral diarrhea (VD) in RNGA, infectious rhinotracheitis (IRT) in RNGA, respiratory syncytial infection (RSI) in RNGA and parainfluenza-3 (PG-3) in RTGA were determined. The following results were obtained: VD � 1:256, IRT � 1:256, RSI � 1:64, PG-3 � 1:2048. Immunoglobulin was obtained from hyperimmune serum using three well�known methods: patent No. 2338375 � "Method for storing plasma or blood serum for the production of immunoglobulin and albumin biologics"; patent No. 2116082 - "Method for obtaining gamma globulin for the treatment of epizootic lymphangitis of horses"; patent No. 2112799 � "Method for obtaining growth proteins from animal serum". The gamma globulin content in the final product was determined using a turbidimetric photoelectrocolorimeter. The extinction of protein fractions in the product obtained by the first method was - albumins 0.008 nm, ?-globulins 0.005 nm, ?-globulins 0.014 nm, gamma globulin 0.084 nm. The result of the second method, respectively, was albumins 0.016 nm, ?-globulins 0.011 nm, ?-globulins were absent, gamma globulin 0.05 nm and the result of the third method was albumins 0.001 nm, ?-globulins 0.018 nm, ?-globulins 0.003 nm, gamma globulin 0.086 nm. The absolute values of the immunoglobulin content in the biopreparation were calculated. The immunoglobulin content in the sample obtained by the first method was 59.82 g/l. The result for the second sample was 51.33 g/l and 62.95 g/l in the third sample, respectively.
Keywords: viral diarrhea, infectious rhinotracheitis, parainfluenza-3, respiratory syncytial infection, immunoglobulin, biotechnology, photoelectrocolorimeter
��������. ���������������� ����������� ��������� ������������ � ����������, ������������ �� ������ ������������-�������� ��������. ������������ ���������������� ���������� ��� ���������� � ��������� � ���������, �������� ��������� ��������, ��������� �� ���������� � ���������� �������, ��� �������� � ������������� ��������� ��������. �������� ����� ����������� �������� ����������� � ��������� �������� �������� �����: �������� ������, ������������ �����������, ������������-������������� �������� � ���������-3. ��� ������������� ������ ����������� ��������� ������ ������ � ���� ��������� �� ����������� �����������, �������� �������� ��������� � ������� ��������� [1, 2].
����� �� ������� ������������ ������ ������������� �������� �������� (����) �������� �������� ����� �������� ������������� ������������������� � ����������������� ���������. ����� ���������� �������� ������������ ��-�� �������� ����������� ������� ��� ������������� ������� �������� � ������������� �������� [3].
������ �������� � ���������� ������ � ����� �������� ������������ ������. �������� ������ � ��������� ������ ������� ���������� ���� ������������ ��-�� ������������ ������� ������������. ����� �������� ������� ���������� ��������������� � ������� ���������� ��������� ����� ���������� ���������. ����� � ������ �������������� ���� ��������������� ������ ���������� �������� �����������, ������� ����� ����� ����������� � ������������ ������������ ������ �������� ����� ����� ����� [3, 4]. �������� ���� � ������������ ���������� � ��������� ������ ��������. �������� ��������� ����������������� ����������� ��������� ��� � ����� ����������, ���� ���������� �������� � ������ ����������� ����� (����������� ���������������), ������� �������� �� ����������� �����, �� ��������������� ��� � ������ �������� ��������. ������ �������� ����� �������� � ����� ��������������� �������� ��-�� ����������������� �������������� ����������. � ����� � ���� ���������� ������� ��������� ��������� ����������� �������, � ������� ����� ��������� ������� � ������� ����������� ����� [5].
