CC BY
0
СОВРЕМЕННАЯ ГЕРПЕТОЛОГИЯ. 2024. Т. 24, вып. 1/2. С. 84 - 89
Current Studies in Herpetology, 2024, vol. 24, iss. 1-2, pp. 84-89
https://sg.sgu.ru
Сравнительная оценка влияния загрязнения среды пестицидами на цитоморфологию эритроцитов Bufotes viridis (Laurenti, 1768) и Pelophylax ridibundus (Pallas, 1771) (Anura, Amphibia)
А. И. Рабаданова н, Д. М. Гамидова
Дагестанский государственный университет Россия, 367025, Республика Дагестан, г. Махачкала, ул. Гаджиева, д. 43
Информация о статье
Краткое сообщение УДК 57.022
https://doi.org/10.18500/1814-6090-
2024-24-1-2-84-89
EDN: CRLQWW
Поступила в редакцию 02.08.2023, после доработки 02.11.2023, принята 02.11.2023, опубликована 28.06.2024
Статья опубликована на условиях лицензии Creative CommonsAttribution 4.0 International (CC-BY4.0)
Аннотация. Проведена сравнительная оценка цитоморфологических особенностей эритроцитов Pelophylax ridibundus (Pallas,1771) и Bufotes viridis (Laurenti, 1768), обитающих вблизи территории, опрыскиваемой пестицидами. Выявлены разнонаправленные изменения параметров эритроцитов у сравниваемых видов, выражающиеся в увеличение ширины, площади и объема клеток у P. ridibundus и уменьшении значений этих параметров -у B. viridis. Отмеченные изменения рассматриваются как различные стратегии приспособления разных видов амфибий к загрязнению среды обитания. Ключевые слова: озёрная лягушка, жабы, амфибии, пестициды, эритроциты
Образец для цитирования: Рабаданова А. И., Гамидова Д. М. 2024. Сравнительная оценка влияния загрязнения среды пестицидами на цитоморфологию эритроцитов Bufotes viridis (Laurenti, 1768) и Pelophylax ridibundus (Pallas, 1771) (Anura, Amphibia) // Современная герпетология. Т. 24, вып. 1/2. С.84- 89. https://doi.org/10.18500/1814-6090-2024-24-1-2-84-89, EDN: CRLQWW
Введение. В настоящее время одним из существенных антропогенных факторов, вызывающих неблагоприятное изменение окружающей среды, являются пестициды. Поступая в живые организмы, они воздействуют на ход обменных процессов, вызывая патологические изменения функций органов и систем. В аграрной Республике Дагестан пестициды находят широкое применение, в том числе и для борьбы с вредителями винограда. По данным Б. У. Мисриевой (2013) и других авторов, основной объем используемых в Дагестане препаратов приходится на фосфоорганические, пире-троидные инсектициды и медь- и серосодержащие фунгициды. Применение пестицидов может негативно сказываться и на обитателях близлежащих с виноградниками водоемов, в частности, на земноводных, многие представители которых находят широкое применение в качестве тест-объектов загрязнения среды обитания (Вершинин, 2004; Вафис, Пескова, 2009; Дробот и др., 2011).
Для обоснования безвредных уровней содержания пестицидов необходимо изучение степени их влияния на метаболические процессы обитателей водоемов, важную роль в осуществле-
нии которых играют компоненты крови (Вершинин, 2004; Вафис, Пескова, 2009; Романова, 2010; Скоркина, Липунова, 2010; Минеева, Минеев, 2011). Удобной моделью для выявления цито-токсичности ксенобиотиков представляются эритроциты, которые в последнее время стали предметом интенсивного научного интереса (Роё81её-Нк et а1., 2020). Морфологические изменения, возникающие в эритроцитах под действием различных факторов, могут привести к последующим нарушениям целостности их мембраны и, как следствие, к их гемолизу.
В изученной авторами статьи литературе отсутствуют сведения о влиянии пестицидов на мор-фометрический профиль эритроцитов земноводных. Обнаружены лишь исследования, описывающие влияние инсектицидов на количественное содержание эритроцитов и гемоглобина в крови озёрной лягушки (Пескова, 2004; Якушева, Пескова, 2010). В отношении жаб подобного рода исследований нет. Имеются данные о поведении жаб во время опрыскивания территории пестицидами (ЬееЪ et а1., 2020), о влиянии пестицидов на репродуктивную способность обыкновенных жаб на виноградных план-
Для корреспонденции. Кафедра зоологии и физиологии биологического факультета Дагестанского государственного университета.
