Сравнительное изучение антиоксидантной активности экстрактов мыльнянки лекарственной, полученных разными способами Текст научной статьи по специальности «Промышленные биотехнологии»

doi: 10.4236/ aim.2013.35057

19. Ottoni C.A., Cuervo-Fernandez R., Piccoli R.M., Moreira R., Guilarte-Maresma B., Sabino da Silva E., Rodrigues M.F. A, Maiorano A.E. Media optimization for ß-fructofuranosidase production by Aspergillus oryzae. ¡Brazilian Journal of Chemical Engineering, 2012, no. 29 (1), pp. 49-59. doi.org/10.1590 /S0104-66322012000100006

20. Romero-Gómez S. J., Augur C., Viniegra-González G. Invertase production by Aspergillus niger in submerged and solidstate fermentation. Biotechnology Letters, 2000, no. 22, pp. 1255-1258.

21. Rubio M.C., Navarro A.R. Regulation of invertase synthesis in Aspergillus niger. Enzyme and

Microbial Technology, 2006, no. 39 (4), pp. 601-606.

22. Solange I. Mussatto, Cristobal N. Aguilar, Ligia R. Rodrigues, Jose A. Teixeira. Fructooligosac-charides and ß-fructofuranosidase production by Aspergillus japonicus immobilized on lignocellulosic materials. Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic, 2009, no. 59, pp. 76-81. Cited 89 times. doi:10.1016/ j.molcatb.2009.01.005

23. Veana F., Aguilar C.N., Rodriguez Herrera R. Kinetic studies of invertase production by xero-philic Aspergillus and Penicillium strains under submerged culture. Micologia Aplicada International., 2011, no. 23 (2), pp. 37-45.

Статья поступила в редакцию 24.12.2015 г.

УДК 615.3:663.1:577

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ ЭКСТРАКТОВ МЫЛЬНЯНКИ ЛЕКАРСТВЕННОЙ, ПОЛУЧЕННЫХ РАЗНЫМИ СПОСОБАМИ

© С.Д. Жамсаранова, Д.В. Лыгденов, Г.Б. Ендонова, Т.П. Анцупова

Восточно-Сибирский государственный университет технологий и управления,

670013, Республика Бурятия, г. Улан-Удэ, ул. Ключевская, д. 40B, стр. 1, [email protected]

В данной работе приведены результаты оценки антиоксидантной активности (АОА) водно-спиртовых и водных экстрактов разных органов мыльнянки лекарственной (Saponaria officinalis). Установлено, что наибольшее содержание антиоксидантов характерно для экстрактов из листьев данного растения. В результате работы выявлено, что АОА зависит от места произрастания исследуемого объекта. Получена липосомальная форма водно-спиртового растительного экстракта листьев. Показано, что суммарное содержание водорастворимых антиоксидантов возрастает с увеличением концентрации экстрагируемых соединений, а жирорастворимых - при разведении экстракта 1: 9. Антиоксидантная активность водно-спиртового растительного экстракта листьев в униламеллярной форме была выше, чем в мультиламеллярной. Полученные униламеллярные липо-сомы имели средний размер, равный 258,39 нм.

Ключевые слова: антиоксидант; антиоксидантная активность; мыльнянка лекарственная; суммарное содержание антиоксидантов; униламеллярный.

COMPARATIVE STUDY OF THE ANTIOXIDANT ACTIVITY OF EXTRACTS OF SAPONARIA OFFICINALIS OBTAINED BY DIFFERENT METHODS

S.D. Zhamsaranova, D.V. Lygdenov, G.B. Endonova, T.P. Antsupova

East-Siberia University of Technology and Management, 40V, Klyuchevskaya ul., Ulan-Ude, Russia, 670013

This paper evaluates the antioxidant activity (AOA) of aqueous-alcoholic and aqueous extracts of different Saponaria officinalis organs. The extracts from the leaves of this plant were found to have the highest content of antioxidants. As a result, the work revealed that AOA depends on the locus of object under study. We have obtained a liposomal form of aqueous-alcoholic extract of plant leaves. It is shown that the total content of water-soluble antioxidants increases when the concentration of extractable compounds rises. The content of fat-soluble compounds rises at an extract dilution of 1: 9. The antioxidant activity of hydro-alcoholic leaf extract in unilamellar form was higher than in multilamellar form. The resulting unilamellar liposomes had an average size of 258.39 nm.

