Научная статья на тему 'СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ СОДЕРЖАНИЯ α2-МАКРОГЛОБУЛИНА И АССОЦИИРОВАННОГО С БЕРЕМЕННОСТЬЮ α2-ГЛИКОПРОТЕИНА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЖЕНЩИН ПРИ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОМ ОПЛОДОТВОРЕНИИ'

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ СОДЕРЖАНИЯ α2-МАКРОГЛОБУЛИНА И АССОЦИИРОВАННОГО С БЕРЕМЕННОСТЬЮ α2-ГЛИКОПРОТЕИНА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЖЕНЩИН ПРИ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОМ ОПЛОДОТВОРЕНИИ Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
298
51
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
α2-макроглобулин / ассоциированный с беременностью α2-гликопротеин / БЕРЕМЕННОСТЬ / экстракорпоральное оплодотворение / б2-macroglobuline / б2-glucoprotein associated with pregnancy / extracorporeal fertilization

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Мальцева Н. В., Маркина Л. А., Баженова Л. Г., Чирикова Т. С., Белогорлова Т. И.

У 45 женщин с трубным бесплодием, участвовавших в программах экстракорпорального оплодотворения (ЭКО), исследованы количественные изменения в сыворотке крови α2-макроглобулина (МГ) и ассоциированного с беременностью α2-гликопротеина (АБГ) до вступления в программы ЭКО, после гормональной индукции суперовуляции и через 3-4 недели после переноса эмбрионов. В качестве контрольных групп обследовали 17 здоровых небеременных женщин репродуктивного возраста и 14 женщин с физиологически наступившей беременностью в сроке 3-4 недели. Концентрацию макроглобулинов в образцах сыворотки крови определяли с помощью метода ракетного иммуноэлектрофореза. Результаты показали, что применение гонадотропинов для индукции суперовуляции приводит к повышению уровня МГ и АБГ, и высокая их концентрация сохраняется как при положительном, так и при отрицательном результате ЭКО через 3-4 недели после переноса эмбрионов. При этом сывороточный уровень АБГ у женщин с индуцированными ЭКО беременностями в несколько раз превышает соответствующий показатель для нормальной беременности такого же гестационного периода. МГ может являться благоприятным прогностическим критерием эффективности программ ЭКО, так как его высокая концентрация ассоциируется с наступлением индуцированной беременности.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Мальцева Н. В., Маркина Л. А., Баженова Л. Г., Чирикова Т. С., Белогорлова Т. И.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Quantitative changes of serum α2-macroglobulin (MG) and pregnancy-associated α2-glycoprotein (PAG) were investigated in 45 women with tubular infertility before their entering in extracorporeal fertilization programs (ECF), after hormonal induction of ovulation and 3-4 weeks after the embryo transfers (ET). Seventeen healthy non-pregnant women and 14 women with physiological pregnancy in terms of 3-4 weeks were observed as controls. Macroglobulin concentration in the samples of blood serum was determined using rocket immunoelectrophoresis. The results showed that gonadotropinstimulated ovulation results in increase of MG and PAG levels, and their high serum concentration is kept both at positive and at negative ECF results 3-4 weeks after ET. MG may be favorable prognosis criterion of ECF efficiency because its high serum concentration associates with the occurrence of induced pregnancy.

Текст научной работы на тему «СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ СОДЕРЖАНИЯ α2-МАКРОГЛОБУЛИНА И АССОЦИИРОВАННОГО С БЕРЕМЕННОСТЬЮ α2-ГЛИКОПРОТЕИНА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЖЕНЩИН ПРИ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОМ ОПЛОДОТВОРЕНИИ»

СИБИРСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ ЖУРНАЛ № 42007

ОПЫТ РЕГИОНОВ

УДК 616-074:618.177-089.888.11

Н.В. Мальцева*, Л.А. Маркина**, Л.Г. Баженова*, Т.С. Чирикова*, Т.И. Белогорлова*

