CC BY
42
УДК 616-006.61:611.61
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ЭКСПРЕССИИ МОЛЕКУЛЯРНЫХ МАРКЕРОВ ЛИМФАТИЧЕСКИХ СОСУДОВ LYVE-1 И ПОДОПЛАНИН ПРИ РАКЕ НИЖНЕЙ ГУБЫ И МЕЛАНОМЕ КОЖИ
Наталия Петровна БГАТОВА1, Ирина Сергеевна КУЛИКОВА1, Алексей Игоревич ЛОМАКИН2, Надежда Борисовна ИСАКОВА2, Виктор Борисович ПРОХОЖЕВ2, Игорь Викторович КАЧЕСОВ2, Сергей Александрович ФУРСОВ2, Юрий Иванович БОРОДИН1, Юрий Эммануилович НАРОВ3, Андрей Юрьевич ЛЕТЯГИН1, Владимир Евгеньевич ВОЙЦИЦКИЙ2, Владимир Иосифович КОНЕНКОВ1
1 ФГБУ НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН 630117, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 2
2 Новосибирский областной онкологический диспансер ГБУЗ НСО 630108, г. Новосибирск, ул. Плахотного, 2
3 ГОУ ВПО Новосибирский государственный медицинский университет Минздрава России 630091, г. Новосибирск, Красный пр., 52
Проведено иммуногистохимическое исследование лимфатического русла двух видов опухолей, различающихся по агрессивности злокачественного роста и метастатическому потенциалу - рака нижней губы и меланомы кожи. Использовали антитела к маркерам эндотелиоцитов лимфатических сосудов LYVE-1 и подопланин. В обоих случаях обнаружено большее содержание подопланин-позитивных лимфатических сосудов, чем LYVE-1+ позитивных. Более значительное, чем при раке нижней губы, преобладание экспрессирующих подопланин сосудов по периферии опухолевого роста по сравнению с пограничными к опухолевому узлу участками при меланоме кожи, вероятно, свидетельствует о новообразовании лимфатических сосудов. Отмеченные отличия в развитии лимфатической сети в опухолевой ткани у пациентов с меланомой кожи могут быть связаны с про-грессированием заболевания, что требует дальнейших исследований.
Ключевые слова: рак нижней губы, меланома кожи, LYVE-1+ сосуды, подопланин+ сосуды.
Для иммуногистохимического (ИГХ) анализа опухолей и их метастазов используется широкий спектр тканеспецифичных и цитоспецифичных маркеров, маркеров пролиферации, опухолеас-социированных антигенов, онкофетальных антигенов, гормонов, ферментов и др. [4]. Задачей молекулярного обследования онкологических
больных является не только накопление информации и пополнение баз данных для будущих ретроспективных обобщений, но и выявление прогностического значения молекулярных маркеров и их влияния на выбор терапевтической программы [1]. В последнее время важную роль в прогрессии опухолевого роста и метастазирова-
Бгатова Н.П. - д.б.н., проф., зав. лабораторией, e-mail: n_bgatova@ngs.ru Куликова И.С. - заочный аспирант, e-mail: kis1975@rambler.ru Ломакин А.И. - заочный аспирант, e-mail lomakin@rocketmail.com Исакова Н.Б. - врач-патологоанатом, e-mail nadin-isakova@mail.ru Прохожев В.Б. - врач-патологоанатом
Качесов И.В. - зав. патолого-анатомическим отделением, главный патологоанатом
Фурсов С.А. - д.м.н., проф. кафедры онкологии, хирург высшей категории, зав. хирургическим отделением,
e-mail fursov.serega2011@yandex.ru
Бородин Ю.И. - д.м.н., проф., академик РАМН, e-mail lympha@soramn.ru Наров Ю.Э. - д.м.н., проф., заведующий кафедрой онкологии
Летягин А.Ю. - д.м.н., проф., зам. директора по научной работе, e-mail letyagin-andrey@yandex.ru Войцицкий В.Е. - д.м.н., проф. кафедры онкологии, зам. главного врача по лечебной части, главный онколог Коненков В.И. - д.м.н., проф., академик РАМН, директор, e-mail konenkov@soramn.ru
ния уделяют опухолевому лимфангиогенезу [20]. В качестве молекулярных маркеров опухолевого лимфангиогенеза наиболее часто используют LYVE-1, подопланин и Ргох-1 [2, 11]. Данные молекулярные маркеры позволяют выявлять эн-дотелиальные клетки существующих и новообразованных лимфатических сосудов. Имеются сведения о наличии взаимосвязи между плотностью лимфатических сосудов в опухоли и выживаемостью пациентов [18]. В настоящее время доказано, что степень развития опухолевого лим-фангиогенеза может служить прогностическим критерием риска метастазирования в лимфатический узел [13]. Для повышения вероятности обнаружения инвазии опухолевых клеток важно выявление лимфатических эндотелиальных маркеров. В частности, было установлено, что экспрессия подопланина ассоциируется с высоким риском метастазирования плоскоклеточного рака кожи [17].
