CC BY
23
DOI 10.24411/2074-5036-2020-10017 УДК 636.22:619:616.993.1
Ключевые слова: анаплазмоз, крупный рогатый скот, Anaplasma marginale, диагностика, лечение
Key words: anaplasmosis, cattle, Anaplasma marginale, diagnosis, treatment
Скорнякова О.О.
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ МЕТОДОВ ЛЕЧЕНИЯ КОРОВ ПРИ СПОНТАННОМ АНАПЛАЗМОЗЕ
COMPARATIVE ANALYSIS OF COW TREATMENT METHODS WITH SPONTANEOUS ANAPLASMOSIS
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Вятская государственная сельскохозяйственная академия» Адрес: 610017, Россия, г. Киров, Октябрьский проспект, д. 133.
Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education «Vyatka state agricultural academy» Address: 610017, Russia, Kirov, Oktyabrsky Prospect, 133.
Скорнякова Ольга Олеговна, кандидат ветеринарных наук, доцент каф. терапии, хирургии, акушерства и заразных болезней. E-mail: olymur@yandex.ru.
Skornyakova Olga Olegovna, PhD of Veterinary Science, Associate Professor of the Dept. of Therapy, Surgery, Obstetrics and Infectious Diseases. E-mail: olymur@yandex.ru.
Аннотация. Анаплазмоз крупного рогатого скота регистрируется в Кировской области с 2005 года. В 2010 году средний процент зараженности крупного рогатого скота анаплазмозом в Кировской области составил 9,42 %. Анаплазмозная инвазия протекает в форме носительства. При заболевании анаплазмозом у коров на 80 % снижаются удои, а также имеются случаи проявления маститов без видимых клинических признаков заболевания. В настоящей статье изучена сравнительная эффективность двух методов лечения коров, больных анаплазмозом и субклинической формой мастита, с использованием антибиотика тетрациклина пролонгированного действия «Нитокс 200» в сочетании с витаминно-минеральным препаратом «Фермивит-Se» и внутривыменной суспензией «Мультибай IMM». Диагностику субклинической формы мастита проводили пробой с «Мастидином». Для диагностики анаплазмоза и оценки влияния препаратов на организм животных были проведены трехкратные микроскопические и гематологические исследования крови коров до, через 7 и 14 дней после лечебной обработки. Для определения вида кровепаразита исследовали под микроскопом мазки из периферической крови заболевших животных, окрашенные по методу Романовского-Гимза с использованием буферного раствора. Для определения содержания антибиотиков тетрациклиновой группы в сыром молоке использовали ИФА и экспресс-метод «Дельвотест». 100 %-ную лечебную эффективность показал метод с использованием «Нитокс 200» в дозе 1 мл на 10 кг живой массы, внутримышечно, однократно, и «Фермивит-Se» в дозе 8-10 мл на голову, внутримышечно, двукратно с интервалом 7 дней. После проведенного лечения в течение 14 дней отмечено постепенное увеличение показателей гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов на 19,33, 17,2 и 4,32 % соответственно. Показатели лейкоцитарной формулы варьировали в пределах физиологической нормы. Молоко коров через 7 дней после обработки не содержит антибиотика.
Summary. Cattle anaplasmosis has been registered in the Kirov region since 2005. In 2010, the average percentage of cattle anaplasmosis infection in the Kirov region amounted to 9.42 %. Anaplasmosis invasion proceeds in the form of carriage. With anaplasmosis in cows, milk yield is reduced by 80 %, and there are also cases of mastitis without visible clinical signs of the disease.
In this article, the comparative effectiveness of two methods of treating cows with anaplasmosis and subclinical mastitis using the antibiotic tetracycline of prolonged action "Nitox 200" in combination with the vitamin-mineral preparation "Fermivit-Se" and intra-suspension suspension "Multibay IMM" is studied. Diagnosis of a subclinical form of mastitis was carried out by a breakdown with mastidine. To diagnose anaplasmosa and assess the effect of drugs on the animal organism, three microscopic and hematological studies of the blood of cows were performed before, after 7 and 14 days after treatment. To determine the type of blood parasite, we examined under a microscope smears from the peripheral blood of diseased animals stained according to the Romanovsky-Giemsa method using a buffer solution. To determine the content of tetracycline antibiotics in raw milk, IFA and the "Delvotest" rapid method were used.