E-mail: NinaMaltseva@nm.ru

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ СОДЕРЖАНИЯ а2-МАКРОГЛОБУЛИНА И АССОЦИИРОВАННОГО С БЕРЕМЕННОСТЬЮ а2-ГЛИКОПРОТЕИНА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЖЕНЩИН ПРИ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОМ ОПЛОДОТВОРЕНИИ

*ГОУ ДПО Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей МЗ РФ; **Городская клиническая больница № 1, г Новокузнецк

Экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО) -один из способов решения проблемы бесплодия. Однако несмотря на то, что в 90% случаев удается осуществить перенос эмбрионов (ПЭ), беременность наступает только у каждой третьей пациентки. Изучение причин неудач при ЭКО является актуальной задачей, решение которой не представляется возможным без получения соответствующих сведений о макроглобулинах. Макроглобулины как антипро-теолитики и иммуномодуляторы принимают участие в репродуктивной функции на этапах оплодотворения яйцеклетки, имплантации эмбрионов и в процессе вынашивания беременности [1]. Цель настоящей работы заключалась в сравнительном изучении количественных изменений в сыворотке крови женщин двух макроглобулинов - а2-макроглобулина (МГ) и ассоциированного с беременностью а2-гликопротеина (АБГ) - в раннем гестационном периоде при физиологически наступившей беременности и беременности, индуцированной ЭКО и ПЭ.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

В настоящем исследовании приняли участие 45 женщин в возрасте от 24 до 42 лет (в среднем 30,6 года), обратившихся в Зональный перинатальный центр г. Новокузнецка для проведения программ экстракорпорального оплодотворения, из них 15 женщин с абсолютным трубным бесплодием и 30 женщин с верифицированным диагнозом

трубно-перитонеального бесплодия как следствие воспалительных заболеваний органов малого таза, т.е. острого клинического синдрома, развивающегося при восходящем инфицировании эндометрия, маточных труб и/или окружающих тканей. Формирование группы обследуемых женщин осуществлялось по критериям включения и исключения. Критериями включения считались установленная в результате ги-стерсальпингографии и/или лапароскопии трубноперитонеальная форма бесплодия, предстоящая первая попытка экстрокорпорального оплодотворения (ЭКО) и возраст пациенток не старше 42 лет. В критерии исключения входили наличие других факторов бесплодия, кроме трубно-перитонеального (эндометриоз, аномалии развития матки и др.), ЭКО в анамнезе, возраст старше 42 лет. Для обеспечения однородности изучаемых групп при оценке результатов ЭКО в критерии исключения были добавлены ненормальные показатели спермограммы, применение для обеспечения фазы десенситизации только агонистов гонадотропин-рилизинг гормона, недостаточный ответ яичников на индукцию суперовуляции (менее 4 фолликулов), отсутствие возможности переноса 3 эмбрионов, низкое качество переносимых эмбрионов GR 3,4.

Для получения объективной оценки репродуктивной функции бесплодных пар и определения рационального подхода к их ведению в программах ЭКО и ПЭ обследование пациенток до реализации программ проводилось в рамках стандартов: динамика концентраций гонадотропных и половых гормонов, клиническое и биохимическое обследования, гемо-стазиограмма, обследование и лечение инфекций, входящих в TORCH-комплекс, обследование на онко- и соматическую патологии. Выявленные нарушения корригировались. По показаниям проводилась противовоспалительная терапия, направленная на эрадикацию патогенных микроорганизмов (Chl. trachomatis, Mic.genitalium, N.gonorrhoeae), энзимо-терапия и иммунокоррекция.