Известно, что опухоли обладают неодинаковой скоростью злокачественного роста и ме-тастазирования. В связи с этим представляет интерес вопрос о существовании особенностей лимфатического русла опухолей, различающихся по агрессивности злокачественного роста и метастатическому потенциалу. К опухолям с низкой степенью метастазирования можно отнести рак губы, который составляет около 3 % всех злокачественных новообразований. Однако в последнее время частота данного заболевания значительно возросла [9]. В большинстве случае опухоль имеет строение плоскоклеточного ороговевающего рака со сравнительно медленным ростом и малой инфильтрацией тканей. Более быстрым инфиль-тративным ростом и ранним метастазированием в регионарные лимфатические узлы - подбородочные, подчелюстные, в район яремной вены -характеризуется неороговевающий плоскоклеточный рак. При I стадии метастазы наблюдаются в 5-8 %, при II - в 15-20 %, при III - в 35 %, при IV - в 70 % случаев [5]. Известно, что рак губы диагностируется чаще всего на Ш-^стадиях, поэтому актуальна ранняя диагностика злокачественного роста, что позволяет избежать травмирующих оперативных вмешательств и возможного метастазирования [10]. Одно из наиболее агрессивно протекающих злокачественных новообразований человека, обладающих высоким метастатическим потенциалом, представляет собой меланома кожи [3]. Ранняя диагностика и своевременное удаление первичной меланомы кожи являются основными составляющими успешной терапии данного заболевания.
Целью исследования было иммуногистохи-мическое выявление экспрессии молекулярных
маркеров лимфатических сосудов LYVE-1 и подопланин при раке нижней губы и меланоме кожи, различающихся по агрессивности злокачественного роста и метастатическому потенциалу.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
В исследование были включены 2 группы пациентов. Первая группа была представлена 15 больными с плоскоклеточным неороговевающим раком нижней губы первой стадии (T1N0M0). Мужчины составили 66 % (10 человек), средний возраст 68,1 ± 2,7 года, женщины - 33 % (5 человек), средний возраст - 72,8 ± 1,39 года. Вторая группа была представлена 22 пациентами с ме-ланомой кожи 2-й стадии с III и IV уровнем инвазии по Кларку без признаков метастазирования в регионарные лимфатические узлы (T3N0M0, T4N0M0). Мужчины составили 45 % (10 человек), средний возраст 57,8 ± 4,16 года, женщины -55 % (12 человек), средний возраст - 61,1 ± 3,42 года.
В диагностических целях до лечения биопта-ты нижней губы и образцы кожи из первичного очага поражения фиксировали в 10%-м растворе нейтрального формалина, обрабатывали по стандартной гистологической методике и заливали в парафин. Парафиновые срезы окрашивали гематоксилином и эозином и с использованием антител. Все этапы иммуногистохимической реакции (депарафинизация, демаскировка, инкубация с первичными антителами и т.д.) проводили в автоматическом режиме на аппарате BENCHMARK/XT (Ventana, США). Использовали моноклональные антитела к LYVE-1 (DCS ImmunoLine, Германия) и подопланин (Monosan, Нидерланды). Полученные препараты плоскоклеточного неороговевающего рака нижней губы и меланомы кожи изучали в световом микроскопе «Leica DM» (Германия), фотографировали с помощью компьютерной программы «Avigilon» (Канада). Микрофотографии морфометрировали с помощью компьютерной программы ImageJ (США). Оценивали объемную плотность LYVE-1-позитивных (LYVE-1+) и подопланин-пози-тивных (подопланин+) лимфатических сосудов и численную плотность LYVE-1+ клеток с использованием закрытой тестовой системы из 315 точек. Цифровые данные обрабатывали с использованием общепринятых методов статистики, вычисляя среднюю арифметическую величину (М), ошибку репрезентативности средней величины (m) и уровень значимости различий средних величин (р) на основании ¿-критерия Стъюдента для уровня достоверности 95 % (p < 0,05).
