СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ БАКТЕРИОТРОПНОГО ДЕЙСТВИЯ МЕТАБИОТИКОВ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

doi: 10.21518/2079-701X-2019-21-154-158 Оригинальная статья / Original article

Сравнительное исследование бактериотропного действия метабиотиков

В.А. Несчисляев, ORCID: 0000-0002-8163-0674, e-mail: neschislayew@qmail.com Т.В.Фёдорова, ORCID: 0000-0002-8760-2201, tv.krylova83@gmail.com Ю.В. Сорокина®, ORCID: 0000-0001-9114-7208, e-mail: sorokinayulia@yandex.ru Е.И. Молохова, ORCID: 0000-0003-0334-8590, e-mail: profmol17@gmail.com А.С. Савина, ORCID: 0000-0002-5917-8431, e-mail: alinasav1994@mail.ru Пермская государственная фармацевтическая академия; 614990, Россия, Пермь, ул. Полевая, д. 2

Резюме

Цель работы: сравнительная оценка бактериотропной активности метабиотика Актофлор-С и экзометаболитного комплекса бифидобактерий.

Материалы и методы: в работе использовали БАД Актофлор-С, раствор для приема внутрь в тюбик-капельницах по 2 мл (Solopharm). В качестве препарата сравнения - экзометаболитный комплекс из культуральной жидкости штамма Bifidobacterium bifidum 1, полученный методом ультрафильтрации с применением разделительных аппаратов с НОММ 15 кДа. В работе изучали стимулирующее влияние метаболитных композиций на активность кислотообразования и динамику накопления лактобактерий Lactobacillus plantarum 8P-A3. Антагонистическую активность в отношении энтеробактерий определяли в тесте ингибирования биолюминесценции индикаторного штамма Escherichia coli lum+ и выражали количественно в виде индекса антибактериальной активности

Результаты и обсуждение. При сравнительном изучении влияния метабиотиков на активность кислотообразования лактобактерий установлено, что оба препарата оказывают выраженное стимулирующее действие на пробиотический штамм L. plantarum. При сравнительном изучении влияния метабиотиков на модельный тест-штамм энтеробактерий установлено, что цельные препараты быстро и значительно (более чем на 90%) ингибируют биолюминесценцию E. coli lum+. Разведения препаратов в 10 и 100 раз позволили выявить достоверные отличия их активности. При одинаковых значениях рН (5,8 ± 0,1) Актофлор-С (разведение в 10 раз) в большей степени угнетал свечение E. rali lum+, превосходя практически в два раза показатели мета-болитного комплекса бифидобактерий.

Показательно, что разведенный в 10 раз Актофлор-С не уступает цельному препарату по уровню воздействия на культуру тест-штамма. Обращает на себя внимание стимулирующее действие больших разведений УФКЖ бифидобактерий после непродолжительного периода ингибирования свечения E. rali lum+.

Представленные данные свидетельствуют о дозозависимости эффекта ингибирования свечения контрольной культуры.

Заключение. Результаты сравнительного исследования профиля бактериального действия нативного комплекса экзометаболи-тов и препарата Актофлор-С подтверждают наличие совокупности необходимой ингибирующей и стимулирующей активности в отношении различных представителей микробиоты. Представляется перспективным создание на основе препарата Актофлор-С линейки метабиотиков с вариабельностью биологических свойств и специализированных для коррекции различных дисбиотических состояний. Дополнительное включение в состав искусственных композиций нативных экзометаболитов бифидо- и/или лактобактерий позволит расширить спектр позитивного влияния пробиотических препаратов на макроорганизм.

Ключевые слова: метабиотики, ультрафильтрат, Актофлор-С, биолюминесценция, бактериотропное действие

Для цитирования: Несчисляев В.А., Фёдорова Т.В., Сорокина Ю.В., Молохова Е.И., Савина А.С. Сравнительное исследование бактериотропного действия метабиотиков. Медицинский совет. 2019;(21):154-158. doi: 10.21518/2079-701X-2019-21-154-158.