��� ���������� �������-���������������� ����������� ������������ ����� ��������� ��������� ���������. �������� ����� ������������ ��������� ��� �����-��������� � ������������� ���������. ��������� ����������� ����� ��������� ���������������� �����������-��������� ������������� ��� ���������� ���������� � ������������ ���������� ������ ���� �������� �������� ����� [6, 7]. ������������� ��������� �����, ��� �������������, ��� � ������������� �������. �� ������������� � �����������, �������� � �������� ���������. ������ � ������� ��������� �� ���� �������� � �� 40 ��, �� ������� ����� ������������ ���������� ����� ��������� � ������� � ����� ������������ ���������� �������, ������� ����� ������� ������������� �������.
������������� ������������� ��������� �������� ��������, ���������� ���������������, ��� ���������� �������. ����� � ��������� � ����������� ��������� � ������� ��������� � ��������� ��� ������, ��� ����� ������� ������������ ��� ��������������������� ����������� [1, 2, 7]. � ���� ����� ����� ������������ ��������� ���������� � ��������� ������������������ ��������������� ������ ������ ������������-�������� �������� ��������� �������� �������� �����.
��������� � ������. ������������ ����������� �� ������� ������������� � �����������-���������� ���������� ����� �� �����. ������� ������������ ������������� ���������, ���������� �� ������������� ���� ����� ����������� ��������-�����������. � ��������� ���������� ���� ������� � ������� ������� �������� ��������������� (����) � ������� ���������� ��������������� (����).
��� ��������� ��������������� ������������ ��� ��������: ������� �������� ������ ��� ��������� ����� ��� ��������� ������������������ � ������������ ��������������, ������� ��������� �����-��������� ��� ������� ��������������� ����������� ��������, ������� ��������� �������� ��������� �� ��������� ����� ���������. ���������� �����-��������� ���������� � ������� ���������������������� (���) ������������������ �������.
���������� ������������ � �� ����������. ��� ��������� �����-��������� �������������� ������������� ��������� �� ��������-����������� �� ���������� ������� �������: �������� ������ (��) - 1:256, ������������ ����������� (���) � 1:256, ������������-������������� �������� (���) � 1:128, ���������-3 (��-3) � 1:2048.
��� ��������� ��������������� ������������ ��� ��������� ������:
������ �. �. ���������, �. �. �������, �. �. ���������� � ������ ����������� � ���������: � ��������� ����� ������ 40 % ������� ������ � ��������� �� ��� �������� ������������ (0,7�0,2) %. ����� ���������� � ������� 5 ���� � ������������ ������� ��������� ��������� ����� ������� ������� �� 50 % ������������ �� �����������. ��������-���������� ��������� ���������� �����������������. ���������� ���������� � �����������: 3000 ��/���, 30 ����� ��� ����������� +10 ��. ���������� ������ ������������ � 1 % �������� ������� ������� � ������ 1/10 �� ��������� ������ ��������� �����. ������������� ������������ � ������� 2-� �����. ��������������� ������ �������� ������� ������� ������������������. � ������������ ��������� ���-6000, ������� ������ � �������-������� ����������� �� �������� ������������ 15 %. �������� �������� ����� ��� ���������� �������������. �� ��������� �������������� 1,5-2-� ����� ����� ������� ����������� ���-6000 ��������� ��������������. ������ ������������ ����� ������������ ��� ������������� ��� � ���������� ������� ������������ ������������������ ������������� [8].
������ �. �. ������, �. �. ����������, �. �. �������� ������� � ���, ��� �� ���������� ����� ��������������������� �������� ����� ��������� ���������, ������� �� �� �� 6,9-7,2. � ��������� ��������� 50 % ������ ������� ����������������� �� �������� ������������ 20 %. ��������� ������������ � ����� ����������� ���������� ��� 10�� �� ���������� ����������������� ��� 2500 ��/��� � ������� 30 ����� ��� ��������� ������, ����������� �����-���������. �����-�������� �������������� � ��������������� �������� � 1/50 ��������� ������ [9].
