CC BY
45
УДК 612.015.6.161.2:575.22]:616.1(476+476.6) ао1: 10.25298/2221-8785-2017-15-3-338-343
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ЧАСТОТ ГЕНОТИПОВ ГЕНА РЕЦЕПТОРА ВИТАМИНА D В БЕЛОРУССКОЙ ПОПУЛЯЦИИ И У ПАЦИЕНТОВ
С СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ГРОДНЕНСКОГО РЕГИОНА
1 Янковская Л. В. ([email protected]), 2Аксенова Е. А. ([email protected]), Снежицкий В. А. ([email protected]), 2Даниленко Н. Г. ([email protected]), Степуро Т. Л. ([email protected]) 1УО «Гродненский государственный медицинский университет», Гродно, Беларусь 2ГНУ «Институт генетики и цитологии НАН Беларуси», Минск, Беларусь
Цель исследования: провести сравнительный анализ частот генотипов по аллелям Bsml (В/Ь) (п'1544410) и Fokl (¥ф (п'2228570) гена VDR в белорусской популяции и у пациентов с ССЗ (артериальная гипертензия (АГ), ишемическая болезнь сердца (ИБС)) Гродненского региона.
Материал и методы. Обследованы 182 пациента с ССЗ. Определение Bsml и Fokl гена VDR проводили методом полимеразной цепной реакции. Для сравнения использованы результаты анализа генотипов 719 этнических белорусов, в том числе 89 белорусов региона Понеманье.
Результаты. Генотип ЬЬ и аллель Ь полиморфного локуса Bsml гена VDR чаще встречался (р<0,05) в группе ССЗ (41.2 и 63.2%, соответственно) и у жителей региона Понеманье (42.9 и 65.3%, соответственно), чем в общей популяции (31.4 и 56.7%, соответственно). Жители Гродненского региона с генотипом ЬЬ//гена VDR имеют повышенный риск развития ССЗ (ОШ=2,3 (95% ДИ 1,32; 3,93) и АГ (ОШ=2,92 (95% ДИ 1,55; 5,496), с генотипом ЬЬЕЕ гена VDR также имеют повышенный риск развития ССЗ (ОШ=1,74 (95% ДИ 1,06; 2,83) и ИБС (ОШ=2,14 (95% ДИ 1,14; 4,03).
Выводы. Установлены достоверные различия в распределении частот генотипов Bsml и Fokl гена VDR у пациентов с ССЗ Гродненского региона от общепопуляционных данных.
Ключевые слова: полиморфизм гена VDR, Bsml, Fokl, витамин D, артериальная гипертензия, ишемиче-ская болезнь сердца
Введение
Открытие рецептора витамина D (VDR) и его последующая идентификация практически во всех тканях организма человека дали новый виток научных исследований в протеомике, раскрывающих регуляторную роль кальцитриола (1,25(0Н)^3) в процессах клеточного роста и дифференцировки, ДНК-репарации, апоптоза, иммуномодулирования, ангиогенеза, инициирования системного воспаления посредством активирования более 200 генов в организме человека, а это до 5% от всего генома [1, 2, 3, 4]. VDR, подобно стероидным и другим гормональным рецепторам, является фактором транскрипции, с помощью которого 1,25(0Н)^3 регулирует широкий спектр генов, кодирующих как ката-болические, так и анаболические процессы в клетке [5]. При этом хорошо изученные эффекты витамина D на гомеостаз кальций-фосфорного обмена в свете последних исследований показали, что среди активируемых VDR генов только небольшая часть регулирует экспрессию белков, вовлеченных в гомеостаз кальция и фосфора. Нечастые патогенные мутации в гене VDR приводят к давно описанному рахиту II типа (1,25-дигидроксивитамин^-резистентный рахит). К настоящему времени известно более 500 однонуклеотидных замен в гене VDR, встречающихся в популяциях с большой частотой, т.е. относящихся к полиморфным вариантам генетического контекста [6]. Вместе с тем связь между различными патологическими состояниями человека: сердечно-сосудистыми заболеваниями (ССЗ), нейрокогнитивными, психическими
расстройствами, остеопорозом, сахарным диабетом, рядом форм рака и др., наиболее интенсивно исследуется с четырьмя однонуклеотидными заменами гена VDR: BsmI, FokI, TaqI, Ара1 [6].