Индукцию суперовуляции осуществляли по стандартным протоколам с использованием диферелина (Ipsen, 0,1 мг) и пурегона (Organon, 100-300 МЕ) или менопура (Ferring, 2-4 мг). Забор ооцитов осуществлялся путем трансвагинальной пункции фолликулов под ультразвуковым контролем с использованием аппарата «Aloca». После подсчета количества полученных ооцитов и оценки их качества по общепринятой шкале (нормального качества - 4-5 баллов, измененные - менее 4 баллов) ооциты культивировали в 4-лу-ночных планшетах в среде IVF («Medicult», Дания) при температуре 370С во влажной атмосфере, содержащей 5% СО2. Обработку спермы проводили методом swim-up с использованием среды Sperm preparation («Medicult», Дания). Ооциты оплодотворяли через

5 часов после их пункции, добавляя 50000-100000 подвижных сперматозоидов на ооцит. Через 18-20 часов после оплодотворения ооциты исследовали на на-

личие пронуклеусов на инвертируемом микроскопе при увеличении х400. Дальнейшую оценку дробления и качества эмбрионов проводили через 46-48 часов культивирования, применяя критерии Раковски на 3-и сутки развития. Перенос эмбрионов осуществлялся на 3-и-4-е сутки культивирования, в количестве 3-4 эмбрионов на 6-й-8-й клеточной стадии деления, под ультразвуковым контролем. Наступление клинической беременности оценивали через 3-4 недели после переноса эмбрионов по наличию плодного яйца в полости матки, визуализированного при УЗИ.

Клинико-биохимическое обследование пациенток включало определение содержания двух представителей семейства макроглобулинов: а2-макроглобулина (МГ) и ассоциированного с беременностью а 2-гликопротеина (АБГ) в крови пациенток. Их концентрацию определяли в образцах сыворотки крови, взятой до начала проведения программы ЭКО, во время забора ооцитов путем трансвагинальной пункции фолликулов и в момент диагностики клинической беременности (на 3-й-4-й неделе после проведения эмбриотрансфера) методом ракетного иммуноэлектрофореза [2] с применением высокоспецифичных антител [3]. Содержание сывороточных макроглобулинов также было определено у 17 здоровых небеременных женщин репродуктивного возраста во вторую фазу менструального цикла и у 14 женщин с физиологически наступившей беременностью в сроке 3-4 недели, в возрасте 26±0,1 года. Статистический анализ проводили с использованием программы Instat 2 (Sigma, США). Стандартная обработка включала подсчет средних арифметических величин (М) и их стандартных ошибок (SEM). Сравнение массивов данных осуществляли с помощью непараметрического критерия Манна-Уитни. Корреляционный анализ проводили посредством вычисления коэффициента корреляции Спирмана (r). Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез в данном исследовании принимался равным 0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Содержание МГ в сыворотке крови обследуемых женщин

Полученные данные показали (таблица), что уровень МГ в сыворотке крови у женщин с физиологически наступившей беременностью в гестационном сроке 3-4 недели (группа 2), варьируя от 2,76 мкмоль/л до 5,79 мкмоль/л, статистически значимо не отличался от такового у здоровых небеременных женщин контрольной группы (1,45-4,28 мкмоль/л, группа 1), хотя у двух из 14 обследованных беременных пациенток были зафиксированы значения концентрации МГ, превышающие 4,28 мкмоль/л.

У пациенток с трубным бесплодием до начала проведения программ ЭКО (группы 3-1 и 4-1, таблица) сывороточное содержание МГ также не отличалось от содержания этого белка у здоровых небеременных

женщин контрольной группы, как в среднем, так и по диапазону индивидуальной вариабельности. Концентрация МГ варьировала от 1,93 до 3,86 мкмоль/л у женщин 3-1 группы (отрицательный результат ЭКО) и от 1,79 до 4,55 мкмоль/л у женщин 4-1 группы (с клиническими беременностями после ЭКО). При этом 50% женщин с концентрацией МГ в крови от

2.75 мкмоль/л (2 г/л) до 4,55 мкмоль/л (3,3 г/л) забеременели в результате ЭКО, в то время как с низкой концентрацией МГ (<2,75 мкмоль/л) забеременели только 36% женщин.

