CC BY
151
Экология
УДК 574.24:591.85
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ МОДИФИКАЦИИ БЕЛКОВ СЫВОРОТКИ КРОВИ КАК ОЦЕНКА АДАПТАЦИИ ОЗЕРНЫХ И ПРУДОВЫХ ЛЯГУШЕК (AMPHIBIA: RANIDAE) НИЖЕГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ К РАЗНЫМ ГИДРОХИМИЧЕСКИМ УСЛОВИЯМ СРЕДЫ
Б01: 10.24411/1728-323Х-2020-11005
Е. Б. Романова, д. б. н, профессор, Нижегородский госуниверситет им. Н. И. Лобачевского, romanova@ibbm.unn.ru, К. В. Шаповалова, аспирант, Нижегородский госуниверситет им. Н. И. Лобачевского, kristin.shapovalova@gmail.com, Е. С. Рябинина, магистр, Нижегородский госуниверситет им. Н. И. Лобачевского, ryabinina.e.s@yandex.ru
Проведена сравнительная оценка интенсивности окислительных реакций белков в сыворотке крови двух видов амфибий: озерных (Pelophylax ridibundus Pallas, 1771) и прудовых (Pelophylax lessonae Camerano, 1882) лягушек при адаптации к разным биотопическим условиям Нижегородской области. Водоемы с доминированием прудовых лягушек имели более высокое содержание хрома по сравнению с водоемами, где обитали озерные лягушки. Показано комплексное влияние загрязнителей водной среды на интенсивность окислительных реакций в сыворотке крови и выявлена взаимосвязь комбинаторного индекса загрязнения водной среды (УКИЗВ) с параметрами окислительной модификации белков (альдегидных карбонильных производных, алифатических кетонных карбонильных производных нейтрального и основного характера). Уровень окислительного стресса у прудовых и озерных лягушек был различен и связан с реализацией окислительного гомеостаза в разных гидрохимических условиях среды обитания. Интенсивность окислительной модификации белков прудовых лягушек более выражена по сравнению с озерными лягушками.
A comparative assessment of the intensity of the oxidative reactions of proteins in the blood serum of two amphibian species: marsh (Pelophylax ridibundus Pallas, 1771) and pool (Pelophylax lessonae Camerano, 1882) frogs (upon adaptation to different biotopic conditions of the Nizhni Novgorod Region has been carried out. The ponds dominated by pool frogs had a higher content of chromium as compared to marsh frogs. The complex effect of water pollutants on the intensity of oxidative reactions in blood serum is shown and the relationship of the combinatorial index of water pollution (CIWP) with the parameters of oxidative modification of proteins is revealed. The level of oxidative stress in pool and marsh frogs was different and was associated with the realization of oxidative homeostasis in hydro-chemical environmental conditions. The intensity of the oxidative modification of pool frog proteins is more pronounced as compared to marsh frogs.
Ключевые слова: амфибии, окислительная модификация белков, окислительный стресс.
Keywords: amphibians, oxidizing modification of proteins, oxidizing stress.
Введение. Адаптация видов к изменяющимся условиям среды протекает на фоне усиления выработки продуктов свободнорадикального окисления, являющихся медиаторами межклеточных взаимодействий [1], и проявляется не одинаково не только в различных систематических группах [2], но д аже у близких видов [3]. Окислению в организме в первую очередь подвергаются белки, и развертывание каскада окислительных реакций связано с превращением отдельных аминокислотных остатков в альдегидные и кетонные группы (карбонильные группы), потерей каталитической активности и увеличением чувствительности к протеолитической деградации [4]. Повышенный уровень карбонильных производных является маркером свободнорадикального окисления и окислительного стресса. В ряде работ показано, что выживанию амфибий урбанизированных ландшафтов способствуют изменение метаболизма, активация свободнорадикальных процессов
[5], усиление работы антиоксидантной системы
[6], направленные на поддержание окислительного гомеостаза организма [7] и реализацию адаптационных механизмов в конкретных экологических условиях.