����� �. �. �������, �. �. �������, �. �. �������, �. �. �������� ������������ ���������: � 80 �� ��������� �������� �������� ����� ��� ���������� ������������� �������� ��������� 4 � ����������������� � ������������ ������ 6000 (�������������� ������������� �� ������� ��������). ���������� ����� ����� ������������� � ������� 10 ����� ��������� ��� ����������� 4-6�� �� 10 � ��� ����������� �������� ������. ������������ �������� ��������� �����������, ������� �� ������������ 0,1 �. ��������� ������� ������� �� 4,8 � �������� ��� ���������� ������������� ��������� ������� ��� �� ��������� ��� ���������� � ������������ 20 %. ����� ��������� ������������ � �������� ����������� ���� �������������-����������. ����������� �������, ������ ���������� � 50 �� ���������������� ����, �������� ������������� ���������� � ���������� ����� [10].
���������� �������� ��������, ���������� ������������ �������, ���������� ������������������� ������������. �������� ������� ������ ������������ ���������� � ���, ��� ��������� �������� ������� ��������� ����� �������� ���������� ���������� ���������� ������������ ������������. ��� ���� ���������� ����� ������ ������ � ������� �������. �� ������� �������� ��������, ��������������� � ������� ����������������������, ����� � ������������ ������ � ����������� �����.
������ ������������ ��������� � ��������� ������:
���������� ���������: �) ������� �������� ��������� ������� � 33,5 � ������ ����� ���������� � 400 �� ���������������� ����, ��������� 226,8 � ��������������� ����� ���������������. ����� ����������� ��������� �� ��������� ����������� � ��������� ���������������� ���� �� ������ 500 ��.; �) ������� ������� ��������� �������� � �� ��������� ���������� �������� ����� � ������ ����� �� 100 ��: 92,4 �� (� 1), 74,9 (� 2), 58,8 �� (� 3), 48,7 �� (� 4) � ������� ���������������� �����. ��������� ����������� ����� ������������.
�� ������ ����������� ����� ���������� �� 6 ��������, ��������� �� ������� 0, 1, 2, 3, 4, 5.
� �������� � 0 ������ 10 �� ���������������� ����, � � �������� � 1, 2, 3, 4 � �� 5 �� ��������������� ������� ��������� ���������.
� �������� � 5 � 0,5 �� ��������� �����, 0,75 �� ���������������� ���� � 3,75 �� ��������� ���������� ��������, ��������� � ������������ ����� �������������� �� 5-6 ���.
�� �������� � 5 ��������� �� 0,5 �� ����� � �������� � 1, 2, 3, 4 � 1 �� � �������� � 0. ���������� �������� ���������, �� ��������� ������������, ������� ����������� ��������� �������.
����� 15 ����� ���������� �� ���� ���������� ��������� ��������� ��� ������� ������������ � ������ �������� ���� 1 ��. ��������� ���������� ��������� �������� � �������� ������������������: �������� � 4, 3, 2, 1.
���������� ������ ���������� �������� ������� ������������ � ������� 1.
������� 1 � ���������� �������� ������� � ���������, ��
�������� �������
�����������
������� ��������, �� ?-��������, �� ?-��������, �� ?-��������, �� ����� ����������, ��
������ �������� ������ ��� ��������� ����� ��� ��������� ������������������ � ������������ ������������� 0,008 0,005 0,014 0,084 0,111
������ ��������� �����-��������� ��� ������� ��������������� ����������� ������� 0,016 0,011 0 0,05 0,077
������ ��������� �������� ��������� �� ��������� ����� �������� 0,001 0,018 0,003 0,086 0,108
���������� ����� ����� � ������������ � ������� �������������� ����������� �STAT FAX� 1904+�, ������� �������� 79,06 � 2,56 �/�.
������ ���������� �������� �����-��������� ��������� �� ��������� �������:
x=(���*�)/����,
���, � � ���������� ������� �������� �������, �/�;
��� � ���������� ������ �������;
� � ������������ ������ ����� � ������������� ���������, �/�;
���� � ����� ���������� ���� �������.
������������ ������������ ������� � 3 ������ ������������ � ������� 2.