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
При анализе биопсийного материала из области красной каймы у пациентов с плоскоклеточным неороговевающим раком нижней губы выявляли различные зоны в зависимости от локализации - зону воспалительного инфильтрата и опухолевой трансформации, периферию опухолевого роста, пограничные области без опухолевого роста и воспалительной инфильтрации. ИГХ окрашивание биоптатов нижней губы из очага поражения с использованием антител к маркерам эндотелиоцитов лимфатических сосудов LYVE-1 и подопланин выявило различия в их экспрессии. Было обнаружено, что объемная плотность LYVE-1+ лимфатических сосудов, расположенных на границе с опухолевой трансформацией в области красной каймы губы, в 3 раза меньше, чем объемная плотность подопланин+ лимфатических сосудов той же локализации. В опухолевом узле практически не отмечали LYVE-1+ лимфатических сосудов, а по периферии опухолевого роста их объемная плотность была на 80 % больше, чем на границе с очагом поражения. Объемная плотность подопланин + лимфатических сосудов в опухолевом узле была более значительно выражена, чем LYVE-1+ лимфатических сосудов, но 2 раза меньше, чем объемная плотность подопланин+ лимфатических сосудов, расположенных по периферии опухолевого роста и в пограничной области без воспалительного инфильтрата и опухолевых клеток (рис. 1).
Vv 121086420
Пограничная область
Опухолевый узел
LYVE-1
Периферия опухолевого роста
Podoplanin
Рис. 1. Объемная плотность (Уу, %) ЬУУЕ-1 + и podoplanin+ лимфатических сосудов при плоскоклеточном неороговевающем раке нижней губы. Здесь и на рис. 2 * - отличие от величины соответствующего показателя ЬУУЕ-1+ сосудов статистически значимо при р < 0,05
Vv 876543210
~г
Погра- Опухо-
ничная левый
область узел
LYVE-1
Периферия опухолевого роста
Podoplanin
Рис.
2. Объемная плотность (Vv, %) LYVE-1+ и podoplanin+ лимфатических сосудов при
меланоме кожи
ИГХ окрашивание выявило, что при мелано-ме кожи величины объемной плотности LYVE-1+ и подопланин+ лимфатических сосудов были больше в участках, расположенных на периферии опухолевого роста. При этом в большем количестве, по сравнению LYVE-1+ сосудами, выявлялись подопланин+ лимфатические сосуды (рис. 2). И если величины объемной плотности внутриопухолевых LYVE-1+ и подопланин+ лимфатических сосудов достоверно не различались, то значения объемных плотностей, особенно подопланин + сосудов, значительно варьировали среди пациентов с меланомой кожи. LYVE-1+ лимфатические сосуды составляли от 1,7 до 5,4 %, а подопланин + лимфатические сосуды -от 4,3 до 11,4 % объема периферии опухолевого узла. Возможно, что отмеченные различия в развитии лимфатической сети у пациентов с мелано-мой кожи могут быть связаны с прогрессировани-ем заболевания.
При ИГХ окрашивании биоптатов нижней губы при плоскоклеточном неороговевающем раке губы и образцов с меланомой кожи с использованием антител к маркерам эндотелиоцитов лимфатических сосудов выявляли LYVE-1+ клетки, которые не были связаны с эндотелием сосудов, а располагались группами или поодиночке в близи просветов сосудов. При этом не наблюдали подопланин + клеток. В препаратах рака нижней губы LYVE-1+ клетки отмечали в соединительнотканных сосочках, расположенных в пограничных областях с очагом поражения, по периферии воспалительных инфильтратов и опухолевой трансформации. При этом численная плотность LYVE-1+ клеток, расположенных по периферии опухолевого роста, была в 2 раза больше, чем
Рис. 3. Иммуногистохимическое выявление LYVE-1+ клеток и сосудов и подопланин + лимфатических сосудов при плоскоклеточном неороговевающем раке нижней губы и меланоме кожи. а, б - LYVE-1 + клетки и сосуды при плоскоклеточном неороговевающем раке нижней губы; в, г - LYVE-1+ клетки и сосуды при меланоме кожи; д - подопланин + лимфатические сосуды при плоскоклеточном не-ороговевающем раке нижней губы; е - подопланин + лимфатические сосуды при меланоме кожи. в. 10 х 40
LYVE-1+ клеток, локализованных в пограничной области без опухолевого роста и воспалительной инфильтрации. В образцах с меланомой кожи LYVE-1+ клетки также отмечали по периферии опухолевого роста (рис. 3, а-г).
