CC BY
14
Содержание сульфатов в норме составляет 3,6±0,3 мкг/мл. Уровень сульфатов в протеогликанах эпиди-димисов и семенников крыс, подвергшихся воздействию природного газа Астраханского газоконденсатного месторождения, начинает существенно расти только после второго месяца токсического воздействия и если на 56 день составляет 4,8±0,2 мкг/мл, что практически не отличается от нормы (Р>0,1), то к концу эксперимента увеличивается до 19,1±0,85 мкг/мл, что в 5 раз выше нормы.
Таким образом, хроническая интоксикация серосодержащим газом приводит к нарушению синтеза про-теогликанов эпидидимисов и семенников крыс, проявляющееся и сопровождающееся увеличением доли кислых фракций, содержащих повышенное количество сульфатов. Однако уже через месяц после окончания воздействия серосодержащего газа резко снижается уровень сульфатов во фракции протеогликанов, оставаясь, тем не менее, практически в 2 раза выше нормы. Нам удалось исследовать протеогликаны эпидидимисов и семенников крыс спустя 4 месяца после окончания воздействия серосодержащего газа только у трех животных, определение сульфатов показало снижение до нормы 4,1±0,4 мкг/мл. Следовательно, воздействие серосодержащего газа Астраханского газоконденсатного месторождения на синтез протеогликанов эпидидимисов и семенников крыс носит существенный характер и может (учитывая многостороннее биологическое действие) привести к значительному нарушению репродуктивной функции. Интенсивность обмена веществ и скорость деления клеток сперматогенного эпителия способствует восстановлению нормальной функции не ранее чем через 3 месяца после окончания воздействия серосодержащего газа Астраханского газоконденсатного месторождения, что соответствует примерно 2 циклам сперматогенеза у крыс [5].
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Бусев И.И. Аналитическая химия серы. - М.: Изд. МГУ, 1999. - 241 с.
2. Измеров Н.Ф. Российская энциклопедия по медицине труда - М.: Медицина, 2005. -656 с.
3. Yoon J.H. [et al.]. Proteoglycans: biochemistry and function // J. Musculoskelet Neuronal Interact. - 2005. -Vol. 5, № 1. - P. 254-261.
4. Scott J.E. Proteoglycan-fibrillar collagen interactions // Biochem J - 1998. - Vol. 252. - P. 313-323
5. Strugnell R., Handley C., Drummond L. Characterisation of Proteoglycans Syntesized by Rabbit Testis // Am. J. Pathol. - 1986. - Vol. 124. - P. 216-226.
Николаев Александр Аркадьевич, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой общей и биоорганической химии ГОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская 121, тел. (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.
Ветошкин Роман Валерьевич, аспирант кафедры общей и биоорганической химии ГОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская 121, тел. (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru
УДК 616.61-053.3:616.153.96
© Д.М. Никулина, Ю.А. Воробьева, Т.С. Оганесян, Т.Б. Воробьева, 2011
Д.М. Никулина, Ю.А. Воробьева, Т.С. Оганесян, Т.Б. Воробьева
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ПРОДУКЦИИ БЕЛКОВ ВОСПАЛЕНИЯ И ИНДУКТОРА АПОПТОЗА ПРИ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ПОЧЕК У ДЕТЕЙ
ГОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России
При изучении нескольких белков острой фазы, интерлейкинов и индуктора апоптоза в сыворотке крови детей, страдающих заболеваниями почек, установлено достоверное увеличение уровня DR5 и TNFa при гломерулонефрите, то есть при заболевании с доминирующим аутоиммунным компонентом. В меньшей степени эта закономерность прослеживалась и в отношении IL4. Уровень БОФ, наоборот, преобладал при банальном воспалении - при пиелонефрите.
Ключевые слова: интерлейкины, белки острой фазы, Death Receptor 5, заболевания почек у детей
D.M. Nikulina, JuA. Vorobyeva, T.S. Oganesyan, T.B. Vorobyeva
COMPARATIVE ANALYSIS OF PROTEIN PRODUCTION INFLAMMATION AND APOPTOSIS INDUCTION FOR
KIDNEY DISEASES IN CHILDREN
At comparative analysis of some acute phase proteins, interleukins and inductor of apoptosis at the blood serum of the children with kidney diseases it was shown reliable increase of DR5 and TNFa levels with glomerulonephritis that is in disease with dominant autoimmune component. As regards IL4, this regularity was observed less. On the contrary, level of acute phase proteins prevailed with ordinary inflammation - pyelonephritis.