������� 2 � ���������� �����-������������ ������� � ������������, �/�
�������� �������
�����������
������� ?-��������, �/�
������ �������� ������ ��� ��������� ����� ��� ��������� ������������������ � ������������ ������������� 59,8
������ ��������� �����-��������� ��� ������� ��������������� ����������� ������� 51,3
������ ��������� �������� ��������� �� ��������� ����� �������� 62,9
����������. ��������� ������ ���� �������� ��������� ������������������ ������� �� ��������� ����� ������� �������� ������� ���������� �������� �������� � 62,9 �/�, ������� ������� �� �������, ���������� �������� �. �. ��������, �. �. �������� � ��. ��� ������ ������ ��������� ��������������� � �������� �������� ��� ������������ ���� ���� �� ��������� � ������� ��������, �������������� �� 5,2 � 22,6 %.
������ ����������
��������, �. �. ���������������� ��������-����������� � ����� ��������� ������������� ��������� ������ ������ ������������-�������� �������� �������� �������� ����� / �. �. ��������, �. �. ������, �. �. ������ // ������� ���������� � ��������� � ������� �������������� ����� ����������������� ���������: ��������� ������������� ������-������������ �����������. � 2-� �����, ������, 15�18 ������� 2022 ����. ��� II. � ������: �������� ��������������� �������������������� ��������, 2022. � �. 166-171.
������������� ����������� ��������� �������� �������� ����� / �. �. ��������, �. �. ���������, �. �. ��������, �. �. �. ��������� // ����������� �������. � 2022. � �. 11, � 3. � �. 203-209.
�������-������������������ ������������ �������� �������� ����� �� ���������-3 / �. �. ���������, �. �. �������, �. �. ������������ [� ��.] // ������ ������� ��������� ��������������� �������� ������������ �������� ��. �.�. �������. � 2023. � �. 256, � 4. � �. 43-49.
�������� ����������� ������������ ����������� ���� �������� �������� ����� ��� ������������ �������� / �. �. ���������, �. �. �������, �. �. ������ [� ��.] // �������� ������� �����. � 2020. � � 5(196). � �. 59-67.
������������� ��������� ��� ������������� ������ ��������������� �������� ������ ������������� �������� �������� � ����� / �. �. ������, �. �. ���������, �. �. ������, �. �. ��������� // ����������� �������. � 2021. � � 1(36). � �. 29-32.
��������� ������������� ������������� ��������� ������ ������ ������������-�������� �������� �������� �������� ����� / �. �. ��������, �. �. ������, �. �. ���������, �. �. ������ // ������ ������� ��������� ��������������� �������� ������������ �������� ��. �.�. �������. � 2023. � �. 255, � 3. � �. 217-221.
��������, �. �. ����������� ����������� ������������������ ������� � ������������ ������ ������������� �������� �������� �������� �������� ����� / �. �. ��������, �. �. ������, �. �. ������� // �������� ������� �����. � 2017. � � 3(157). � �. 5-8.
������ � 2338375 C2 ���������� ���������, ��� A01N 1/02, A61K 35/16. ������ �������� ������ ��� ��������� ����� ��� ��������� ������������������ � ������������ �������������: � 2006131784/15: �����. 04.09.2006: �����. 20.11.2008 / �. �. ��������, �. �. ������, �. �. ��������� [� ��.]; ��������� ��������������� ��������������� ���������� ������� ����������������� ����������� "���������� ��������������� �����������".
������ � 2116082 C1 ���������� ���������, ��� A61K 38/16. ������ ��������� �����-��������� ��� ������� ��������������� ����������� �������: � 97110294/13: �����. 24.06.1997: �����. 27.07.1998 / �. �. �����, �. �. ���������, �. �. ������� [� ��.]; ��������� ������������� ������-����������������� �������� ������ ��������.
������ � 2112799 C1 ���������� ���������, ��� C12N 5/02. ������ ��������� �������� ��������� �� ��������� ����� ��������� ����� ��������: � 96103039/13: �����. 16.02.1996: �����. 10.06.1998 / �. �. �������, �. �. �������, �. �. �������, �. �. ��������.