Целью работы являлась сравнительная оценка интенсивности окислительных реакций озерных (Pelophylax ridibundus Pallas, 1771) и прудовых (Pelophylax lessonae Camerano, 1882) лягушек при адаптации к разным биотопическим условиям водных объектов Нижегородской области.
Материал и методы. В десяти водоемах г. Н. Новгорода и Нижегородской области в период с 2016 по 2019 г. в прибрежной зоне были отобраны пробы воды и определено количественное содержание (мг/мл): железа, марганца, меди, хрома, нитратов, нитритов, сульфатов, сульфидов, никеля, кобальта, цинка, свинца, нефтепродуктов. По результатам анализа для каждого водоема был рассчитан удельный комбинаторный индекс загрязненности воды УКИЗВ [8].
Объектом исследования служили сборы озерных (Pelophylax ridibundus Pallas, 1771) (283 особи) и прудовых (P. lessonae Camerano, 1882) (135 особей) лягушек в 2017—2019 гг.
Уровень окислительной модификации белков (ОМБ) сыворотки крови лягушек измеряли по методу, основанному на реакции взаимодействия окисленных альдегидных и кетонных аминокислотных остатков белков с 2,4-динитрофе-нилгидразином (ДНФ) с образованием альдегид- (АДНФГ) и кетон-динитрофенилгидразонов (КДНФГ) при спонтанном окислении [4]. Для альдегидных карбонильных производных спектр поглощения регистрировали на спектрофотометре СФ-2000 при длине волны 230; 270 нм. Для алифатических кетонных карбонильных производных нейтрального характера — при длине волны 370 нм, основного характера — при длине волны 430; 530 нм. Расчет содержания 2,4 — ДНФГ в сыворотке крови выражали в единицах оптической плотности на мл сыворотки (ОЕ/мл).
Полученные экспериментальные данные обрабатывали методами непараметрической статистики с применением пакета прикладных программ Statistica 10.0. За величину уровня статистической значимости принимали a = 0.05.
Результаты и их обсуждение. Гидрохимический анализ выявил в большинстве водных объектов превышение норматива качества воды для водоемов рыбохозяйственного назначения (ПДКрЬ1б_хоз) по содержанию железа, марганца, меди, хрома, сульфидов и нефтепродуктов. Норматив качества воды для водоемов рыбохозяйст-венного назначения выбран нами как наиболее жесткий из существующей нормативно-технической д окументации [9]. Полученные первичные показатели загрязнения водных объектов были нормированы с учетом превышения ПД^^^, расчетом частных оценочных коэффициентов и УКИЗВ. В течение времени наблюдений качество воды в водоемах ухудшилось (табл. 1).
Для уточнения и анализа гидрохимических особенностей водной среды обитания амфибий, а также с целью сокращения исходных характеристик водных объектов мы воспользовались методом главных компонент и рассчитали несколько
новых признаков, линейных индексов (главных компонент). Для стандартизации вклада различных загрязнителей в качестве исходных данных использованы логарифмы частных оценочных коэффициентов, которые рассчитываются в ходе оценки УКИЗВ и учитывают кратность превышения ПДКрыб-хоз 1-го ингредиента на водном объекте. Первая главная компонента (факторная ось), соответствующая собственному значению 1,88, описывала приблизительно 80,06 % общей дисперсии и ее роль выше, чем других по информационной насыщенности. Вторая компонента с собственным значением 0,30 описывала 12,79 % оставшейся дисперсии. Первая факторная ось наиболее сильно коррелировала с логарифмом частного оценочного коэффициента содержания в водоемах меди (0,99) (сильная положительная корреляция). Вторая факторная ось имела сильную отрицательную корреляцию с логарифмом частного оценочного коэффициента содержания марганца (—0,93). Таким образом, были опреде-
Таблица 1
Значения комбинаторного индекса загрязнения (УКИЗВ) водных объектов в период полевых сезонов 2016—2019 гг.
