CC BY
29
УДК 616.62-006.6:612.461:577.112-07
© И.И. Майсков, В.М. Попков, Б.И. Блюмберг, Г.Е. Брилль, 2013
И.И. Майсков, В.М. Попков, Б.И. Блюмберг, Г.Е. Брилль
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА БЕЛКОВ МОЧИ КАК ПОТЕНЦИАЛЬНЫХ МАРКЕРОВ В ДИАГНОСТИКЕ РАКА МОЧЕВОГО ПУЗЫРЯ
ГБОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет имени В.И. Разумовского»
Минздрава России
Рак мочевого пузыря продолжает занимать одно из лидирующих мест среди онкоурологических заболеваний. Большинство известных онкомаркеров являются высокоспецифичными, однако ни один из них не является патогномоничным для рака мочевого пузыря. В настоящее время идет активное изучение протеома мочи. Постоянно выявляются новые белки, которые могут рассматриваться в качестве потенциальных маркеров для диагностики рака мочевого пузыря. Анализ белков мочи важен для понимания патогенеза онкологических заболеваний мочевыделительного тракта и весьма удобен, поскольку моча является легко доступным биологическим материалом и может быть собрана самими пациентами без каких-либо дополнительных затрат. Данный научный обзор посвящен анализу результатов, полученных разными авторами при изучении мочевого протеома в поисках маркеров рака мочевого пузыря.
Ключевые слова: рак мочевого пузыря, растворимые онкомаркеры мочи, протеомный анализ.
I.I. Mayskov, V.M. Popkov, B.I. Blumberg, G.E. Brill
THE COMPARATIVE VALUE OF PROTEINS IN THE URINE AS POTENTIAL MARKERS IN DIAGNOSTICS OF URINARY BLADDER CANCER
The cancer of urinary bladder is still on the leading place among oncological urological diseases. The majority of famous oncomarkers are highly specific but none of them are pathognomic for urinary bladder cancer. At present the active investigation of urine proteoma is done. The new proteins are discovered, they may be used as potential markers for diagnostics of urinary bladder cancer. The analysis of urine proteins is important for understanding pathogenesis of oncological diseases of urinary tract and may be the available biological material which may be collected by the patients themselves without additional wastes. This scientific review is devoted to analyses of results received by various authors in study of urinary proteoma searching the markers of urinary bladder cancer.
Key words: urinary bladder cancer, soluble urine oncomarkers, proteoma analysis.
Современная онкоурология обладает большим арсеналом возможностей в диагностике рака мочевого пузыря (РМП). Однако серьезной проблемой по-прежнему остается выявление как первичной опухоли, так и рецидива заболевания. У больных с впервые установленным диагнозом РМП поверхностные немышечно-инвазивные папиллярные опухоли (Та и Т1), представляющие собой начальную стадию заболевания, выявляются в 70-80 % случаев. После проведенной трансуретральной резекции (ТУР) более чем у 70 % пациентов в течение 2 лет наблюдается рецидив опухоли, а в 10-20 % случаев обнаруживается прогрессия заболевания с развитием глубоких мышечно-инвазивных форм РМП, требующих выполнения радикальной цистэктомии. При выявлении РМП на ранних стадиях, когда можно провести своевременное оперативное лечение, 5-летняя выживаемость пациентов достигает 94 % [25]. Однако часто возникающие рецидивы опухоли, а также высокий процент прогрессии требуют постоянного наблюдения за пациентами. Поэтому ранняя и точная диагностика РМП увеличивает выживаемость больных и улучшает прогноз.
Цистоскопия продолжает оставаться «золотым стандартом» окончательной диагностики и контроля за возникновением рецидива опухоли мочевого пузыря после проведенного лечения. Однако частые цистоскопии могут вызывать у пациентов неприятные ощущения, болезненность, дизурию, обострение простатита, цистита с уретральной лихорадкой, что значительно снижает качество жизни больных. Кроме того, данный метод является дорогостоящим и инвазивным.