Применение гонадотропинов для индукции суперовуляции привело к повышению концентрации МГ у некоторых женщин. Так, у 13 (29,5%) из 44 обследованных пациенток показатели МГ превысили 4,1 мкмоль/л (3 г/л), причем максимальные составили 6,21 мкмоль/л и 6,07 мкмоль/л соответственно в группах 3-2 и 4-2. Вследствие этого повышения в среднем уровень МГ поднялся на 25% по сравнению с предыдущим сроком обследования (от

3,01 ±0,15 мкмоль/л, п=25 до 3,83±0,16 мкмоль/л, п=44, р=0,0009), соответствуя сывороточному содержанию белка при физиологической беременности в сроке гестации 3-4 недели (р>0,05). что свидетельствует о связи уровня этого макроглобулина в крови с содержанием в организме половых стероидов.

Концентрация МГ в среднем сохранялась повышенной через 3-4 недели после переноса эмбрионов в обеих группах женщин. Независимо от исхода программы ЭКО она варьировала сходно: от

2.75 мкмоль/л до 6,07 мкмоль/л - у забеременевших женщин и от 2,48 мкмоль/л до 6,76 мкмоль/л - у незабеременевших, что соответствует индивидуальной вариабельности этого показателя у женщин с физиологически наступившей беременностью в сроке 3-4 недели. Однако в группе 4-3 у 11 (84,6%) из 13 забеременевших женщин наблюдался подъем уровня МГ приблизительно на 20% по сравнению с предыдущим сроком обследования, т.е. от 3,39±0,33 мкмоль/л до 4,3±0,34 мкмоль/л (коэффициент корреляции Спирмана=0,8257, р=0,0017), и лишь у двух - незначительное снижение. Отмеченный рост показателя МГ до значений, превышающих 5,5 мкмоль/л, у двух (28,6%) из 7 незабеременевших женщин из группы 3-3, по-видимому, является последствием индукции суперовуляции. У остальных пяти (71,4%) обследованных из группы 3-3 наблюдалось снижение концентрации МГ в среднем на 28% (р=0,0317), от 4,22±0,32 мкмоль/л до 3,03±0,22 мкмоль/л.

Содержание АБГ в сыворотке крови обследуемых женщин

Результаты показали (таблица), что уровень АБГ в сыворотке крови у женщин с физиологически наступившей беременностью в гестационном сроке 3-4 недели (группа 2), варьируя от 0,017 мкмоль/л до 0,064 мкмоль/л, статистически значимо не от-

личался от соответствующего показателя у здоровых небеременных женщин контрольной группы (0,003-0,069 мкмоль/л, группа 1). Молярное соотношение МГ/АБГ у небеременных женщин варьировало от 24 до 1539, а у беременных женщин - от 54 до 174, т.е. в среднем уменьшилось в 6,5 раз (табл.). Вследствие большого диапазона колебаний индивидуальных показателей АБГ статистически значимой разницы в индексах МГ/АБГ между небеременными и беременными женщинами не было установлено, но у 9 из 15 обследованных небеременных женщин (60%) индекс МГ/АБГ превышал значение 174. Это позволяет полагать, что у большинства женщин с физиологически наступившей беременностью в гестационном сроке 34 недели все-таки наблюдается прирост количества АБГ, видимо, за счет активации его биосинтеза, что, в конечном итоге, и снижает молярное соотношение МГ/АБГ.

Нами не было обнаружено значимого различия в уровне АБГ в группах у женщин с верифицированным диагнозом трубно-перитонеального бесплодия и контрольной группы здоровых небеременных женщин (таблица). Анализ индивидуальной вариабельности результатов выявил, что концентрация АБГ колебалась от 0,003 до 0,064 мкмоль/л у женщин группы 3-1 и от 0,003 до 0,044 мкмоль/л у женщин группы 4-1, укладываясь в диапазон показателей этого белка у здоровых небеременных женщин. Показатель МГ/АБГ варьировал от 30-50 до 1042 в обеих группах, т.е. как у небеременных женщин контрольной группы.