Водоем Год УКИЗВ, отн. ед. Класс качества воды
Торфокарьер 2016 2017 2018 2019 2,06 9,5 6,4 17,53 II, слабо загрязненная IV, очень грязная, разряд «в» IV, грязная, разряд «б» V, экстремально грязная
Уч. р. Кудьмы 2017 2018 2019 55,98 66,1 28,63 V, экстремально грязная V, экстремально грязная V, экстремально грязная
Оз. Силикатное 2016 2017 2018 2019 4,87 7,2 7,2 5,99 III, загрязненная IV, грязная, разряд «б» IV, грязная, разряд «б» IV, грязная, разряд «а»
Оз. Бере-зовское 2017 8,8 IV, очень грязная, разряд «в»
Оз. Рустай 2016 1,13 I, условно чистая
Оз. Жилново 2016 4,45 III, загрязненная
Бол. Круглое Дальнее 2016 4,87 III, загрязненная
Оз. Сортировочное 2019 8,46 V класс, очень грязная, разряд «г»
Оз. Втор-чермет 2016 2017 2018 2019 4,51 9,1 6,6 19,34 III, загрязненная IV, очень грязная, разряд «в» IV, грязная, разряд «б» V, экстремально грязная
Бол. Белкино 2017 2018 2019 12,1 12,5 11,73 V, экстремально грязная V, экстремально грязная V, экстремально грязная
т
1,5 1,0 0,5 0,0 -0,5 -1,0 1,5 -2,0 -2,5
А 20 Д ! 19\
16 • 181214 1 шп* / ' 5 •
4 . '15, °9\ к1 1 /
и VI? 10*° №
V/
4
-4 -3-2-1 0 1 2 3 Первая главная компонента: 80,06 %
• Озерные лягушки п Прудовые лягушки
Рис. 1. График рассеивания водных объектов в пространстве
главных компонент: 1 — участок р. Кудьмы_2017; 2 — оз. Березовское_2017; 3 — участок р. Кудьмы_2018; 4 — оз. Силикатное_2017; 5 — участок р. Кудьмы_2019; 6 — торфокарьер_2017; 7 — торфокарьер_2018; 8 — торфокарьер_2019; 9 — бол. Белкино_2018; 10 — бол. Белкино_2017; 11 — оз. Вторчермет_2017; 12 — оз. Вторчермет_2018; 13 — оз. Вторчермет_2019; 14 — оз. Силикатное_2019; 15 — бол. Белкино_2019; 16 — оз. Рустай_2016; 17 — торфокарьер_2016; 18 — бол. Круглое Дальнее_2016; 19 — оз. Жилново_2016; 20 — оз. Силикатное_2016; 21 — оз. Вторчермет_2016
лены факторные оси в пространстве меньшей размерности, на которые были проецированы анализируемые гидрохимические показатели.
Проведенный кластерный анализ и ордина-ция водных объектов в пространстве найденных компонент позволил выделить четыре группы водных объектов, формирующих отдельные кластеры (рис. 1).
С учетом вида распределения центральные тенденции и рассеяние значений количественного содержания химических загрязнителей (выраженное логарифмами частных оценочных коэф-
фициентов) в водных объектах описывали медианой (Ме) и интерквартильным размахом (1РЯ) (значения 25-го и 75-го процентилей). По медианным показателям логарифмов оценочных коэффициентов нитратов (Н = 3,32, р = 0,34) нитритов (Н = 2,39, р = 0,49) и сульфатов (Н = 2,22, р = 0,52) выделенные кластеры м ежду собой статистически значимо не различались. Кластер, занимающий первый квадрант, объединил водоемы с наиболее высоким показателем УКИЗВ (Ме — 28,63; — 46,76), высоким содержанием меди (Ме — 3,10; — 1,67) (табл. 2). Второй кластер объединил наименее загрязненные водные объекты с доминированием озерных лягушек. В этих водных объектах установлено отсутствие превышение ПДКрЬ1б_хоз по меди, хрому, нитратам, сульфатам. Медиана УКИЗВ для водоемов второго кластера составляла — 2,06; — 8,37. Третий кластер объединил пробы вод бол. Белки-но за три года наблюдений (2017—2019) и тор-фокарьера (2019), в которых отмечено относительно высокое содержание железа, марганца, меди и хрома. Значение УКИЗВ третьего кластера: медиана — 12.30, 1рЯ — 3.10. Четвертый кластер включал пробы вод оз. Вторчермет за 2016—2018 годы, в котором доминировали прудовые лягушки, и пять водоемов с доминированием озерных лягушек. Этот кластер характеризовался относительно невысоким содержанием меди, марганца, хрома и железа. Значение УКИЗВ составляло: Ме — 6,27, 1рЯ — 2,33. Водные объекты с доминированием прудовых лягушек имели более высокое содержание хрома (Ме — 0,61, 1РЯ — 0,11) по сравнению с водными объектами, в которых обитали озерные лягушки (Ме — 0,43, ¡РЯ— 0,28) (и = 1,98, р = 0,04).