Целью исследования было провести сравнительный анализ частот генотипов по аллелям BsmI (В/Ь) (ге1544410) и FokI (М) (ге2228570) гена VDR в белорусской популяции и у пациентов с ССЗ (артериальная гипертензия (АГ), ишемическая болезнь сердца (ИБС)) Гродненского региона.
Материал и методы
В исследование были включены 182 пациента с ССЗ в возрасте от 30 до 79 лет, из них 100 пациентов с АГ II степени в возрасте от 30 до 64 лет (26 мужчин, 74 женщины) и 82 пациента с ишемической болезнью сердца (ИБС), протекающей в сочетании с АГ II степени в возрасте от 35 до 79 лет (36 мужчин, 46 женщин).
На кафедру поликлинической терапии пациенты направлялись терапевтами и кардиологами городских поликлиник № 1-6 г. Гродно по мере обращаемости и при подписании информированного согласия при их соответствии критериям включения/исключения из исследования. Протокол исследования был одобрен комитетом по биомедицинской этике Гродненского государственного медицинского университета. Критерии включения в исследование: наличие эссенциальной АГ II степени [7], в том числе в сочетании с ИБС: стабильной стенокардией напряжения и/или постинфарктным кардиосклерозом. Критерии исключения из исследования: наличие заболеваний, приводящих к вторичной
АГ (эндокринных, почечных и т.д.), недостаточность кровообращения выше HI, нестабильная стенокардия, хроническая почечная недостаточность, сахарный диабет, прием глюкокорти-костероидов, саркоидоз, активная форма туберкулеза легких, онкопатология и другие тяжелые сопутствующие заболевания, способные оказывать влияние на исследуемые параметры.
Выделение ДНК из лейкоцитов цельной венозной крови осуществлялось набором реагентов «ДНК-ЭКСПРЕСС-КРОВЬ» («Литех», Россия) в соответствии с прилагаемой инструкцией.
Определение полиморфного варианта BsmI (B/b) (rs1544410) гена VDR проводили методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с элек-трофоретической детекцией результата с применением соответствующего набора реагентов производства «Литех» (Россия). Амплификацию исследуемого локуса ДНК проводили на термо-циклере Applied Biosystems 2720. Разделение продуктов амплификации осуществляли методом горизонтального электрофореза в 3% ага-розном геле, приготовленном на ТАЕ-буфере и окрашенном Zubr green. Визуализацию и регистрацию ПЦР продуктов осуществляли с помощью системы гель-документирования «Gel Doc XR+ Imaging System».
Существуют общепринятые обозначения аллелей и генотипов по изучаемым полиморфным локусам гена VDR согласно первой букве названия фермента с эндонуклеазной активностью (рестриктазой) по наличию или отсутствию сайта узнавания для этого фермента [8]. Наличие гуанина (G) в локусе rs1544410 обеспечивает узнавание последовательности ферментом BsmI - такой аллель обозначают строчной буквой 'b'. При аденине (A) - сайт узнавания для рестрикта-зы отсутствует, и аллель обозначают прописной буквой 'B'. Отсутствие сайта узнавания ферментом FokI в локусе rs2228570 свидетельствует о наличии тимина (Т) и, соответственно, аллель обозначают прописной буквой 'F', а в присутствии цитозина (С) фермент узнает последовательность, разрезает ее, и аллель обозначают строчной буквой 'f.
Выявление полиморфного варианта FokI (F/f) (rs2228570) гена VDR проводили методом анализа полиморфизма длин фрагментов, полученных в ходе рестрикции продукта ПЦР (ПЦР-ПДРФ). Для амплификации указанного фрагмента использовали набор реагентов для приготовления реакционной смеси, производства «Синтол» (Россия), и синтетические оли-гонуклеотиды, производства «Праймтех» (Беларусь): VDR-Fok-F 5'-AGCTGGCCCTGGCACT GACTCTGGCTCT-3' и VDR-Fok-R 5'-ATGGA AACACCTTGCTTCTTCTCCCTC-3'. Реакционную смесь готовили, исходя из расчета на одну пробу: 10 мкл 2,5х реакционной смеси, содержащей 2,5х ПЦР-буфер, (КС1, ТрисНС1 (pH=8,8), 6,25 мМ MgCl2), SynTaq ДНК-полимеразу, де-зоксинуклеозидтрифосфаты, глицерол, Tween 20, 1 мкл раствора MgCl2 (25 мМ), 1 мкл каждого праймера (10 мкМ), 5 мкл образца ДНК, 7 мкл деионизированной воды ПЦР-качества. Про-
цесс амплификации проводили на термоциклере Applied Biosystems 2720 по следующей программе: начальная денатурация - 95оС, 5 мин., далее 35 циклов, включающих 20 с денатурацией при 94оС, 40 - с отжига праймеров при 61оС, элонгация при 72оС, 30 с. Завершал процесс амплификации этап финальной элонгации (5 мин. при 72оС и охлаждение до 4оС). Процесс рестрикции полученных ампликонов проводили согласно инструкции набором реагентов производства «Jena Bioscience GmbH» (Германия). Разделение продуктов рестрикции осуществляли методом горизонтального электрофореза в 2% агарозном геле, приготовленном на ТАЕ-буфере и окрашенном Zubr green. Визуализацию и регистрацию полученного результата осуществляли с помощью системы гель-документирования «Gel Doc XR+ Imaging System».