ORCID и e-mail адреса: Рабаданова Аминат Ибрагимовна: https://orcid.org/0009-0002-3454-7605, phisiodgu@mail.ru; Гамидова Джамиля Магомедсаидовна: https://orcid.org/0000-0003-0460-9895, Djamka_90@mail.ru.
тациях (Adams et al., 2021), тератогенном влиянии пестицидов на эмбриональное развитие жаб (Pas-kovaetal.,2011).
В этой связи цель данной работы - изучение цитоморфологических особенностей эритроцитов крови двух фоновых видов земноводных - озёрной лягушки (Pelophylax ridibundus Pallas, 1771) и зелёной жабы (Bufotes viridis Laurenti, 1768), обитающих вблизи территории, опрыскиваемой пестицидами.
Материал и методы. Объектами исследования послужили 28 особей P. ridibundus и 20 особей B. viridis, отловленных в водоемах, расположенных вблизи виноградных плантаций окрестностей с. Новые Викри весной и летом 2021 -2022 гг. Химический анализ воды методом газовой хромотографии проводился дважды: до и после опрыскивания виноградников пестицидами.
Все манипуляции и исследования выполнены с соблюдением требований Хельсинкской декларации по гуманному обращению с животными и директивами Совета Европейского Сообщества по защите животных, используемых в экспериментальных и других научных целях (https://ecologysite.ru/ norms/item/569).
Забор крови проводили путем пункции вены задней лапки. Перед пункцией земноводных обездвиживали. Мазки крови готовили общепринятыми методами с окрашиванием красителем Романовского - Гимзе. Измерения эритроцитов проводили с помощью видеокуляра «ToupCam 14.0 MP» (Китай), который встраивали в стереоскопический микроскоп МСП-1 «ЛОМО» (Россия). Полученные изображения обрабатывались с использованием программного обеспечения TopView3.7.
Для определения цитоморфологии эритроцитов были измерены их длина (L) и ширина (W). На основе этих данных с использованием соответствующих формул были вычислены площадь (S), объем (V) и сферичность (Е). Для расчета объема эритроцитов была использована формула:
V = -mb\ 3
где V- объем, а - длинная полуось, b - короткая полуось эллипса. Площадь вычисляли по формуле S = abn. При вычислении сферического индекса (Е) была использована формула:
Полученные данные подвергали вариационно-статистической обработке в программах Excel 10 (Microsoft Corp., USA) и Statistica 10 (StatSoft Inc., OK, USA). Достоверность различий оценивалась с использованием критерия Стьюдента (t), для вы-
борок с нормальным распределением (р > 0.05). Нормальность распределения оценивали критериями Шапиро - Уилка. Для выборок с ненормальным распределением использовали непараметрический критерий Манна - Уитни. Рассчитывали коэффициент корреляции и коэффициент вариации.
Результаты и их обсуждение. Химический анализ воды водоема до опрыскивания близлежащих виноградных плантаций не выявил наличие в ней пестицидов. После опрыскивания было обнаружено повышенное содержание пестицидов пен-коназол (топаз) - 0.005 мг/дм3 (предельно допустимая концентрация в воде 0.003 мг/дм3), ридомил голд - 0.002 мг/дм3 (предельно допустимая концентрация в воде 0.001 мг/дм3) и тиовит джет -0.025 мг/дм3 (ПДК в воде 0.02 мг/дм3).
Результаты исследования по определению морфометрического профиля эритроцитов P. ridi-bundus и B. viridis до и после опрыскивания виноградных плантаций пестицидами представлены на рисунке и в табл. 1, 2.
