CC BY
171
СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КАЧЕСТВА ЭКСТРАКЦИОННЫХ И НЕЭКСТРАКЦИОННЫХ
ФИТОПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ ЖИРНЫХ РАСТИТЕЛЬНЫХ
МАСЕЛ
Т.А. Лобаева \ H.H. Глущенко2, O.A. Богословская2, И.П. Ольховская 3
1Кафедра биохимии, медицинский факультет, РУДН, ул. Миклухо-Маклая, д. 8, 117198, Москва, Россия
Кафедра фармацевтической и токсикологической химии, медицинский факультет, РУДН, ул. Миклухо-Маклая, 8, 117198, Москва, Россия
Институт энергетических проблем химической физики РАН, Ленинский просп., д. 38, корп. 2, 119334, Москва, Россия
Согласно современным представлениям, показатели качества жирных растительных масел и препаратов на их основе включают значения кислотного числа, перекисного числа, йодного числа и индекса окисленности.
Нами показано, что значение кислотного числа фитопрепаратов, полученных методом экстракции растительным маслом, выше этого показателя препаратов, полученных холодным отжимом. Значение йодного числа пищевого растительного масла-экстрагента и экстракционных фитопрепаратов выше этого значения у препаратов, полученных холодным прессованием. Перекисное число экстракционных и неэкстракционных препаратов находится в пределах одного порядка и не превышает значение 1,2x10'2 ммоль/г. Индекс окисленности, согласно современной нормативной документации, рассчитывают разными методами: по поглощению фитопрепарата, растворенного в органическом растворителе (гексан) при X =232 нм к концентрации препарата, выраженной в %; либо по отношению значения абсорбции раствора фитопрепарата в органическом растворителе при X =232 нм к значению абсорбции при X =206-210 нм (поглощение -С-С-связей образца); либо по отношению значений абсорбции раствора фитопрепарата при X =232 к абсорбции при X =270нм. Проведение сравнительного анализа по расчету индекса окисленности показало, что Е , см и индекс окисленности, рассчитанный как отношение Агзг/ А2ю, дают полное представление о содержании первичных продуктов окисления липидов фитопрепаратов на основе жирных растительных масел.
ВВЕДЕНИЕ
Несомненная роль антиоксидантов (АО) в протекании процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в организме, возможность коррекции интенсивности свободнорадикального окисления липидов при развитии заболеваний различной этиологии являются предпосылками для поиска и создания новых лекарственных композиций и источников АО, в особенности, природного происхождения как потенциально безопасных средств. В этом отношении масляные экстракты различных растений, жирные масла, полученные отжимом семян, пищевые растительные масла (РМ) и биологически активные добавки к пище (БАД) являются наиболее перспективными источниками АО, сбалансированными по концентрации и действующей доле отдельных АО, как правило, обеспечивающих синергизм действия или поддерживающих АО в восстановленной форме. В настоящее время для лечения ран, ожогов, заболеваний кожи различной
этиологии используют фитопрепараты, содержащие комплекс биологически активных веществ из различных видов растительного сырья: «Облепиховое масло», «Масло шиповника», «Аромелин», композиции жирорастворимых витаминов, например, А и Е [1, 2, 6-8]. В комплексной терапии доброкачественных и злокачественных новообразований также используют различные жирные РМ и фитопрепараты на их основе. Так, например, для лечения аденомы простаты используют фитопрепарат «Тык-веол», снижающий процессы воспаления и нормализующий функцию предстательной железы, что обеспечивает премедикацию для хирургического вмешательства [9]. Полифитовое масло «Кызыл-май» применяют при лучевой терапии рака желудочно-кишечного тракта, гинекологических заболеваниях и т.д. [12].
По способу получения выделяют два типа фитопрепаратов на основе жирных РМ: полученные холодным прессованием семян (например, «Ты-квеол», «Льняное масло») и экстракционные, полученные, при экстрагировании РМ растительного сырья (например, «Кызыл-май», «Аромелин», «Облепиховое масло»).
При использовании тех или иных фитопрепаратов, довольно близких по составу природных АО, ненасыщенных и насыщенных жирных кислот (ЖК), триглицеридов и др. выясняется, что они по-разному воздействуют на течение различных заболеваний, стадии одного процесса, причем, как правило, эффективность действия связана с дозой используемого масляного препарата, схемой лечения и качеством препарата.