The method using "Nitox 200" at a dose of1 ml per 10 kg of live weight, intramuscularly, once, and "Fermivit-Se" at a dose of 8-10 ml per head, intramuscularly, twice with an interval of 7 days showed 100 % therapeutic effectiveness. After treatment for 14 days, a gradual increase in hemoglobin, red blood cells and white blood cells by 19.33, 17.2 and 4.32 %, respectively. The leukocyte counts varied within the physiological norm. Cow's milk does not contain an antibiotic 7 days after treatment.
Введение
Анаплазмоз крупного рогатого скота регистрируется в Кировской области с 2005 года. В 2010 году микроскопически обследовано 39 районов (10 % поголовья) и областной центр. Средний процент зараженности анаплазмозом в Кировской области составил 9,42 %. По результатам мониторинга выявлено три стационарно неблагополучных района (Малмыжский, Вятско-Полянский и Кильмезский) с экстенсивностью инвазии, равной в среднем 80,56±9,02 %. По морфологическим особенностям обнаруженных паразитов в крови крупного рогатого скота на территории Кировской области был идентифицирован возбудитель анаплазмоза, которым является внутриэритроцитарный паразит Anaplasma marginale (Theiler, 1910), относящийся к роду Anaplasma [1]. При микроскопическом исследовании мазков из периферической крови крупного рогатого скота, окрашенных по Романовскому-Гимза, обнаруживали паразитов в виде мелких точек округлой формы темно-красного цвета, расположенных ближе к периферии эритроцита. Анаплазмоз протекает в форме пара-зитоносительства, паразитемия в среднем составила 5...6 (максимум 7...8) анаплазм в 100 полях зрения микроскопа [3, 4, 5, 6]. Имеются данные, что при анаплазмозе у коров снижаются удои (до 80 %), развиваются маститы, а функция молочной железы после переболевания полностью не восстанавливается, что приводит к значительному снижению надоев и последующей выбраковке животных [2].
В работе проведен сравнительный анализ эффективности двух методов лечения коров, больных анаплазмозом и субклинической формой мастита, с использованием антибиотика тетрациклина пролонгированного действия в форме раствора для инъекций («Нитокс 200») в сочетании с витаминно-минеральным препаратом «Фермивит-Se» и внутривыменной суспензией «Мультибай IMM».
Материалы и методы
Диагностические исследования крови были проведены на базе курса паразитологии ФГБОУ ВО Вятская ГСХА, молока сыро-
го на содержание антибиотиков тетрацикли-новой группы - токсикологического отдела КОГБУ Кировская областная ветеринарная лаборатория, практическая часть - племенного хозяйства ОАО Агрофирма «Смаиль» Малмыжского района Кировской области.