Цитологическое исследование осадка мочи или смыва со стенок мочевого пузыря во время цистоскопии в настоящее время является стандартом неинвазивной диагностики РМП, широко распространенным в клинической практике [3]. Неинвазивность, высокая специфичность полученных
результатов, а также низкая стоимость исследования сделали данный метод широко используемым для скрининга РМП, диагностики карциномы in situ и мониторинга за возникновением рецидивов после лечения поверхностного рака мочевого пузыря. Однако данный метод имеет низкую чувствительность, а при высокодифференцированных опухолях (pTa-pT1G1-G2) часто дает ложноотрица-тельные результаты [5, 19]. Кроме того, этот метод является субъективным, и достоверность результатов существенно зависит от опыта и квалификации врача-лаборанта.
Дополнить цитологическое исследование и заполнить самостоятельную нишу в лабораторной диагностике РМП могут онкомаркеры, обнаружение которых в сыворотке и/или в моче можно было бы рассматривать как высокоэффективные диагностические показатели, способствующие точной диагностике заболевания [1].
Опухолевые маркеры - сложные вещества, чаще глико- или липопротеидной природы. Источником молекул-маркеров могут быть непосредственно клетки опухоли (в этом случае онкомаркеры образуются внутри опухолевых клеток, а затем экспрессируются на их поверхности) и клетки организма, непосредственно взаимодействующие с опухолью или активированные под действием веществ-индукторов, образующихся в опухоли (факторов роста, тканевых гормонов и т.д.) [23].
Идеальный маркер должен продуцироваться только клетками злокачественного новообразования и не должен определяться у здоровых людей, а также у лиц с доброкачественными поражениями. В настоящее время описано большое количество онкомаркеров, многие из которых высокоспецифичны, однако ни один из них не является патогномоничным для РМП. Исследование онкомаркеров затрудняется тем, что является достаточно трудоемким и дорогостоящим.
Многообразие уже применяющихся в клинической практике и перспективных онкомаркеров обусловливает необходимость их классификации. По цели определения опухолевые маркеры можно подразделить на скрининговые и диагностические маркеры, а также маркеры риска, рецидива, инвазии и метастазирования. По биологической функции маркеры делятся на опухолевые антигены, онкогены и продукты их экспрессии, регуляторы клеточного цикла, маркеры пролиферации, ангиогенеза, молекулы клеточной адгезии, протеазы внеклеточного матрикса и базальной мембраны, пептидные факторы роста и их рецепторы, маркеры апоптоза и др. [2]. По исследуемому материалу маркеры РМП делятся на сывороточные, тканевые и мочевые, последние из которых подразделяются на кле-точно-ассоциированные и растворимые [22].
В настоящее время во многих лабораториях мира идет активное изучение протеома мочи. Постоянно выявляются новые белки, которые могут рассматриваться в качестве потенциальных маркеров для диагностики РМП. Анализ белков мочи важен для понимания патогенеза онкологических заболеваний мочевыделительного тракта и весьма удобен, поскольку моча является легко доступным биологическим материалом и может быть собрана самими пациентами без каких-либо дополнительных затрат.
Данный научный обзор посвящен анализу результатов, полученных разными авторами при изучении мочевого протеома в поисках маркеров РМП.
В отличие от другого онкоурологического заболевания (рака предстательной железы), для РМП пока нет общепринятого онкомаркера, который может с точностью верифицировать данный диагноз у пациента. Тем не менее, существуют апробированные в клинической практике маркеры, ассоциированные с РМП. К числу одних из наиболее известных относят определение гематурии, антиген опухолей мочевого пузыря (bladder tumor antigen, BTA) [9], протеин ядерного матрикса (nuclear matrix protein, NMP-22), BLCA-4 и BLCA-1 (bladder cancer antigen), гиалуроновую кислоту и гиалурони-дазу, сурвивин, продукты деградации фибриногена, цитокератин 20 и уровень теломеразной активности мочи [18].
Маркером первой линии, который позволяет заподозрить наличие у пациента заболевания мо-чевыделительного тракта, является выявление гематурии с помощью тест-систем определения гемоглобина в моче. Хотя гематурия является частой находкой у больных с онкоурологическими заболеваниями, она также часто встречается и при воспалениях мочевого тракта, являющихся осложнением мочекаменной болезни, доброкачественной гиперплазии предстательной железы и некоторых других урологических заболеваний, что снижает специфичность данного метода при РМП до 67 % [13, 22]. Чувствительность гемоглобиновых тест-полосок колеблется в пределах от 46 до 71 % [22].