В соответствии с поставленными задачами был определен уровень карбонильных производных у особей зеленых лягушек, обитающих в раз-
Таблица 2
Медиана и интерквартильный размах логарифмов частных оценочных коэффициентов, учитывающих кратность превышения ЦДКрыб-хоз химических веществ в выделенных кластерах
Номер кластера Железо Марганец Медь Хром
Me ^ Me Me ^ Me ^
Первый Второй Третий Четвертый Статистические показатели 0,52 0,77 0,75 0,38 Н = 11,67, Б3-4 = 3,0! 0,21 0,37 0,13 0,20 р = 0,0086; р = 0,012 1,13 0,41 1,39 0,73 Н = р = 0,40 1,84 0,33 0,07 7,88, 0,04 3,10 0,00 1,60 1,15 Н = 16,43, Бх-2 = 3,51, р = 0 р = 0,042; Б2-3 1,67 0,00 0,24 0,31 р = 0,0009; ,002; Б1-4 = 2,69, = 2,98, р = 0,016 0,41 0,00 0,69 0,55 Н = 13,27, Б2-3 = 3,37 0,21 0,00 0,82 0,09 р = 0,0041; , р = 0,0044
Примечание: В таблице приведены статистически значимые различия по критерию Данна с учетом поправки Бенфер-рони. Н — критерий Крускалла-Уоллеса; Б — критерий Данна. Ме — медиана; ¡РЯ — интерквартильный размах, включающий 50 % значений показателя в выборке (значения 25-го и 75-го процентилей).
ных и сходных, с точки зрения гидрохимии, биотопических условиях. Показано, что уровень окисления как альдегидных, так и кетонных аминокислотных остатков белков сыворотки крови озерных лягушек, обитающих в наиболее загрязненных водных объектах первого кластера, намного превышал аналогичные показатели озерных лягушек второго и третьего кластеров (табл. 3). Такая модификация могла являться регуляцией скоординированного действия белков-ферментов, локализованных в разных тканях организма озерных лягушек.
В течение трех лет наблюдений прудовые лягушки доминировали в двух водных экосистемах: оз. Вторчермет и бол. Белкино, с высоким содержанием марганца, по результатам гидрохимического анализа эти водные объекты попали в раз-
ные кластеры. Сравнительный анализ содержания альдегид- и кетон-динитрофенилгидразонов в сыворотке крови прудовых лягушек этих популяций свидетельствовал о более выраженном характере процесса окислительной модификации белков у особей оз. Вторчермет, входящих в четвертый кластер, по отношению к прудовым лягушкам бол. Белкино (табл. 4).