Как видно из представленных данных (см. рисунок, табл. 1) эритроциты P. ridibundus имеют более вытянутую форму, по сравнению с эритро-
б / b
Микрофотографии эритроцитов крови P. ridibundus (а) и B. sitibundus (б), отловленных в водоеме, расположенном вблизи виноградных плантаций окрестностей с. Новые Викри, до (слева) и после (справа) опрыскивания пестици-дами (увеличение 400 крат) Figure. Micrographs of P ridibundus (a) and B. sitibundus (b) red blood cells captured in a reservoir located near the grape plantations of the vicinity of Novye Vikri village, before (left) and after (right) spraying with pesticides (an increase of400 times)
Таблица 1. Морфометрический профиль эритроцитов крови P.ridibundus и B.viridis, отловленных в водоеме, расположенном вблизи виноградных плантаций окрестностей с. Новые Викри, до и после опрыскивания пестицидами Table 1. Morphometric profile of blood erythrocytes of P ridibundus and B. viridis captured in a water body located near vine plantations in the vicinity ofNovye Vikri village, before and after spraying with pesticides
P. ridibundus В. viridis
Показатель / Indicator До опрыскивания / Before spraying После опрыскивания / After spraying До опрыскивания / Before spraying После опрыскивания / After spraying
L (длина, мкм / length, цт) 21.3±2.8 21.93±2.1 17.3±2.7 17.49±1.34
W (ширина, мкм / width, цт) 13.2±1.7 15.53±3.8* 16.1±3.7 13.39±1.2*
LI W 1.64±0.3 1.49±0.4* 1.1±0.2 1.3±0.2
S (площадь, мкм2 / area, цт2) 221.0±42.5 267.34±6.2* 223±75.2 183.9±23.2*
К (объем, мкм3 / volume, цт3 1121.5±11.7 1960.2±8.8* 1439.3±779.0 1256.4±197.9*
S/V 0.44±0.03 0.18±0.04* 0.17±0.04 0.20±0.02*
Е (сферичность / sphericity) 0.89±0.08 0.74±0.04* 0.39±0 0.64±0.07*
Примечание. * - достоверно значимые отличия (р < 0.05). Note. * - significant differences (p < 0.05).
цитами B. viridis. Об этом можно судить по значительному преобладанию длины над шириной у озерной лягушки (21.3±2.8 и 13.2±1.7 мкм соответственно), большему соотношению L / W(1.64±0.31), а также большему значению индекса сферичности (0.89±0.08). Однако, остальные параметры клеток (площадь, объем и толщина) больше у жаб. Обработка данных непараметрическими методами статистики выявила более широкий размах значений длины эритроцитов у озерной лягушки (18 мкм), тогда как у жаб эритроциты оказались более вариабельны по ширине (9 - 23 мкм), площади (105 -380 мкм2) и объему (358 - 3298 мкм3).
Характерной особенностью эритроцитов P. ridibundus после воздействия пестицидов является увеличение их ширины (F = 12.66,р < 0.00057) без существенного изменения длины (F = 1.384, р < 0.242). За счет этого на 20.9% увеличивается площадь (F = 13.489,р < 0.00039) и на 74.8% - объем (F = 12.27,р < 0.00069) клеток крови. Вычисление
коэффициента корреляции выявил сильную положительную связь между изменением ширины и площади (г = 0.91,р < 0.05), атакже ширины и объема (г = 0.97,р < 0.05). Эритроциты при этом становятся более сферичными, что может снизить их проходимость через узкие стенки сосудов. Кроме того, обращает на себя внимание тот факт, что на фоне увеличения, как объема, так и площади эритро-цитову P. ridibundus при воздействии пестицидов отмечается снижение соотношения S / V, что указывает на уменьшение поверхности эритроцита в единицу объема, а значит и степени их деформации при прохождении через узкие капилляры.
Интересно отметить, что распределение эритроцитов по длине при этом сужается до 10 мкм, тогда как по ширине, площади и объему размах значений становится намного шире. При этом преобладает число эритроцитов с минимальными значениями этих параметров, на что указывает значение асимметрии больше 0.5. Сходные результа-
Таблица 2. Содержание эритроцитов и гемоглобина в крови P. ridibundus и B. viridis, отловленных в водоеме, расположенном вблизи виноградных плантаций окрестностей с. Новые Викри, до и после опрыскивания пестицидами Table 2. Erythrocyte and hemoglobin content in blood of P. ridibundus and B. viridis captured in a water body located near vine plantations in the vicinity ofNovye Vikri village, before and after spraying with pesticides
Показатель / Indicator P. ridibundus B. viridis
До опрыскивания / Before spraying После опрыскивания / After spraying До опрыскивания / Before spraying После опрыскивания / After spraying
Эритроциты, х10п/л / Erythrocytes, xl0n/l 3.4±0.8 4.0±0.9* 2.2±0.7 3.0±0.3*
Гемоглобин, г/л / Hemoglobin, g/1 70.5±1.9 71.6±1.8* 80.1±1.7 94.4±1.2*
MCH/MSH 20.7±0.7 17.9±0.8* 36.4±1.3 31.5±0.5
Примечание. * - достоверно значимые отличия (р < 0.05), МСН - среднее содержание гемоглобина в эритроците пропорционально отношению гемоглобин / количество эритроцитов.