Keywords: antioxidant; antioxidant activity; Saponaria officinalis; the total content of antioxidants; uni lamellar.

ВВЕДЕНИЕ

Продолжительность жизни и состояние здоровья населения зависит от многих факторов, но определяющим является качество питания. В условиях возрастающей тенденции роста алиментарно-зависимых заболеваний увеличивается значимость функционального питания. Подготовлена и нормативно-правовая база, поддерживающая разработку и реализацию обогащенных продуктов питания. В технологии продуктов функционального питания предпочтение отдается использованию натурального растительного и животного сырья в качестве источника функционального пищевого ингредиента (Изм. № 1 от 10.09.2010 № 239 - ст. к ГОСТ Р 52349-2005).

В основе многих алиментарно-зависимых заболеваний лежат процессы, объединенные понятием «оксидативный стресс». Соотношение показателей, характеризующих оксидативный стресс и антиоксидантную систему, является одним из регуляторных факторов, определяющих состояние гомеостаза и возможности адаптации организма к изменяющимся условиям среды.

В последнее время возрос интерес к природным антиоксидантам и их применению в пищевой промышленности и медицине. Большое внимание уделяется компонентам фенольной природы, которые являются составной частью многих растений.

В растительных экстрактах содержится спектр флавоноидных соединений, обладающих антиоксидантным эффектом. Важным является оптимальное сочетание водорастворимых и жирорастворимых антиоксидантов, которые могут проявлять свою эффективность, как в мембранах, так и в цитозоле клетки.

Соединения фенольной природы применяются в качестве антиоксидантов как соединения, способные эффективно взаимодействовать со свободными радикалами, инициирующими окисление липидов биологических мембран, а пере-кисное окисление липидов (ПОЛ) приводит к развитию различных патологий в организме человека. Образование свободных радикалов -неизбежный постоянно протекающий в организме процесс, физиологически сбалансированный за счет активности антиоксидантной системы. При недостаточности одного или нескольких звеньев

антиоксидантной системы ткани утрачивают защиту от действия свободных радикалов, что приводит к повреждению тканей и органов и развитию патологических процессов [1].

Эффективность антиоксидантов зависит от дозы препарата нелинейно. В больших концентрациях антиоксиданты начинают действовать в обратном направлении и не тормозят, а, напротив, ускоряют свободнорадикальные реакции. Дело в том, что часть из них, взаимодействуя со свободными радикалами, превращается в радикалы, но только менее активные. Пока таких радикалов мало, они не опасны для организма. Но если их накапливается слишком много, вклад в окисление становится весомым.

Перспективность растительных объектов, как источников антиоксидантов, заключается в том, что это возобновляемое сырье, которое может быть использовано для постоянного получения биологически активных веществ. В связи с этим представляет интерес изучение и сравнение антиоксидантных свойств экстрактов разных растений [6].

Известно, что при заболеваниях поражается не весь организм, а отдельные органы и ткани. Особенно это важно в тех случаях, когда приходится иметь дело с весьма токсичными препаратами, которые хорошо лечат саму болезнь, но при этом плохо влияют на другие системы организма. Часто это заставляет отказываться от использования подобных веществ и применять менее эффективные.

Однако создать нужную концентрацию лекарственных веществ в пораженных болезнью местах, не затрагивая остальные, - задача непростая. А чтобы они попали в нужные места, необходим носитель, который бы мог их туда доставить. За последние несколько лет было предпринято много попыток для решения этой проблемы, перепробовано множество соединений, и как оказалось лучшими носителями лекарств являются липосомы [9].

Липосомы, наносомы в настоящее время рассматриваются как одни из перспективных лекарственных форм для доставки биологически активных веществ к клеткам и тканям, что доказано многими исследованиями [2].

Цель нашего исследования - оценка анти-

оксидантной активности разных форм фитоэкс-тракта мыльнянки лекарственной.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Объектом исследования явились водно-спиртовый и водный экстракты, а также липосо-мальная форма водно-спиртового экстракта мыльнянки лекарственной [3].

Оценку антиоксидантной активности растительных экстрактов проводили амперометриче-ским методом на приборе «Цвет ЯУЗА 01 -АА» [10]. Яичные фосфолипиды получали методом Фолча [12].