Большое внимание в клинических исследованиях уделяется определению в моче специфического антигена РМП - BTA. Предложены две разновидности методики, основанные на использовании моноклональных антител, - BTA-stat Test и BTA-TRAK Test. BTA-stat Test является экспресс-методом и может быть выполнен в кабинете врача [14]. BTA-TRAK Test обладает несколько большей
специфичностью, но может быть выполнен только в лаборатории. Чувствительность обоих тестов колеблется от 17 до 89 % и зависит от стадии, размера и степени дифференцировки опухоли [6, 8, 17, 20, 21]. Специфичность данных методов достигает 90 % [13]. Эти тесты повышают надежность цитологического исследования.
Другим известным маркером является NMP-22 - специфический, ассоциированный с опухолью белок ядерного матрикса, обнаруживаемый в моче при десквамации и лизисе клеток уротелия на фоне развития РМП. NMP-22 участвует в распределении хроматина во время репликации ДНК. Уровень данного белка в нормальных клетках, как правило, низкий, тогда как у пациентов с РМП он повышается в 25 раз и более. Чувствительность метода составляет 50-70 %, а специфичность - 60-90 % [18, 21].
BLCA-4 и BLCA-1 также являются белками ядерного матрикса. Они увеличивают скорость деления клеток и формируют характерный фенотип раковых клеток [24]. BLCA-4 выявляется с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) и имеет чувствительность 89,0-96,4 %, а его специфичность достигает 95-100 % [24]. Чувствительность определения BLCA-1 составляет около 80 %, а специфичность - 87 % [16]. Оба эти маркера с успехом используются в диагностике РМП.
Одним из хорошо зарекомендовавших себя тест-маркеров для выявления РМП является ИФА, включающий в себя определение гиалуроновой кислоты, гликозоаминогликана и нормального компонента тканевого матрикса, а также стромы опухоли и гиалуронидазы. Эти вещества хорошо представлены в опухоли и принимают заметное участие в ангиогенезе, росте, инвазии и метастазировании [11]. Данный тест имеет высокую чувствительность для обнаружения как низко-, так и высокодиффе-ренцированных опухолей, а также РМП на разных стадиях опухолевого процесса. Сообщается, что определение гиалуроновой кислоты и гиалуронидазы при РМП имеет чувствительность 83 %, специфичность - 78 %, положительную прогностическую ценность метода - 64 %, отрицательную прогностическую ценность - 90 % [7].
Еще одним потенциальным онкомаркером может служить белок сурвивин, который является членом семейства белков-ингибиторов апоптоза. Функция данного белка заключается в препятствии активации фермента каспазы, который играет важную роль в процессах апоптоза, некроза и воспаления. Ингибирование этого белка приводит к отрицательной регуляции апоптоза и запрограммированной клеточной смерти. Таким образом, сурвивин нарушает пути индукции, ведущие к активации апоптоза и снижению роста опухоли. В больших концентрациях этот белок представлен в тканях опухолей человека и некоторых тканях плода, но полностью отсутствует в терминально дифференцированных клетках. Ограниченные данные, опубликованные до настоящего времени, показывают, что это перспективный маркер с относительно высокой чувствительностью и специфичностью [13, 24].
Все вышеперечисленные молекулярные маркеры хорошо изучены и довольно широко применяются в диагностике РМП. Однако у них есть и свои недостатки, ограничивающие их использование в рутинной диагностике этого заболевания. Онкомаркеры относительно малодоступны, поскольку не все лаборатории оснащены необходимым оборудованием, специалистами и лабораторными наборами, которые и весьма дорогостоящи. Вместе с тем, они не обладают достаточно высокой чувствительностью и специфичностью, чтобы служить альтернативой цистоскопии и цитологическому исследованию в диагностике РМП. Поэтому их дальнейшее изучение и поиск более патогномоничных маркеров остается актуальной задачей современной онкоурологии. В этой связи большое развитие получает протеомика.