Кроме того, в работе были использованы результаты анализа генотипов этнических белорусов, проживающих в шести этнографических регионах Беларуси, ДНК которых была собрана сотрудниками (Кушнеревич Е. И., Сивицкой Л. Н., Даниленко Н. Г. и Давыденко О. Г.) в 20042006 гг. лаборатории нехромосомной наследственности Института генетики и цитологии Национальной академии наук Беларуси (ИГЦ НАНБ). Генотипирование белорусов по полиморфным аллелям BsmI (B/b) (rs1544410) и FokI (F/f) (rs2228570) гена VDR проводили с помощь метода ПЦР-ПДРФ [9]. Электронная база данных лаборатории нехромосомной наследственности ИГЦ НАНБ для общей популяционной выборки этнических белорусов, не состоящих в родстве и проживающих в шести регионах страны, составила 719 чел., для выборки этнических белорусов западного региона Беларуси (Понема-нье) - 89 человек.
Статистическая обработка результатов осуществлялась с использованием программы «STATISTICA 10.0». Данные представлены в абсолютных числах и в виде %, сравнение которых проводилось Difference tests между двумя пропорциями. В каждой исследуемой группе проводили оценку соответствия распределения аллелей и генотипов равновесию Харди-Вай-нберга. Полученное при этом значение р>0,05 свидетельствовало о выполнении условий данного равновесия. Сравнение распределений эмпирических частот генотипов в популяциях фенотипически здоровых белорусов и в группах пациентов проводилась с использованием программы AB-Stat по методу Хи-квадрат. Для сравнения независимых групп по типу «случай-контроль» с количественной оценкой статистической значимости связи между фактором и исходом рассчитывалось отношение шансов (ОШ) с 95% доверительным интервалом (ДИ). Статистически значимыми считали различия при значениях p<0,05.
Результаты и обсуждение
Нами было проведено сравнение распределения частот генотипов по аллелям BsmI и FokI гена VDR между группами пациентов (вся груп-
па обследованных с ССЗ и выделенные группа АГ, группа ИБС) населения Гродненского региона и частотами генотипов в общей популяци-онной выборке этнических белорусов (719 чел.), проживающих в 6 регионах страны, и частотами генотипов в выборке этнических белорусов (89 чел.) западного региона Беларуси (Понёманье). Результаты анализа представлены в табл. 1 и 2.
Таблица 1. - Частоты генотипов и аллелей BsmI (В/Ь) (ге1544410), БоЫ (М) (ге2228570) гена VDR у пациентов с ССЗ и в популяции белорусов
Примечание: * — статистически значимые различия (р<0,05) со всей популяцией
Как видно из представленных в табл. 1 данных, как в общей популяции Беларуси, в популяции белорусов Понёманья, а также и среди пациентов с ССЗ наиболее часто встречался гетерозиготный генотип по обоим полиморфным локусам BsmI (В/Ь) и БоЫ (Б/Я) гена VDR. С наименьшей частотой (р<0,0001) как в группе пациентов с ССЗ, так и в популяции, в том числе популяции Запада, встречались генотипы ВВ и ЯЯ соответствующих полиморфных локусов гена VDR. Различия по частоте встречаемости между группой пациентов с ССЗ и общей популяцией установлены для генотипа ЬЬ и частоты аллелей ге1544410 локуса VDR (см. табл. 1). Так, гомозиготный генотип ЬЬ и аллель Ь гена VDR чаще встречался в группе ССЗ и в популяции Запада, чем в общей популяции Беларуси (р<0,05). В свою очередь аллель В полиморфного локуса BsmI гена VDR в группе ССЗ и в популяции Запада встречался реже, чем в общей популяции (р<0,05). Различий по частоте встречаемости других полиморфных генотипов и аллелей BsmI и БоЫ гена VDR между представленными группами не получено.