Липосомы получали в соответствии с методиками, описанными в [4]. Ранее полученные яичные фосфолипиды массой 0,1 г растворяли в 2 мл хлороформа, затем полученную суспензию переливали в круглодонную колбу и выпаривали хлороформ в течение 10 мин при температуре 50 оС на роторном испарителе до образования фосфолипидной пленки. Затем готовили четыре варианта пробы растительного экстракта с различной степенью разведения (0:1 - на 0 мл растительного экстракта приходилось 20 мл буферного раствора, рН = 7,4 (сахароза + трис + ЭДТА), 0,01 М 1:9 - на 2 мл растительного экстракта использовалось 18 мл буферного раствора и т.д.). Затем смешивали приготовленные растворы, содержащие растительный экстракт, с липосомальной пленкой и перемешивали интенсивно в течение 20 мин.

Униламеллярные липосомы получали методом экструзии в соответствии с методическими указаниями через поликарбонатную мембрану с диаметром пор 200 нм на мини-экструдере Liposomal Fast-Basic [14]. Размеры униламеллярных липосом определяли методом турбидиметрии [8]. Статистическая обработка результатов рассчитана в MS Office Excel.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Мыльнянка лекарственная (Saponaria officinalis) - представитель семейства гвоздичные (Caryophyllaceae) является адвентивным видом на территории Республики Бурятия.

Saponaria officinalis наделена весьма ценными целебными свойствами, при этом с лечебной целью рекомендуется использовать корневища с корнями. Это растение наделено весьма эффективным мочегонным, ранозаживляющим, выраженным отхаркивающим, желчегонным, антимикробным, потогонным, антивирусным и противоревматическим действием. Следует отметить, что мыльнянка лекарственная в виде настоя проявляет поверхностно-активное воздействие по отношению, как к грамотрицательным, так и к грамположительным микробам [5].

В научной медицине препараты на основе

этого растения используются в связи с его способностью как разжижать мокроту, так и усиливать ее отхаркивание. Чаще всего мыльнянка лекарственная используется в качестве отхаркивающего средства при заболеваниях дыхательных путей и легких, а иногда применяется в качестве мочегонного и слабительного средства.

В народной медицине настой, приготовленный на основе корней и листьев этого растения, используется при воспалении легких, упорном кашле, ангине, бронхитах, коклюше, ларингитах, насморке, холециститах, водянке, подагре, запоре, ревматизме и различных желудочно-кишечных заболеваниях [11].

Корни мыльнянки лекарственной содержат углеводы, тритерпеновые гликозиды (2,5-20%): сапонарозид, сапонарозиды A, D, сапорубин и др. В листьях найдены алкалоиды, аскорбиновая кислота, флавоноиды: витексин, сапонарин, са-понаретин [5, 11, 13].

Исследования антиоксидантной и антирадикальной активности экстрактов из корней различного срока вегетации Saponaria officinalis проводили E.H. Цыбулько и др. [14] на образцах, заготовленных в Приморском крае. Авторами было установлено наличие выраженной антиок-сидантной активности в этилацетатных экстрактах корней многолетних растений. Полученные данные по ингибированию реакции термического окисления линетола при введении в инкубационную среду водного экстракта мыльнянки лекарственной свидетельствовали о перспективности исследований водных и водно-спиртовых экстрактов.

Нами проведена оценка антиоксидантной активности водных и водно-спиртовых экстрактов разных органов растения. В экспериментах использовалась мыльнянка лекарственная, произрастающая на территории Республики Бурятия. Результаты анализа водно-спиртовых экстрактов органов растения представлены в табл. 1. Как выяснилось, наибольшее суммарное содержание антиоксидантов было обнаружено в листьях мыльнянки лекарственной, которые были собраны на территории п.г.т. Селенгинск в 2014 г.

В сравнительном аспекте исследовались водные и водно-спиртовые экстракты листьев мыльнянки лекарственной, результаты представлены в табл. 2. Водный растительный экстракт обладал большей антиоксидантной активностью, чем водно-спиртовой. Суммарное содержание антиоксидантов в водном экстракте было выше на 17,8%, чем в водно-спиртовом.