Протеомный анализ направлен на одновременное изучение многих индивидуальных белков, совокупность которых составляет определенную систему, характеризующую исследуемый объект в целом. Предметом изучения протеомики являются синтез, модификация, декомпозиция и замена белков исследуемого объекта. В настоящее время появились исчерпывающие базы данных о структуре всех белков человека и многих других организмов, а также их протеолитических фрагментов, полученных в стандартных условиях и позволяющих идентифицировать белки по молекулярной массе фрагментов их протеолиза. Развитие протеомики обусловлено использованием высокотехнологичных методов, позволяющих определить количество того или иного белка в образце, идентифицировать сам белок, его первичную структуру и пост-трансляционные модификации. В настоящее время большая часть работ в протеомике выполняется с использованием метода 2-D PAGE (two-dimensional Polyacrylamide gel electrophoresis) - двумерного гель-электрофореза в полиакриламиде. Однако в последнее десятилетие все более широкое применение получают высокотехнологичные методы, обладающие большей эффективностью, информативностью и чувствительностью, такие, как микросеквени-рование белков, высокоэффективная жидкостная хроматография, масс-спектрометрия (MS), а также использование белковых чипов с различными типами детекции, таких, как SELDI Protein Chip (surface-
enhanced laser desorption/ionization). Белковые чипы основаны на связывании определенных белков со специфическими для них молекулами. Взаимодействие может строиться по типу антиген - антитело, рецептор - лиганд, ДНК - белок, белок - белок, фермент - субстрат или белок - липид. Чипы считыва-ются и идентифицируются с помощью масс-спектрометрии с лазерной десорбцией и ионизацией.
В настоящее время применение методов протеомного анализа в медицине позволяет выявить маркеры сердечно-сосудистых и онкологических заболеваний на ранних стадиях (клиническая протеомика). Клиническая протеомика - это идентификация и количественное определение всех индивидуальных белков, которые содержатся в биологическом образце (сыворотка крови, спинномозговая жидкость, моча, ткань) и мониторинг изменения их концентраций. Методы протеомного анализа позволяют проанализировать до 10 000 индивидуальных белков в одном образце и зафиксировать изменения их концентраций, что позволяет проводить диагностику и мониторинг течения заболевания [15].
В научной литературе имеются данные о новых белках, которые выявлены с помощью методов протеомного анализа и потенциально могут быть использованы в диагностике РМП.
Большую научную и практическую значимость представляют результаты одного масштабного исследования [23], позволившего выявить нескольких сотен белков мочи у пациентов с РМП и лиц группы контроля. Из 387 идентифицированных и количественно оцененных белков при РМП 157 (40 %) пересекались с белками, обнаруживаемыми в моче здоровых добровольцев. Таким образом, более двухсот белков были ассоциированы с РМП. Однако в других исследованиях [2] анализ низкомолекулярных пептидов мочи позволил идентифицировать только 22 полипептида, которые потенциально могут быть использованы в диагностике РМП [5].
Сузить круг потенциальных онкомаркеров смогли авторы [12], установившие 29 белков мочи, которые достоверно выше выявлялись в образцах от пациентов с РМП, чем в контроле (p < 0,05). Использование в дальнейшем метода WB (Western blotting) подтвердило повышенную встречаемость при РМП уже четырех белков: предшественника ß-цепей фибриногена (FGB, fibrinogen beta chain), аполипопротеина Е (APOE, Apolipoprotein E), a-1-антитрипсина (SERPINA1, serpin peptidase inhibitor, clade A - alpha-1 antiproteinase or antitrypsin) и богатого лейцином a-2-гликопротеина (LRG1, Leucine-rich alpha-2-glycoprotein 1). На следующем этапе более тонкий анализ DB (Dot blot) независимых образцов мочи выделил ß-цепи фибриногена и a-1-антитрипсин как наиболее интересные биомаркеры, имеющие чувствительность и специфичность в диапазоне 66-85 %. При сопоставлении выявленных белков с ткань-специфичными протеинами, представленными в «Атласе белков человека» (Human Protein Atlas, НРА), было установлено, что источником этих белков, вероятнее всего, являются опухоли мочевого пузыря.
