CC BY
54
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ 3-ОКСИПИРИДИНАЦЕТИЛЦИСТЕИНАТА И АМБИОЛА НА МИЕЛОТОКСИЧНОСТЬ ЦИКЛОФОСФАНА У МЫШЕЙ С КАРЦИНОМОЙ ЛЕГКОГО ЛЬЮИС
О.А. Куликов, А.В. Сипров, В.А. Кузнецова
Кафедра фармакологии Медицинский институт МГУ им. Н.П. Огарёва Большевистская, 68, Саранск, Россия, 430005 тел. +79114636467, эл. почта: [email protected]
Показано, что в эксперименте на мышах линии C57BL/6 с карциномой легкого Льюис (LLC) 3-оксипиридинацетилцистеинат (3-ОПЦ) и амбиол снижают миелотоксичность циклофосфана (ЦФ), не уменьшая его противоопухолевой эффективности в отношении первичного опухолевого узла. 3-ОПЦ более эффективно, чем амбиол, восстанавливает клеточный состав эритроидного ростка костного мозга.
Ключевые слова: 3-оксипиридинацетилцистеинат, амбиол, циклофосфан, миелотоксич-ность.
Важной задачей онкофармакологии является разработка подходов к оптимизации и повышению эффективности действия уже известных противоопухолевых препаратов. В решении этой задачи одним из главных подходов можно считать снижение токсичности противоопухолевых средств. Важным аргументом в пользу обоснования применения антиоксидантов как антитоксических модификаторов и средств снижения побочных эффектов противоопухолевой терапии является тот факт, что побочные эффекты цитостатиков во многом связаны с образованием су-пероксидных радикалов [1]. Поэтому изучение возможности применения антиоксидантов в комплексном лечении онкологической патологии представляется чрезвычайно актуальным.
Целью данной работы явилось сравнение миелопротекторной эффективности 3-оксипиридинацетилцистеината и амбиола при проведении химиотерапии циклофосфаном у мышей с карциномой легкого Льюис.
Материалы и методика. Эксперименты выполнены на 75 мышах-самках линии C57BL/6 массой 18—22 г разводки питомника ГУ НЦБМТ РАМН «Столбовая». Суспензию клеток LLC (106 клеток в растворе Хенкса) перевивали внутримышечно в область бедра. Все животные были разделены на 6 групп: мыши с опухолевым штаммом LLC без лечения (контроль LLC); животные с LLC, получавшие химиотерапию ЦФ (ОАО «Биохимик», Россия), который вводили внут-рибрюшинно 2 раза с интервалом 96 часов в дозе 100 мг/кг, начиная с 7 суток с момента имплантации опухолевых клеток (LLC + ЦФ); в следующих группах животные с карциномой получали ЦФ так же, как и в предыдущей группе, в сочетании с 3-ОПЦ и амбиолом, которые вводили внутримышечно в дозах 25 и 50 мг/кг в соответствующих группах (LLC + ЦФ + 3-ОПЦ 25 мг/кг; LLC + ЦФ +
+ 3-ОПЦ 50 мг/кг; LLC + ЦФ + амбиол 25 мг/кг; LLC + ЦФ + амбиол 50 мг/кг), начиная с 7 суток после имплантации опухолевых клеток в течение 14 дней. В каждой группе было по 15—20 мышей. Отдельную группу составили интакт-ные особи.
Для оценки миелотоксичности у части животных на 14-е и 22-е сутки опыта под эфирным наркозом производился забор крови, с последующим определением содержания эритроцитов, гемоглобина, тромбоцитов и лейкоцитов. Из бедренной кости животных выделяли костный мозг и на предметном стекле готовили мазок. На 22-е сутки после трансплантации опухолевых клеток животные подвергались эвтаназии под эфирным наркозом. Эффективность лечения оценивали по массе первичного опухолевого узла и среднему числу метастазов на поверхности легких.
