CC BY
70
УДК 616.366-002-093
Б.С. Данзанов1, М.И. Бальхаев1,3, Б.В. Дармаева2, Д.Д. Бархутова2
сравнительное исследование бактерии из желчного пузыря и конкрементов при остром холецистите и окружающих водоемов и почв
1 Бурятский государственный университет (Улан-Удэ) 2 ФГУ здравоохранения «Центр гигиены и эпидемиологии» в РБ (Улан-Удэ)
3 Бурятский филиал НЦРВХ СО РАМН (Улан-Удэ)
Дана морфофизиологическая характеристика культивируемых видов бактерий желчи, желчных камней и. слизистой оболочки желчного пузыря, у больных острым, калькулезным холециститом. Изучение видового состава микрофлоры, у оперированных больных показало, что одной из причин инфекционных процессов желчевыводящих путей являются условно-патогенные и. непатогенные виды бактерий, аналогичные выявляемым в почве и. водоемах Забайкалья. Это дало нам. повод считать, что в инфицировании, пищеварительного тракта и. желчевыводящих путей основную роль играют выявленные бактерии. Этому способствуют, заболевания желудочно-кишечного тракта со снижением бактерицидных свойств.
Ключевые слова: острый холецистит, бактерии
coMpARATivE REsEARcH oF BAcTERiuM FRoM GALL BLADDER AND coNcRETioNs at acute cholecystitis and from surrounding reservoirs and soils
B.S. Danzanov1, M.I. Balkhayev1,3, B.V. Darmayeva2, D.D. Barkhutova2
1 Buryat State University (Ulan-Ude)
2 Center of Hygiene and Epidemiology in Buryat Republic (Ulan-Ude) 3Buryat Branch of SCRRS SB RAMS (Ulan-Ude)
Morphophysiologic characteristics of cultivated, types of bacteria of gall, gall-stones and mucous membrane of gall bladder in patients with acute calculous cholecystitis is described in the article. The study of species content of microflora in operated, patients has shown that one of the causes of infectious processes of bile-excreting paths are conditionally pathogenic and. nonpathogenic types of bacteria similar to those which are detected, in soil and reservoirs of Transbaikalia. That was the reason to consider that the main part of infecting gastrointestinal tract and bile-excreting paths belongs to revealed bacteria. And. reduction of bactericidal features due to diseases of gastrointestinal tract promotes to this.
Key words: acute cholecystitis, bacteria
введение
Различные органы человека являются местом развития прокариотных и эукариотных микроорганизмов. Симбионтные виды микроорганизмов играют важную роль в функционировании организма человека. Они участвуют в метаболических реакциях в разных органах, являются антагонистами патогенной флоры. Кроме симбионтов в организме человека развиваются микроорганизмы, распространенные в окружающей среде и вызывающие различные инфекционные процессы в организме человека. В желчном пузыре выявляются аэробные и анаэробные микроорганизмы, которые вызывают разные инфекции и участвуют в образовании камней в этом органе [1].
В то же время Я.Л. Тюрюмин с соавт. [5] эту проблему рассматривают без бактериального фактора, а именно, уменьшение моторно-эвакуаторной функции желчного пузыря считают предрасполагающим фактором образования желчных камней, а наличие хронического внутрипузырного холестаза (формирование «литогенной» пузырной желчи) и хронического «мягкого» внутрипеченочного холестаза (секреция «литогенной» печеночной желчи) определяет формирование холестериновых желчных камней.
Поэтому, изучение роли бактерий в заболеваниях желчного пузыря и желчевыводящих путей представляет одну из актуальных задач современной клинической медицины и микробиологии [3].
материал и методы
У 30 больных с острым калькулезным холециститом, оперированных нами в хирургическом отделении, была изучена микрофлора желчи, желчных камней и слизистой оболочки желчного пузыря. Извлечение желчи, желчных камней и кусочки слизистой желчного пузыря для бактериологического анализа проводили во время оперативного вмешательства. Материал помещали в стерильную посуду. Желчные камни и кусочки слизистой желчного пузыря отмывали от поверхностных бактерий в стерильном 0,85% растворе хлорида натрия и гомогенизировали в стерильной фарфоровой ступке. Бактериологический посев проб проводили методом 10-кратных разведений на мясопептонный агар.
результаты
Микробные монокультуры и ассоциации обнаружены у 23 больных. У 9 больных на использованных культуральных средах бактерии не выявлены.
Грамположительные бактерии составляют 60 %. Среди них преобладают стафилококки, кроме них встречаются стрептококки и сарцины.
Среди грамотрицательных видов выявлены Escherichia coli и Enterobacter liquefaciens.