В целом, белки FGB, APOE, SERPINA1 и LRG1, по данным НРА, при окрашивании выявлялись в более высокой концентрации в тканях РМП по сравнению с морфологически нормальной тканью. Таким образом, выявленные белки мочи от больных с РМП Та/Т1 могут быть результатом повышенной экспрессии в опухолевых клетках. Но поскольку морфологически нормальная ткань, использованная в HPA, была получена от пациентов с РМП после удаления опухолевой ткани, она не может в полной мере соответствовать тканям здоровых лиц группы контроля в клинических исследованиях.
Примечательно, что все четыре обсуждаемых белка-кандидата рассматриваются как связанные с раком. FGB является одним из трех компонентов (a-, ß- и у-) фибриногена. Ранее сообщалось, что белки FGB и фибриногена встречаются при раке. Например, обнаружение продукта деградации фибриногена (fibrinogen degradation protein, FDP) в моче используется для диагностики рецидива РМП [19]. FDP включает фрагменты a-, ß- и у-цепей, но в данном исследовании было продемонстрировано, что FGB является лучшим представителем в смысле диагностической значимости при РМП. По результатам WB-анализа, продукты деградации FGB наблюдались в большем количестве в моче у больных с РМП по сравнению с контролем. У небольшого количества больных с РМП ни FGB, ни продукты его деградации не обнаруживались. Обнаружение фибрина в строме опухоли могло бы являться результатом его проникновения из кровяного русла под действием фактора роста эндотелия сосудов А в ходе пропотевания белков плазмы, таких, как фибриноген, в ткань [14, 22]. Однако данные HPA четко продемонстрировали, что появление FGB в раковой ткани является результатом генной экспрессии.
Среди других оцениваемых протеинов АРОЕ не показал высокой специфичности, поскольку, по данным НРА, выявлялся в повышенных концентрациях также при раке яичников и при некоторых других видах рака [17].
Острофазовый белок SERPINA1 тоже не является высокоспецифичным при РМП, поскольку экспрессируется на HLA-позитивных (человеческий лейкоцитарный антиген) цервикальных карци-
номах [20] и показал ассоциацию с инвазивными и потенциально метастазирующими клетками карциномы легких in vitro [6].
Белок LRG1, вовлеченный в сигнальную передачу сигнала, взаимодействие между белками, клеточную адгезию и развитие [8], был ассоциирован с раком предстательной железы в исследованиях по изучению протеома, экскретированного клетками рака простаты линии РС3 (prostate cancer). Нельзя исключить, что белок LRG1 может экскретироваться клетками РМП в мочу. Это, в свою очередь, может означать, что некоторые из белков, наиболее часто обнаруживаемых в моче больных с РМП по сравнению с контролем в данном исследовании, в том числе SERPINA1, являются экскрети-руемыми белками [21].
Большинство пациентов в данном исследовании [12] имели ранние стадии немышечноинвазивно-го РМП (Та/Т1), что делает изучаемые белки-кандидаты важными потенциальными маркерами раннего выявления заболевания или его рецидивирования. Изучение мышечноинвазивных опухолей, Т2-Т4 также может быть интересным, но первоначальные эксперименты показали, что моча этих пациентов сложна в изучении, поскольку высоко контаминирована клеточными компонентами и кровью.
Одним из новых, активно изучающихся в настоящее время белков мочи, который рассматривается как потенциальный кандидат в онкомаркеры РМП, является кальретикулин. Кальретикулин (CRT, Calreticulin), или кальрегулин, - кальцийсвязывающий белок, который играет роль буфера в эндоплазматическом ретикулуме клеток. Его повышенная концентрация отмечается в опухолевых тканях. В исследовании [10] изучался протеом, выделенный методом двухмерного электрофореза в узком рН-диапазоне из образцов тканей РМП, полученных в ходе трансуретральной резекции или радикальной цистэктомии, и здорового уротелия. Данный белок определялся методом WB. Для выявления CRT в ткани опухоли и моче использовались антитела против кальретикулина.