При статистической обработке результатов исследования использовали ¿-критерий Стьюдента.
Как показали исследования на 14-е сутки эксперимента на фоне опухолевого роста развивалась анемия и лейкопения: количество гемоглобина снижалось с 143,4 г/л у интактных мышей до 61,2 г/л, эритроцитов — с 8,53 х 1012/л до 3,97 х х 1012/л, лейкоцитов — с 5,84 х 109/л до 3,52 х 109/л (р < 0,05). Введение ЦФ приводило к усилению анемии (уровень гемоглобина снижался до 50,67 г/л, а эритроцитов — до 3,02 х 1012/л (р < 0,05). ЦФ усиливал и лейкопению: число лейкоцитов достоверно снижалось до 1,23 х 109/л.
3-ОПЦ в дозе 50 мг/кг, в отличие от амбиола, приводил к повышению уровня гемоглобина с 50,7 г/л в группе с одним ЦФ до 62,8 г/л (р < 0,05), а амбиол в дозах 25 и 50 мг/кг, в отличие от 3-ОПЦ, повышал общее число лейкоцитов с 1,23 х 109/л (в группе с ЦФ) до 3,25 х 109/л и 3,62 х 109/л соответственно.
В костном мозге на 14-е сутки под действием ЦФ увеличивалось число бла-стов, миэлоцитов и метамиэлоцитов по сравнению с интактной и контрольной группой. Доля палочкоядерных нейтрофилов при этом достоверно возрастала с 30,5% у интактных до 46% в группе с ЦФ. Число сегментоядерных нейтрофи-лов резко снижалось с 23,2% в контрольной группе до 4,47% в группе с ЦФ.
В эритроидном ростке ЦФ приводил к снижению содержания полихрома-тофильных нормоцитов с 23,6% у интактных мышей до 11,45%.
Применение 3-ОПЦ 25 и 50мг/кг приводило к снижению числа бластов с 2,4% в группе с одним ЦФ до 0,5% и 0,425% соответственно. Амбиол 50 мг/кг достоверно снижал число бластов по отношению к группе с одним ЦФ до 0,56%.
Количество миэлоцитов под влиянием амбиола 50 мг/кг снижалось с 18,4% в группе с одним ЦФ до 8,54% (р < 0,05). Число палочкоядерных нейтрофилов под влиянием амбиола 25 мг/кг снижалось с 46% в группе с одним ЦФ до 20,8% (р < 0,05).
На 22-е сутки эксперимента у животных без лечения наблюдалось снижение уровня гемоглобина с 143,4 г/л у интактных мышей до 47,5 г/л, числа эритроцитов с 8,53 х 1012/л до 3,68 х 1012/л (р < 0,05). Общее число лейкоцитов на фоне опухолевого роста не изменялось. Введение ЦФ усиливало эритропению (число эритроцитов снижалось с 3,68 х 1012/л до 2,3 х 1012/л). При этом общее число лейкоцитов достоверно увеличивалось до 12,35 х 109/л по отношению к интактной и конт-
рольной группам. Амбиол в дозах 25 и 5O мг/кг, в отличие от 3-ОПЦ, способствовал возрастанию уровня гемоглобина по отношению к группе с одним ЦФ с 43,5 до S1,O и 61,6 г/л соответственно (p < O,O5). Все изучаемые антиоксиданты достоверно повышали число эритроцитов по отношению к группе с одним ЦФ (p < O,O5). Применение 3-ОПЦ 25 мг/кг привело к снижению общего числа лейкоцитов с 12,35 x Ю9/л (в группе с ЦФ) до 7,O5 x Ю9/л.