Конфликт интересов: авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

A comparative study of the bacteriotropic effect of metabiotics

Valeriy A. Neschislyaev, ORCID: 0000-0002-8163-0674, e-mail: neschislayew@qmail.com Tatyana V. Fedorova, ORCID: 0000-0002-8760-2201, tv.krylova83@gmail.com Yuliya V. Sorokina®, ORCID: 0000-0001-9114-7208, e-mail: sorokinayulia@yandex.ru Elena I. Molokhova, ORCID: 0000-0003-0334-8590, e-mail: profmol17@gmail.com Alina S. Savina, ORCID: 0000-0002-5917-8431, e-mail:alinasav1994@mail.ru Perm State Pharmaceutical Academy; 2, Polevaya St., Perm, 614990, Russia

Abstract

Objective of the study: comparative evaluation of the bacteriotropic activity of Actoflor-S metabiotic and the exometabolic bifidobacteria complex.

Materials and methods: in our work we used Actoflor-S dietary supplement as oral solution in 2 ml drop tubes (Solopharm). As a comparator drug, we used an exometabolite complex from the culture fluid of strain Bifidobacterium bifidum 1 obtained by method of ultrafiltration using separation apparatus with HOMM 15 kDa.

We studied the stimulating effect of metabolite compositions on the acid forming activity and dynamics of the accumulation of lactobaciUi Lactobacillus plantarum 8P-A3. Antagonistic activity against enterobacteria was determined in the test of inhibition of bioluminescence of the indicator strain Escherichia coli lum+ and quantified as an index of antibacterial activity Results and discussions. A comparative study of the effects of metabiotics on the acid forming activity of lactobacilli showed that both drugs have a pronounced stimulating effect on the probiotic strain L. plantarum.

A comparative study of the effects of metabiotics on the model test strain of enterobacteria showed that whole preparations quickly and significantly (by more than 90%) inhibit the bioluminescence of E.coli lum+. Preparation dilutions 1:10 and 1:100 discovered significant differences in their activity. Given equal pH values (5.8 ± 0.1), Actoflor-S (dilution 1:10) inhibited the luminescence of E. coli lum + to a greater degree, exceeding almost 2 times the indicators of the metabolite bifidobacteria complex. It is revealing that Actoflor-S diluted 1:10 is not inferior to the whole preparation in terms of the level of effect on the test strain culture.

What calls attention to itself is that large dilutions of UFLC of bifidobacteria after a short period of inhibition of luminescence of E. coli lum + have a stimulating effect.

There is evidence that effect of inhibition of the luminescence of the control culture is dose-dependent.

Conclusion. The results of a comparative examination of the bacterial action profile of the native exometabolites complex and Actoflor-S preparation confirm the presence of combination of the necessary inhibitory and stimulating activity against various agents of the microbiota. Creation of the metabiotics line based on Actoflor-S preparation with variability of biological properties and specialized for the management of various dysbiotic conditions show promise. An additional inclusion of native exometabolites of bifidobacteria and/or lactobacilli into the formula of artificial compositions will make it possible to expand the spectrum of the positive effect of probiotic preparations on the microorganism.

Keywords: metabiotics, ultrafiltrate, Actoflor-S, bioluminescence, bacteriotropic effect

For citation: Neschislyaev V.A., Fedorova T.V., Sorokina Yu.V., Molokhova E.I., Savina A.S. Comparative study of the bacteriotropic effect of metabiotics. Meditsinskiysovet = Medical Council. 2019;(21):154-158. (In Russ.) doi: 10.21518/2079-701X-2019-21-154-158.

Conflict of interest: The authors declare no conflict of interest.

ВВЕДЕНИЕ

Современные достижения микробиологии в понимании процессов функционирования системы «макроорганизм и его микрофлора» позволяют прогнозировать актуальные направления в разработке новых терапевтических средств для коррекции дисбиотических состояний человека. Не вызывает сомнений перспективность применения препаратов на основе биологически активных экзометаболитов, продуцируемых клетками нормальной микрофлоры, для обеспечения состояния эубиоза в различных биотопах организма хозяина и, соответственно, его полноценной жизнедеятельности [1, 2].