Анализ протеома и количественный анализ WB показал, что содержание CRT было повышено в опухолевой ткани (р = 0,0003). CRT мочи имел чувствительность 73 % при специфичности - 86 % (80-91 %) для РМП в исследуемых образцах. Диагностическая точность CRT мочи для РМП оказалась сопоставимой с требуемой FDA (Food and Drug Administration) для маркеров мочи. Однако для определения его диагностической роли при РМП необходимы дальнейшие исследования.
В исследованиях других авторов [4] объектом изучения стало качественное определение DEK-белка в ткани опухоли и моче больных с РМП. Ученые проводили изучение экспрессии DEK-протеина методом WB в 38 парах переходноклеточных карцином мочевого пузыря и нормальной окружающей ткани. Наличие DEK-белка в проходящей моче было проанализировано методом WB в 42 образцах мочи, собранной от пациентов с активной переходноклеточной карциномой мочевого пузыря, другими злокачественными опухолями мочевыводящего тракта и здоровых лиц. При этом DEK-протеин экс-прессировался в 33 опухолях из 38 и не выявлялся в здоровой окружающей ткани. По данным представленной выборки, DEK-протеин экспрессировался в 100 % случаев опухолей с высокой степенью дифференцировки, 92 % опухолей средней степени дифференцировки и в 71 % случаев опухолей низкой степени дифференцировки. Далее было проанализировано 42 образца мочи больных с переход-ноклеточным РМП, доброкачественными опухолями урогенитального тракта и здоровых индивидуумов. При этом впервые было показано, что DEK-протеин представлен в моче больных с РМП. Приблизительно у 84 % пациентов с опухолью мочевого пузыря выявлялся онкопротеин DEK. По результатам данного пилотного исследования, наличие DEK-белка в моче потенциально является пригодным маркером РМП и поэтому может использоваться в скрининге РМП как неинвазивный метод.
Таким образом, несмотря на многообразие потенциальных онкомаркеров, диагностическая значимость их при РМП остается малоизученной. Требуется проведение исследований для выявления специфичных маркеров, которые могут быть включены в стандарты обследования пациентов с РМП.
Список литературы
1. Бабаян, А. Ю. Молекулярно-генетические маркеры как факторы прогноза течения поверхностного рака мочевого пузыря / А. Ю. Бабаян, С. В. Башкатов, О. Б. Карякин и др. // Онкоурология. - 2009. - № 3. - С. 19-24.
2. Корнеев, И. А. Оценка факторов риска у больных раком мочевого пузыря : автореф. дис. ... канд. мед. наук / И. А. Корнеев. - СПб., 1996. - 21 с.
3. Broders, A. C. Epithelioma of genitourinary organs / A. C. Broders // Ann. Surg. - 1922. -Vol. 75. - P. 574.
4. Datta, A. Oncoprotein DEK as a tissue and urinary biomarker for bladder cancer / A. Datta, M. E. Adelson, Y. Mogilevkin et al. // BMC Cancer. - 2011. - Vol. 11. - P. 234.
5. Glas, A. S. Tumor markers in the diagnosis of primary bladder cancer. A systematic review / A. S. Glas, D. Roos, M. Deutekom et al. // The Journal of Urology. - 2003. - Vol. 169. - P. 1975-1982.
6. Gutierrez Banos, J. L. Usefulness of the BTA STAT test for the diagnosis of bladder cancer / J. L. Gutierrez Banos, M. del Henar Rebollo Rodrigo, F. M. Antolin Juarez, B. M. Garcia // Urology. - 2001. - Vol. 57, № 4. - P. 685-689.
7. Hautmann, S. Immunocyt and the HA-HAase urine tests for the detection of bladder cancer : a side-by-side comparison / S. Hautmann, M. Toma, M. F. Lorenzo Gomez et al. // Eur. Urol. - 2004. -Vol. 46, № 4. - P. 466-471.
8. Irani, J. BTA stat and BTA TRAK : a comparative evaluation of urine testing for the diagnosis of transitional cell carcinoma of the bladder / J. Irani, F. Desgrandchamps, C. Millet et al. // Eur. Urol. - 1999. -Vol. 35. - P. 89-92.