По мнению F. Schroedl и соавт. [16], LYVE-1+ клетки могут быть оценены как предшественники лимфангиогенеза. При ИГХ выявлении лимфатических сосудов в оболочках глаза было обнаружено большое число LYVE-1+ клеток. Фенотипи-рование данных клеток показало, что они имеют
костно-мозговое происхождение и окрашиваются на маркеры макрофагов. Авторы полагают, что популяции LYVE-1+ макрофагов являются гемопо-этическими предшественниками эндотелиоцитов лимфатических сосудов при их формировании de novo в условиях патологии [19]. Другими авторами было показано, что LYVE-1+ клетки представляют собой CD68+ макрофаги и могут быть вовлечены в метаболизм гиалуроновой кислоты и способствовать формированию временных лимфатических каналов при воспалительных процес-
сах [16]. При анализе структуры лимфатических сосудов, выявляемых с помощью окрашивания на подопланин, как при раке нижней губы, так и при меланоме кожи, было обнаружено, что геометрия лимфатических сосудов (размерности, очертания) была более сложной в зоне опухолевого роста и по его периферии по сравнению с сосудами, расположенными в пограничных областях очага поражения (см. рис. 3, д, е). Усложнение структурной организации лимфатической сети в очаге поражения было отмечено и другими авторами, исследовавшими сосудистую сеть слизистой оболочки полости рта при развитии карциномы и сделавшими заключение, что данный факт может иметь дополнительное прогностическое значение для выявления опухолевого роста [8].
Анализ количества и локализации 1^УЕ-1+ и подопланин+ лимфатических сосудов при плоскоклеточном неороговевающем раке нижней губы и меланоме кожи выявил, что при обоих типах опухолевого роста экспрессия молекулярного маркера эндотелия лимфатических сосудов LYVE-1 выражена в меньшей степени, чем подопланин. При этом для центральных участков опухолевого роста была характерна более низкая экспрессия обоих исследованных маркеров эндотелиоцитов лимфатических сосудов (см. рис. 1, 2). В обеих опухолях отмечено большее количество как 1^УЕ-1+, так и подопланин+ лимфатических сосудов, локализованных по периферии опухолевого роста (см. рис. 1, 2). Однако при раке нижней губы объемные плотности 1^УЕ-1+ и подопла-нин+ лимфатических сосудов, локализованных на границе с очагом поражения и по периферии опухолевого роста, достоверно не различались, что, по-видимому, связано с исходным достаточно значительным содержанием лимфатических сосудов в области красной каймы губы. В то же время при меланоме кожи объемные плотности 1^УЕ-1+ и подопланин+ лимфатических сосудов, локализованных по периферии опухолевого роста, были в 3 раза больше, чем сосудов пограничной с опухолевым узлом области (см. рис. 2). Данный факт может быть следствием новообразования лимфатических сосудов по периферии опухолевого роста при меланоме кожи.
Если в течение первого десятилетия после обнаружения молекулярных маркеров лимфатических сосудов шло накопление данных по локализации лимфатических сосудов при различных патологиях и их соотношением с процессами опухолевого роста, то в настоящее время установлено, что не при всех патологиях наблюдается экспрессия того или иного маркера эндотелия лимфатического сосуда. Причем некоторые маркеры выявляются не только в клетках эндотелия сосудов,
но и экспрессируются другими, не связанными со стенкой сосуда клетками [11]. Согласно современным представлениям, различия в экспрессии наиболее используемых молекулярных маркеров эндотелиоцитов лимфатических сосудов (1^У"УЕ-1, Ргох-1, подопланин) могут быть связаны с периодами развития организма, со структурой и функцией органа, условиями функционирования - в норме или при патологии. В частности, известно, что в течение эмбрионального развития первым маркером лимфатических сосудов является 1^УЕ-1 [12], впоследствии основным регулятором дифференцировки лимфатических эндотелиальных клеток становится Ргох-1 [6], затем они начинают экспрессировать подопланин, который играет существенную роль в развитии лимфатической системы [12, 14]. Накапливаются данные о том, что в условиях патологии (при воспалении, опухолевом росте) выявляются преимущественно подопланин+ лимфатические сосуды [7, 15].