Для сравнительного анализа методов лечения анаплазмоза провели опыты на коровах 2-й и 3-й лактации с субклинической формой мастита, в эритроцитах которых были обнаружены анаплазмы. Для этого были сформированы две опытные группы животных. Первой опытной группе (п=6) для лечения использовали «Нитокс 200» (200 мг окситетрациклина дигидрата в 1 мл раствора) в дозе 1 мл на 10 кг живой массы, внутримышечно, однократно, и «Фермивит^е» (40 мг трехвалентного железа, 2500 МЕ витамина А, 500 МЕ витамина Д3, 2,5 мг витамина Е, 0,25 мг витамина К, 2,5 мг витамина В1, 1 мг витамина В2, 0,75 мг витамина В6, 0,0025 мг витамина В12, 7,5 мг никотинами-да, 5 мг пантотеновой кислоты, 0,05 мг фо-лиевой кислоты, 0,0025 мг биотина, 0,15 мг селенита натрия, 0,2 мг гидролизата белка лактоальбумина, 15 мг глюкозы в 1 мл раствора) в дозе 8-10 мл на голову, внутримышечно, двукратно с интервалом 7 дней; второй опытной группе (п=6) - «Нитокс 200» в дозе 1 мл на 10 кг живой массы, внутримышечно, однократно, и «Мультибай 1ММ» (100 мг пенициллина прокаина, 100 мг стрептомицина сульфата, 100 мг неомицина сульфата, 10 мг преднизолона в 5 г суспензии) в дозе 5 г (1 шприц) в пораженную долю вымени, трехкратно с интервалом 24 часа. Субклиническую форму мастита диагностировали пробой с «Мастидином». Для диагностики анаплазмоза и оценки влияния препаратов на организм животных были проведены трехкратные микроскопические и гематологические исследования крови коров до, через 7 и 14 дней после лечебной обработки. Для определения вида кровепаразита исследовали под иммерсионной системой микроскопа мазки из периферической крови заболевших животных, окрашенные по методу Романов-ского-Гимза с использованием буферного раствора (КН2РО4 - 0,27 г, Ш2НРО4 - 0,67 г, вода дистиллированная - 1 л). Микроскопия
и морфометрия выполнены на бинокулярном микроскопе Микромед-1 с использованием цифровой камеры (видео-окуляр) серии Toup Cam 3.1 MP и программного обеспечения анализа изображений Toup View [1, 3]. Гематологические исследования включали: определение количества гемоглобина (г/л) в крови с использованием унифицированного гемиглобинцианидного метода на основе реагентов «Гемоглобин-200-СПб» и спектрофотометра ПЭ-5400 УФ; определение количества эритроцитов (1012/л) и лейкоцитов (109/л) меланжерными методами в камере Горяева; подсчет лейкоцитарной формулы по общепринятым методикам (Кондрахин, 1985). В ходе исследований были подсчитаны средние показатели паразитемии, эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина и лейкоцитарной формулы по опытным группам и статистическое стандартное отклонение с использованием компьютерной программы Microsoft Excel 2010. Всего исследовано 36 проб крови.
Результаты исследований и обсуждение
Диагноз на анаплазмоз ставили комплексно с учетом эпизоотической ситуации по заболеванию в Кировской области, результатов мастидиновой пробы молока и микроскопии крови. В результате у всех опытных животных диагностировали субклиническую форму мастита с поражением одной доли вымени.
При микроскопии мазков крови коров обнаруживали единичных точковидной формы паразитов, расположенных ближе к периферии или центру эритроцита и окрашенных в темно-красный цвет (рис. 1). Экстенсивность ана-плазмозной инвазии составила 100% в обеих опытных группах, а интенсивность (паразите-мия) - 2-3-4 анаплазмы в среднем в 100 полях зрения микроскопа. Результаты исследований свидетельствуют о субклиническом течении заболевания в форме паразитоносительства.
Показатели гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов коров до и после лечения
До лечения в крови животных опытных групп показатели гемоглобина и эритроцитов были у нижней границы физиологической нормы. Количество лейкоцитов в крови
75 % коров находилось в пределах средних показателей нормы здоровых животных и составляло 6,44±0,34-6,39±0,24 109/л. В 25 % случаях отмечали лейкоцитоз. Количество лейкоцитов было в среднем 12,88±0,37 1 09/л, что может говорить о переходе субклинической формы мастита в катаральную. После проведенного лечения в динамике гемоглобина у коров всех опытных групп отмечали постепенное увеличение показателя: у животных первой группы - на 12,09 % через 7 дней и на 19,33 % через 14 дней после обработки, а у животных второй группы - на 3,81 и 10,79 %, соответственно. В динамике эритроцитов у коров первой опытной группы количество эритроцитов увеличилось на 9,17% через 7 дней и на 17,2 % через 14 дней после обработки, у животных второй опытной группы - на 0,9 и 5,24 %, соответственно. В динамике лейкоцитов у коров всех опытных групп отмечено незначительное увеличение их количества к 14 дню на 4,32 и 1,69 % у животных первой и второй группы. У коров, в крови которых был лейкоцитоз, наблюдали снижение количества лейкоцитов на 48,83 % через 7 дней после обработки. К 14 дню этот показатель находился в пределах показателей обеих опытных групп.