Как видно из представленных в табл. 2 данных, с наибольшей частотой как в общей популяции, так и среди пациентов с ССЗ, в том числе в группах АГ, ИБС, встречался гетерозиготный по обоим аллелям генотип ВЬБЯ, кроме популяции белорусов Понёманья, в котором самым частым (28,1%) был ЬЬБЯ генотип. С наименьшей частотой как в группах пациентов, так и в популяции, в том числе популяции Запада, встречался гомозиготный генотип ВВЯЯ, связанный, по данным ряда исследователей [6], с экспрессией менее активной формы VDR.
Таблица 2. - Частоты генотипов по аллелям BsmI (В/Ь) (ге1544410), БоЫ (Б/Я) (ге2228570) гена VDR у пациентов с ССЗ и в популяции белорусов
№ Генотип Частота (в %)
Группа с ССЗ Группа с АГ Группа с ИБС Популяция Запада (Понёманье) Всего в популяции Беларуси
1 bbFF 14,3 12,0 17,1*# 6,7 8,8
2 bbFf 14,8# 16,0# 13,4# 28,1 16,6
3 bbff 12,1* 15,0* 8,5 6,7 5,7
4 BbFF 14,3 13,0 15,9 7,9 15,4
5 BbFf 23,1 24,0 22,0 25,8 24,3
6 Bbff 6,6 5,0 8,5 12,4 11,5
7 BBFF 4,4 3,0 6,1 4,5 4,5
8 BBFf 8,2 10,0 6,1 5,6 10,1
9 BBff 2,2 2,0 2,4 2,3 3,1
Примечание: * — статистически значимые различия (р<0,05) при сравнении со всей популяцией, # — статистически значимые различия (р<0,05) при сравнении с популяцией Западного региона Беларуси (Понёманье)
Генотип ЬЬББ, связанный с экспрессией более активной формы VDR [6], чаще встречался у пациентов с ИБС - 17,1%, чем во всей популяции Беларуси - 8,8% (р=0,02), и чаще, чем в популяции Понеманья - 6,7% (р=0,04).
Наиболее часто встречающийся среди белорусов Западного региона генотип ЬЬБЯ - 28,1% - встречался реже у лиц с ССЗ - 14,8% (р=0,01) и у пациентов с АГ - 16,0% (р=0,047) и ИБС -13,4% (р=0,017).
Генотип ЬЬЯЯ гена VDR чаще встречался среди лиц с ССЗ - 12,1% (р=0,005) и у пациентов с АГ - 15,0% (р=0,001), чем во всей популяции белорусов - 5,7%.
В табл. 3 показаны значения Хи-квадрат, рассчитанные при сравнении эмпирических частот распределения обоих генотипов по аллелям BsmI (В/Ь) и БоЫ (Б/Я) гена VDR в группе всех пациентов с ССЗ, а также в группах АГ, ИБС с популяционными частотами белорусов. Статистической достоверности различий между группами пациентов и популяцией Западного региона (Понёманье) не установлено. Частоты генотипов пациентов с ИБС не отличались достоверно от частот в общей популяции Беларуси, тогда как для всей группы пациентов с ССЗ (Хи-квадрат=17,74), так и для пациентов с АГ в
Таблица 3. - Значение Хи-квадрат при сравнении частот генотипов по аллелям BsmI (В/Ь) (ге1544410) и БоИ (Б/Я) (ге2228570) гена VDR пациентов с ССЗ с популяционными частотам белорусов
Группа с АГ Группа с ИБС Группа с ССЗ Частота в популяции Запада (Понёманье)
Группа с ИБС 5,62
Группа с ССЗ 1,66 2,13
Частота в
популяции Запада 13,12 11,86 15,12
(Понёманье)
Всего в
популяции 16,74* 9,27 17,74* 11,54
Беларуси
Примечание: * — статистически значимые различия (р<0,05)
Полиморфный маркер гена VDR Группа с ССЗ Частота (в %)
Популяция Запада (Понёманье) Всего в популяции Беларуси
BsmI bb 41,2* 42,9* 31,4
Bb 44,0 44,9 50,7
BB 14,8 12,2 17,9
Аллель b 63,2* 65,3* 56,7
Аллель B 36,8* 34,7* 43,3
FokI FF 33,0 19,6 29,1
Ff 46,1 59,8 50,3
ff 20,9 20,7 20,6
Аллель F 56,0 49,5 54,2
Аллель f 44,0 50,5 45,8
частности (Хи-квадрат=16,74) показаны статистически значимые различия (р<0,05) по распределению частот генотипов от общепопуляцион-ных данных.