Note. * - significant differences (p < 0.05), MSN - average hemoglobin content in erythrocyte proportional to the ratio hemoglobin/number of erythrocytes.
ты, указывающие на повышение числа более мелких эритроцитов округлой формы, были получены Т. Ю. Песковой (2004) при изучении влияния пестицида дециса на гематологические показатели крови озерной лягушки. Подобные изменения формы эритроцитов автор рассматривает как краткосрочную адаптацию к действию токсиканта.
Отмеченные изменения морфологии эритроцитов крови озерной лягушки могут быть связаны с увеличением их количества (на 17.6%, р < < 0.001) после опрыскивания территории пестицидами. Содержание гемоглобина при этом также достоверно повышается, но незначительно. Известно, что более выраженное повышение эритроцитов по сравнению с гемоглобином имеет место при гипохромной анемии (Якушева, Пескова, 2010).
Подобные изменения параметров красной крови были отмечены Я. А. Якушевой, Т. Ю. Песковой (2010) при изучении влияния карбамино-вых пестицидов (феноксикарба и карбарила) на гематологические параметры озерной лягушки. Авторы отмечают адаптивный характер возрастания показателей красной крови под действием карбоминовых пестицидов, поскольку это приводит к повышению кислородной емкости крови. Однако более высокие концентрации токсикантов вызывали развитие анемии, что свидетельствует о патологии.
Противоположные изменения нами были обнаружены у B. viridis. Это выразилось в уменьшении ширины эритроцитов (F = 12.66, р < 0.001), а также их площади (F = 12.27, р < 0.001) и объема (F = 13.48; р<0.00039). Кроме того, сужается размах значений этих параметров. В крови жаб встречаются эритроциты с длиной 15 - 20 мкм, шириной - 11 - 16 мкм, площадью - 130 - 223 мкм2 и объемом - 544 - 1311 мкм3, причем наиболее часто встречаются эритроциты со средними значениями данных параметров.
На фоне указанных изменений параметров эритроцитов у B. viridis эритроциты приобретают более вытянутую форму, на что указывает увеличение индекса сферичности до 0.64±0.07 (F = 58.9, р < 0.000). Кроме того, отмечается повышение отношения площади эритроцитов к их объему (F = 7.3, р < 0.009). Это позволяет эритроцитам легче менять свою форму (увеличивается степень их деформации) и проходить через узкие капилляры, что улучшает транспортные функции крови. При высоком соотношении площади и объема любая молекула гемоглобина ближе располагается к поверхности, что обеспечивает максимально ускоренный газообмен. Это
позволяет рассматривать подобные изменения как компенсаторную реакцию.
Кроме того, уменьшение размеров эритроцитов при воздействии пестицидов у B. viridis происходит на фоне повышения их количества на 36.4% (F = 15.1, р < 0.001), а также увеличения содержания гемоглобина на 17.9% (F = 8.1, р < 0.001). Этот факт также свидетельствует о повышении кислородной емкости крови.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о разнонаправленном компенсаторном характере изменений морфометрических особенностей эритроцитов у двух сравниваемых видов амфибий, обитающих в условиях воздействия пестицидов. У P. ridibundus улучшение транспортных функций эритроцитов происходит за счет увеличения площади и объема клеток. Уменьшение этих же параметров у B. viridis может способствовать улучшению их проходимости через тонкие капилляры, а, значит, позволяет усилить эффективность газообмена. Общей реакцией красной крови на воздействие токсикантов у обоих видов является повышение содержания эритроцитов и гемоглобина в крови, что способствует улучшению кислородной емкости крови.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Вафис А. А., Пескова Т. Ю. 2009. Реакции крови озерной лягушки, Pelophylax ridibundus Pal. на воздействие сточных вод сахарных заводов // Вопросы современной науки и практики. Университет им. В. И. Вернадского. № 2. С. 8 - 18.