Широкое распространение фитопрепаратов на основе жирных РМ в терапии различных заболеваний, с одной стороны, специфичность состава и свойств фитопрепаратов на основе жирных РМ к гидролизу и окислению, с другой стороны, создает необходимость строгой регламентации и оценки показателей их качества, установления сроков и условий хранения фитопрепаратов. Согласно современным представлениям, показатели качества жирных РМ и препаратов на их основе включают значения йодного числа (ЙЧ), кислотного числа (КЧ), перекисного числа (ПЧ) и индекса окисленности (ИО), которые отражают степень ненасыщенности ЖК, степень гидролиза триглицеридов и состояние окисленности ЖК.
В связи с этим, мы провели сравнительный анализ показателей качества экстракционных и неэкстракционных фитопрепаратов, применяемых в клинике («Кызыл-май», «Тыквеол», «Облепиховое масло»), и новых, находящихся на этапе формирования нормативной документации (НД) («Томатное масло», «Тыквенное масло»).
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Материал и методы исследования. В наших исследованиях были использованы фитопрепараты и БАД на основе жирных РМ: масляные экстракты (МЭ) из лекарственных и пищевых растений - МЭ томата, условно названный «Томатное масло» («ТтМ»), МЭ тыквы, условно названный «Тыквенное масло» («ТкМ»), полифитовое масло «Кызыл-май» («КМ»),
«Облепиховое масло» («ОМ»); жирное масло «Тыквеол» («Тл») полученное методом холодного прессования семян.
Определение кислотного числа (КЧ) проводили методом, принятым для контроля качества жирных и эфирных масел. Определение йодного числа (ЙЧ) фитопрепаратов проводили по методике [5].
Для определения количества пероксидов использовали метод, предложенный Велером и модифицированный И.В. Березиным [14].
Определение индекса окисленности (ИО) фитопрепаратов определяли по методикам, принятым для фитопрепаратов, содержащих жирные РМ [4,
9].
Полученные результаты обрабатывали статистически по методам вариационной статистики [5].
Результаты и обсуждение. Результаты исследования качества фитопрепаратов на основе жирных РМ приведены в табл. 1.
Таблица 1
Показатели качества фитопрепаратов на основе жирных растительных масел
Образец п = 5 Кислотное число (мг КОН/ г в-ва) КЧ Йодное число (г йода / 100 г в-ва) ЙЧ Перекисное число *10-2 ммоль/г ПЧ Удельный показатель поглощения первичных продуктов окисления по методике [9] Е\'’<СтПри232ш1 - А-‘-С%«1 Индекс окисленности по методике [4] ио = Ап2 ^210
МЭ «Тыквенное масло» 2,7±0,05 126,0±1,65 1,20±0,84 7,00 ± 0,02 0,67± 0,04
МЭ «Томатное масло» 2,10±0,15 137,3+2,15 0,82±0,12 3,10 + 0,01 0,29±0,02
Жирное масло «Тыквеол» 2,02±0,07 80,90±0,78 0,88±0,02 3,50 ± 0,05 0,32±0,02
МЭ «Кызыл-май» 3,31+0,60 128,9±] ,05 1,11 ±0,05 6,20 ± 0,07 0,60±0,01
МЭ «Облепиховое масло из плодов и листьев» 3,08±0,06 115,9± 1,12 1,03±0,01 5,45 ±0,01 0,55±0,03
Подсолнечное раф. дезодор. масло «Олейна» 0,13+0,02 125,011,42 0,63±0,05 6,46±0,02 0,32±0,05
Кислотное число как показатель процесса гидролиза липидов не всегда отражен в НД на липидсодержащие фитопрепараты и БАД [1-4, 9-12]. Известно, что фармакопейные статьи (ФС), описывающие требования к фитопрепаратам на основе жирных РМ, наиболее жёсткие требования к ка-
честву предъявляют к жирным РМ, чем к МЭ, что связано с особенностью технологии их получения.
Как видно из табл. 1, наибольшее КЧ характерно для полифитового масла «Кызыл-май», меньше - «Облепихового масла из плодов и листьев», «Тыквенного масла», «Томатного масла». Наименьшее КЧ имеет препарат «Тыквеол». Установленные нами значения КЧ удовлетворяют требованиям НД для фитопрепаратов на основе жирных РМ [9-12]. Следовательно, по мере уменьшения значения показателя КЧ можно составить следующий ряд:
«КМ» > «ОМ» из плодов и листьев > «ТкМ» > «ТтМ (МЭ) > «Тл» > РМ «Олейна».