Таким образом, длительное существование озерных и прудовых лягушек в грязных и экстремально грязных водных объектах приводило к изменению содержания уровня карбонильных производных в сыворотке крови, обусловленных активацией свободнорадикальных процессов и развитию окислительного стресса. Коэффициентом ранговой корреляции Спирмена (г) выявлена положительная взаимосвязь уровня окис-
Таблица 3
Содержание альдегид- и кетон-динитрофенилгидразонов в сыворотке крови озерных лягушек водных объектов разного гидрохимического состава
Кластеры Показатели ОМБ, ОЕ/мл
АДНФГ кднфг
230 нм 270 нм 370 нм 430 нм
Ме 25 % 75 % Ме 25 % 75 % Ме 25 % 75 % Ме 25 % 75 %
1. Первый 2. Второй 3. Третий 4. Четвертый Статистические показатели 32,00 10,50 2,51 9,30 Н = 2 А-3 = 02-3 = ^3-4 = 4,98 7,90 0,65 4,40 ,91, р = 4,60, р < 3,65, р = 3,70, р 40,0 14,70 4,59 14,5 0,0001 0,001; 0,001; = 0,001 12,0 2,50 0,94 4,93 Н = 2 А-2 = А-3 = ^3-4 = 2,10 1,80 0,26 2,03 0,57, р = 2,69, р 3,97, р = 3,60, р 24.0 4,00 3,20 13.1 0,0001 = 0,04; 0,0004; = 0,001 14,0 2,00 1,81 4,30 Н = 1 А-2 = А-3 = ^3-4 = 2,21 1,50 0,28 1,41 7,85, р = 2,69, р 3,92, р = 2,84, р 18,0 4,10 2,12 7,90 0,0005 = 0,04; 0,0005; = 0,02 12,8 1,20 0,98 2,98 Н = 1 А-2 = А-3 = ^3-4 = 2,00 1,00 0,40 1,01 7,14, р = 2,87, р 3,68, р = 2,71, р 19,0 2,40 2,08 6,80 0,0007 = 0,02; = 0,001; = 0,03
Примечание: АДНФГ — альдегид-динитрофенилгидразоны; КДНФГ — кетон-динитрофенилгидразоны; Ме — медиана; 25 % — значение 25-го квартиля; 75 % — значения 75-го квартиля; Н — множественный критерий Крускалла-Уоллиса; Б — попарный критерий Данна. В таблице приведены статистически значимые различия по критерию Данна с учетом поправки Бонферрони.
Таблица 4
Содержание альдегид- и кетон-динитрофенилгидразонов в сыворотке крови прудовых лягушек водных объектов разного гидрохимического состава
Кластеры
Показатели ОМБ, ОЕ/мл
АДНФГ
КДНФГ
230 нм 270 нм 370 нм 430 нм
Ме 25 % 75 % Ме 25 % 75 % Ме 25 % 75 % Ме 25 % 75 %
10,2 44,2 и = 8 5,97 6,28 ,11, р < 15,4 56,0 0,001 7,00 34,0 и = 4,40 4,75 ,07, р < 13,6 39,3 0,001 4,69 31,0 и = 2,20 4,87 5,11, р < 12,4 34,3 0,001 4,80 27,06 и = 2,60 4,31 ,07, р < 10,8 31,5 0,001
3. Третий
4. Четвертый Статистические показатели
Примечание: АДНФГ — альдегид-динитрофенилгидразоны; КДНФГ — кетон-динитрофенилгидразоны; Ме — медиана; 25 % — значение 25-го процентная; 75 % — значения 75-го процентиля; и — попарный критерий Манна-Уитни.
н 0
м о
,Б М
о
ь н
50
40
30
20
10
в
Я -10
X
X
Кр. Манна-Уитни = 4,52, р < 0,001
Озерные Прудовые
Вид лягушек □ Медиана; □ 25-й и 75-й процентили; I Минимум и максимум; о Выпадающие значения; в Экстремумы
Ур
50
40
30
20
10
10
в
в В □ 1
В о
□
Кр. Манна-Уитни = 5,04, р < 0,001
Озерные Прудовые
Вид лягушек □ Медиана; □ 25-й и 75-й процентили; I Минимум и максимуму Выпадающие значения; Экстремумы
Рис. 2. Уровни альдегид-динитрофенилгидразонов (А) и кетон-динитрофенилгидразонов (Б) в сыворотке крови озерных и прудовых лягушек, обитающих в сходных гидрохимических условиях среды
0
0
ления альдегидных карбонильных производных (г = 0,90; р < 0,05), алифатических кетонных карбонильных производных нейтрального (г = 0,90; р < 0,05) и основного характера (г = 0,90; р < 0,05) с комбинаторным индексом загрязнения УКИЗВ. Возрастание УКИЗВ коррелировало с увеличением концентрации в воде м еди (г = 0,95, Я2 = 0,89, р < 0,001) и марганца (г = 0,56, Я2 = 0,31, р < 0,001), что свидетельствовало о преимущественном влиянии на состояние окислительного гомеостаза зеленых лягушек среди комплекса других показателей загрязнения водной среды этих химических элементов.