Индукция суперовуляции гонадотропинами (группы 3-2 и 4-2, таблица) не влияла на содержание АБГ. Однако между индивидуальными показателями концентрации АБГ у женщин этих групп и до проведения программ ЭКО (группы 3-1 и 4-1) была обнаружена высокая коррелятивная связь (коэффициент Спирмана=0,7583, р<0,0001), отражающая отсутствие или однотипность изменений индивидуальных показателей. Так, у 35 из 43 женщин после индукции суперовуляции концентрация этого белка оставалась практически неизменной или обнаруживала слабый рост. Видимо, за счет последнего эффекта при росте у этих пациенток количества МГ до 3,9±0,18 мкмоль/л показатель МГ/АБГ, варьируя от 45 до 1639, в среднем составил 526 ± 77, не отличаясь от такового у здоровых небеременных женщин контрольной группы. Однако у пяти из оставшихся женщин в группе 3-2 наблюдался существенный подъем уровня АБГ от

0,036-0,064 мкмоль/л (до начала проведения программ ЭКО) к 0,097-0,278 мкмоль/л (после индукции суперовуляции), в среднем от 0,05±0,006 мкмоль/л до 0,14±0,03 мкг/мл (р=0,0159), а молярное соотношение МГ/АБГ составило всего 24 ±6. В группе 4-2 у оставшихся трех женщин также была зафиксирована высокая концентрация АБГ - от 0,078 мкмоль/л до 0,189 мкмоль/л (0,14± 0,03 мкмоль/л). Так же как у женщин из группы 3-2, у них были выявлены слабый рост или стабильность концентрации МГ

и, соответственно, низкое молярное соотношение

МГ/АБГ (30±5). В совокупности у этих восьми женщин индекс МГ/АБГ в среднем (26±4) оказался значительно меньше, чем у здоровых небеременных женщин контрольной группы - более чем в 26 раз (р=0,0069), и существенно меньше, чем у женщин с физиологически наступившей беременностью - в 4 раза (р<0,0001). При этом средняя концентрация АБГ (0,14 ± 0,02 мкмоль/л) у них была выше в 3,6 раза соответствующего показателя при физиологической беременности (р<0,0001) и почти в 6 раз выше среднего показателя у здоровых небеременных женщин (р<0,0001). Таким образом, полученные результаты указывают на более активный биосинтез АБГ по сравнению с МГ после индукции суперовуляции у некоторых женщин по сравнению со здоровыми небеременными женщинами и женщинами с нормальной беременностью в сроке 3-4 недели.

Через 3-4 недели после ПЭ концентрация АБГ была определена у семи незабеременевших женщин (группа 3-3). Среди них у двух женщин она не изменилась по сравнению с предыдущим сроком обследования, у трех - снизилась на 60-70%, а у двух - повысилась в

6 раз. Соответственно, индекс МГ/АБГ у первых двух женщин снизился в 1,5 раза на фоне стабильности концентрации АБГ за счет уменьшения содержания МГ, у трех - повысился в 2,5 раза на фоне снижения концентрации обоих белков и у последних двух пациенток - снизился в 4,5 раза при повышении концентрации обоих белков. Таким образом, у четырех женщин было обнаружено уменьшение соотношения МГ/АБГ до 532 ± 238, а у трех - повышение до 1191 ± 86, т.е. до уровня здоровых небеременных женщин (р>0,05). При этом индивидуальные показатели АБГ варьировали от 0,003 мкмоль/л до 0,053 мкмоль/л, а МГ/АБГ - от 107 до 1340, т.е. находились практически в физиологическом диапазоне.

У всех забеременевших пациенток после ЭКО (группа 4-3) концентрация АБГ повысилась в среднем в 7 раз по сравнению с небеременными женщинами контрольной группы, и в 4 раза, по сравнению с уровнем при физиологической беременности. Концентрация АБГ варьировала от 0,03 мкмоль/л до 0,46 мкмоль/л, а индекс МГ/АБГ изменялся от 7 до 121 у разных пациенток. Средний его показатель был самым низким из обследованных групп, меньше, чем у небеременных женщин, почти в 14 раз, и в два раза по сравнению со здоровыми беременными женщинами (таблица).