Целью дальнейших исследований явилось изучение зависимости антиоксидантной активности водных экстрактов листьев мыльнянки лекарственной от места произрастания собранного растения. Из полученных результатов следует,

что антиоксидантная активность образцов экстрактов листьев мыльнянки зависит от места сбора (табл. 3). Наибольшее содержание анти-оксидантов обнаружено в листьях растений, собранных в п.г.т. Селенгинск.

Учитывая, что суммарное содержание анти-оксидантов в водно-спиртовом растворе достаточно велико, мы исследовали его на наличие водо- и жирорастворимых антиоксидантов.

На следующем этапе в полученных водно-спиртовых экстрактах измеряли антиоксидант-ную активность жирорастворимых и водорастворимых соединений экстрактов при различном разведении, результаты представлены на рис. 1. С увеличением концентрации соединений в водорастворимом растительном экстракте суммарное содержание антиоксидантов увеличивалось, а суммарное содержание жирорастворимых антиоксидантов было выше при малых концентрациях. При разведении 1:3 и выше суммарное содержание водорастворимых и жирорастворимых антиоксидантов оставалось примерно одинаковым, а максимальная активность жирорастворимых антиоксидантов отмечалась при разведении 1 : 9.

Липосомальные технологии нашли широкое применение в медицине, фармацевтической и

пищевой промышленности. Липосомы способны включать большое количество водной среды. Помимо гидрофильных ингредиентов, растворенных в воде, в липосомы можно включать и липофильные вещества, которые распределяются в фосфолипидном бислое. Таким образом, липосомы являются оптимальным носителем биологически активных веществ при конструировании систем, включающих гидрофильные и гидрофобные соединения. Далее нами была разработана липосомальная форма экстракта мыльнянки лекарственной, технологическая схема представлена на рис. 2.

Были получены мультиламеллярные липо-сомы на основе природных фосфолипидов. Мультиламеллярные липосомы - липосомы, у которых стенка состоит из десятков или сотен -мембранных слоёв. Многослойные липосомы легко образуются при встряхивании водной дисперсии набухшего липида. При этом получается взвесь липосом с широким распределением частиц по размерам. Суммарное содержание ан-тиоксидантов в водном экстракте липосомаль-ной формы менялось незначительно от разведения экстракта. Суммарное содержание жирорастворимых антиоксидантов в экстрактах было выше, чем водорастворимых. В разведении 1 : 9

Таблица 1

Антиоксидантная активность водно-спиртовых экстрактов органов мыльнянки лекарственной, произрастающей на территории Республики Бурятия

Растение Место сбора Органы растения Суммарное содержание антиоксидантов, мг/г

Стебли 13,66 ± 1,1

Стеклозавод, Соцветие 9,0376 ± 0,9

г. Улан-Удэ Корни 5,0368 ± 0,3

Мыльнянка Листья 13,9576 ± 1,1

лекарственная п.г.т. Селенгинск Стебли Соцветие с семенами Листья Корни 10,2584 ± 1,0 28,128 ± 1,7 53,388 ± 2,3 9,132 ± 0,9

Таблица 2

Определение суммарного содержания антиоксидантов в водном и водно-спиртовом экстрактах листьев мыльнянки лекарственной

Тип растительного экстракта Суммарное содержание антиоксидантов, мг/г

Водный Водно-спиртовой (70%) 61,564 ± 1,9 52,245 ± 1,3

Место сбора листьев растения Суммарное содержание антиоксидантов, мг/г

Селенгинское ЦКК, п.г.т. Селенгинск 61,564 ± 1,9

Селенгинская школа, п.г.т. Селенгинск 58,356 ± 1,6

Стеклозавод, г. Улан-Удэ 30,456 ± 1,1

Таблица 3

Определение суммарного содержания антиоксидантов в водных экстрактах листьев мыльнянки лекарственной, собранной в разных местах

Разведение растительного экстракта

* Суммарное содержание водорастворимых антиоксидантов, мг/г

■ —Суммарное содержание жирорастворимых антиоксидантов, мг/г

Рис. 1. Зависимость суммарного содержания антиоксидантов от разбавления водно-спиртовых растительных экстрактов

Экстрагирование фосфолипидов из яичного желтка (хлороформ : этиловый спирт, в соотношении 1 : 1)

I

Растворение липидной пленки Растворение фосфолипидов в органическом растворителе (хлороформ : этанол, в соотношении 1 : 1), t = 20 ± 2 оС

I

Высушивание липидной смеси на роторном испарителе до образования тонкой пленки С = 30 ± 3 оС)