Представляло особый интерес оценить степень окисления белков лягушек разных видов, обитающих в сходных гидрохимических условиях среды, т.е. в водных объектах четвертого кластера. Показано, что оптическая плотность растворов 2,4-ДНФГ, регистрируемая при всех пяти длинах волн, у прудовых лягушек статистически значимо превышала аналогичные показатели озерных лягушек. Так, содержание альдегидных карбонильных производных белков в сыворотке крови прудовых лягушек в 6,9 раза превышало содержание АДНФГ в сыворотке крови озерных лягушек, зарегистрированное при длине волны 270 нм (и = 4,52, р < 0,001) (рис. 2, А).
Уровень алифатических кетонных карбонильных производных нейтрального характера (зарегистрированных при длине волны 370 нм) в сыворотке крови прудовых лягушек в 7,2 раза превышал аналогичный показатель озерных (и = 5,04, р < 0,001) (рис. 2, Б). Из представленных данных можно сделать вывод, что порог чувствительнос-
ти белков к окислению у прудовых лягушек ниже, чем у озерных лягушек, и процесс окислительной м одификации белков имеет статистически значимо более выраженный характер.
Известно, что из окружающей среды соединения тяжелых металлов (меди, железа, никеля, свинца и др.) легко проникают в трофические цепи, включаются в метаболические циклы и вызывают разнообразные физиологические нарушения, участвуя в генерации активных форм кислорода [10]. Чрезмерная активация свободно -радикальных реакций вносит вклад в разбаланси-ровку основных интегральных систем организма, в том числе и иммунной системы, поскольку вызывает деструкцию иммуноглобулинов, белков-ферментов, рецепторов, структурных белков и ионных каналов, что сопровождается нарушениями метаболизма, функций тканей и органов и приводит к гибели организмов. Условия среды, вызывающие необходимость адаптивного ответа, могут быть выражены относительно непродолжительными отклонениями различных показателей от их средних значений либо изменениями среднего уровня воздействующих факторов [11]. Адаптации амфибий к комплексному загрязнению водной среды проявлялись в усилении окислительной м одификации белков в сыворотке крови. Окисление белков, как известно, приводит к их деградации с образованием пептидов [4], выполняющих ведущую роль в регуляции метаболических процессов в общей системе адаптации к окислительному стрессу. Состояние окислительного стресса связано с функционированием ан-тиоксидантной и прооксидантной систем, соот-
ношение которых в организме изменяется под влиянием различных факторов внешней среды и поддерживается на более высоком сбалансированном уровне, обеспечивая выживание видов. В тканях происходит постоянная генерация активных форм кислорода, которые, являясь сигнальными молекулами, обеспечивают сохранение нормального метаболического фона, необходимого для функционирования клеток и органов. С активными формами кислорода связана экспрессия редокс-чувствительных генов, необходимых для включения адаптационных механизмов организма в экстремальных условиях [12]. Это обеспечивает мобилизацию антиоксидантной защиты, которая участвует в снижении уровня реакционно-способных соединений, препятствуя тем самым проявлению их токсического действия в тканях.
Заключение. Химическое загрязнение исследованных водных объектов Нижегородской области было относительно высоким. Методом главных компонент о выделены группы (кластеры) объектов с близкими показателями химического загрязнения среды и доминированием разных видов лягушек, а также водоемы, отличающиеся от остальных своими специфическими гидрохимическими условиями. Во всех кластерах в разном соотношении отмечено превышение ПД^^^ для железа, марганца, меди и хрома. При этом больше железа обнаружено в третьем кластере по сравнению с четвертым; меди — в первом по
сравнению со вторым и четвертым кластерами; хрома — в третьем по сравнению со вторым кластером. Водные объекты первого кластера характеризовались наиболее высокими показателями удельного комбинаторного индекса загрязненности воды (УКИЗВ). Водоемы с доминированием озерных лягушек имели более низкое содержание хрома по сравнению с водоемами, где обитали прудовые лягушки. Установлена взаимосвязь комбинаторного индекса загрязнения водной среды (УКИЗВ) и параметров окислительного гомеос-таза (альдегидных карбонильных производных, алифатических кетонных карбонильных производных нейтрального и основного характера), а также комплексное влияние загрязнителей водной среды на интенсивность окислительных реакций в сыворотке крови озерных и прудовых лягушек. Уровень окислительного стресса у разных видов амфибий связан с реализацией окислительного гомеостаза в различных гидрохимических условиях среды. Адаптации амфибий к комплексному загрязнению водной среды проявлялись в усилении окислительной модификации белков в сыворотке крови, при этом интенсивность окислительных процессов у прудовых лягушек более выражена по сравнению с озерными лягушками.