Метаболитные комплексы, не являющиеся специализированными факторами антагонизма, способны стимулировать представителей нормобиоты, участвовать в обмене веществ, поддерживать водно-электролитный баланс в кишечнике, быть источником питания для клеток эпителия, оказывать антиканцерогенное и антимутагенное действие, влиять на иммунный статус и работу различных органов и систем макроорганизма [3].

Метаболиты в качестве самостоятельных препаратов-метабиотиков имеют ряд преимуществ технологического и терапевтического характера в сравнении с традиционными клеточными пробиотиками, сферу применения которых они конкурентно полностью охватывают, а по потенциалу органоспецифического действия значительно превосходят. К их преимуществам следует отнести: высокую биодоступность, отсутствие конфликта с собственной микробиотой макроорганизма, отсутствие латентного периода для реализации биологического эффекта, безопасность, более высокие потребительские свойства лекарственных форм и сроки годности [4-6].

В ближайшие годы следует ожидать значительного расширения арсенала метаболитных препаратов на отечественном фармацевтическом рынке, который в настоящее время не отличается разнообразием и представлен весьма ограниченно метабиотиками нативного и сконструированного вида.

Среди метабиотиков обращает на себя внимание препарат Актофлор-С, представляющий собой искусственно созданную композицию идентифицированных экзометаболитов Escherichia coli М-17, включающую короткоцепо-чечные карбоновые кислоты (муравьиную, янтарную), молочную кислоту, ацетат, аминокислоты и витамины [7].

Относительно нативных метабиотиков следует отметить разработки препаратов на основе ультрафильтратов культуральной жидкости (УФКЖ) лакто- и бифидобакте-рий производственных штаммов, биологическая активность которых подтверждена многолетним клиническим применением лекарственных средств на их основе в гастроэнтерологии и других областях медицины [7, 8].

С учетом востребованности на фармацевтическом рынке препарата Актофлор-С вызывает интерес сравнение его биологической активности с нативными экзоме-таболитными комплексами представителей микробиоты.

Цель работы: сравнительная оценка бактериотропной активности метабиотика Актофлор-С и экзометаболитно-го комплекса бифидобактерий.

Материалы и методы: в работе использовали БАД Актофлор-С, раствор для приема внутрь в тюбик-капельницах по 2 мл (Solopharm). В качестве препарата сравнения - экзо-метаболитный комплекс из культуральной жидкости штамма Bifidobacterium bifidum 1, полученный методом ультрафильтрации с применением разделительных аппаратов с номинально отсекаемой молекулярной массой (НОММ) 15 кДа.

2019;(21):154-158 I MEDITSINSKIY SOVET I 155

В работе изучали стимулирующее влияние метаболит-ных композиций на активность кислотообразования и накопление биомассы клеток штамма 1_а^оЬаа11иБ р1агЛагит 8Р-А3.

Жидкую культуру лактобактерий получали путем реги-дратации препарата Лактобактерин сухой (НПО «Микроген») в 5 мл 0,9%-ного стерильного раствора натрия хлорида. Для определения влияния исследуемых препаратов на рост клеток 3 мл метабиотика и такой же объем культуры лактобактерий вносили в 24 мл 0,5%-ного стерильного раствора глюкозы и выдерживали в термостате при температуре 37 ± 1 °С в течение 48 ч. В контрольные пробирки вносили 24 мл 0,5%-ного раствора глюкозы, 3 мл раствора 0,9%-ного натрия хлорида, 3 мл культуры тест-штамма лактобактерий.

Рассчитывали отдельно коэффициент стимуляции (КС) по показателям оптической плотности (КС роста) и по показателям кислотности (КС кислотообразования) с использованием формулы:

^^_ О кон ^нач

к.„,. -к..

где Окон - средний конечный показатель в опытной пробе; Онач - средний начальный показатель в опытной пробе; Ккон - средний конечный показатель в контрольной пробе; Кнач - средний начальный показатель в контрольной пробе.