У трех больных обнаружены представители сапрофитной микрофлоры, в частности Bacillus subtilisи Bacillusmegaterium. В составе бактериальных ассоциаций обнаружены Streptococcus faecium и Sarcina sp.
В чистую культуру выделены и описаны монокультуры: Staphylococcus epidermidis, Streptococcus faecium, Escherichia coli, Enterobacter liquefaciens, Bacillus subtilis и Bacillus megaterium.
Staphylococcus epidermidis образуют на агаре колонии круглой формы, блестящие, выпуклые. Диаметр колоний 1—3 мм. Клетки имеют форму правильных шаров диаметром 0,5—1,5 мкм. В препаратах клетки располагаются поодиночке, парами и группами. Клетки неподвижны, грамположи-тельны. Культура разлагает глюкозу, галактозу с образованием кислоты, восстанавливает нитриты в нитраты, не образует индол, разжижает желатину и кровяную сыворотку, свертывает молоко.
Streptococcus faecium на кровяном агаре образует мелкие, округлые, сероватые колонии. Диаметр колоний до 1 мм. Шаровидные бактерии данного вида образуют цепочки, в основном до 4-х клеток. Факультативный анаэроб. Диаметр клетки менее
2 мкм. На жидких питательных средах характерен придонный и поднимающийся по стенке рост. Культура растет при температуре 10 и 45 °С, на средах с 6,5 % хлорида натрия, 40 % желчи. Оптимум рН равен 9,6. Не использует аргинин как источник энергии, но гидролизует его с образованием аммиака. Сбраживает арабинозу, не сбраживает сорбит. Для роста на простых средах нуждается в фолиевой кислоте.
Изучение монокультуры энтеробактерий, наиболее часто встречающихся в исследуемом материале показало, что в большинстве случаев обнаруживаются Escherichia coli, лишь в единичном случае — Enterobacter liquefaciens.
Escherichia coli — полиморфные палочки размером от 0,2 х 0,5 до 0,6 х 0,8 мкм. Палочки прямые, с закругленными концами, располагаются чаще одиночно. Факультативный аэроб. На плотных средах формируются выпуклые, полупрозрачные сероватые колонии в диаметре 2 — 3 мм, с ровными краями, сочные, с блестящей поверхностью. В жидких средах образует равномерное помутнение и небольшой осадок. На среде Эндо колонии окрашиваются в темно-фиолетовый или черный цвет. Культура ферментирует лактозу, глюкозу, маннит, мальтозу с образованием газа и кислоты, не разжижает желатину, не разлагает мочевину, образует индол и сероводород.
Enterobacter liquefaciens представляет собой палочки с перитрихальными жгутиками, грамо-трицательные. Идентифицировали данную культуру по ее биохимическим свойствам, которые показывают ферментацию углеводов: глюкозы,
лактозы, мальтозы, маннита, сорбита, сахарозы, разжижение желатина, отсутствие образования индола и сероводорода.
Bacillus subtilis является аэробом, растет на картофеле, дает сероватые, плоские, мучнистые колонии. Это палочки шириной 0,7 — 0,8 мкм, длиной 2 — 3 мкм, гидролизуют крахмал, гиппурат, восстанавливают нитраты, максимальная температура роста 45 — 55 °С, минимальная — 5 — 20 °С.
Другая сапрофитная культура — Bacillus megaterium — представляет собой палочки шириной 1,2 — 1,5 мкм, длиной 2 — 5 мкм. Подвижна. Образует кислоты из углеводов: арабинозы, ксилозы, манни-та, восстанавливает нитраты в нитриты, образует щелочь на цитратно-солевом агаре, максимальная температура роста 35 — 45 °С, минимальная — 3-20 °С.
Sarcina sp. представляет собой почти сферические клетки, 1,8 — 3,0 мкм в диаметре, в пакетах из четырех клеток. Неподвижные. Обычно уплощены в местах контакта с соседними клетками. Грамположительные. Факультативные анаэробы. Субстратами служат углеводы, Сбраживают глюкозу с образованием ацетата, углекислого газа и водорода.
При сравнительном анализе установлено, что микрофлора желчи, желчных камней и слизистой оболочки желчного пузыря в основном идентична. Выявлено некоторое морфологическое отличие бактерий, развивающихся в желчном камне, от микроорганизмов желчи и слизистой оболочки. Клетки стафилококков — обитателей желчных камней несколько меньше и немного деформированы. Бактерии желчных камней хуже растут в аэробных условиях, чем в анаэробных, нуждаются в частых пересевах. Аналогичные данные о наличии сапрофитных культур бактерий в желчи, желчных камнях и биоптата слизистой оболочки желчного пузыря были отмечены в работе А.Я. Веселова с соавт. [1].