Учитывая установленные различия при сравнении частот генотипов между группами пациентов и популяционными частотами белорусов, нами была проведена оценка отношения шансов, которая показала, что лица с генотипом ЬЬ£Г гена VDR имеют в 2,3 раза выше риск развития ССЗ (ОШ=2,3 (95% ДИ 1,32; 3,93) и в 2,92 раза выше риск развития АГ (ОШ=2,92 (95% ДИ 1,55; 5,496), чем люди с другими генотипами в белорусской популяции. В свою очередь обладатели генотипа ЬЬББ гена VDR имеют в 1,7 раза выше риск развития ССЗ (ОШ=1,74 (95% ДИ 1,06; 2,83) и в 2,14 раза выше риск развития ИБС (ОШ=2,14 (95% ДИ 1,14; 4,03), чем носители других генотипов белорусской популяции. Кроме того, обладатели генотипа ЬЬББ гена VDR имеют в 2,85 раза выше риск развития ИБС, чем этнические белорусы Западного региона по сравнению с носителями других генотипов (ОШ=2,85 (95% ДИ 1,04; 7,81).
Исследования популяционных частот генотипов полиморфных вариантов гена VDR содействуют более корректной оценке их вклада в риск развития заболеваний в каждой конкретной стране или регионе. Частота встречаемости полиморфных аллелей BsmI, БоЫ, TaqI, Ара1 гена VDR в популяции Беларуси ранее была описана группой соавторов статьи [10]. Нами впервые проведено сопоставление частоты генотипов и аллелей по полиморфным вариантам BsmI и БоЫ гена VDR у пациентов с ССЗ Гродненского региона и популяционными частотами как в Беларуси в целом, так и в Западном регионе в частности. Ранее нами было указано, что ни в группе с АГ, ни в группе с ИБС генетическая структура групп не зависит от пола и не различается между мужчинами и женщинами по частоте встречаемости генотипов BsmI и Бок1 гена VDR [11]. В свете результатов, изложенных выше, хочется обратить внимание врачей первичного звена здравоохранения, наиболее активно работающих с пациентами по вопросам первичной профилактики ССЗ, что для персонифицированной оценки риска развития ССЗ, особенно АГ, ИБС, жителям Гродненского региона следует рекомендовать анализ ПЦР гена VDR по полиморфным вариантам BsmI и БоЫ, с учетом полученных нами данных, указывающих, что с генотипом ЬЬ£Г и ЬЬББ риск развития ССЗ повышен в 2-3 раза.
Полученные нами результаты согласуются с данными литературы, указывающими на ассоциацию риска развития ССЗ, а именно АГ, ИБС с полиморфизмом BsmI и/или БоЫ гена VDR [12,
Литература
1. Громова, О. А. Витамин Д - смена парадигмы / О.
А. Громова, И. Ю. Торшин. - Москва : Торус-пресс,
2015. - 463 с.
2. Значение витамина Б в патогенезе сердечно-сосуди-
13, 14, 15, 16]. Так, в крупном (п=1211) проспективном исследовании американских мужчин с длительностью наблюдения в среднем 15,3 года, риск АГ составил 1,25 (1,04-1,51) для генотипа BsmI ЬЬ по сравнению с генотипом ЬВ или ВВ гена VDR. Для VDR Бок1 генотипа ББ и Ff риск развития АГ составил 1,32 (1,03-1,70) по сравнению с генотипом [16]. Сравнение генотипов 200 здоровых лиц и 280 пациентов с АГ в Индии по полиморфизму Бок1 гена VDR также установило повышенный риск развития АГ при генотипе ББ и аллеле Б для лиц обоих полов, с отягощенной наследственностью и курением [15]. В испанском исследовании было показано, что BsmI полиморфизм гена VDR влияет на артериальное давление (АД) у здоровых мужчин, которые при ЬЬ генотипе имеют выше уровень систолического АД по сравнению с другими генотипами [12]. Результаты исследования корейских рабочих выявили противоположные данные, указывающие, что значения систолического и диастолического АД, распространенность АГ выше у лиц с генотипами ВВ и ВЬ по сравнению с генотипом ЬЬ [13]. У лиц моложе 65 лет (п=1946) с генотипом ВВ полиморфного локуса BsmI гена VDR имелся повышенный риск развития инфаркта миокарда (ОШ 1.38 (95% ДИ 1.071.79; р=0.016) [14]. Приведенные литературные данные указывают на очевидную роль генотипов BsmI и Бок1 гена VDR в развитии как АГ, так и ИБС, однако имеющиеся различия в полученных результатах в разных странах указывают на необходимость проведения собственных популяционных и региональных исследований.