Получение экстракта из листьев мыльнянки лекарственной (70% этиловый спирт), С = 100 ± 5 оС, t = 60 мин)

I

Растворение экстракта мыльнянки лекарственной в буферном растворе (в соотношении 1 : 9)

Смешивание липидной пленки и экстракта мыльнянки лекарственной

i

Встряхивание на м еханической качалке (t = 20 ± 2 оС, т = 30 ± 1 мин, 150-160 встряхиваний в минуту)

Рис. 2. Технологическая схема получения липосомальной формы фитоэкстракта

мыльнянки лекарственной

антиоксиданетная активность липосомальной формы была наибольшей, однако ниже, чем в водно-спиртовом растворе. Результаты представлены на рис. 3. По-видимому, капсулирова-ние снижало антиоксидантную активность соединений экстракта, однако это не является

окончательным показателем активности средства in vivo. Биодоступность и эффективность липосомальных форм, возможно, могут быть и выше водно-спиртового раствора, все же это требует дополнительных экспериментов по созданию комплексных антиоксидантных средств

с высокой проницаемостью через биологические мембраны.

Затем были получены униламеллярные липосомы. Униламеллярные липосомы - липосомы, у которых стенка состоит из одного бислоя. Малые униламеллярные липосомы получают из многослойных при обработке их продавлива-нием под большим давлением воднолипидных дисперсий через небольшое отверстие. Липид-ную эмульсию 19 раз экструдировали через поликарбонатную мембрану с диаметром пор 200 нм на мини-экструдере Liposomal Fast-Basic.

На следующем этапе наших исследований были определены размеры полученных липо-сом. Для этого был использован метод турбиди-метрии. Принцип метода основан на измерении интенсивности света определённой длины волны, прошедшего через кювету, содержащую коллоидный раствор, образованный частицами определяемого вещества. Показатель преломления нанолипосом при различных длинах волн представлена в таблице при разбавлениях 1:4,

1:6, 1:8 (табл. 4). При использовании мембран с порами размером 200 нм были получены частицы со средним размером 258,39 нм.

На рис. 4 представлены результаты по оценке суммарной антиоксидантной активности униламеллярных липосомальных форм фито-экстракта. Изменения произошли только в суммарном содержании антиоксидантов, а общая картина не изменилась, т.е. суммарное содержание антиоксидантов липосомальной формы экстракта увеличилось по сравнению с мульти-ламеллярной формой липосом.

Растительные извлечения широко применяются в фармакологии и нутрициологии в качестве естественных источников антиоксидантов. Скрининг растений на оценку содержания фито-компонентов с доказанными антиоксидантными свойствами является чрезвычайно важным. Вид извлечения, форма введения позволит выявить наиболее эффективные.

Микрокапсуляция позволяет осуществлять контролируемое высвобождение биологически

70

g 6°

та Ч s о

m О

50

SE 4° та

s

та 30 S о. ф

g 20 о

V

о

о. 10 та 5 5

¿? 0

— —Суммарное содержание жирорастворимых антиоксидантов в липосомальной форме, мг/г

0:1 1:9 1:4 1:3 1:2 1:0 Разведение растительного экстракта

Рис. 3. Зависимость суммарного содержания жирорастворимых антиоксидантов от разбавления мультилалмеллярных липосомальных форм растительных экстрактов

Результаты расчетов турбидиметрического метода

Таблица 4

Липосомальный Показатель Среднее

раствор : водный преломления Параметр z значение Радиус частиц Диаметр частиц

раствор полимера параметра z

Разбавление 1 : 4 1,46 11,46

Разбавление 1 : 6 1,56 11,06 11,71 129,19 258,39

Разбавление 1 : 8 1,17 68,5

m о

та Ч s о

m О

та

Ф

90 80 70 60 50

40

та 5 S S о.

V

5 30

о

ф

0

1

.

