CC BY
12
ИССЛЕЛОВАНИР
Сравнительная оценка органолептических свойств и иммуногенной активности вакцины Ультравак® и вакцины живой гриппозной аллантоисной
для интраназального применения
М.К. Ерофеева, В.Л. Максакова, М.Г. Позднякова, И.Л. Колыванова, Е.М. Войиеховская, В.М. Николаева, Т.И. Крайнова
ФГУН «НИИ гриппа» РАМН, Санкт-Петербург
Введение
Стратегической основой профилактики гриппа является иммунизаиия населения [2, 4]. Реальной альтернативы ей нет. Вакиинаиия против гриппа остается самой массовой по сравнению со спеиифической профилактикой других инфекиионных заболеваний. Между тем в последние годы произошли кардинальные изменения эпидемического проиесса при наиболее распространенной разновидности, возбудители которой относятся к антигенному варианту вируса типа А. Ранее всегда при появлении нового серотипа возбудителя - вирусов А(Н01Ч1), А(Н11\11), А(Н2Ы2) и А(Н3№) - полностью прекращалась ииркуляиия вируса-предшественника. В 1977 году по невыясненным причинам такой замены не произошло, вследствие чего до сих пор одновременно ииркулируют вирусы А(Н11Ч1), А(Н3Ы2) и В. При повторных встречах с антигенными вариантами одних и тех же вирусов у населения в возрасте 15 лет и старше сформировался сравнительно напряженный иммунитет.
Эпидемические подъемы заболеваемости гриппом типа А наблюдаются в основном среди детей, что ранее было присуще лишь гриппу типа В.
За последние 20 лет значительно улучшилось качество гриппозных вакиин, увеличился их ассортимент. В контролируемых наблюдениях показано, что иммунизаиия современными гриппозными вакиина-ми является единственным научно-обоснованным эффективным способом массовой профилактики гриппа. При своевременной вакиинаиии можно предотвратить заболевания гриппом у 80 - 90% детей и взрослых. При этом болезнь у привитых людей протекает, как правило, легче и без каких-либо осложнений. Грипп особенно опасен для пожилых людей и больных с хронической патологией - на них прихо-
дится до 80% летальных исходов в структуре общей смертности от гриппа и его осложнений.
Гриппозные вакиины разрешено применять ежегодно. Причина заключается в частом обновлении эпидемических вирусов гриппа по типу антигенного дрейфа. Поэтому и состав гриппозных вакиин обновляется, и, по крайней мере, меняется один из трех входящих в вакиины штаммов. В этих условиях чрезвычайно важно в строго контролируемых эпидемиологических наблюдениях оиенивать иммуногенную активность и потенииальную профилактическую эффективность отечественных гриппозных вакиин.
В России производятся и сравнительно широко применяются как живые для интраназального применения (ЖГВ), так и инактивированные гриппозные вакиины.
Вакиина гриппозная аллантоисная интраназаль-ная живая сухая (ЖГВ) - одна из наиболее эффективных вакиин для проведения массовой вакиинаиии населения. Удобный и безопасный интраназальный способ применения препарата относится к преимуществам ЖГВ и дает возможность использовать его у детей начиная с 3-х лет. ЖГВ при введении в верхние дыхательные пути стимулирует гуморальный, клеточный и локальный иммунитет [1, 3, 5]. В то же время следует учитывать, что интраназальный способ введения вакиины предъявляет повышенные требования к органолептическим свойствам препарата, который вводится распылением в полость носа. В состав вакиины гриппозной аллантоисной интрана-зальной живой сухой входит стабилизатор пептон, обладающий спеиифическим запахом, который часто оиенивался как неприятный. С учетом вакиинаиии детских коллективов спеиифические органолептиче-ские свойства вакиины необходимо было улучшить.
исследование;
Именно поэтому была создана вакцина Ультра-вак®, в процессе приготовления которой был использован новый современный стабилизатор М-2, в состав которого входят: сахароза, лактоза, глицин, глу-тамат натрия, трис, натрия хлорид и раствор желатина. Вакцина, приготовленная со стабилизатором М-2, сохраняет специфическую активность лучше, а также имеет более высокую термостабильность, чем вакцина, приготовленная с пептоном. Это существенно как для транспортировки, так и для длительного хранения препарата.