Выводы
1. Генотип ЬЬ и аллель Ь полиморфного ло-куса BsmI гена VDR чаще встречался в группе с ССЗ и в популяции жителей западного региона Беларуси, чем в общей популяции.
2. Установлены достоверные различия в распределении частот генотипов BsmI и Бок1 гена VDR у пациентов с ССЗ, в том числе с АГ, Гродненского региона от общепопуляционных данных.
3. Жители Гродненского региона с генотипом ЬЬ£Г гена VDR имеют повышенный риск развития ССЗ (ОШ=2,3 (95% ДИ 1,32; 3,93) и АГ (ОШ=2,92 (95% ДИ 1,55; 5,496).
4. Жители Гродненского региона с генотипом ЬЬББ гена VDR также имеют повышенный риск развития ССЗ (ОШ=1,74 (95% ДИ 1,06; 2,83) и ИБС (ОШ=2,14 (95% ДИ 1,14; 4,03). Кроме того, обладатели генотипа ЬЬББ имеют выше риск развития ИБС, чем этнические белорусы Западного региона (ОШ=2,85 (95% ДИ 1,04; 7,81) по сравнению с носителями других генотипов.
стых заболеваний / В. В. Поворознюк [и др.] // Журнал Гродненского государственного медицинского университета. - 2015. - № 2 (50). - С. 6-14.
3. Holick, M. F. The vitamin D deficiency pandemic and consequences for nonskeletal health: mechanisms of
action / M. F. Holick // Molecular Aspects of Medicine. -2008. - Vol. 29 (6). - P. 361-368.
4. Norman, A. W. Vitamin D Receptor: New Assignments for an Already Busy Receptor / A. W. Norman // Endocrinology. - 2006. - Vol. 147 (12). - P. 5542-5548.
- doi: 10.1016/j.mam.2008.08.008.
5. Pike, J. W. Regulation of gene expression by 1,25-dihydroxyvitamin D3 in bone cells: exploiting new approaches and defining new mechanisms / J. W. Pike, S. M. Lee, M. B. Meyer // BoneKEy Reports. - 2014. - Vol. 3. - Art. nr. 482. - doi: 10.1038/bonekey.2013.216.
6. Genetics and biology of vitamin D receptor polymorphisms / A. G. Uitterlinden [et al.] // Gene. - 2004. - Vol. 338 (2).
- P. 143-156.
7. ESH/ESC Guidelines for the management of arterial hypertension / G. Mancia [et al.] // Journal of Hypertension.
- 2013. - Vol. 31 (7). - P. 1281-1357. - doi: 10.1097/01. hjh.0000431740.32696.cc.
8. Vitamin D receptor gene Fokl but not TaqI, Apal, BsmI polymorphism is associated with Hashimoto's thyroiditis: a meta-analysis / X. Wang [et al.] // Scientific Reports. -2017. - Vol. 7. - Art. nr. 41540. - doi: 10.1038/srep41540.
9. Association between vitamin D receptor gene haplotypes and chronic periodontitis among Japanese men / M. Naito [et al.] // International Journal of Medical Sciences. -2007. - Vol. 4 (4). - P. 216-222. - doi:10.7150/ijms.4.216.
10. Особенности распределения частот полиморфных аллелей гена рецептора витамина D в популяциях этнических белорусов / Е. А. Аксенова [и др.] // Молекулярная и прикладная генетика : сб. науч. тр. / Государственное научное учреждение "Институт генетики и цитологии НАН Беларуси" ; ред. А. В. Кильчевский [и др.]. - Минск : Институт генетики и цитологии НАН Беларуси, 2016. - Т. 21. - C. 71-80.