9. Jovanovic, M. Evaluation of the Bard BTA-test in the diagnosis of upper urinary tract tumours / M. Jovanovic, J. Hadzi-Djokic, Z. Dzamic et al. // Acta Chirurgica Iugoslavica. - 2007. - Vol. 54, № 4. -P. 19-24.
10. Kageyama, S. Identification by Proteomic Analysis of Calreticulin as a Marker for Bladder Cancer and Evaluation of the Diagnostic Accuracy of Its Detection in Urine / S. Kageyama, T. Isono, H. Iwaki et al. // Clinical Chemistry. - 2004. - Vol. 50. - P. 857-866.
11. Lokeshwar, V. B. HYAL1 hyaluronidase : a molecular determinant of bladder tumor growth and invasion / V. B. Lokeshwar, W. H. Cerwinka, B. L. Lokeshwar // Cancer Res. - 2005. - Vol. 65, № 6. -P. 2243-2250.
12. Linden, M. Proteomic analysis of urinary biomarker candidates for nonmuscle invasive bladder cancer / M. Linden, S. B. Lind, C. Mayrhofer et al. // Proteomics. - 2012. - Vol. 12, № 1. - P. 135-144.
13. Lokeshwar, V. B. Bladder tumor markers beyond cytology : International Consensus Panel on bladder tumor markers / V. B. Lokeshwar, T. Habuchi, H. B. Grossman et al. // Urology. - 2005. - Vol. 66. -P.35-63.
14. Lokeshwar, V. B. Current bladder tumor tests : does their projected utility fulfill clinical necessity? / V. B. Lokeshwar, M. S. Soloway // J. Urol. - 2001. - Vol. 165. - P. 1067-1077.
15. Conrotto, P. Proteomic approaches in biological and medical sciences : principles and applications / P. Conrotto, S. Souchelnytskyi // Exp. Oncol. - 2008. - Vol. 30, № 3. - P. 171-180.
16. Meyers-Irvin, J. Use of the novel marker BLCA-1 for the detection of bladder cancer / J. Meyers-Irvin, D. Landsittel, R. Gertzenberg // J. Urol. - 2005. - Vol. 174. - P. 64-68.
17. Mian, C. Comparison of two qualitative assays, the UBC rapid test and the BTA stat test, in the diagnosis of urothelial cell carcinoma of the bladder / C. Mian, M. Lodde, A. Haitel et al. // Urology. - 2000. -Vol. 56. - P. 228-231.
18. Ramakumar, S. Comparison of screening methods in the detection of bladder cancer / S. Ramakumar, J. Bhuiyan, J. A. Besse et al. // J. Urol. - 1999. - Vol. 161, № 2. - P. 388-394.
19. Ross, J. S. Ancillary methods for the detection of recurrent urothelial neoplasma / J. S. Ross, M. B. Cohen // Cancer. - 2000. - Vol. 90. - P. 75-86.
20. Sarosdy, M. F. Improved detection of recurrent bladder cancer using the Bard BTA stat Test / M. F. Sarosdy, M. A. Hudson, W. J. Ellis et al. // Urology. - 1997. - Vol. 50. - P. 349-353.
21. Serretta, V. Urinary BTA-stat, BTA-trak and NMP22 in surveillance after TUR of recurrent superficial transitional cell carcinoma of the bladder / V. Serretta, G. Pomara, I. Rizzo, et al. // Eur. Urol. - 2000. -Vol. 38. - P. 419-425.
22. Tetu, B. Diagnosis of urothelial carcinoma from urine / B. Tetu // Modern Pathology. - 2009. -Vol. 22. - P. 53-59.
23. Volpe, A. Bladder tumor markers: a review of the literature / A. Volpe, M. Racioppi, D. D'Agostino et al. // The International Journal of Biological Markers. - 2008. - Vol. 23, № 4. -P.249-261.
24. Vrooman, O. P. J. Molecular markers for detection, surveillance and prognostication of bladder cancer. Review Article / O. P. J. Vrooman, J. A. Witjes // International Journal of Urology. - 2009. -Vol. 16. - P. 234-243.