Определение активности кислотообразования проводили титриметрическим способом. Содержимое пробирок перемешивали и отбирали 10 мл на титрование 0,1 М раствором натрия гидроксида до рН = 8,5 ± 0,1. Значение рН определяли с помощью иономера универсального.

Кислотность выражали в градусах Тернера и вычисляли по формуле:

°Т = АхКх 10,

где ОТ - условная величина, выраженная в градусах Тернера, которая определяется количеством мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, пошедшего на титрование 100 мл исследуемой суспензии;

А - количество мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, пошедшего на титрование 10 мл исследуемой суспензии; К - поправка к титру раствора натрия гидроксида.

Рост культуры лактобактерий оценивали по изменению оптической плотности в контрольной и исследуемой пробе в кювете с толщиной слоя 3 мм при длине волны 540 нм на фотоэлектроколориметре «КФК-3» (Россия).

Антагонистическую активность в отношении энтеро-бактерий определяли в тесте ингибирования биолюминесценции индикаторного штамма Escherichia coLi Lum+ и выражали количественно в виде индекса антибактериальной активности (ИАА) - безразмерной величины, рассчитываемой по формуле:

°Т = АхКх 10,

где I0 и I - интенсивность свечения контроля и опыта, соответственно, при фиксированном времени экспозиции исследуемой пробы с тест-объектом [9, 10].

К 0,5 мл исследуемого препарата (цельного или разведенного в 10 или 100 раз) добавляли 0,5 мл бактериальной суспензии тест-штамма E. coli Lum+ и выдерживали при температуре 22 ± 2 оС в течение 24 ч. Для контроля к бактериальной взвеси добавляли 0,5 мл стерильного раствора натрия хлорида 0,9%.

Динамику интенсивности биолюминесценции бактерий E. coli lum+ в пробах регистрировали с помощью люминометра «Биотокс-10М» (Россия).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Прямой или опосредованный стимулирующий эффект экзометаболитного комплекса на представителей нор-мофлоры является необходимым и ведущим параметром специфической активности любого коммерческого метабиотика. Этот аспект бактериотропного действия весьма важен при сравнении разных препаратов в ситуации терапевтического выбора.

При сравнительном изучении влияния метабиотиков на активность кислотообразования клеток тестируемой культуры установлено, что оба препарата оказывают выраженное стимулирующее действие на лактобактерии (табл. 1). Наблюдался аналогичный прирост кислотности, несмотря на существенные отличия исходных уровней в исследуемых образцах. В контрольном варианте кислото-образование лактобактерий было в 1,5 раза менее выражено.

• Таблица 1. Влияние метаболитных комплексов на активность кислотообразования лактобактерий

• Table 1. Effect of metabolite complexes on the acid forming activity of lactobacilli

Величина общей кислотности, о Т Коэффициент стимуляции кислотообразования

Исследуемый образец Исходный показатель Показатель после инкубации

Контроль 13,01 ± 0,09 48,7 ± 0,16 -

Актофлор-С 58,4 ± 0,14 111,8 ± 0,13* 1,49 ± 0,12

УФКЖ бифидобактерий 15,22 ± 0,03 69,3 ± 0,09* 1,52 ± 0,82

* p < 0,001 по f-критерию Стъюдента в сравнении с контролем.

В ходе эксперимента определяли значения показателя рН жидких бактериальных культур до и после инкубации. Наблюдали следующие изменения данного показателя: в контроле от 5,68 ± 0,02 до 4,94 ± 0,13; в образцах с УФКЖ бифидобактерий от 5,54 ± 0,01 до 3,48 ± 0,01; в образцах с препаратом Актофлор-С от 5,00 ± 0,01 до 4,54 ± 0,02.

При изучении влияния метаболитных комплексов на рост лактобактерий отмечены сопоставимые данные стимуляции накопления биомассы (табл. 2).

В ходе эксперимента установлено, что стимулирующее влияние метабиотика Актофлор-С более выражено.