Key words: interleukins, acute phase proteins, Death Receptor 5, kidney diseases at children
Изучение молекулярного патогенеза аутоиммунных и воспалительных заболеваний в последние 20 лет заметно сместилось в сторону определения различных регуляторных молекул иммунной системы - цитокинов, и белков, ассоциированных с воспалением. Это связано с тем, что до сих пор остается не до конца ясным, какие тонкие механизмы определяют течение, прогрессирование и исход заболеваний с иммуноопосредованным типом воспаления [3]. В число таких заболеваний входят и различные нефропатии (гломерулонефриты, тубуло-интерстициальный нефрит). Высокий интерес к проблеме почечной патологии у детей объясняется ее высоким удельным весом в структуре заболеваемости и серьезностью прогноза Заболевания почек у взрослых нередко бывают продолжением начавшейся в детском возрасте болезни [1, 4]. Наиболее тяжелым из них является гло-мерулонефрит (ГН), являющийся частой причиной ХПН. При ГН и пиелонефрите (ПН) имеет место реакция воспаления, но механизмы развития и, соответственно, принципы лечения различные. В случае развития ГН значительную роль играет нарушение баланса между процессами повреждения и восстановления клеток неф-рона. Показано, что активация апоптоза у больных нефритом подавляет воспалительные явления в клубочке и уменьшает риск возврата ГН. Многие факторы среды воспалительного очага выступают индукторами апоптоза, в том числе TNF a, DR5, IL1 и другие [2, 5, 6, 7].
Цель. Сравнительный анализ уровня некоторых белков, ассоциированных с воспалением, и маркера готовности к апоптозу при заболеваниях с преимущественно аутоиммунным характером воспаления у детей, с целью установления закономерности продукции этих белков для улучшения диагностики и оценки эффективности лечения заболеваний.
Материалы и методы. В качестве объектов исследования были отобраны классический маркер острой фазы воспаления-С-реактивный белок (СРБ), малоизученный макрофагальный белок воспаления (MIP-1ß), IL-4, относящийся к противовоспалительным цитокинам, TNFa и Death Receptor 5 (DR5), он же TNF-related apoptosis-inducing ligands или TRAIL. Основную группу обследованных составили дети (средний возраст 9,3 года), страдающие заболеваниями почек с доминирующим аутоиммунным компонентом (ГН, липоидный нефроз-ЛН, тубулоинтерстициальный нефрит-ТИН), группу сравнения-дети с неаутоиммунным типом воспаления - ПН, находившиеся на обследовании и лечении в отделении нефрологии ДОБ имени Н.Н. Силищевой. Все изучаемые компоненты определяли в сыворотке крови больных детей и доноров методом иммуноферментного анализа с использованием коммерческих наборов: MIP-1ß, IL4 и TNFa (CYTIMMUNE); СРБ (Diagnostic System Laboratories); DR5 (Biosource international). ИФА проводили на аппаратуре фирмы Bio-TechniE's:зультаты. Как видно из таблицы 1, максимальный уровень DR5 был отмечен при ГН при диапазоне значений 0-40.5, минимальный - при ПН (0-6.87). При ТИН отмечались единичные случаи высокого уровня DR5 (0-24.11), что существенно не повлияло на соотношение средних значений: высокими они были только при ГН. Такие результаты вполне согласуются с ролью апоптоза в развитии заболеваний с аутоиммунным характером воспаления и можно констатировать, что этот фактор апоптоза отражает течение процесса, по сути, являясь его маркером.
Таблица
Определение уровня БЯ5, ТЬ-4 и ТКЕ-а и белков воспаления в группах больных с заболеваниями почек
Заболевание n Концентрация определяемых показателей, М±т
СРБ, нг/мл MIP-1ß нг/мл IL4, нг/мл TNFa, нг/мл DR5, пг/мл
Гломерулонефрит 39 1837,9±674,0 1612,3±132,0 23,77±3,41 24,36±9,19 17,47±2,93
Липоидный нефроз 20 1684,7±1490,4 1918,0±348,2 19,43±2,43 0 6,08±0,95
Тубулоинтерст. нефрит 29 2063,5±1096,1 2416,1±172,3 13,14±2,80 1,49±0,64 6,22±2,19
Пиелонефрит 43 2611,1±879,6 2350,7±318,4 16,38±2,50 2,04±0,78 2,11±0,47
Доноры 15 2393,3±144,7 1707,5±235,8 20,8±0,21 3,37±0,46 не опред.
Всего 146
Наиболее близкими к полученным значениям по оказались результаты определения ТОТа. Они были максимальными только при ГН, а в остальных случаях уровень ТОТ а был невысоким или он не выявлялся. Этот факт подтверждает литературные данные о функциональной связи БЯ5 и ТОТа и синтез ТОТа при аутоиммунном заболевании достоверно отличается от его продукции при других процессах в почках, возможно, за счет участия в механизмах регуляции апоптоза. Уровень 1Ь4 при ГН, напротив, мало отличался от значений в донорской группе, но в 1,5 раза и более превышал его значения при ПН и ТИН. Однако эти различия не столь выражены как у БЯ5 и ТОТа. Уровень СРБ и М1Р-1Р был максимальным при ПН и ТИН с ПН соответственно, что согласуется с их принадлежностью к БОФ.
