CC BY
76
УДК 617.7
Зайнутдинова Г.Х., Шевчук Н.Е., Мальханов В.Б., Сергеева О.А.
Государственное учреждение «Уфимский НИИ глазных болезней»
Академии наук Республики Башкортостан, г Уфа
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЦИТОКИНОВОГО ПРОФИЛЯ ПРИ УВЕИТАХ ГЕРПЕТИЧЕСКОЙ ЭТИОЛОГИИ И НА ФОНЕ РЕВМАТИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
Проведено сравнительное изучение содержания цитокинов в сыворотке крови 24 пациентов с увеитом герпетической этиологии и 28 - на фоне ревматических заболеваний. Установлено, что увеит при системных ревматических заболеваниях характеризуется более значимым увеличением продукции провоспалительных цитокинов IL-1 ß, TNF-a, IL-2, тогда как герпетической этиологии - IL-1RA и IFN-y.
Ключевые слова: содержание цитокинов, увеит герпетической этиологии
Актуальность
Изучение патогенеза эндогенных увеитов остается важной проблемой ввиду высокой частоты заболеваемости лиц в молодом трудоспособном возрасте, развития слепоты или слабо-видения у 10-35% и инвалидизации у 35% переболевших [5, 14].
Рядом исследователей при развитии увеи-тов отмечается выраженный дисбаланс продукции про- и противовоспалительных цитокинов [2, 3, 6, 10]. Так, одни авторы обнаруживают в остром периоде неинфекционного воспаления увеального тракта существенное увеличение в сыворотке крови и в слезной жидкости концентрации цитокинов 1Ь-2 и ТКР-а [15], другие -значительное повышение уровней №N-7 и ТОТ-а [4]. При офтальмогерпесе отмечается увеличение уровней №N-7 и TNF-a и недостаточная выработка защитного 1Ш-а [7, 8]. В других исследованиях при этой патологии обнаружено повышение концентрации также и INF-a как в сыворотке крови, так и в слезе [1, 12].
Вышеприведенные факты показывают, что имеющиеся данные о сходстве и различиях баланса цитокинов при различной этиологии увеитов носят разрозненный и противоречивый характер.
Цель исследования
Сравнительное изучение уровней цитокинов в сыворотке крови при увеитах герпетической этиологии и на фоне ревматических заболеваний.
Материал и методы
Проведено исследование сыворотки крови 24 больных с увеитом герпетической этиологии и 28 - при системном ревматическом заболевании (РЗ). Возраст больных колебался от 25 до
68 лет (в среднем 37,7±5,3). Мужчины составили 48,0%, женщины - 52,0%. Группа контроля состояла из 15 практически здоровых лиц этой же возрастной группы.
Содержание цитокинов определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа согласно инструкциям, прилагаемым производителями тест-систем. Материалом для исследования служила кровь из локтевой вены больных, которую забирали в строго стерильных условиях натощак в 8 часов утра.
Количественное определение цитокинов (1Ь-1р, 1Ь-№А, 1Ь-2, 1Ь-4, 1Ь-6, ТОТ-а, 1Ш-а, №N-7) в сыворотке крови пациентов проводили с помощью тест-систем «Ргосоп» (С.-Петербург, Россия), «Вектор-Бест» (Новосибирск, Россия). Результаты учитывали на фотометре для микропланшетов «МиШзсап» при длине волны 450 нм и выражали в пкг/мл.
В динамике заболевания всем больным проводили офтальмологическое обследование, включающее визометрию, биомикроскопию, офтальмоскопию, периметрию, тонометрию, А-скани-рование, по показаниям - В-сканирование.
При установлении этиологии увеита использовали данные клинической картины и лабораторных исследований. Все пациенты осматривались терапевтом, стоматологом, ЛОР-врачом, фтизиоокулистом, ревматологом.
Результаты исследования были обработаны стандартными методами параметрической и непараметрической статистики.
Результаты и обсуждение
В острой стадии увеитов в целом, как видно из таблицы 1, средние уровни 1Ь-1р, 1Ь-1ИА, Т№-а, 1Ь-6, 1Ь-4, !Ш-а и !Ш-у в сыворотке кро-
ви были достоверно выше сравнительно со значениями у здоровых лиц. После проведенного лечения происходило снижение уровней 1Ь-6 и IFN-Y (р<0,05) при параллельном статистически значимом повышении содержания 1Ь-4 и 1Ь-2 (р<0,05). В то же время средний уровень 1Ь-1р и его рецепторного антагониста - 1Ь-1ИА, других цитокинов - TNF-а, №^а при выздоровлении оставался выше контрольных значений (р<0,001).
Острая стадия увеита при РЗ (табл. 2) характеризовалась статистически значимым (р<0,05) повышением средних уровней изучаемых в сыворотке крови цитокинов, за исключением №^а. При купировании воспалительного процесса происходило достоверное снижение концентрации ТОТ-а, 1Ь-6 и №N-7 (р<0,001).
