CC BY
25
Материалы II Национального конгресса бактериологов
Инфекция и иммунитет
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА МЕТОДОВ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА ТРАНСПОРТНЫХ СРЕД
Т.П. Морозова, В.А. Андреева, Л.В. Домотенко, А.П. Шепелин, Е.Н. Миронова, И.Н. Шамичева
ФБУНГНЦприкладной микробиологии и биотехнологии Роспотребнадзора, п. Оболенск, Московская область
В РФ контроль качества транспортных сред рекомендуется проводить в соответствии с МУК 4.2.231608 «Методы контроля бактериологических питательных сред». За рубежом для контроля транспортных сред недавно внедрен стандарт M40-A2 «Quality Control of Microbiological Transport Systems», CLSI, 2014, который рекомендует использование двух методов контроля: полуколичественного Roll plate и количественного Swab Elution.
Цель работы: оценить эффективность трех методов для оценки качества транспортной среды Эймса.
Материалы и методы. Тестируемая среда: транспортная среда Эймса (ТС) без угля, сухая, разработанная в ФБУН ГНЦПМБ.
Тест-штаммы: P. aeruginosa АТСС 27853, H. influenzae ATCC 10211, S. pneumoniae ATC^ 6305, S .pyogenes Dick 1, S. aureus AT^ 25923, S. flexnery 1a8516, E. coli AT^ 25922.
Среду тестировали на способность сохранять и высвобождать в жизнеспособном состоянии культуры тест-штаммов после выдерживания ТС при комнатной температуре в течение 48 ч. По МУК тестирование проводили путем посева 1 мл суспензии каждой культуры в пробирки с ТС и по окончании экспозиции последующего высева по 0,1 мл содержимого пробирки на Шоколадный агар и среду № 1 ГРМ. Посев культур по стандарту M40-A2 проводили путем внесения в пробирку с ТС тампона-зонда, пропитанного 0,1 мл суспензии, и высева на Шоколадный агар и среду № 1 ГРМ после экспозиции, прокатывая тампон по всей площади чашки со средой для Roll plate метода или экстрагируя культуры из тампона в 1 мл физиологического раствора при Swab Elution методе и последующего высева на те же среды.
Результаты и обсуждения. Выполнение методики, рекомендованной МУК, вызывает ряд трудностей, связанных с невозможностью равномерно перемешать ТС с суспензией тест-штаммов и отобрать пробу для посева из-за высокого содержания агара в среде. Поэтому не удалось получить воспроизводимые результаты. Контроль ТС по Roll plate методу дает стабильные результаты, но он очень трудоемкий и требует большого количества ТС и других расходных материалов. Метод Swab Elution менее трудоемкий и позволяет определить точную концентрацию тест-штаммов. Результаты исследований тестируемой ТС двумя последними методами показали снижение концентрации S. pneumoniae и H. influenzae в 20 раз, S. pyogenes и S. aureus в 4,5 раза, а для S. flexnery, E. coli увеличение концентрации микробных клеток на 2 порядка.
Выводы. Методики, рекомендованные стандартом M40-A2, позволяют объективно оценить качество транспортных сред для исследованных микроорганизмов. Метод, рекомендованный МУК 4.2.2316-08, не отвечает международным требованиям по контролю агаризованных ТС.