Показатели лейкограммы коров до и после лечения
У животных первой опытной группы количество эозинофилов до и после лечения находилось в пределах физиологической нормы, а у животных второй опытной группы увеличилось в 2 раза через 7 дней после обработки.
В динамике сегментоядерных нейтрофи-лов у коров первой группы их количество увеличилось на 16,62 % через 7 дней и на 27,94 % через 14 дней после обработки, а у животных второй группы этот показатель вырос на 18,09 и 27,73 %, соответственно.
В динамике лимфоцитов у коров всех опытных групп отмечено уменьшение их количества: у животных первой группы к 7 дню на 9,82 % и к 14 дню на 13,65 %, у второй группы - на 7,91 и 15,68%, соответственно. В итоге все показатели лейкоцитарной формулы варьировали в пределах физиологической нормы.
Рис. 1. Различная локализация Anaplasma marginale в крови коров. Окр. по Романовскому-Гимза. Ув.1000
Сравнительный анализ методов лечения коров при спонтанном анаплазмозе крупного рогатого скота
Эффективность лечения оценивали по результатам двукратных микроскопических исследований крови через 7 и 14 дней после обработки и лабораторных исследований молока сырого на содержание антибиотиков тетрациклиновой группы через 7 дней после лечения.
После проведенного лечения показатели ЭЭ (табл. 2) при использовании «Ни-токс 200» + «Фермивит^е» составили 66,67 и 100 % через 7 и 14 дней после лечения, а показатели ИЭ - 87,64 и 100 %, соответственно. При использовании «Ни-токс 200» + «Мультибай 1ММ» ЭЭ через 7 дней была равной 66,77 %, а через 14 дней - 83,33 %, ИЭ - 87,64 и 93,63 %, соответственно.
Таблица 1
Гематологические показатели крови и лейкограммы коров до и после лечения
Показатели Физиологическая норма 1 опытная группа (n=6) 2 опытная группа (n=6)
до лечения через 7 дней через 14 дней до лечения через 7 дней через 14 дней
Нв, г/л 90-120 94,68 ±6,06 107,71 ±6,72 117,36 ±2,61 93,31 ±8,81 97,01 ±7,93 104,6 ±6,01
Эритроциты, 1012/л 5-7,5 5,15 ±0,22 5,67 ±0,55 6,22 ±0,31 5,07 ±0,13 5,11 ±0,27 5,35 ±0,22
Лейкоциты, 109/л 4,5-12 6,44 ±0,34 6,66 ±0,28 6,73 ±0,28 6,39 ±0,24 6,53 ±0,38 6,5 ±0,29
Сегментоядерные нейтрофилы,% 20-35 27,6 ±1,9 33,1 ±1,5 38,3 ±1 25,8 ±2,3 31,5 ±1,4 35,7 ±2,5
Палочкоядерные нейтрофилы, % 2-5 2,5 ±1 2,3 ±0,8 1,7 ±0,5 2,5 ±0,5 2,5 ±0,8 1,8 ±0,9
Лимфоциты, % 40-75 65,2 ±2,3 58,8 ±2,3 56,3 ±1,5 68,2 ±1,7 62,8 ±4,9 57,5 ±1,5
Моноциты, % 2-7 - 0,2 ±0,4 - - - 0,3 ±0,5
Эозинофилы, % 3-10 3,3 ±1,4 4,8 ±2,6 3,8 ±0,9 3,0 ±1,1 6,5 ±1,8 6,7 ±2,2
Базофилы, % 0-2 - 0,2 ±0,4 - - - -
Таблица 2
Показатели экстенсэффективности (ЭЭ) и интенсэффективности (ИЭ) после лечения
Методы лечения ЭЭ, % ИЭ, %
через 7 дней через 14 дней через 7 дней через 14 дней
«Нитокс 200» + «Фермивит-Se» 66,67 100 87,64 100
«Нитокс 200» + «Мультибай IMM» 66,67 83,33 87,64 93,63
Лабораторные исследования молока сырого показали, что при использовании первого метода лечения («Нитокс 200» + «Фермивит-Se») методом ИФА на тетрациклиновую группу антибиотиков показатель был равен 0,0014, при использовании второго метода лечения («Нитокс 200» + «Мультибай 1ММ») -менее 0,005. Экспресс-метод «Дельвотест» при обоих методах лечения антибиотиков не обнаружил.