Применение стабилизатора М-2, а также специально разработанного режима лиофилизации позволяет более эффективно проводить процесс высушивания и использовать для приготовления 1 дозы вакцины Ультравак® в 1,7 раза меньше вируссодержа-щей аллантоисной жидкости (ВАЖ) по сравнению с ЖГВ. Это является существенным, поскольку ВАЖ может выступать как потенциальный фактор развития поствакцинальных аллергических реакций.
В качестве белкового носителя в стабилизаторе использован высокоочищенный желатин, который не имеет ни цвета, ни запаха. Кроме того, количество желатина в 1 дозе вакцины Ультравак® в 10 раз меньше, чем количество пептона в ЖГВ - лиофилизате для приготовления раствора для интраназального введения. Уменьшение белка в 1 дозе вакцины снижает риск проявления реактогенности и аллергических реакций.
Предполагаемое существенное улучшение органо-лептических свойств и других характеристик препарата позволяет рассматривать его как новый, отвечающий современным требованиям вариант вакцины.
Целью настоящего исследования являлась сравнительная оценка прививочных свойств отечественных гриппозных вакцин - ЖГВ (стабилизатор пептон) и Ультравака®.
В задачи исследования входили: сравнительная оценка иммуногенной активности и реактогенности ЖГВ и Ультравака®, а также проведение сравнительной оценки их органолептических свойств.
Материалы и методы
Строго контролируемое эпидемиологическое наблюдение было проведено в октябре - декабре 2005 года среди юношей 16 - 17 лет (300 человек), находящихся в одном организованном коллективе.
Методом случайной выборки (рандомизация) все наблюдаемые были разделены на три группы по 100 человек каждая: 1-я - привитые ЖГВ на стабилизаторе пептон, серия <501; 2-я - привитые вакциной Ультравак® на новом стабилизаторе М-2, серия <01; 3-я - получившие плацебо (стерильный физиологический раствор).
В соответствии с рекомендациями ВОЗ на эпидемический сезон 2005 - 2006 годов вакцины включали в себя три штамма, подобные: А/Новая Каледо-ния/20/99(Н11Ч1), А/Калифорния/07/04(Н3№), В/Шан-хай/361/02.
Перед прививкой все наблюдаемые были осмотрены врачом-инфекционистом (с обязательной термометрией), сотрудником НИИ гриппа, для допуска к прививкам с учетом состояния здоровья и противопоказаний. Обе вакцины применялись согласно инструкции - однократно, интраназально с помощью одноразового шприца-дозатора, по 0,25 мл в каждый носовой ход. Плацебо вводили интраназально с помощью распылителя-дозатора РЖД-4М, однократно. Оценку органолептических свойств ЖГВ и Ультравака® проводили по специально разработанному опросному листу, который был предложен каждому прививаемому вакцинами. Для оценки реактогенных свойств вакцин у 100 человек в каждой группе привитых в течение 3-х дней после вакцинации проводили обязательную термометрию и медицинский осмотр. Для изучения иммуногенных свойств вакцин 145 парных сывороток крови (от 43 человек, привитых Ультраваком®, от 51 человека, привитого ЖГВ, и от 51 человека, получившего плацебо), взятых до и через 28 дней после иммунизации, были одномоментно исследованы в РТГА по стандартной методике для определения антител к вакцинным и эпидемическим штаммам вирусов гриппа. Для постановки РТГА использовались эритроциты человека. Сыворотки были предварительно обработаны рецепторразрушающим энзимом (RDE) производства японской фирмы Denka Seiken Co., LTD. Использовались диагностикумы: А/Новая Кале-дония/20/99(Н1 N1), А/Нью-Йорк/55/04(Н3№), В/Джанг-су/10/03.
Результаты и обсуждение
Был проведен расчет стандартных иммунологических показателей: частоты сероконверсий анти-НА у лиц с разными исходными уровнями титров антител, отрицательных логарифмов средних геометрических титров антител (СГТ), процента лиц с защитными титрами антител (^ 1:40) с помощью пакета программы Excel.
По данным Территориального управления федеральной службы Роспотребнадзора в Санкт-Петербурге, в октябре - декабре 2005 года не наблюдалось превышения эпидемического порога заболеваемости ни среди всего населения в целом по городу, ни по отдельным возрастным группам, что благоприятствовало вакцинации в выбранном коллективе. Прививали юношей в возрасте 16 - 17 лет (14 - 15 ноября 2005 г.), находящихся в организованном коллективе. Окончательно в исследовании участвовало 98 человек, привитых вакциной Ультравак®, 100 человек -ЖГВ на пептоне,100 человек - плацебо.