Таким образом, даже визуальный анализ позволяет сделать заключение о связи двух БОФ с иными звеньями патогенеза, чем последовательная цепь событий апоптоза. Они, вероятно, больше связаны с непосредственными процессами изменения клеток-мишеней очага воспаления, 1Ь и БЯ5-с участием иммунокомпетентных клеток.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Балаболкин И.И. Современный взгляд на проблему лечения аллергических болезней у детей // Рос. педиатр. журнал. - 2007. - № 1. - С. 4-8.
2. Барышников А.Ю., Шишикин Ю.В. Иммунологические проблемы апоптоза - М.: Эдиториал, 2002. - 320 с.
3. Бережная, Н.М. Иммунологические исследования в клинике: состояние вопроса // Иммунология. - 2006. - № 1. - С.18-22.
4. Вялкова А.А., Перепелкина Н.Ю. Детская нефрологическая заболеваемость и инвалидность по данным официальной статистики // Всероссийский конгресс «Современные методы диагностики и лечения в детской нефрологии», 2-й: Материалы. - М., 2002. - С. 128-129.
5. Маянский Н.А., Рос Д., Кайперс Т. Каспазонезависимый путь клеточной гибели нейтрофилов человека, индуцированный TNFa // Цитокины и воспаление. - 2003. - Т. 2, № 1. - С. 29-35.
6. Перевезенцева Ю.Б. Апоптоз и его роль в патогенезе заболеваний почек // Нефрол. - 2001. -№ 4. - С. 17-23.
7. Петросян Э.К., Цыгин А.Н., Шестаков А.Е., Носиков В.В. Роль генетического полиморфизма IL4 и 13 в развитии нефротического синдрома с минимальными изменениями у детей и подростков // Педиатрия. - 2006. - № 5. - С. 7-9.
Никулина Дина Максимовна, доктор медицинских наук, профессор, заведующая кафедрой биохимии с курсом клинической лаборатоорной диагностики ГОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцраз-вития России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, 121, тел. (8512) 52-53-20, e-mail: dimax@astranet.ru
Воробьева Юлия Александровна, кандидат медицинских наук, врач детской поликлиники № 1, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Кирова, 47, тел. (8512) 51-35-63, e-mail: detpolikl@yandex.ru
Оганесян Тигран Сергеевич, заочный аспирант кафедры биохимии с курсом клинической лаборатоорной диагностики ГОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, 121, тел. (8512) 52-53-21, e-mail: dimax@astranet.ru
Воробьева Татьяна Борисовна, кандидат медицинских наук, доцент кафедры биохимии с курсом клинической лабо-ратоорной диагностики ГОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, 121, тел. (8512) 52-53-21, e-mail: dimax@astranet.ru
УДК 612.353.26616-036.882-08-082.9:615.9]-074-08
© Е.А. Нургалеева, Д.А. Еникеев, Л.В. Нагаева, М.А. Александров, Г.А. Байбурина, 2011
Е.А. Нургалеева, Д.А. Еникеев, Л.В. Нагаева, М.А. Александров, Г.А. Байбурина
ПОКАЗАТЕЛИ ПРООКСИДАНТНО-АНТИОКСИДАНТНОГО СТАТУСА ПЕЧЕНИ КРЫС ПРИ ФОРМИРОВАНИИ ЭНДОТОКСИКОЗА ПОСТРЕАНИМАЦИОННОГО ПЕРИОДА
ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, г. Уфа
В постреанимационном периоде (35 суток) после перенесенной смертельной кровопотери у 215 беспородных крыс самцов выявлены две волны эндотоксинемии (1-3-и и 7-10-е сутки), сопровождающиеся усилением процессов перекисного окисления липидов в печени. При первой волне наблюдалось угнетение активности каталазы и снижение содержания восстановленного глутатиона (GSH). При второй волне активность каталазы усиливалась на фоне снижения содержания GSH, который расходуется как на процессы детоксикации, так и на процессы антиоксидантной защиты.
Ключевые слова: эндотоксикоз, антиоксидантный статус.
E.A. Nurgaleeva, D.A. Enikeev, L.V. Nagaev, M.A. Alexandrov, G.A. Baiburin
INDICES OF RAT LIVER PROOXIDANT-ANTIOXIDANT STATUS IN THE POSTRESUSCITATIVE
ENDOTOXICOSIS DEVELOPMENT
In postresuscitation period (35 days) after endured fatal hemorrhage in 215 nonpedigreed male rats two waves of endotoxinemia (1st-3rd and 7th-10th days) were detected, accompanied by lipoperopxidation process strengthening in the liver. At the first wave catalase activity depression and glutathione (GSH) level decrease were observed. At the second wave the catalase activity increased against the GSH level decrease which is spent both for detoxication processes, and on antioxidant protection processes .
Keywords: endotoxicosis antioxidant status.
Значительное место при эндотоксикозе постреанимационного периода отводится процессам перекисного окисления липидов (ПОЛ). Ишемия и последующая реперфузия усиливают образование свободных радикалов,