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ИГХ окрашивание биологических образцов при плоскоклеточном неороговевающем раке нижней губы и меланоме кожи с использованием антител к маркерам эндотелиоцитов лимфатических сосудов 1^УЕ-1 и подопланин выявило сходства и различия в экспрессии данных маркеров. В обоих типах опухолей обнаружено большее содержание подопланин+, чем LYVE-1+ лимфатических сосудов. Более значительное, чем при раке нижней губы, преобладание подопланин + сосудов по периферии опухолевого роста по сравнению с пограничными к опухолевому узлу участками при меланоме кожи, вероятно, свидетельствует о новообразовании лимфатических сосудов в данном случае. Усложнение структурной организации подопланин+ лимфатических сосудов может иметь дополнительное прогностическое значение для выявления опухолевого роста. Отмеченные различия в развитии лимфатической сети среди пациентов с меланомой кожи могут быть связаны с прогрессированием заболевания, что требует дальнейших исследований.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Богданов А.Н., Игнатьев С.Б., Камило-ва Т.А. Прогностические маркеры диффузных В-крупноклеточных лимфом // Вопр. онкол. 2008. 54. (2). 133-141.
2. Коненков В.И., Бородин Ю.И., Бгатова Н.П. Молекулярные маркеры лимфатических и кровеносных сосудов при развитии опухоли и мишени
блокирования метастазов // Вопр. онкол. 2011. 57. (3). 295-301.
3. Никитина Р.Г., Мардынская В.П., Морозова Т.Г., Дрожжина В.В. Способ повышения эффективности лечения меланомы // Бюл. экспер. биол. мед. 2009. 148. (8). 209-212.
4. Петров С.В., Цыплаков Д.Э., Кулагин Р.Н. и др. Семнадцатилетний опыт повседневной молекулярной диагностики рака. Возможности и ограничения иммуногистохимического анализа в клинической онкологии // Бюл. СО РАМН. 2011. 31. (2). 75-80.
5. Федяев И.М., Байриков И.М., Белова Л.П., Шувалова Т.В. Злокачественные опухоли челюстно-лицевой области. М., 2000. 160 с.
6. Hong Y.K., Harvey N., Noh Y. HProx1 is a master control gene in the program specifying lymphatic endothelial cell fate // Dev. Dyn. 2002. 3. 351-357.
7. Keichel S., Barcena de Arellano M.-L., Reichelt U. et al. Lymphangiogenesis in deep infiltrating endometriosis // Hum. Reprod. 2011. 26. (10). 27132720.
8. Margaritescu C., Raica M., Pirici D. et al. Po-doplanin expression in tumor-free resection margins of oral squamous cell carcinomas: an immunohisto-chemical and fractal analysis study // Histol. Histopathol. 2010. 25. (6). 701-711.
9. Marocchio L.S., Lima J., Sperandio F.F. et al. Oral squamous cell carcinoma: an analysis of 1,564 cases showing advances in early detection // J. Oral Sci. 2010. 52. (2). 267-273.
10. Moretti A., Vitullo F., Augurio A. et al. Surgical management of lip cancer // Acta Otorhinolaryngol. Ital. 2011. 31. (1). 5-10.
11. Noda Y., Amano I., Hata M. et al. Immuno-histochemical examination on the distribution of cells expressed lymphatic endothelial marker podoplanin and LYVE-1 in the mouse tongue tissue // Acta Histochem. Cytochem. 2010. 43. (2). 61-68.
12. Oliver G. Lymphatic vasculature development // Nat. Rev. Immunol. 2004. 1. 35-45.
13. Renyi-Vamos F., Tovari J., Fillinger J. et al. Lymphangiogenesis correlates with lymph node metastasis, prognosis, and angiogenic phenotype in human non-small cell lung cancer // Clin. Cancer Res. 2005. 15. (20). 7344-7353.
14. Schacht V., Ramirez M.I., Hong Y.K. et al. T1alpha/podoplanin deficiency disrupts normal lymphatic vasculature formation and causes lymphedema // EMBO J. 2003. 14. 3546-3556.
15. Schoppmann S.F., Fenzl A., Nagy K. et al. VEGF-C expressing tumor-associated macrophages in lymph node positive breast cancer: impact on lymphangiogenesis and survival // Surgery. 2006. 6. 839846.