Благодарности. Авторы выражают благодарность д. б. н. Якимову В. Н. за ценные рекомендации при выполнении статистического анализа.
Библиографический список
1. Зенков Н. К., Ланкин В. З., Меньщикова Е. Б. Окислительный стресс: биохимический и патофизиологический аспекты. — М. — 2001. — 343 с.
2. Никольская В. А., Черетаев И. В., Геок И. В. Влияние окислительного стресса in vitro на процессы окислительной модификации белков и уровень молекул средней массы в сыворотке крови представителей Amhhibia, Mammalia и Aves // Бюллетень медицинских Интернет-конференций (ISSN 2224-6150). — 2015. — Т. 5. — № 9. — С. 1151—1153.
3. Пескова Т. Ю. Адаптационная изменчивость земноводных в антропогенно загрязненной среде: автореф. дис. ... докт. биол. наук. Тольятти, 2004. — 36 с.
4. Дубинина Е. Е. Продукты метаболизма кислорода в функциональной активности клеток. — СПб.: Мед. Пресса, 2006. — 400 с.
5. Wall S. B. Joo-Yeun Oh, Diers A. R., Landar A. Oxidative modification of proteins: an emerging mechanism of cell signaling // Frontiers in Physiology. — 2012. — P. 7—10.
6. Романова Е. Б., Шаповалова К. В., Козырева А. В. Состояние свободно-радикального окисления сыворотки крови амфибий водоемов урбанизированной территории // Экология урбанизированных территорий. — 2017. — № 1. — С. 25—31.
7. Falfushinska H., Loumbourdis N., Romanchuk L., Stolyar O. Validation of oxidative stress responses in two population of frogs from Western Ukraine // Chemosphere. — 2008. — P. 1096—1101.
8. РД 52.24.643—2002 Метод комплексной оценки степени загрязненности поверхностных вод по гидрохимическим показателям https://meganorm.ru/Data2/1/4293831/4293831806.htm
9. Нормативы качества воды водных объектов рыбохозяйственного значения, в том числе нормативы предельно допустимых концентраций вредных веществ в водах водных объектов рыбохозяйственного значения (утв. приказом Федерального агентства по рыболовству от 18.01.2010 г. № 20). Информационно-правовой портал: Гарант.ру. URL: http://www.garant.ru/products/ipo/prime/doc/2070984/#ixzz4mY1P6WRm
10. Матвеева Н. А., Леонов А. В., Грачева М. П. и др. Гигиена и экология человека / Под ред. Н. А. Матвеевой. — М.: Издательский центр «Академия», 2005. — 304 с.
11. Шилов И. А. Физиологическая экология животных. — М., 1985. — 328 с.
12. Smith C. V. Correlation and apparent contradictions in assessment of oxidant stress status in vivo. // Free Radic. Biol. Med. — 1992. — Vol. 10. — P. 217—224.