Ингибирующее действие метаболитных пробиотиков на условно-патогенную и патогенную микрофлору также

• Таблица 2. Влияние метаболитных комплексов на рост лактобактерий

• Table 2. Effect of metabolite complexes on the growth of Lactobacilli

Оптическая плотность, А

Исследуемый образец Исходный показатель Показатель после инкубации Коэффициент стимуляции роста

Контроль 0,11 ± 0,01 0,16 ± 0,03 -

Актофлор-С 0,12 ± 0,02 0,19 ± 0,01 1,4 ± 0,33

УФКЖ бифидобактерий 0,16 ± 0,04 0,21 ± 0,05 1,0 ± 0,26

является одним из весьма значимых факторов их регуля-торного влияния на состав микробиоты желудочно-кишечного тракта макроорганизма.

При сравнительном изучении влияния метабиоти-ков на модельный тест-штамм энтеробактерий установлено, что цельные препараты быстро и значительно (более чем на 90%) ингибируют биолюминесценцию Е. еоИ 1ит+.

Разведение препаратов в 10 и 100 раз позволило выявить достоверные отличия их активности. При одинаковых значениях рН (5,8 ± 0,1) Актофлор-С (разведение в 10 раз) в большей степени угнетал свечение Е. соИ 1ит+, превосходя практически в два раза показатели метабо-литного комплекса бифидобактерий. Показательно, что разведенный в 10 раз Актофлор-С не уступает цельному препарату по уровню воздействия на культуру тест-штамма.

Обращает на себя внимание стимулирующее действие больших разведений УФКЖ бифидобактерий после

непродолжительного периода ингибирования свечения E. coli Lum+ (табл. 3).

Представленные данные свидетельствуют о дозозави-симости эффекта ингибирования свечения контрольной культуры.

Способ получения препарата-метабиотика может существенно влиять на выраженность данного эффекта, если принимать во внимание возможность создания искусственных композиций типа Актофлор-С.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Результаты сравнительного исследования профиля бактериального действия нативного комплекса экзометаболи-тов и искусственной композиции, входящей в состав препарата Актофлор-С, подтверждают наличие совокупности необходимой ингибирующей и стимулирующей активности в отношении различных представителей микробиоты, что является необходимым условием для проявления корректирующего эффекта пробиотика. Дозозависимый эффект метабиотика открывает возможность для конструирования препаратов, обладающих разной степенью выраженности составляющих бактериотропного действия. Представляется перспективным создание на основе препарата Актофлор-С линейки метабиотиков с вариабельностью биологических свойств и специализированных для коррекции различных дисбиотических состояний. Дополнительное включение в состав искусственных композиций нативных экзометабо-литов бифидо- и/или лактобактерий позволит расширить спектр позитивного влияния пробиотических препаратов на макроорганизм.

Поступила / Received 28.11.2019 Поступила после рецензирования / Revised 16.12.2019 Принята в печать / Accepted 23.12.2019

• Таблица 3. Ингибирующая активность метаболитов в отношении энтеробактерий

• Table 3. Inhibitory activity of metabolites against enterobacteria

Препарат Подавление свечения тест-штамма, % Время экспозиции

5 мин 30 мин 1 ч 2 ч 4 ч 6 ч 24 ч

Актофлор (цельный) 99,77 ± 0,04* 99,73 ± 0,04* 99,77 ± 0,04* 99,77 ± 0,04* 99,70 ± 0,01* 99,70 ± 0,01* 98,40 ± 0,01**

УФКЖ (цельный) 97,77 ± 0,08 97,90 ± 0,01 97,73 ± 0,04 98,00 ± 0,07# 98,10 ± 0,14* 98,13 ± 0,23 95,47 ± 0,04*

Актофлор (разведение в 10 раз) 99,77 ± 0,04* 99,80 ± 0,01* 99,80 ± 0,01* 99,80 ± 0,01* 99,73 ± 0,04* 99,70 ± 0,01* 98,47 ± 0,04**