Культивируемые виды бактерий, выделенные нами из организма больных, способны переживать и развиваться вне организма человека и часто выявляются в почве, минеральных источниках, реках и озерах Забайкалья, в том числе и в озере Байкал [2, 4, 6]. Количество энтеробактерий в воде реки Селенги достигает 42 — 279 клеток в 1 л. Наибольшие количества выявлены в воде в районе сброса сточных вод Селенгинского целлюлознокартонного комбината. В минеральных источниках пригородов Улан-Удэ при температуре воды 2 — 3 °С содержание бактерий группы кишечной палочки составляет 13 — 150 клеток в 1 л. БГКП в количестве 93 клеток в 1 литре обнаружены в пруду источника Горячинск, который образуется при изливе термальной воды.
В донных осадках восточного прибережья озера Байкал содержание бактерий группы кишечной палочки достигает 24 — 440 клеток в 1 мл осадков. Максимальные значения этих бактерий выявлены в осадках в летнее время, когда температура верхних слоев донных отложений равна 15 — 22 °С. Эти
результаты показывают, что бактерии, выявляемые в желчном пузыре человека, способны развиваться и в природных условиях при низкой температуре. Bacillus subtilis и Bacillus megaterium являются обычными представителями почв Забайкалья, где их количество достигает 100—100000 клеток в 1 мл [5].
Нами были проведены фиброгастроскопии перед операцией у части больных в трех изучаемых группах. В 1 группе больных, оперированных традиционным способом (открытая холецистэктомия) — из 72 больных у 73,6 % выявлены различные заболевания желудка и двенадцатиперстной кишки (язвенные болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, эрозивные и гипоацидные гастриты). Во второй группе пациентов, оперированных лапароскопическим способом, из 54 больных у 85,2 % больных, а в третьей группе больных, оперированным минилапаротомным доступом — из 60 больных у 68,3 % выявлены аналогичные изменения со стороны желудка. Это дало нам повод считать, что в инфицировании пищеварительного тракта и желчевыводящих путях эти заболевания могут играть не последнюю роль.
выводы
Таким образом, сравнительное изучение видового состава микрофлоры желчи, желчных камней, биоптата слизистой оболочки желчного пузыря и окружающей водной среды и почвы показало, что одной из причин инфекционных процессов желчевыводящих путей являются условно-патогенные и непатогенные виды бактерий, развивающиеся в окружающей среде. Факторами, способствующими инфицированию внепеченочных желчных путей с последующими развитием калькулезного холецистита и его осложненных форм, в большинстве случаев можно считать заболевания верхнего отдела
пищеварительного тракта с дуоденогастральным рефлюксом (дуодениты, гастриты различных форм, язвенная болезнь), со сниженной бактерицидной функцией.
литература
1. Веселов А.Я. Микрофлора желчных пузырей при хроническом калькулезном холецистите и чувствительность ее к антибиотикам / А.Я. Веселов, Я.Д. Витебский, В.Ф. Чернов // Антибиотики. — 1984. - № 1. - С. 19-24.
2. Дармаева Б.В. Санитарно-микробиологическая характеристика источников Кумыска и Серебряный (Верхняя Березка) / Б.В. Дармаева, Д.Д. Бархутова // Вестник Бурятского университета. — Серия 2. Биология. Вып. 7. — С. 160-163.
3. Дедерер Ю.М. Желчнокаменная болезнь / Ю.М. Дедерер, Н.П. Крылова, Г.Г. Устинов. - М. : Медгиз, 1990. - 78 с.
4. Микробная деструкция естественного и антропогенного загрязнения прибрежной полосы озера Байкал / Л.П. Козырева [и др.] // Проблемы экологического мониторинга: матер. Х Байкальской школы-семинара. - Байкальск : ИЭТ, 1998. -
С. 123-128.
5. Морфо-функциональная характеристика гепатобилиарной системы у больных хроническим калькулезным холециститом / Я.Л. Тюрюмин [и др.] // Бюл. СО РАМН. - 2001. - № 2. - С. 26-29.
6. Микробиологический мониторинг водных экосистем Байкальского региона / Б.Б. Намсараев [и др.] // Проблемы экологического мониторинга: матер. Х Байкальской школы-семинара. - Байкальск : ИЭТ, 1998. - С. 119-123.
7. Поздеев О.К. Медицинская микробиология / О.К. Поздеев. - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2005. -768 с.
Сведения о авторах:
Данзанов Бимба Содбоевич - к.м.н., доцент, врач- хирург 670020, г Улан- Удэ, ул. Гагарина 64 «а», кв. 69. E-mail: [email protected]
Бальхаев Михаил Илларионович - к.м.н., ст. преподаватель медицинского факультета БГУ; тел. 8 (3012) 55-62-74