На 22-е сутки в костном мозге при опухолевом росте снижалось содержание лимфоцитов с 6,53% у интактных животных до 1,95%. Под действием ЦФ возросло число сегментоядерных нейтрофилов с 23,5% в интактной и контрольной группах до 4S,36%, доля базофильных нормоцитов снижалась с 1,4% у мышей контрольной группы до O,4S%, а содержание полихроматофильных нормоцитов снижалось с 27,5% в контроле до 4,72% (p < O,O5). При этом в костном мозге отсутствовали оксифильные нормоциты. 3-ОПЦ 25 и 5O мг/кг, в отличие от ам-биола, приводил к повышению уровня полихроматофильных нормоцитов до 1S,5% и 15,2% соответственно (p < O,O5) по отношению к группе с ЦФ. 3-ОПЦ 5O мг/кг достоверно увеличивал число оксифильных нормоцитов по отношению к группе с ЦФ.
ЦФ уменьшал число метастазов в легких с 95,7 ± S,23 в контроле до 5 ± 1,25 (p < O,O5). При комбинации ЦФ и 3-ОПЦ 25 мг/кг число метастазов достоверно уменьшалось до 1,33 ± O,56 по сравнению с одним ЦФ. В группе с 3-ОПЦ 5O мг/кг число метастазов не отличалось от такового в группе с одним ЦФ. Комбинация ЦФ и амбиола 25 мг/кг привела к достоверному снижению числа метастазов до O,2 ± O,133 по отношению к группе с одним ЦФ и группам ЦФ + 3-ОПЦ 25 и 5O мг/кг. При использовании амбиола в дозе 5O мг/кг среднее число метастазов не отличалось от такового в группе с одним ЦФ.
Масса опухоли при терапии ЦФ снизилась с 9,1S ± O,19 г в контроле до 6,45 ± ± O,1S г (p < O,O5). При использовании 3-ОПЦ 25 и 5O мг/кг масса опухолевого узла составила 7 ± O,17 и 6,95 ± O,2 г, а при использовании амбиола 25 и 5O мг/кг — 6,3S ± O,32 и 7,O95 ± O,47 г соответственно, что достоверно не отличалось от таковой в группе с одним ЦФ.
Таким образом, оба изучаемых антиоксиданта приводили к повышению содержания эритроцитов в периферической крови на 22-е сутки эксперимента. Ам-биол, в отличие от 3-ОПЦ, в большей степени корригировал лейкопению на 14-е сутки. 3-ОПЦ, в отличие от амбиола, оказывал более выраженный протекторный эффект на клетки эритроидного ряда, что проявлялось увеличением числа поли-хроматофильных и оксифильных нормоцитов в костном мозге на 22-е сутки эксперимента. Оба изученных антиоксиданта не снижают противоопухолевой эффективности ЦФ, при этом 3-ОПЦ и амбиол в дозах 25 мг/кг повышали антиметаста-тическую эффективность цитостатика.
ЛИТЕРАТУРА
[1] Дыгай A.M. Механизм действия стимуляторов гранулоцитопоэза в условиях цито-статической миелосупрессии // Экспер. и клин. фармакол. — 2OO6. — Т. 69. — № 2. — С. 44—47.
COMPARATIVE ESTIMATION OF INFLUENCE 3-OXIPIRIDINACETYICYSTEINATE AND AMBIOL ON MYELOSUPRESSION CYCLOPHOSPHAMIDE AT MICE WITH LEWIS LUNG CARCINOMA
O.A. Kulikov, А.V. Siprov,
V.A. Kuznetsova
Pharmacology department Medical institute N.P. Ogarev Mordovsky State University Bolshevistskaya str., 68, Saransk, Russia, 430005 tel. +79114636467, email: [email protected]
It is shown, that in experiment in mice of line C57BL/6 with Lewis lung carcinoma 3-oxipiri-dinacetylcysteinat (3-OPC) and ambiol reduce myelosupression of the cyclophosphamide, not reducing its antitumor efficiency with respect to primary tumorous knot. The 3-OPC more effectively than ambiol restores erythroid cells of the marrow.
Key words: 3-oksipiridinacetylcisteinat, ambiol, cyclophosphamid, myelosupression.