Вершинин В. Л. 2004. Гемопоэз бесхвостых амфибий - специфика адаптациогенеза видов в современных экосистемах // Зоологический журнал. Т. 83, № 11. С. 1367 - 1374.
Дробот Г. П., Мальцева Н. Л., Ведерников А. А. 2011. Ответная реакция некоторых тканей лягушки озерной (Rana ridibunda, 1771) на антропогенную нагрузку // Вестник Оренбургского государственного университета. № 12 (131). С. 65 - 67.
Минеева О. В, Минеев А. К. 2011. Нарушение лейкоцитарной формулы крови озерной лягушки Саратовского водохранилища // Вестник Нижегородного университета им. Н.И. Лобачевского. № 2. C. 94 - 97.
Мисриева Б. У. 2013. Результаты испытаний системных фунгицидов против эпифитотийно опасных болезней винограда в Дагестане // Аграрная Россия. № 4. С. 11 - 13. https://doi.org/10.30906/1999-5636-2013-4-11-13
Пескова Т. Ю. 2004. Адаптационная изменчивость земноводных в антропогенно загрязненной среде : автореф. дис. ... д-ра биол. наук. Тольятти. 36 с.
Романова Е. Б. 2010. Мониторинг состояния иммунной системы зеленых лягушек рода Rana в
условиях антропогенной трансформации городской среды // Вестник Нижегородского университета им. Н. И. Лобачевского. № 1. С. 131 - 134.
Скоркина М. Ю, Липунова Е. А. 2010. Система крови как скрининг-тест экологического состояния окружающей среды // Проблемы региональной экологии. № 1. С. 147 - 150.
Якушева Я. А., Пескова Т. Ю. 2010. Гематологические показатели озерной лягушки, экспонированной в растворах карбаминовых инсектицидов // Труды Кубанского государственного аграрного университета. № 3 (24). С. 49 - 53.
Adams E, Leeb C, Brühl C. 2021. Pesticide exposure affects reproductive capacity of common toads (Bufo bufo) in a viticultural landscape // Ecotoxicology. Vol. 30, iss. 2. P. 213 - 223. https://doi.org/10.1007/ s10646-020-02335-9
Leeb C, Brühl C, Theissinger K. 2019. Potential pesticide exposure during the post-breeding migration of the common toad (Bufo bufo) in a vineyard dominated landscape // Science of the Total Environment. Vol. 706. Article number 134430. https://doi.org/10.1016Zj.scitotenv. 2019.134430
Paskova V., Hilscherova K, Blaha L. 2011. Teratogenicity and embryotoxicity in aquatic organisms after pesticide exposure and the role of oxidative stress // Reviews of Environmental Contamination and Toxicology / ed. D. Whitacre. New York : Springer. Vol. 211. P. 25 -61. https://doi.org/10.1007/978-1-4419-8011-3_2
Podsiedlik M, Markowicz-Piasecka M., Sikora J. 2020. Erythrocytes as model cells for biocompatibility assessment, cytotoxicity screening of xenobiotics and drug delivery // Chemico-Biological Interactions. Vol. 332, iss. 4. Article number 109305. https://doi.org/10.1016/ j.cbi.2020.109305
Comparative assessment of the impact of pesticide pollution on the cytomorphology of erythrocytes Bufotes viridis (Laurenti, 1768) and Pelophylax ridibundus (Pallas, 1771) (Anura, Amphibia)
A. I. Rabadanova D. M. Gamidova
Dagestan State University 43a Gadzhiev St, Makhachkala 367000, Russia
Article info
Short Communication https://doi.org/10.18500/1814-6090-2024-24-1-2-84-89 EDN: CRLQWW
Received August 2, 2023, revised November 2, 2023, accepted November 2, 2023, published June 28, 2024
This is an open access article distributed under the terms of Creative Commons Attribution 4.0 International License (CC-BY 4.0)
Abstract. A comparative assessment of morphological features of erythrocytes Pelophylax ridibundus (Pallas, 1771) and Bufotes viridis (Laurenti, 1768) living near the territory sprayed with pesticides was carried out. Multidirectional changes in the parameters of erythrocytes in the compared species were revealed, expressed in an increase in the width, area and volume of cells in P. ridibundus and a decrease in the values of these parameters in B. viridis. The noted changes are considered as different strategies of adaptation of different amphibian species to habitat pollution.