Анализ полученных данных свидетельствует о том, что значения КЧ для фитопрепаратов на порядок выше этого показателя растительного пищевого масла-экстрагента, причём наибольшее КЧ свойственно препарату «Кызыл-май». Такое увеличение кислотного числа для экстракционных фитопрепаратов связано с особенностями технологии их получения, которая предусматривает нагревание масла-экстрагента до 60-70 °С. По сравнению с МЭ «Кызыл-май» жирное масло «Тыквеол», полученное методом холодного прессования имеет КЧ на 60% ниже.
Изучение показателя йодного числа масляных препаратов показывают,
V-/ _ VV
что наименьшее ИЧ наблюдается у препарата «Тыквеол». Значение ЙЧ выше у «Тыквенного масла», «Облепихового масла» из плодов и листьев и препарата «Кызыл-май». Наибольшее значение ЙЧ - у «Томатного масла». Следовательно, по мере уменьшения значения показателя ЙЧ можно составить следующий ряд:
ТтМ (МЭ) > «КМ» > «ТкМ» > РМ «Олейна» > «ОМ» из плодов и листьев > «Тл»
Представленный ряд фактически демонстрирует изменение количества ненасыщенных соединений в фитопрепаратах на основе жирных РМ. Таким образом, можно предположить, что в процессе экстракции лекарственного растительного сырья (плодов, травы) используемое РМ-экстрагент (в данном случае - рафинированное дезодорированнное масло «Олейна») обогащается жирными ненасыщенными кислотами, содержащимися в самом сырье.
Исследования концентрации пероксидов липидов в изученных образцах показали, что наименьшее их количество содержится в «Томатном масле» и «Тыквеоле». Наибольшее содержание перекисей отмечается в фитопрепарате «Тыквенное масло». Однако установленные нами значения ПЧ удовлетворяют требованиям НД для жирных РМ и фитопрепаратов на основе жирных растительных масел [9 - 12]. По мере уменьшения показателя ПЧ в масляных экстрактах можно составить следующий ряд:
«ТкМ» > «КМ» х<ОМ» из плодов и листьев > «Тл» > «ТтМ»(МЭ)
В настоящее время в НД предлагается рассчитывать индекс окислен-ности (ИО) разными методами [4, 9]. В одном случае, данный показатель рассматривают как отношение абсорбции раствора фитопрепарата в орга-
ническом растворителе (гексане) при X = 232 нм к концентрации ЛС, выраженной в % по массе [ФС «Тыквеол», 1998]. В другом случае, расчёт ведут как отношение абсорбции раствора фитопрепарата в органическом растворителе (гексане) при X = 232 нм (поглощение коньюгатов гидроперекисей) к абсорбции при X = 206-210 нм (поглощение -С-С- связей образца) [ВФС «Масло «Фитоким», 1995]. В действительности, первый метод отражает показатель удельного поглощения веществ при X - 232 нм и обозначает Е 1% 1СМ. ИО, рассчитанный по второй методике, показывает соотношение содержания первичных продуктов окисления - конъюгированных гидроперекисей в образце. Необходимо подчеркнуть, что в длинноволновой области УФ при X = 270-280 нм поглощают продукты более глубокого окисления липидов - кетодиены. Поэтому обычно для характеристики степени окисленности липидов рассчитывают оба соотношения: А232/А210 и А274/А210. Кроме того, по максимуму поглощения при X = 232 можно рассчитать концентрацию конъюгатов гидроперекисей, учитывая молярный коэффициент экстинции, равный 2,1-2,3 * 105 М'1 * см-1 . Согласно Британской Фармакопее (ВР), для оценки показателя качества медицинских РМ проводят определение Е 1% 1СМ при X = 270 нм и рассчитывают соотношение А232/А270 , т.е. отношение абсорбции первичных и вторичных продуктов окисления.
19/
Полученные нами результаты Е 0 1СМ и ИО согласуются с данными, представленными в литературе и НТД [1-4, 9-12]. Показано, что значения ИО изучаемых фитопрепаратов укладываются в принятые нормы, за исключением препарата «КМ» и «ТкМ», ИО которых немного превышает установленный уровень для липофильных фитопрепаратов [4,9].