11. Influence of the vitamin D receptor gene polymorphisms and 25-hydroxyvitamin D on blood pressure in apparently healthy subjects / S. Muray [et al.] // Journal of Hypertension. - 2003. - Vol. 21 (11). - P. 2069-2075. -doi: 10.1097/01.hjh.0000098139.70956.21.
12. Associations of blood pressure and hypertension with lead dose measures and polymorphisms in the receptor S-aminolevulinic acid dehydratase genes / B. K. Lee [et al.] // Environmental Health Perspectives. -2001. - Vol. 109 (4). - P. 383-389. - doi: 10.1097/01. hjh.0000098139.70956.21.
13. Additive effects of the chemokine receptor 2, vitamin D receptor, interleukin-6 polymorphismsand cardiovascular risk factors on the prevalence of myocardial infarction in patients below 65 years / J. R. Ortlepp [et al.] // International Journal of Cardiology. - 2005 - Vol. 105 (1). - P. 90-95. - doi: 10.1016/j.ijcard.2005.03.004.
14. Risk conferred by FokI polymorphism of vitamin D receptor gene for essential hypertension / N. Swapna [et al.] // Indian Journal of Human Genetics. - 2011. - Vol. 17 (3). - P. 201-206. - doi: 10.4103/0971-6866.92104.
15. A prospective study of plasma vitamin D metabolites, vitamin D receptor gene polymorphisms, and risk of hypertension in men / L. Wang [et al.] // European Journal of Nutrition. - 2013. - Vol. 52 (7). - P. 1771-1779. - doi: 10.1007/s00394-012-0480-8.
References
1. Gromova OA, Torshin IJu. Vitamin D - smena paradigmy [Vitamin D - paradigm change]. Moskva: Torus-press; 2015. 463 p. (Russian).
2. Povoroznyuk VV, Snezhitskiy VA, Yankouskaya
LV, Maylyan EA, Reznichenko NA, Maylyan DE. Extraskeletal effects of vitamin D: role in the pathogenesis of cardiovascular diseases. Journal of the Grodno State Medical University. 2015;2(50):6-14. (Russian).
3. Holick MF. The vitamin D deficiency pandemic and consequences for nonskeletal health: mechanisms of action. Molecular Aspects of Medicine. 2008;29:361-368.
4. Norman AW. Vitamin D Receptor: New Assignments for an Already Busy Receptor. Endocrinology. 2006;147(12):5542-5548.
5. Pike JW, Lee SM, Meyer MB. Regulation of gene expression by 1,25-dihydroxyvitamin D3 in bone cells: exploiting new approaches and defining new mechanisms. BoneKEy Reports. 2014;3:Art No 482. doi:10.1038/ bonekey.2013.216.
6. Uitterlinden AG, Fang Y, Van Meurs JB, Pols HA, Van Leeuwen JP. Genetics and biology of vitamin D receptor polymorphisms. Gene. 2004;338:143-156.
7. Mancia G, Fagard R, Narkiewicz K, Redón J, Zanchetti A, Böhm M, Christiaens T, Cifkova R, De Backer G, Dominiczak A, Galderisi M, Grobbee DE, Jaarsma T, Kirchhof P, Kjeldsen SE, Laurent S, Manolis AJ, Nilsson PM, Ruilope LM, Schmieder RE, Sirnes PA, Sleight P, Viigimaa M, Waeber B, Zannad F. ESH/ESC Guidelines for the management of arterial hypertension. Journal of Hypertension. 2013;31(7):12810-1357. doi: 10.1097/01. hjh.0000431740.32696.cc.
8. Wang X, Cheng W, Ma Y, Zhua J. Vitamin D receptor gene FokI but not TaqI, Apal, BsmI polymorphism is associated with Hashimoto's thyroiditis: a meta-analysis. Scientific Reports. 2017;7:Art No 41540. doi:10.1038/ srep41540.
9. Naito M, Miyaki K, Naito T, Zhang L, Hoshi K, Hara A, Masaki K, Tohyama S, Muramatsu M, Hamajima N, Nakayam T. Association between vitamin D receptor gene haplotypes and chronic periodontitis among Japanese men. International Journal of Medical Sciences. 2007;4(4):216-222. doi: 10.7150/ijms.4.216.