Соотношение МГ/АБГ отрицательно коррелировало с фактом наступления беременности (г= - 0,79, р<0,0001), а между концентрацией АБГ и фактом наступления беременности корреляция была положительной (г=0,5612, р=0,01), что дополнительно указывает на тесную связь между макроглобулинами и беременностью.

Таким образом, высокая концентрация а 2-макроглобулина (>2,75 мкмоль/л) у женщин с трубным бесплодием в программах ЭКО часто ассоциируется с наступлением клинической беременности.

Таблица

Содержание а2-макроглобулина и ассоциированного с беременностью а2-гликопротеина в сыворотке крови женщин при нормальной и индуцированной ЭКО беременности (мкмоль/л)

Группы обследуемых женщин № п/п МГ (мкмоль/л) АБГ (мкмоль/л) МГ/АБГ (моль/моль)

Здоровые небеременные женщины 1 3,2±0,22 (15) 0,024±0,006 (15) 696,7± 153,3 (15)

Нормальная беременность 3-4 недели 2 3,69 ± 0,21 (14) 0,039±0,004 (14) 107,52± 10,37 (14)

Отрицательный результат ЭКО 3-1 (до программы ЭКО) 2,9± 0,15 (14) рфБ=0,0051 0,025 ±0,006 (13) 277,97±91 (14) р1=0,0342

3-2 (после стимуляции суперовуляции) 3,91 ±0,23 (22) р1=0,0172 р3-1=0,0017 0,044±0,014 (22) 380,15±81,15 (22) рфб=0,0119

3-3 (через 3-4 недели после эмбриотрансфера) 3,94±0,62 (7) 0,017 ± 0,009 (7) рфБ=0,0461 814,91 ±187,16 (7) рфб=0,0023 р3-1=0,0369 р3_2=0,0481

Положительный результат ЭКО 4-1 (до программы ЭКО) 3,16 ± 0,29 (11) 0,022±0,005 (11) рфб=0,0131 322,3 ±96,5 (11) рфб=0,0199

4-2 (после стимуляции суперовуляции ) 3,75±0,23 (22) 0,035 ± 0,011 (21) 489,33± 115,06 (21) рфб=0,0111

4-3 (через 3-4 недели после эмбриотрансфера) 4,095 ±0,32 (13) 0,17 ± 0,04 (13) р1=0,0003 рфБ=0,0004 р3 3=0,0005 р4’1<0,0001 р4-2=0,0002 49,9 ± 11,74 (13) р1=0,001 рфб=0,0011 р4_4<0,0001 р4-1=0,0059 р4_2=0,0054

Пояснения к таблице:

Данные представлены как М±8ЕМ, где М - выборочное среднее, 8БМ - стандартная ошибка среднего. р - достигнутый уровень значимости различий между данными; нижний индекс указывает номер сравниваемой группы. В круглых скобках - количество обследованных женщин.

Индукция суперовуляции гонадотропинами может сопровождаться повышением уровня обоих макроглобулинов - МГ и АБГ. Через 3-4 недели после переноса эмбрионов уровень МГ остается повышенным независимо от результативности проведенных программ. Значимый рост содержания ассоциированного с беременностью а2-гликопротеина в сыворотке крови регистрируется при наступлении клинической беременности, причем он существенно выше значений при физиологически наступившей беременности такого же гестационного периода.

ОБСУЖДЕНИЕ

Известно, что семейство макроглобулинов объединяет гомологичные белки, ассоциированные с

беременностью. Повышение сывороточного уровня а2-макроглобулина в среднем на 50%, а ассоциированного с беременностью а2-гликопротеина в 8 раз установлено к концу I триместра нормальной гестации [4, 5]. Количественные изменения МГ в первые недели беременности прежде не исследовались, а рост сывороточной концентрации АБГ был зафиксирован при нормальной беременности в сроке 3 недели [6]. Результаты настоящей работы не выявили статистически значимых изменений количества обоих макроглобулинов в крови женщин в сроке физиологической беременности 3-4 недели, хотя было обнаружено, что уровень МГ и АБГ может повышаться у части беременных женщин в различной степени. Поскольку в среднем абсолютное количество МГ превалировало над таковым АБГ более чем в