16. Schroedl F., Brehmer A., Neuhuber W.L. et al. The normal human choroid is endowed with a significant number of lymphatic vessel endothelial hyaluronate receptor 1 (LYVE-1)-positive macrophages // IOVS. 2008. 49. (12). 5222-5229.
17. Toll A., Gimeno-Beltran J., Ferrandiz-Pulido C. et al. D2-40 immunohistochemical overexpression in cutaneous squamous cell carcinomas: a marker of metastatic risk // J. Am. Acad. Dermatol. 2012. 67. (6). 1310-1318.
18. Van der Schaft D.W., Pauwels P., Hulsmans S. et al. Absence of lymphangiogenesis in ductal breast cancer at the primary tumor site // Cancer Lett. 2007. 254. (1). 128-136.
19. Xu H., Chen M, Reid D.M., Forrester J.V. LYVE-1-positive macrophages are present in normal murine eyes // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2007. 48. 2162-2171.
20. Zeng Y., Opeskin K., Goad J., Williams T.D. Tumor-induced activation of lymphatic endothelial cells via vascular endothelial growth factor receptor-2 is critical for prostate cancer lymphatic metastasis // Cancer Res. 2006. 66. (1). 9566-9575.
COMPARATIVE ANALYSIS OF EXPRESSION OF MOLECULAR MARKERS OF LYMPHATIC VESSELS LYVE-1 AND PODOPLANIN AT THE LOWER LIP CANCER AND SKIN MELANOMA
Natalya Petrovna BGATOVA1, Irina Sergeevna KULIKOVA1, Aleksey Igorevich LOMAKIN2, Nadezhda Borisovna ISAKOVA2, Viktor Borisovich PROKHOZHEV2, Igor Viktorovich KACHESOV2, Sergey Aleksandrovich FURSOV2, Yuri Ivanovich BORODIN1, Yuri Emmanuilovich NAROV3, Andrey Yuryevich LETYAGIN1, Vladimir Evgenyevich VOYTSITSKIY2, Vladimir Iosifovich KONENKOV1
1 Institute of Clinical and Experimental Lymphology of SB RAMS 630117, Novosibirsk, Timakov str., 2
2 Novosibirsk Regional Oncological Clinics 630108, Novosibirsk, Plakhotnyi str., 2
3 Novosibirsk State Medical University of Minzdrav of Russia 630091, Novosibirsk, Krasnyi av., 52
Immunohistochemical research of lymphatic vasculature of 2 type tumors differing in malignant growth aggression and metastatic potential - squamous cell carcinomas of lower lip and melanoma of skin has been carried out. The antibodies to markers of lymphatic vessels endotheliocytes LYVE and podoplanin were used. In both cases the bigger contents of podoplanin positive lymphatic vessels in comparison with LYVE-1+ vessels where revealed. The more considerable, than at the lower lip cancer, prevalence of expressing podoplanin vessels in the circumferential direction of tumor growth in comparison with boundary sites of tumor at melanoma of skin probably testifies to the lymphatic vessels new formation. Noted distinctions from lymphatic network development among patients with melanoma of skin can be connected with the disease progressing that demands further researches.
Key words: squamous cell carcinomas of lower lip, melanoma of skin, LYVE-1+ vessels, podoplanin+ vessels.
Bgatova N.P. - doctor of biological sciences, professor, head of the laboratory, e-mail: n_bgatova@ngs.ru
Kulikova I.S. - correspondence postgraduate student, e-mail kis1975@rambler.ru
Lomakin A.I. - correspondence postgraduate student, e-mail lomakin@rocketmail.com
Isakova N.B. - pathologist, e-mail nadin-isakova@mail.ru
Prokhozhev V.B. - pathologist
Kachesov I.V. - head ofpathoanatomical department, chiefpathologist
Fursov S.A. - doctor of medical sciences, professor of the chair of oncology, surgeon of the highest category, head of surgical department, e-mail fursov.serega2011@yandex.ru
Borodin Yu.I. - doctor of medical sciences, professor, academician of RAMS, e-mail lympha@soramn.ru Narov Yu.E. - doctor of medical sciences, professor, head of the chair for oncology Letyagin A.Yu. - doctor of medical sciences, professor, deputy director on scientific work, e-mail letyagin-andrey@yandex.ru
Voytsitskiy B.E. - doctor of medical sciences, professor of the chair of oncology, deputy chiefphysician on medical department, chief oncologist
Konenkov V.I. - doctor of medical sciences, professor, academician of RAMS, director, e-mail konenkov@soramn.ru