та S

S >

о

20

10

-Суммарное содержание жирорастворимых антиоксидантов в униламмелярной форме, мг/г

0:1 1:9 1:4 1:3 1:2 1:0 Разведение растительного экстракта

Рис. 4. Зависимость суммарного содержания антиоксидантов от разбавления униламеллярных форм растительных экстрактов

активных веществ, повышая эффективность и расширяя спектр применения. Особо эффективно микрокапсулирование в случае нестабильных или легколетучих добавок. Липосомы обладают способностью легко проникать через липидные мембраны и способствуют проникновению гидрофильных веществ в клетки. В связи с этим эффектом необходимы дополнительные эксперименты по оценке эффективности липосо-мальных форм антиоксидантов in vivo.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Наибольшее содержание антиоксидантов обнаружено в экстрактах из листьев мыльнянки лекарственной, выявлена зависимость активности от места сбора сырья.

Суммарное содержание водорастворимых

антиоксидантов возрастало с увеличением концентрации извлекаемых соединений, а наибольшая активность жирорастворимых антиоксидан-тов отмечалась при разведении экстракта 1 : 9.

Антиоксидантная активность жирорастворимых антиоксидантов липосомальной формы водно-спиртового экстракта листьев мыльнянки лекарственной была выше таковой водорастворимых.

Суммарное содержание антиоксидантов липосомальной формы водно-спиртового растительного экстракта в униламеллярной форме была выше, чем в мультиламеллярной. По-видимому, это связано с увеличением суммарной поверхности липосом в связи с уменьшением их размеров.

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИИ СПИСОК

1. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах // Соросовский общеобразовательный журнал. 2000. Т. 6, № 12. С. 13-19.

2. Водовозова Е. Л., Кузнецова Н. Р., Кадыков В. А., Хуцян С. С., Гаенко Г. П., Молотковский Ю.Г. Липосомы как нано-носители липидных конъюгатов противоопухолевых агентов мелфа-лана и метотрексата // Российские нанотехноло-гии. 2008. Т.3, № 3-4. С. 162-172.

3. Ендонова Г.Б., Анцупова Т.П. Методика

количественного определения суммарного содержания флавоноидов в надземной части гвоздики разноцветной (dianthus versicolor fisch.) //

Вестник Восточно-Сибирского государственного университета технологии и управления, 2014.

№ 1. С. 89-92.

4. Ламажапова Г.П., Жамсаранова С.Д. Способ получения липосомального средства, обладающего ранозаживляющим действием. Патент РФ на изобретение № 2417075, опубл. 27.04.2011. Бюл. № 12

5. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование семейства Caprifoliaceae-Plantaginaceae. Москва. Наука, 1990. С. 328.

6. Рябинина Е.И., Зотова Е.Е., Ветрова Е.Н., Пономарева Н.И., Илюшина Т.Н. Новый подход в оценке антиоксидантной активности растительного сырья при исследовании процесса автоокисления адреналина // Химия рас-

0

тительного сырья. 2011. № 3. С. 117-121.

7. Цыбулько Е.И., Ершова Т.А., Мищенко Н.П. Об антирадикальной активности Saponaria officinalis L. флоры Приморского края // Хранение и переработка сельхозсырья. 2004. № 2. С. 32-34.

8. Фролов Ю.Г. Лабораторные работы и задачи по коллоидной химии. М., 1986. С. 215.

9. Швец В.И., Краснопольский Ю.М. Липо-сомы в фармации. Продукты нанобиотехнологии // Провизор. 2008. № 3. С. 16-19.

10. Яшин Ю.И., Рыжнев В.Ю., Яшин А.Я., Черноусова Н.И. и др. Природные антиокси-данты. Содержание в пищевых продуктах и влияние их на здоровье и старение человека. / Я.И.

Яшин [и др.] М.: Изд-во «ТрансЛит», 2009. С. 212.

11. Andrzejewska E. Methoda oznaczania saponin w niektorych srodkach spozywczych // Rocz Panstw Zakl Hig 1975. Vol. 26, № 1. P. 87-92.

12. Folch J., Lees M., Sloane Stanley G. A simple method for the isolation and purification of total lipides from animal tissues // J Biol. Chem. 1957. Vol. 226, № 5. P. 497-509.

13. Pasich B. Triterpenoid compounds in plant materials // Diss. Pharm. PAN. 1961. Vol. 13, № 1. P. 1-10.

14. Zuidam N.J, Nedovic V.A. Encapsulation Technologies for Active Food Ingredients and Food Processing // Springer Science. 2010. P. 247.

REFERENCES

1. Vladimirov Yu.A. Svobodnye radikaly v bio-logicheskikh sistemakh [Free Radicals in Biological Systems]. Sorosovskii obshcheobrazovatel'nyi zhur-nal [Soros general educational Journal], 2000. T 6. № 12. S. 13-19.