100 раз у небеременных и в 90 раз при беременности в исследуемом сроке, доминирующий над МГ прирост количества АБГ в крови здоровых беременных женщин подтверждается анализом молярного соотношения МГ/АБГ. У беременных оно уменьшено в среднем более чем в 6 раз по сравнению с небеременными женщинами, явно указывая на более активный биосинтез АБГ, чем МГ. Видимо, благодаря этому в последующие сроки беременности уровень АБГ быстро растет, вследствие чего его абсолютное количество в III триместре беременности составляет уже 30% от такового МГ [7].

У пациенток с трубным бесплодием до начала проведения программ ЭКО сывороточное содержание МГ и АБГ практически не отличалось от такового у здоровых небеременных женщин. Однако после проведения индукции суперовуляции у части женщин наблюдалось повышение абсолютного количества МГ (у 50% пациенток) и АБГ (у 18% пациенток), а также обнаружено резкое снижение молярного соотношения МГ/АБГ, даже по сравнению с показателем при физиологической беременности. Этот факт свидетельствует о положительной связи уровня обоих макроглобулинов с содержанием в организме половых стероидов и находит подтверждение в литературе [6].

Наступившая клиническая беременность в результате ЭКО, по нашим данным, часто ассоциируется с высокой концентрацией сывороточного МГ, как исходной, до проведения программ ЭКО, так и в сроке беременности 3-4 недели. Изначально высокий уровень этого белка может являться благоприятным прогностическим признаком индуцированной ЭКО беременности у женщин с трубным бесплодием. Наше предположение подкрепляется данными других авторов. Установлено [8], что повышенный уровень МГ (1,91-2,58 г/л) в сыворотке крови после индукции суперовуляции сопряжен со сниженным риском развития синдрома овариальной гиперстимуляции. Авторы предлагают использовать низкий показатель сывороточного МГ (1,45-1,73 г/л) для прогноза формирования этого синдрома. Одним из механизмов, лежащих в его основе, может быть связывание и инактивация а2-макроглобулином ростового фактора сосудистого эндотелия в фолликулярной жидкости (vascular endothelial growth factor) [8]. Кроме того, показано, что количество МГ в фолликулярной жидкости преовуляторных фолликулов коррелирует с их размером [9], от которого зависит эффективный фолликулогенез и качество забираемых ооцитов.

Каких-либо данных по количественным изменениям второго макроглобулина, ассоциированного с беременностью а2-гликопротеина, при индуцированной ЭКО беременности нами в литературе не обнаружено. Наши исследования выявили, что такая беременность сопряжена с более высоким показателем концентрации сывороточного АБГ, чем физиологическая беременность в этом же сроке гестационного периода. Это может быть связано с допустимыми отличиями в

иммунной регуляции индуцированной и физиологической беременностей.

Сравнительный анализ количественных изменений двух макроглобулинов при физиологической и индуцированной ЭКО беременности, проведенный в настоящей работе, показал, что их молярное соотношение может быть более показательным параметром, чем их абсолютные концентрации. Это укладывается в рамки концепции о компенсаторных взаимоотношениях белков семейства макроглобулинов [10], структурных и функциональных аналогов, но имеющих различную степень выраженности иммунорегуляторных свойств [11], и обосновывает необходимость одновременного исследования всех макроглобулинов при изучении их роли в различных биологических феноменах.

ЛИТЕРАТУРА

1. Н.А. Зорин, В.Г. Левченко, Р.М. Зорина, В.Н. Зорина. Роль макроглобулинов в репродуктивной функции // Акушерство и гинекология.-2005. - № 4.- С. 7-9.

2. N.H. Axelsen, E. Bock . Electroimmunoassay (rocket immunoelectrophoresis) // Scand. J. Immunol. -1983. -Vol.17 (Suppl. 10). - P. 113-24.