УФКЖ (разведение в 10 раз) 42,97 ± 1,76 46,20 ± 0,85 43,70 ± 1,14 43,80 ± 1,77 44,03 ± 1,28 44,43 ± 1,60 -101,50 ± 9,76*

Актофлор (разведение в 100 раз) 87,57 ± 0,25* 87,87 ± 0,18* 87,97 ± 0,22* 88,27 ± 0,32* 87,53 ± 0,55* 86,47 ± 0,39* 50,07 ± 1,21**

УФКЖ (разведение в 100 раз) -2,90 ± 1,87 2,63 ± 1,52# 2,57 ± 1,49# 1,97 ± 2,72# -11,33 ± 3,28* -16,07 ± 2,89* -177,80 ± 15,48*

* р < 0,05 по сравнению с УФКЖ бифидобактерий. - # р < 0,05 по сравнению с исходным значением.

2019;(21):154-158 MEDITSINSKIY SOVET 157

Список литературы

1. Акиньшина А.И., Смирнова Д.В., Загайнова А.В., Макаров В.В., Юдин С.М. Перспективы использования методов коррекции микробиоты при терапии воспалительных заболеваний кишечника. Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2019;29(2):12-22. doi: 10.22416/1382-4376-2019-29-2-12-22.

2. Вахитов Т.Я., Ситкин С.И., Демьянова Е.В. Современные подходы к регуляции состава микробиоты кишечника. Гастроэнтерология Санкт-Петербурга. 2018;(2):4-6. Режим доступа: https://elibrary.ru/item. asp?id=35123716.

3. Корниенко Е.А. Метаболическое действие микробиоты и метабиотики. РМЖ. 2016;(18):1196-1201. Режим доступа: https// www.rmj.ru/articles/pediatriya/Metabolicheskoe_ deystvie_mikrobioty_i_metabiotiki/.

4. Яковенко Э.П., Агафонова Н.А., Яковенко А.В., Иванов А.Н., Солуянова И.П. Антибиотики, пре-биотики, пробиотики, метабиотики при избыточном бактериальном росте в тонкой кишке.

Трудный пациент. 2018;16(4):16-22. Режим доступа: ИПр$//суЬег1еп]пка.ги/агйс1е/п/агЛ1Ы-ойкЬргеЫойкЬргоЫойкЬт^аЫойкЬрп^Ьу-tochпom-Ьakteгialпom-гoste-v-toпkoy-kishke.

5. Ситкин С.И., Вахитов Т.Я., Демьянова Е.В. Микробиом, дисбиоз толстой кишки и воспалительные заболевания кишечника: когда функция важнее таксономии. Альманах клинической медицины. 2018;46(5):396-425. Режим доступа: https;//eLiЬгaгy.гu/coпteпts.asp?id=36412565.

6. Ардатская МД., Столярова Л.П, Архипова Е.В., Филимонова О.Ю. Метабиотики как естественное развитие пробиотической концепции. Трудный пациент. 2017;15(6-7):35-39. Режим доступа: https//cyЬeгLeпiпka.гu/aгticLe/п/meta-Ьiotiki-kak-estestveппoe-гazvitie-pгoЬiotich-eskoy-kontseptsii.

7. Вахитов Т.Я., Ситкин С.И., Демьянова Е.В. Развитие концепции метабиотиков в России и за рубежом. Перспективы развития производства и применения иммунобиологических препаратов в XXI веке: Материалы конференции.

Пермь, 2018:209-214. Режим доступа: Ьш^// eLiЬrary.ru/item.asp?id=35407536.

8. Крылова Т.В., Чистохина Л.П., Несчисляев ВА., Николаева А.М. Состав и биологическая активность метаболитных комплексов из культу-ральной жидкости бифидобактерий. Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. ЮА. Овчинникова. 2012;8(2):27-30. Режим доступа: https//www.biorosinfo.ru/ Vestпik/2012/JouгпaL_2012_2.pdf.