Оценивая значение ИО, рассчитанного двумя методами (табл. 1), мы видим, что наибольшее значение индекса окисленности отмечается у «Тыквенного масла», меньше - у препарата «Кызыл-май», ещё меньший индекс окисленности отмечается у «Облепихового масла» из плодов и листьев и «Томатного масла», наименьший индекс - у «Тыквеола». По мере уменьшения значения ИО можно составить следующий ряд:
«ТкМ» > «КМ» > «ОМ» из плодов и листьев > «Тл» > «ТтМ»(МЭ)
Нами показано, что Е 1% 1 см и ИО отражают содержание первичных продуктов окисления липидов в масляных препаратах (совпадение рядов ПЧ и ИО).
Следовательно, сравнительное изучение показателей качества фитопрепаратов на основе жирных РМ независимо от способа их получения показывает, что все изученные масляные экстракты, в том числе, новые препараты, которые находятся на стадии оформления документации, по показателям качества удовлетворяют требованиям, предъявляемым к препаратам данного ряда.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Значения КЧ для экстракционных фитопрепаратов на порядок выше этого показателя для растительных пищевых масел, используемых в качестве экстрагентов. Показатель ЙЧ свидетельствует об обогащении масла-экстрагента в процессе экстракции лекарственного растительного сырья жирными ненасыщенными кислотами. Установлено, что наибольшее количество пероксидных соединений свойственно новому экстракционному препарату «Тыквенное масло». О содержании первичных продуктов окисления липидов фитопрепаратов на основе жирных растительных масел свидетельствуют показатели Е 1% | см и ИО.
ЛИТЕРАТУРА
1. Временная фармакопейная статья (ВФС) 42-1698-87 Масло из плодов и листьев облепихи.
2. ВФС 42-2015-97 Суппозитории с маслом облепиховым 0,5 г.
3. ВФС 42-2616-95 Масло «Фитоким».
4. ВФС 42-2926-97 Масло «Витон».
5. Государственная Фармакопея СССР. Выпуски 1,2. Репринтное изд. М., 1998.
6. Дранин Л.И., Козлов Н.Г. II Фармация. 1986. № 5. С.76-77.
7. Лечамо В., Лобачёва И.И. II Химия растительного сырья. 2001. № 3,
8. Привалова Э.Г., Никитюк В. Г. II Провизор. 2000. № 11. С 194-196.
9. Фармакопейная статья (ФС) 42- 3651 -98 Тыквеол (масло семян тыквы).
10. ФС 42-2666-99 Натурсил (масло расторопши).
11. ФС 42-7300 - 86 Масло облепиховое.
12. ФС Республики Казахстан 42-212 - 98 Масло полифитовое «Кызыл-май».
13. Шведова А.А., Полянский Н.Б. II Исследование синтетических и природных антиоксидантов in vitro и in vivo. М.: Наука, 1992. С. 74 - 76.
14. Шишкина Л. Н. II Исследование синтетических и природных антиоксидантов in vitro и in vivo. М.: Наука, 1992. С. 26 - 30.
STUDY OF THE CHARACTERISTICS OF DIFFERENT OILY PHYTOPREPARATIONS OBTAINED BY EXTRACTION AND COLD-
PRESSING METHODS
T.A. Lobaeva N.N. Glushchenko2, O.A. Bogoslovskaya 2,1.P.
Olkhovskaya3
1 Department of biological chemistry, medical faculty, RPFU, Miklukho-Maklaya st., 8 117198, Moscow,Russia department ofpharmaceutical and toxicology chemistry, medical faculty, RPFU, Miklukho-Maklaya St., 8 117198, Moscow,Russia 3 Institute for Energy Problems of Chemical Physics RAS Leninskii prospect, 38, Bid. 2, 117334,Moscow, Russia
We present the results of the study of qualitative characteristics (acid number, iodine number, peroxide number, oxidation index) of different oily phytopreparations. We report the acid number of extraction phytopreparations to be higher than the acid number of cold-pressed ones. The iodine number of the oil used as an extraction agent and the one of the extraction phytopreparations is higher than the iodine number of the cold-pressed phytopreparations. The peroxide numbers of both types of phytopreparations don't exceed 1,2*10-2 mmol/g. The oxida-
tion index (01), according to temporary standards, is counted by different methods: (1) the absorption of specimen dissolved in organic solvent (hexane) at 232 nm divided by the concentration of the specimen in %, (2) the absorption of specimen dissolved in organic solvent at 232 nm divided by the absorption of the same solution at 206-210 nm or (3) the ratio of the absorptions at 232 nm and 270 nm. Our analysis of the oxidation index calculated using different methods showed that E1%1 cm and OI calculated as ratio A232/A210 reflect the level of primary oxidation products of oily phytoprepations lipids.