3. Н.А. Зорин, С.Г. Жабин, О.Ф. Лыкова, Р.М. Зорина,

B.С. Горин, Т.И. Белогорлова, Т.С. Чирикова, Н.А. Кра-юшкина. Белки плазмы и сыворотки крови доноров // Клин. лаб. диагн. -1992. - № 9-10. - С.13-15.

4. Н.А. Зорин, В.С. Горин, Р.М. Зорина, Н.А. Митрофанов,

C.Г. Жабин, О.Б. Дубленников, Н.В. Мальцева. Белки беременности у небеременных, беременных, рожениц и родильниц // Акушерство и гинекология. -1990. - № 3.

- С. 65-67.

5. Н.В. Мальцева, В.Г. Левченко, В.Н. Зорина, А.А. Дубовик, Н.Н. Васильева. Сравнительный анализ содержания а2-макроглобулина и ассоциированного с беременностью протеина А в крови и моче при нормальной беременности и гестозе // Бюллетень СО РАМН. - 2005. - № 4. - С. 119126.

6. Petersen C.M. a2-Macroglobulin and pregnancy zone protein. Serum levels, a2-macroglobulin receptors, cellular synthesis and aspects of function in relation to immunology // Dan. Med. Bull. 1993. - Vol. 40.- P. 409-446.

7. Н.В.Мальцева. Сравнительное изучение иммунологических свойств альфа2-макроглобулина и ассоциированного с беременностью альфа2-гликопротеина. Дис. ...канд. биол.наук: 14.00.36 / Новосибирск, 1991. - 132 с.

8. McElhinney B., Ardill J., Caldwell C., Lloyd F, McClure N. Ovarian hyperstimulation syndrome and assisted reproductive technologies: why some and not others?// Hum Reprod. -2002. - Vol. 17(6). - P. 1548-1553.

9. Gentry P.A., Zareie M., Liptrap R.M. Fibronectin concentrations correlate with ovarian follicular size and estradiol values in equine follicular fluid // Anim Reprod Sci. - 1996. - Vol. 45(1-2). - P. 91-102.

10. Н.А. Зорин, Р.М. Зорина, В.С. Горин, С.Г. Жабин, Н.В. Мальцева. Семейство макроглобулинов (обзор литературы) // Клиническая лабораторная диагностика. - 1993.

- № 1. - С. 52-56.

11. N.V. Maltseva, N.A.Zorin. The comparison of immunoregulatory properties of human alpha-

2-macroglobulin and pregnancy-associated alpha-2-glycoprotein // Russian Journal of Immunology. - 1997.

- Vol.2. - № 2. - P. 97-102.

СИБИРСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ ЖУРНАЛ № 42007

COMPARATIVE ANALYSIS OF HUMAN SERUM a2-MACROGLOBULIN AND PREGNANCY-ASSOCIATED a2-GLYCOPROTEIN LEVELS IN BLOOD SERUM OF WOMEN IN EXTRACORPOREAL FERTILISATION

N.V. Mal’tseva, L.A. Markina, L.G. Bagenova, T.S. Chirikova, T.I. Belogorlova

SUMMARY

Quantitative changes of serum a2-macroglobulin (MG) and pregnancy-associated a2-glycoprotein (PAG) were investigated in 45 women with tubular

infertility before their entering in extracorporeal fertilization programs (ECF), after hormonal induction of ovulation and 3-4 weeks after the embryo transfers (ET). Seventeen healthy non-pregnant women and 14 women with physiological pregnancy in terms of

3-4 weeks were observed as controls.

Macroglobulin concentration in the samples of blood serum was determined using rocket immunoelectrophoresis. The results showed that gonadotropin-stimulated ovulation results in increase of MG and PAG levels, and their high serum concentration is kept both at positive and at negative ECF results 3-4 weeks after ET. MG may be favorable prognosis criterion of ECF efficiency because its high serum concentration associates with the occurrence of induced pregnancy.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.