9. Пшеничников Р.А., Масленикова И.Л., Никитина Н.М. Микробиолюминесценция (оптимизация сенсоров и расширение сферы использования реакции). Пермь: Пермский государственный технический университет; 2005. 76 с. Режим доступа: https://search.rsl.ru/ru/record/01002687125.

10. Несчисляев В.А. и др. Способ определения антагонистической активности пробиотиков. Патент России № 2187801. Заяв. 10.07.2000. Опубл. 20.08.2002. Бюл № 23. Режим доступа: https://yandex.ru/patents/doc/ 1^112187801С2 20020820

References

1. Akinshina A.I., Smirnova D.V., Zagainova A.V., Makarov V.V., Yudin S.M. Prospects of Using Microbiota Correction Methods in the Treatment of Inflammatory Bowel Disease. Rossiyskiy zhur-nal gastroehnterologii, gepatologii, koloproktologii = Russian Journal of Gastroenterology, Hepatology Coloproctology. 2019;29(2):12-22. (In Russ.) doi: 10.22416/1382-4376-2019-29-2-12-22.

2. Vakhitov T.Ya., Sitkin S.I., Demyanova E.V. Modern approaches to the regulation of the composition of the intestinal microbiota. Gastroehntero-logiya Sankt-Peterburga = Gastroenterology of St. Petersbur. 2018;(2):4-6. (In Russ.) Available at: https://elibrary.ru/item.asp7id-35123716.

3. Kornienko EA. Metabolic activities of microbiota and metabiotics. RMJ. 2016;18:1196-1201. RMZH = RMJ. (In Russ.) Available at: https://www.rmj.ru/ articles/pediatriya/Metabolicheskoe_deystvie_ mikrobioty_i_metabiotiki/.

4. Yakovenko E.P, Agafonova N.A., Yakovenko A.V, Ivanov A.N., Soluyanova I.P. Antibiotics, Prebiotics, Probiotics, Metabiotics in the Therapy of Small

Intestinal Bacterial Overgrowth. Trudnyy patsient = Difficult patient. 2018;16(4):16-22. (In Russ.) Available at: https//cyberleninka.ru/article/n/ antlblotlkl-preblotikl-problotlkl-metablotlkl-prl-izbytochnom-bakterialnom-roste-v-tonkoy-kishke.

5. Sitkin S.I., Vakhitov T. Ya., Demyanova

E.V Microbiome, gut dysbiosis and inflammatory bowel disease: That moment when the function is more important than taxonomy. Al'manakh klinicheskoy meditsiny=Almanac of Clinical Medicine. 2018;46(5):396-425. (In Russ.) Available at: https//elibrary.ru/contents.asp?id=36412565.

6. Ardatskaya M.D., Stolyarova L.G., Arkhlpova E.V Metabiotics as a Natoral Development of a Probiotic Concept. Trudnyy patsient = Difficult patient. 2017;15(6-7):35-39. (In Russ.) Available at: https//cyberlenlnka.ru/artlcle/n/metablotlkl-kak-estestvennoe-razvitie-probioticheskoy-kontseptsii.

7. Vakhitov T.Ya., Sitkin S.I., Demyanova E.V. Development of the metabiotics concept in Russia and abroad. Prospects for the development of the production and use of immunobiological prepara-

tions in the 21st century: Conference proceedings. Perm; 2018. P. 209-214 (In Russ.) Available at: https//ellbrary.ru/ltem.asp?ld=35407536.

8. Krylova T.V, Chistokhina L.P., Neschlslyaev VA., Nikolaeva A.M. Composition and biological activity of metabolite complexes from the culture fluid of bifidobacteria. Vestnik biotekhnologii i fiziko-khimicheskoy biologii im. YUA. Ovchinnikova = YuA. Ovchinnikov bulletin of biotechnology and physical and chemical biology. 2012;8(2):27-30. (In Russ.) Available at: https://Www.bloroslnfo.ru/ Vestnik/2012/Journal_2012_2.pdf.