2. Vodovozova E.L., Kuznetsova N.R., Kadi-kov V.A. Liposomy kak nano-nositeli lipidnyh konju-gatov protivoopuholevyh agentov melfalana i meto-treksata [Liposomes nanocarriers as the peptide conjugates of anticancer agents melphalan and methotrexate] // Ros. nanotekhnologii [Rus. nano-technology]. 2008. № 3. S. 162.

3. Endonova G.V., Antsupova T.P. Metodika kolichestvennogo opredelenija summarnogo soder-zhanija flavonoidov v nadzemnoj chasti gvozdiki raznocvetnoj (dianthus versicolor fisch.) [Methods of quantitative determination of total flavonoid content in the aboveground part of a multi-colored pinks (dianthus versicolor fisch.)] // Vestnik Vostochno-Sibirskogo gosudarstvennogo universiteta tekh-nologii i upravleniya [Journal of East Siberia State University of Technology and Management]. 2014. № 1. S. 89-92.

4. Lamazhapova G.P., Zhamsaranova S.D. Sposob polucheniya liposomal'nogo sredstva, obladayushchego ranozazhivlyayushchim deistviem [A process for preparing liposomal agent has wound-healing effect]. Patent of Russia no. 2417075 C1,2011.

5. Rastitel'nye resursy SSSR: Tsvetkovye ras-teniya, ikh khimicheskii sostav, ispol'zovanie se-meistva Caprifoliaceae-Plantaginaceae [Plant resources of the USSR: Flowering plants, their chemical composition, the use of family Caprifoliaceae-Plantaginaceae]. Moscow. Nauka [Sceince]. 1990. S. 328.

6. Ryabinina E.I. Zotova E.E. Vetrova E.N., Ponomareva N.I., Ilyushina T.N. Novyi podkhod v otsenke antioksidantnoi aktivnosti rastitel'nogo syr'ya pri issledovanii protsessa avtookisleniya adrenalina

[A new approach in the evaluation of the antioxidant activity of vegetable raw materials in the study of auto-oxidation of adrenaline]. Khimiya rastitel'nogo syr'ya [Chemistry of plant raw materials]. 2011. № 3. S. 117-121.

7. Tsybul'ko E.I., Ershova T.A., Mishchenko N.P. Ob antiradikal'noi aktivnosti Saponaria offici-nalis L. flory Primorskogo kraya [About antioxidant and anti-radical activity Saponaria officinalis L. flora of Primorsky Krai]. Khranenie i pererabotka Sel'khozsyr'ya [Storage and processing of agricultural products]. 2004. № 2. S. 32-34.

8. Frolov Yu.G. Laboratornye raboty i zadachi po kolloidnoi khimii [Laboratory works and tasks of colloid chemistry]. Moskva [Moscow]. 1986. S. 215.

9. Shvets V.I., Krasnopol'skii Yu.M. Liposomy v farmatsii. produkty nanobiotekhnologii [Liposomes in pharmacy. Nanotechnology products]. Provizo [Pharmacist]. 2008. № 3. S. 16-19.

10. Yashin Yu. I. i dr. Prirodnye antioksidanty. Soderzhanie v pishchevykh produktakh i vliyanie ikh na zdorVe i straenie cheloveka [Natural antioxidants. The content in foods and their effect on human health and aging]. «TransLit» Publ., Moskva [Moscow]. 2009. S. 212.

11. Andrzejewska E. Methoda oznaczania saponin w niektorych srodkach spozywczych [Method for the determination of saponins in certain foodstuffs]. - Rocz. Panst. Zakt. Hig. 1975. Vol. 26. No. 1. P. 87-92.

12. Folch J., Lees M., Sloane Stanley G. A simple method for the isolation and purification of total lipides from animal tissues // J Biol Chem, 1957. Vol.226. No.5. P. 497—509.

13. Pasich B. Triterpenoid compounds in plant materials // Diss. Pharm. PAN. 1961. Vol. 13. No 1. P. 1-10.

14. Zuidam N. J, Nedovic V. A. Encapsulation Technologies for Active Food Ingredients and Food Processing. Springer Science. 2010. P. 247.

Статья поступила в редакцию 25.12.2015 г.