25. Yang, N. Urinary glycoprotein biomarker discovery for bladder cancer detection using LC/MS-MS and label-free quantification / N. Yang, S. Feng, K. Shedden et al. // Clinical Cancer Research. - 2011. -Vol. 17, № 10. - P. 3349-3359.
Майсков Илья Игоревич, аспирант кафедры урологии, ГБОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского» Минздрава России, Россия, 410012, г. Саратов, ул. Большая Казачья, д. 112, тел.: 8-927-229-43-34, e-mail: mayskov_ilya@mail.ru.
Попков Владимир Михайлович, кандидат медицинских наук, доцент, заведующий кафедрой урологии, ректор, ГБОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского» Минздрава России, 410012, г. Саратов, ул. Большая Казачья, д. 112, тел.: (8452) 27-33-70, e-mail: meduniv@sgmu.ru.
Блюмберг Борис Исаакович, профессор кафедры урологии», ГБОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского», Минздрава России, 410012, г. Саратов, ул. Большая Казачья, д. 112, тел.: (8452) 27-33-70, e-mail: meduniv@sgmu.ru.
Брилль Григорий Ефимович, доктор медицинских наук, профессор кафедры патологической физиологии, ГБОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского» Минздрава России, 410012, г. Саратов, ул. Большая Казачья, д. 112, тел.: (8452) 27-33-70, e-mail: meduniv@sgmu.ru.
УДК 618.39:616.9-07
© В.С. Орлова, А.А. Должиков, И.В. Калашникова, Ю.И. Набережнев, С.Ю. Шеховская, 2013
В.С. Орлова, А.А. Должиков, И.В. Калашникова, Ю.И. Набережнев, С.Ю. Шеховская
СОВРЕМЕННОЕ ПОНИМАНИЕ ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЙ РОЛИ ИНФЕКЦИОННЫХ АГЕНТОВ ЭКСТРАГЕНИТАЛЬНЫХ БИОТОПОВ В НЕДОНАШИВАНИИ БЕРЕМЕННОСТИ*
ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»
Минобрнауки России
Рассмотрены данные, отражающие современные взгляды ученых на проблему преждевременных родов инфекционного генеза. Проанализирована роль грамотрицательной анаэробной микрофлоры периодонтальных пространств в досрочном прерывании беременности на фоне преждевременного излития вод. Предполагается, что бактерии периодонтальных биотопов и их вирулентные факторы индуцируют местный иммунный ответ в виде выброса провоспалительных цитокинов. Если иммунный ответ не способен локализовать инфекцию, она приобретает системный характер путем циркуляции в крови и вызывает иммунный ответ организма на системном уровне. Усиленная продукция цитокинов в области фето-плацентарного комплекса способствует разрыву плодовых оболочек и инициирует сокращение матки, вызывая родовую деятельность.
Ключевые слова: беременность, преждевременные роды, преждевременный разрыв оболочек, микрофлора периодонта.
V.S. Orlova, A.A. Dolzhikov, I.V. Kalashnikova, Yu.I. Naberezhnev, S.Yu. Shekhovskaya
THE MODERN UNDERSTANDING OF THE PATHOGENIC ROLE OF INFECTIOUS AGENTS OF PERIODONTAL BIOTOPES IN THE PREMATURITY
The modern views of scientists on the problem of premature birth of infectious origin are presented. The role of gram-negative anaerobic microflora of periodontal spaces was examined in the early termination of pregnancy with premature rupture of water. It was assumed that periodontal bacteria and virulence factors induced the local immune response in the form of proinflammatory cytokines. If the immune response was not able to localize the infection, it became systemic, circulating in the blood and caused the body immune response at the systemic level. Cytokine production in the field of placenta promoted rupture of amniotic membrane and triggers contractions of the uterus causing generic activities.
Key words: pregnancy, preterm labor, premature rupture of the membranes, microflora ofperiodontal.
С инфицированием плодного яйца в современном акушерстве связаны многие осложнения и неблагоприятные исходы беременности. В ранние сроки они представлены самопроизвольными вы-
* Статья подготовлена в рамках выполнения ГК № 02.740.11.0712.