9. Pshenichnikov RA., Maslenlkova I.L., Nikitina N.M. Microbioluminescence (sensor optimization and extension of the use of the reaction). Perm: Perm State Technical University; 2005. 76 p. (In Russ.) Available at: https://search.rsl.ru/ru/ record/01002687125.

10. Neschlsljaev V.A. et al. Method of assay of antagonistic activity of probiotics. (19)RU(11)2 187 801. (In Russ.) Available at: https://yandex.ru/patents/ doc/RU2187801C2_20020820.

Информация об авторах:

Несчисляев Валерий Александрович, д.м.н., профессор кафедры промышленной технологии лекарств с курсом биотехнологии, Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации; 614990, Россия, Пермь, ул. Полевая, д. 2; e-maiL: neschisLayew@qmaiL.com Фёдорова Татьяна Викторовна, к.фарм.н., старший преподаватель кафедры промышленной технологии лекарств с курсом биотехнологии, Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации; 614990, Россия, Пермь, ул. Полевая, д. 2; e-maiL: tv.kryLova83@gmaiL.com Сорокина Юлия Васильевна, к.фарм.н., доцент кафедры промышленной технологии лекарств с курсом биотехнологии, Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации; 614990, Россия, Пермь, ул. Полевая, д. 2; e-maiL: sorokinayuLia@yandex.ru Молохова Елена Игоревна, д.фарм.н., профессор кафедры промышленной технологии лекарств с курсом биотехнологии, Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации; 614990, Россия, Пермь, ул. Полевая, д. 2; e-maiL: profmoL17@gmaiL.com Савина Алина Сергеевна, аспирант, ассистент кафедры промышленной технологии лекарств с курсом биотехнологии, Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации; 614990, Россия, Пермь, ул. Полевая, д. 2; е-maiL: aLinasav1994@maiL.ru

Information about the authors:

Valeriy A. Neschislyaev, Dr. of Sci. (Med.), Professor of Chair for IndustriaL PharmaceuticaL TechnoLogy with BiotechnoLogy ModuLe, FederaL State Budget EducationaL Institution of Higher Education «Perm State PharmaceuticaL Academy» of the Ministry of HeaLth of the Russian Federation; 2 PoLevaya St., Perm, 614990, Russia; e-maiL: neschisLayew@qmaiL.com

Tatyana V. Fedorova, Cand. of Sci. (Pharm.), Senior Lecturer of Chair for IndustriaL PharmaceuticaL TechnoLogy with BiotechnoLogy ModuLe, FederaL State Budget EducationaL Institution of Higher Education «Perm State PharmaceuticaL Academy» of the Ministry of HeaLth of the Russian Federation; 2 PoLevaya St., Perm, 614990, Russia; e-maiL: tv.kryLova83@gmaiL.com

Yuliya V. Sorokina, Cand. of Sci. (Pharm.), Assistant Professor of Chair for IndustriaL PharmaceuticaL TechnoLogy with BiotechnoLogy ModuLe, FederaL State Budget EducationaL Institution of Higher Education «Perm State PharmaceuticaL Academy» of the Ministry of HeaLth of the Russian Federation; 2 PoLevaya St., Perm, 614990, Russia; e-maiL: sorokinayuLia@yandex.ru

Elena I. Molokhova, Dr. of Sci. (Pharm.), Professor of Chair for IndustriaL PharmaceuticaL TechnoLogy with BiotechnoLogy ModuLe, FederaL State Budget EducationaL Institution of Higher Education «Perm State PharmaceuticaL Academy» of the Ministry of HeaLth of the Russian Federation; 2 PoLevaya St., Perm, 614990, Russia; e-maiL: profmoL17@gmaiL.com

Alina S. Savina, Postgraduate Student, Assistant of Chair for IndustriaL PharmaceuticaL TechnoLogy with BiotechnoLogy ModuLe, FederaL State Budget EducationaL Institution of Higher Education «Perm State PharmaceuticaL Academy» of the Ministry of HeaLth of the Russian Federation; 2 PoLevaya St., Perm, 614990, Russia; e-maiL: aLinasav1994@maiL.ru