10. Aksenova EA, Silvanovich AP, Mihajlovskaja AV, Danilenko NG. Osobennosti raspredelenija chastot polimorfnyh allelej gena receptora vitamina D v populjacijah jetnicheskih belorusov [Peculiarities of VDR gene polymorphic allele frequencies in populations ofnative belarusians]. In: Kilchevskij AV, editor. Molekuljarnaja i prikladnaja genetika [Molecular and Applied Genetics] : sbornik nauchnyh trudov. Minsk: Institute of Genetics and Cytology of the National Academy of Sciences of Belarus; 2016;21:71-80. (Russian).
11. Muray S, Parisi E, Cardús A, Craver L, Fernández E. Influence of the vitamin D receptor gene polymorphisms and 25-hydroxyvitamin D on blood pressure in apparently healthy subjects. Journal of Hypertension. 2003;21(11):2069-2075. doi: 10.1097/01. hjh.0000098139.70956.21.
12. Lee BK, Lee GS, Stewart WF, Ahn KD, Simon D, Kelsey KT, Todd AC, Schwartz BS. Associations of blood pressure and hypertension with lead dose measures and polymorphisms in the receptor S-aminolevulinic acid dehydratase genes. Environmental Health Perspectives. 2001;109(4):383-389. doi: 10.1097/01. hjh.0000098139.70956.21.
13. Ortlepp JR, Krantz C, Kimmel M, von Korff A, Vesper K, Schmitz F, Mevissen V, Janssens U, Franke A, Hanrath P, Zerres K, Hoffmann R. Additive effects of the chemokine receptor 2, vitamin D receptor, interleukin-6 polymorphismsand cardiovascular risk factors on
the prevalence of myocardial infarction in patients below 65 years. International Journal of Cardiology. 2005;105(1):90-95. doi: 10.1016/j.ijcard.2005.03.004.
14. Swapna N, Vamsi UM, Usha G, Padma T. Risk conferred by Fokl polymorphism of vitamin D receptor gene for essential hypertension. Indian Journal of Human Genetics.
2011;17(3):201-206. doi: 10.4103/0971-6866.92104. 15. Wang L, Ma J, Manson JE, Buring JE, Gaziano JM, Sesso HD. A prospective study of plasma vitamin D metabolites, vitamin D receptor gene polymorphisms, and risk of hypertension in men. European Journal of Nutrition. 2013;52(7):1771-1779. doi: 10.1007/s00394-012-0480-8.
COMPARATIVE ANALYSIS OF VITAMIN D RECEPTOR GENOTYPE FREQUENCIES IN BELARUSIAN POPULATION AND IN PATIENTS WITH CARDIOVASCULAR
DISEASES OF GRODNO REGION
1 Yankouskaya L. V., 2Аksyonova E. A,1 Snezhitskiy V. A., 2 Danilenko N. G, Stepuro T. L.
1 Educational Institution "Grodno State Medical University, Grodno, Belarus 2 State Scientific Institution "Institute of Genetics and Cytology of NAS of Belarus"
The aim of the study was to perform a comparative analysis of the frequencies of genotypes by BsmI (B / b) (rs1544410) and Fokl (F/f) (rs2228570) alleles of the VDR gene in Belarusian population and in patients with CVD (arterial hypertension (AH), ischemic heart disease (1HD)) of Grodno region.
Material and methods. 182 patients with CVD were examined. BsmI and Fokl of the VDR gene were determined by polymerase chain reaction. For comparison, the results of the genotypes analysis of 719 ethnic Belarusians, including 89 Belarusians of Ponemanje region, were used.
Results. Genotype bb and allele b of polymorphic BsmI locus of the VDR gene were more frequent (p<0.05) in the group with CVD (41.2% and 63.2%, respectively) and in citizens of Ponemanje region (42.9% and 65.3%, respectively) than in general population (31.4 %o and 56.7%, respectively). Patients from Grodno region with genotype bbff of the VDR gene have an increased risk of developing CVD (OR = 2.3 (95% CI 1.32, 3.93) and AH (OR = 2.92 (95% CI 1.55, 5.496), patients with genotype bbFF also have an increased risk of developing CVD (OR = 1.74 (95% CI 1.06, 2.83) and CHD (OR = 2.14 (95% CI 1.14, 4.03).
Conclusions: Significant differences in frequency distribution of genotypes BsmI and FokI of the VDR gene in patients with CVD of Grodno region compared to general population data were established.
Keywords: polymorphism of VDR gene, BsmI, FokI, vitamin D, arterial hypertension, ischemic heart disease
Поступила: 21.06.2017 Отрецензирована: 26.06.2017