COMPARATIVE ANALYSIS OF OXIDATIVE MODIFICATION OF BLOOD SERUM PROTEINS AS AN ASSESSMENT OF THE ADAPTATION OF MARSH AND POOL FROGS (AMPHIBIA: RANIDAE) OF THE NIZHNY NOVGOROD REGION TO DIFFERENT HYDROCHEMICAL ENVIRONMENTAL CONDITIONS
E. B. Romanova, Ph. D. in Biology, Dr. Habil., Professor, Lobachevsky State University of Nizhni Novgorod, romanova@ibbm.unn.ru; K. V. Shapovalova, Postgraduate Student, Lobachevsky State University of Nizhni Novgorod, kristin.shapovalova@gmail.com; E. S. Ryabinina, Master Student, Lobachevsky State University of Nizhni Novgorod, ryabinina.e.s@yandex.ru
References
1. Zenkov N. K., Lankin V. Z., Menshikova E. B. Okislitelnyi stress biokhimicheskii i patofiziologicheskii aspekty [Oxidative stress: biochemical and pathophysiological aspects.]. Moscow, 2001. 343 p. [in Russian].
2. Nikolskaya V. A., Cheretaev I. V., Geok I. V. Vliianie okislitelnogo stressa in vitro na protsessy okislitelnoi modifikatsii belkov i uroven molekul srednei massy s syvrorotke krovi predstavitelei Amhhibia Mammalia i Aves [The influence of oxidative stress in vitro on the processes of oxidative modification of proteins and the level of medium-weight molecules in the blood serum of Amhhibia, Mammalia and Aves]. Byulleten medicinskih Internet konferencij (ISSN 2224-6150) [Bulletin of Medical Internet Conferences]. 2015. Vol. 5. No. 9. P. 1151-1153 [in Russian].
3. Peskova T. Iu. Adaptatsionnaya izmenchivost zemnovodnyih v antropogenno zagryaznennoy srede. [Adaptive variability of amphibian in an anthropogenically polluted environment]. Synopsis of DrDegree dissertation. Togliatti, 2004. 36 p. [in Russian]
4. Dubinina E. E. Produkty metabolizma kisloroda v funktsionalnoi aktivnosti kletok [Products of oxygen metabolism in the functional activity of cells]. SPb., Med. Presa. 2006. 400 p. [in Russian].
5. Wall S. B. Joo-Yeun Oh, Diers A. R., Landar A. Oxidative modification of proteins: an emerging mechanism of cell signaling. Frontiers in Physiology. 2012. P. 7—10.
6. Romanova E. B., Shapovalova K. V., Kozyreva A. V. Sostoianie svobodno-radikalnogo okisleniia syvorotki krovi amfibii vo-doemov urbanizirovannoi territorii. Ekologiya urbanizirovannyh territorij [Ecology of Urban Areas], 2017. No. 1. P. 25—31 [in Russian].
7. Falfushinska H., Loumbourdis N., Romanchuk L., Stolyar O. Validation of oxidative stress responses in two population of frogs from Western Ukraine. Chemosphere. 2008. P. 1096—1101.
8. GD 52.24.643—2002 Metod kompleksnoy otsenki stepeni zagryaznennosti poverhnostnyih vod po gidrohimicheskim poka-zatelyam [Method for a comprehensive assessment of the degree of pollution of surface waters by hydrochemical indicators]. Electronic resource available at: https://meganorm.ru/Data2/174293831/4293831806.htm [in Russian].
9. Normativyi kachestva vodyi vodnyih ob'ektov ryibohozyaystvennogo znacheniya, v tom chisle normativyi predelno dopus-timyih kontsentratsiy vrednyih veschestv v vodah vodnyih ob'ektah ryibohozyaystvennogo znacheniya [Water quality standards for fishery water bodies, including maximum permissible concentrations of harmful substances in fishery water bodies (approved by order of the Federal Agency for Fisheries of January 18, 2010 No. 20)]. Electronic resource available at: http:// www.garant.ru/products/ipo/prime/doc/2070984/#ixzz4mY1P6WRm [in Russian].
10. Matveeva N. A., Leonov A. V., Gracheva M. P. et al. Gigiena i ekologiia cheloveka [Hygiene and human ecology]. Moscow: Publishing Center "Academy". 2005. 304 p. [in Russian].
11. Shilov I. A. Fiziologicheskaia ekologiia zhivotnykh [Physiological Ecology of Animals]. Moscow, 1985. 328 p. [in Russian].
12. Smith C. V. Free Radic. [Correlation and apparent contradictions in assessment of oxidant stress status in vivo]. Biol. Med. 1992. Vol. 10. P. 217—224.