Непосредственно после вакцинации результаты опроса каждого привитого были занесены в специально разработанные анкеты, в которых омечались основные параметры органолептических свойств (наличие запаха, вкуса) и степень их выраженности, а также ассоциируемые с ними проявления (тошнота, головная боль, головокружение).
Среди привитых Ультраваком® только один человек (1,2%) заметил наличие сильного запаха, отсутст-
ИССЛЕЛОВАНИР
вие его отметили 54,1%, слабый запах обнаружили 44,9% привитых этой вакииной. В то же время 46,0% привитых ЖГВ охарактеризовали запах как сильный, 51,0% - как слабый и только 3% не почувствовали никакого запаха.
Одним из критериев пригодности гриппозных вакиин для иммунизаиии людей является их реакто-генность, то есть интенсивность и частота возникновения поствакиинальных реакиий и осложнений.
Кроме температурных, других реакиий в по-ствакиинальном периоде ни в одной из групп отмечено не было.
При этом необходимо иметь в виду, что повышение температуры тела у некоторой части привитых может быть следствием интенсивной ииркуляиии различных респираторных вирусов в осенне-зимний период, когда проводятся прививки. Слабые температурные реакиии (от 37,1 до 37,5 0С), количество которых не регламентируется требованиями к живой гриппозной вакиине (ФСП 42-0417409703), встречались у 2-х человек (2,0%) в группе привитых ЖГВ, их продолжительность не превышала одного дня и не приводила к нарушению трудоспособности. В группах привитых вакииной Ультравак® и плаиебо подъема температуры отмечено не было. Температурных реакиий средней (от 37,6 до 38,5 0С) и сильной (от 38,6 0С и выше) степени выраженности зарегистрировано не было ни в одной из групп привитых.
Иммуногенную активность вакиин оиенивали по основным показателям, характеризующим напряженность гуморального иммунитета, - по проиенту
лии с достоверными четырехкратными и более приростами титров антител после прививки, а также по среднегеометрическому титров антител и кратности прироста антител. Не менее важным показателем является проиент лии с условно-защитным уровнем антител (^ 1:40) в сыворотках крови после прививки. Эти показатели оиенивали как среди всех привитых, так и в группе серонегативных лии, то есть у лии с низким исходным титром антител « 1:10). Анализ результатов исследований показал, что ко всем трем вирусам - А(Н11Ч1), А(Н3Ы2) и В - отмеченная частота сероконверсий была на уровне стандартных требований, при этом несколько выше - среди вакиини-рованных Ультраваком®. К вирусу А(Н11Ч1) в группе серонегативных, привитых Ультраваком®, было отмечено 90,9% сероконверсий, среди привитых ЖГВ -68,4% ( р < 0,001). К вирусу А(Н3№) эти показатели составили соответственно 85,3% и 70,6%, к вирусу типа В - 79,3% и 71,05%. С защитными титрами антител (^ 1:40) во вторых сыворотках в группе серонегативных, привитых Ультраваком®, было соответственно 78,8% и 62,1% человек - к антигенам А(Н11Ч1) и В и несколько ниже - к антигену А(Н3Ы2), а именно 38,2%. Среди серонегативных, привитых ЖГВ, число лии с защитными титрами антител во вторых сыворотках к А(Н11Ч1), А(Н3Ы2) и В составило соответственно 50,0%, 38,6% и 57,9%. По этому показателю обе вак-иины оказались достаточно иммуногенными. Ко всем трем вирусам одновременно достоверные серокон-версии отмечены у 67,4% привитых вакииной Ультравак®, среди привитых ЖГВ - у 53,0%.
£
<
Таблица 1.
Показатели иммуногенной активности у вакцинированных ЖГВ и Ультраваком® (ноябрь - декабрь 2005 г.)