Keywords: frog, toads, amphibians, pesticides, erythrocytes
For citation: Rabadanova A. I., Gamidova D. M. Comparative assessment of the impact of pesticide pollution on the cytomorphology of erythrocytes Bufotes viridis (Laurenti, 1768) and Pelophylax ridibundus (Pallas, 1771) (Anura, Amphibia). Current Studies in Herpetology, 2024, vol. 24, iss. 1-2, pp. 84-89 (in Russian). https://doi.org/10.18500/1814-6090-2024-24-1-2-84-89, EDN: CRLQWW
REFERENCES
Vafis A. A., Peskova T. Yu. Blood change of lake frog (Rana ridibunda) influenced by sugar-beet mill sewage. Problems of Contemporary Science and Practice. Vernadsky University, 2009, no. 2, pp. 8-18 (in Russian).
Vershinin V. L. Hematopoiesis of tailless amphibians - the specifics of adaptation genesis of species in modern ecosystems. Zoologicheskii zhurnal, 2004, vol. 83, no. 11, pp. 1367-1374 (in Russian).
Drobot G. P., Maltseva N. L., Vedernikov A. A. The response of frog tissues (Rana ridibunda Pallas, 1771) to the anthropogenous load. Vestnik of the Orenburg State University, 2011, no. 12 (131), pp. 65-67 (in Russian).
Mineeva О. V., Mineev A. K. Disorders of blood leukocyte formula in the lake frog of the Saratov reservoir. Vestnik of Lobachevsky University of Nizhni Novgorod, 2011, no. 2, pp. 94-97 (in Russian).
Misrieva B. U. Results of the tests of systemic fungicides against epiphytotically dangerous diseases of grapes in Dagestan. Agrarnaya Rossiya, 2013, no. 4, pp. 11-13 (in Russian). https://doi.org/10.30906/1999-5636-2013-4-11-13
Peskova T. Yu. 2004. Adaptation Variability of Amphibians in Anthropogenically Polluted Environment. Thesis Diss. Dr. Sci. (Biol.). Togliatti, 2004. 36 p. (in Russian).
Romanova E. B. Monitoring of Rana frog immune system state under anthropogenic transformation of urban environment. Vestnik of Lobachevsky University of Nizhni Novgorod, 2010, no. 1, pp. 131-134 (in Russian).
Skorkina M. Yu., Lipunova E. A. Blood system as screening test of ecological state of the environment. Regional Environmental Issues, 2010, no. 1, pp. 147-150 (in Russian).
Yakusheva Ya. A., Peskova T. Yu. Hematological parameters of a lake frog exposed in solutions of carba-mine insecticides. Proceedings of the Kuban State Agrarian University, 2010, no. 3 (24), pp. 49-53 (in Russian).
Adams E., Leeb C., Brühl C. Pesticide exposure affects reproductive capacity of common toads (Bufo bufo) in a viticultural landscape. Ecotoxicology, 2021, vol. 30, iss. 2, pp. 213-223. https://doi.org/10.1007/s10646-020-02335-9
Leeb C., Brühl C., Theissinger K. Potential pesticide exposure during the post-breeding migration of the common toad (Bufo bufo) in a vineyard dominated landscape. Science of the Total Environment, 2019, vol. 706, article no. 134430. https://doi.org/10.1016/j.scitotenv. 2019.134430 '
Paskova V., Hilscherova K., Blaha L. Teratogenicity and embryotoxicity in aquatic organisms after pesticide exposure and the role of oxidative stress. In: Whita-cre D., ed. Reviews of Environmental Contamination and Toxicology. New York, Springer, 2011, vol. 211, pp. 2561. https://doi.org/10.1007/978-1-4419-8011-3_2
Podsiedlik M., Markowicz-Piasecka M., Sikora J. Erythrocytes as model cells for biocompatibility assessment, cytotoxicity screening of xenobiotics and drug delivery. Chemico-Biological Interactions, 2020, vol. 332, iss. 4, article no. 109305. https://doi.org/10.1016/j.cbi.2020.109305
H Corresponding author. Department of Zoology and Physiology of Faculty of Biology, Dagestan State University, Russia.
ORCID and e-mail addresses: Aminat I. Rabadanova: https://orcid.org/0009-0002-3454-7605, phisiodgu@mail.ru; Jamilya M. Gamidova: https://orcid.org/0000-0003-0460-9895, Djamka_90@mail.ru.