Заключение
Лечение коров, больных анаплазмозом и субклинической формой мастита, с использованием антибиотика тетрациклинового ряда пролонгированного действия «Нитокс 200» в сочетании с витаминно-ферментным препаратом «Фермивит^е», обладающим восстановительным и общеукрепляющим действием, способствует 100 % выздоровлению в течение 14 дней. Молоко через 7 дней после обработки не содержит антибиотика.
Список литературы
1. Георгиу Х. Видовая идентификация кровепара-зитов крупного рогатого скота в Кировской области / Х. Георгиу, О. О. Скорнякова // Российский ветеринарный журнал. М., 2016. Вып. 1. С. 12-13.
2. Минасян В. Г. Методы лечения коров, больных анаплазмозом / В. Г. Минасян, Ю. Г. Ткаченко, М. Ф. Идина // Ветеринарная патология. 2009. №4. С. 82-85.
3. Скорнякова О. О. Эпизоотологический мониторинг и динамика сезонной восприимчивости крупного рогатого скота к бабезиозу и анаплазмозу / О. О. Скорнякова // Российский паразитологический журнал. М., 2014. № 4. С. 34-40.
4. Скорнякова О. О. Протозойные болезни крупного рогатого скота: диагностика, лечение и профилактика. / О. О. Скорнякова. Киров: ФГБОУ ВПО Вятская ГСХА, 2013. 58 с.
5. Скорнякова О. О. Эпизоотический анализ гемо-споридиозов крупного рогатого скота в Кировской области / О. О. Скорнякова // Современные научно-прак-тич. достижения в ветеринарии. Киров, 2011. Вып. 2. С. 86-87.
6. Скорнякова О. О. Основы терапии и профилактики паразитарных болезней животных (по Кировской области) / О. О. Скорнякова, С. Н. Белозеров. Киров: Вятская ГСХА, 2016. С. 29-32.
DOI 10.24411/2074-5036-2020-10018 УДК 639.386.1: 57.085.2
Ключевые слова: рыбы, слизь, кровь, гемостаз, иммуноблоттинг, электрофорез
Key words: fish, slime, blood, hemostasis, immunoblotting, electrophoresis
'Фомина Л. Л., 'Кулакова Т. С., 2Жунина О. А., 'Ошуркова Ю. Л., 'Вайцель А. Э.
ВЫДЕЛЕНИЕ АКТИВНЫХ КОМПОНЕНТОВ ИЗ СЛИЗИ КОЖИ РЫБ РАЗНЫХ ВИДОВ И ИЗУЧЕНИЕ ИХ ГЕМОСТАТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ
ISOLATION OF ACTIVE COMPONENTS FROM THE SKIN SLIME OF FISH OF DIFFERENT SPECIES AND STUDY OF THEIR HEMOSTATIC ACTIVITY
'ФГБОУВО «Вологодская государственная молочнохозяйственная академия имени Н. В. Верещагина» Адрес: 160555, Вологодская область, г. Вологда, с. Молочное, ул. Шмидта, д. 2
FSBEIHE "Vologda State Dairy Farming Academy named after N. V. Vereshchagin"
Address: 160555, Vologda region, Vologda, Molochnoe village, Shmidta str., 2