Препарат Антиген Титры Кол-во обслед. Конверсия СГТ1 СГТ2 Индекс прироста Уровень защиты
абс. % абс. %
Ультравак Н1ГМ1 < 1:10 33 30 90,9 8,6 43,5 5,0 26 78,8
0-320 43 37 86,1 11,2 52,6 4,7 35 81,4
НЗМ2 < 1:10 34 29 85,3 6,5 23,5 3,6 13 38,2
0-320 43 31 72,1 8,5 25,4 3,0 17 39,5
В < 1:10 29 23 79,3 7,5 30,0 4,0 18 62,1
0-320 43 33 76,7 10,8 41,3 3,8 30 69,8
Вакцина ЖГВ Н"Ш1 < 1:10 38 26 68,4 7,1 33,9 4,8 19 50,0
0-320 51 36 70,6 9,2 45 4,9 32 62,8
НЗМ2 < 1:10 44 31 70,5 6,6 22,0 3,3 17 38,6
0-320 51 33 64,7 8,2 26 3,2 24 47,1
В < 1:10 38 27 71,1 7,5 32,1 4,3 22 57,9
0-320 51 34 66,7 10 39 3,9 32 62,7
Плацебо тш < 1:10 32 3 9,4 6,9 12,7 1,8 1 3,1
0-320 51 4 7,84 11,3 18,9 1,7 13 25,5
НЗМ2 < 1:10 41 0 0,00 7,01 9,04 1,29 0 0,0
0-320 51 0 0,00 8,7 10,7 1,2 1 2,0
В < 1:10 39 1 2,56 8,1 10,4 1,3 1 2,6
0-320 51 1 1,96 10,1 12,6 1,2 4 7,8
исследование;
За период наблюдения (октябрь 2005 г. - январь 2006 г.) эпидемического подъема заболеваемости гриппом и ОРЗ в коллективе не отмечалось.
Выводы
В результате рандомизированных плацебо-конт-ролируемых наблюдений по сравнительной оценке иммуногенности, реактогенности и органолептиче-ских свойств вакцин Ультравак® и ЖГВ показано, что оба препарата проявили себя как ареактогенные, высокоиммуногенные и соответствующие по этим показателям медико-биологическим требованиям.
При оценке иммуногенной активности показатели вакцины Ультравак® превысили аналогичные показатели ЖГВ на пептоне. Анализ органолептических свойств выявил преимущества вакцины Ультравак® с новым стабилизатором М-2 по сравнению с ЖГВ на стабилизаторе пептон.
Таким образом, использование нового стабилизатора М-2 для живой гриппозной вакцины существенно улучшило иммуногенность и другие характеристики препарата, выпускаемого под товарным знаком «Ультравак®», и позволило успешно преодолеть проблему специфического запаха.
The Research of Influenza Vaccine Ultravac®
and Influenza Vaccine Virus Vaccine Egg-derived, Intranasal, Live, Dry
M.K. Erofeeva, V.L. Maksakova, M.G. Pozdnyakova, I.L. Kolivanova, E.M. Vojcehovskaya, V.M. Nikolaeva, T.I. Krainova Influenza Research Institute, St. Petersburg
There was conducted research of test and smell behavior Influenza vaccine Ultravac® (with new stabilizer M-2) and Influenza vaccine virus vaccine egg-derived, intranasal, live, dry (with peptone stabilizer).
2.
Литература
Дешева Ю.А., Данини Г.В., Григорьева Е.П. и др. Изучение безвредности, генетической стабильности и иммуногенности живой гриппозной вакцины для взрослых при вакцинации детей 3 - 6 лет // Вопр. вирусол. 2002. <4. С. 21 - 24. Ерофеева М.К., Максакова В.Л., Колыванова И.Л. и др. Актуальные проблемы специфической профилактики гриппа в России // Эпидемиология, лабораторная диагностика и профилактика вирусных инфекций. 2005. С. 211 - 212.
3.
4.
5.
Григорьева Е.П., Дорошенко Е.М., Руленко Л.Г. Вакцинопро-филактика гриппа с помощью живой гриппозной вакцины // Эпилемиология и вакцинопрофилактика. 2005. <4. С. 1 - 4. Карпухин Г.И. (рел.) Грипп. Руковолство лля врачей. -СПб.: Гиппократ, 2001. - 360 с.
Руленко Л.Г., Шварцман Я.С., Исполатова А.В. и лр. Сравнительная оценка безврелности, иммуногенной активности и профилактической эффективности взрослого и летского вариантов живой гриппозной вакцины у школьников 7 - 14 лет при станлартных метолах ввеления // Вопр. вирусол. 2002. <4. С. 24 - 27.