References
Krysenko, Yu. G. Hyperimmunization of producing animals in order to obtain hyperimmune serum against acute respiratory intestinal infections of cattle / Yu. G. Krysenko, D. A. Petrov, I. S. Ivanov // Scientific developments and innovations in solving strategic tasks of the agro-industrial complex: Materials of the International scientific and practical conference. In 2 volumes, Izhevsk, February 15-18, 2022. Volume II. Izhevsk: Izhevsk State Agricultural Academy, 2022. � pp. 166-171.Respiratory diseases of young cattle / T. S. Ermilova, M. A. Samburova, O. V. Kasharnaya, E. A. O. Salimzade // Veterinary medicine today. - 2022. � vol. 11, No. 3. � pp. 203-209.
Respiratory diseases of young cattle / T. S. Ermilova, M. A. Samburova, O. V. Kasharnaya, E. A. O. Salimzade // Veterinary medicine today. - 2022. � Vol. 11, No. 3. � pp. 203-209.
Clinical and epizootological studies of cattle for parainfluenza-3 / A. K. Galiullin, V. G. Gumerov, R. Ya. Gilmutdinov [et al.] // Scientific notes of the Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N.E. Bauman. - 2023. � Vol. 256, No. 4. � pp. 43-49.
The importance of complex laboratory diagnostics of acute respiratory viral infections in cattle for veterinary practice / A. P. Poryvaeva, O. G. Petrova, E. V. Pechura [et al.] // Agrarian Bulletin of the Urals. � 2020. � � 5(196). � Pp. 59-67.
Colostral immunity as an analytical factor in predicting the development of acute respiratory viral infections in calves / E. N. Shilova, A. P. Poryvaeva, E. V. Pechura, L. V. Khalturina // Veterinary medicine today. � 2021. � � 1(36). � Pp. 29-32.
Obtaining hyperimmune polyvalent serum against acute respiratory intestinal infections of cattle / Yu. G. Krysenko, I. S. Ivanov, E. V. Maksimova, D. A. Petrov // Scientific notes of the Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N.E. Bauman. - 2023. � Vol. 255, No. 3. � pp. 217-221.
Alekseev, A.D. Modern possibilities of immunomodulatory therapy in the prevention of acute respiratory viral infections of cattle / A.D. Alekseev, E. S. Odegov, O. G. Petrova // Agrarian Bulletin of the Urals. � 2017. � � 3(157). � Pp. 5-8.
Patent No. 2338375 C2 Russian Federation, IPC A01N 1/02, A61K 35/16. Method of storing plasma or serum for the production of immunoglobulin and albumin biologics: No. 2006131784/15: application 04.09.2006: publ. 20.11.2008 / A. K. Barsukov, A.V. Barmin, O. Yu. Nesterova [et al.]; the applicant is a State educational institution of higher professional education "Udmurt State University".
Patent No. 2116082 C1 Russian Federation, IPC A61K 38/16. Method of obtaining gamma globulin for the treatment of epizootic lymphangitis in horses: No. 97110294/13: application 24.06.1997: publ. 27.07.1998 / A. A. Gusev, V. D. Borzionov, E. N. Utesheva [et al.]; the applicant is the All-Russian Scientific Research Institute for Animal Protection.
Patent No. 2112799 C1 Russian Federation, IPC C12N 5/02. A method for obtaining growth proteins from blood serums of various animal species: No. 96103039/13: application. 02/16/1996: publ. 06/10/1998 / G. A. Kostina, I. F. Radaeva, S. B. Shmeleva, M. A. Andreeva.
��� ������ ������� ������������� ����� � ���������� ����������.
������ ������������ ���������� ��������� ����������/������������ ���������, ��������� � ���������� ������.
All authors have made an equivalent contribution to the preparation of the publication.
The authors declare that there is no conflict of interest.
������� � ���������� / accepted for publication 26. 02. 2024;
_______________________________________________________________________________________
� ������ �. �. 2024