Все периоды герпетического увеита (табл. 2) в отличие от ассоциированного с РЗ сопровождались статистически значимым повышением среднего уровня №N-7 (р<0,05) и тенденцией к повышению - №^а в сыворотке крови. В отличие от увеита на фоне РЗ у больных с герпетическим увеитом содержание 1Ь-1р в сыворотке крови не менялось, тогда как, напротив, достоверно значимо, сравнительно с контролем, возрастал средний уровень его антагониста - 1Ь-ША (р<0,001).
Кроме того, сравнительный анализ содержания цитокинов в сыворотке крови больных выявил отличие в содержании TNF-а и 1Ь-2. Известно, что TNF-а наряду с №N-7 относят к противовирусным цитокинам [11]. Однако в на-
Таблица 1. Уровни цитокинов в сыворотке крови при эндогенных увеитах, пкг/мл
Цитокины Содержание цитокинов у больных увеитом, n=52
контроль до лечения после лечения
IL-1 ß 34,3+5,6 203,2+37,3** 259,4+103,1**
IL-1RA 147,4+56,5 808,4+81,8** 579,2+62,8*
TNF-a 40,5+9,3 140,9+3б,б* 98,2+25,2
IL-6 44,б+7,0 779,5+44,6** 453,1+39,0*
IL-2 426,0+55,2 547,8+52,0 754,0+87,1**
IFN-a 15,8+4,2 31,0+4,9* 38,8+10,3*
IFN-y 415,2+106,3 1274,7+208,2** 816,5+83,0*
IL-4 37,8+5,8 84,2+19,3* 114,6+32,5*
* - достоверность различия по сравнению с контролем р<0,05; ** - р<0,001.
Таблица 2. Уровни цитокинов в сыворотке крови при увеите на фоне ревматического заболевания и герпетической этиологии, пг/мл
Цитокины Контрольная группа Увеит
при ревматических заболеваниях герпетической этиологии
до лечения после лечения до лечения после лечения
IL-1 ß 34,3+5,6 119,0+15,9* 128,4+19,1* 58,0+15,9 64,4+39,1
IL-1RA 147,4+56,5 503,6+43,6* # 376,4+47,1* # 847,5+102,6 * # 680,4+62,2* #
TNF-a 40,5+9,3 189,8+18,3* # ” 71,7+19,4” 90,8+18,3* # 76,7+19,4
IL-2 426,0+55,2 748,4+40,1* 862,3+40,2* # 347,5+42,6 192,8+27,6 * #
IL-6 44,6+7,0 794,5+42,6* ” 284,8+27,7 * # ” 764,3+93,4* 658,6+77,2* #
IL-4 37,8+5,8 92,6+20,1* 71,7+21,5 * # 79,6+18,3* ” 253,6+36,5 * # ”
IFN-a 15,8+4,2 12,1+3,0 6,82+1,4* # 49,2+24,6 87,4+36,3 #
IFN-y 415,2 + 106,3 1036,7+41,0* ” 406,3+31,4# ” 1623,6 + 252,4* 1510,0 + 274,2* #
* - достоверность различий с контролем р<0,05;
# - достоверность различий между группами с увеитом различной этиологии р<0,05-0,001; " - достоверность различий до и после лечения р<0,001.
Зайнутдинова Г.Х. и др.
Сравнительная характеристика цитокинового профиля..
ших исследованиях более существенное накопление TNF-a отмечалось в остром периоде увеитов на фоне РЗ, чем герпетических, который соответственно в 4,7 и 2,2 раза превышал значения в контроле. Что касается концентрации IL-2, то при увеите на фоне РЗ его средний уровень был выше контроля во все периоды заболевания, в то время как при герпетической этиологии отмечалось достоверное снижение его значений после лечения (p<0,05). Концентрации IL-6 и IL-4 в сыворотке крови были высокими в обеих исследуемых группах больных на всех стадиях болезни, причем их уровни при выздоровлении были выше при герпетических увеитах в сравнении с таковыми при РЗ (p<0,05).
Проведенный сравнительный анализ профиля цитокинов при увеитах герпетической этиологии и ассоциированных с РЗ выявил более значимое увеличение концентрации провоспа-лительных цитокинов IL-1 ß, TNF-a, IL-2 при системных ревматических заболеваниях, тогда как при герпесвирусном процессе отмечали существенный рост уровней IL-1RA и IFN-y, т. е. активизацию первого звена противовирусного иммунного ответа. Наблюдающийся значительный рост IL-4 на стадии реконвалесценции увеита герпетической этиологии является еще одним свидетельством того, что динамика цитоки-нов зависит от этиологии и стадии воспалительного процесса в сосудистой оболочке глаза.
Результаты наших исследований не противоречат данным других авторов о том, что воспаление, обусловленное активацией герпетической инфекции, всегда происходит на фоне нарушений цитокинового профиля, в основном баланса цитокинов Th1/Th2, причем в иммунном ответе доминируют провоспалительные и Th1 цитокины [13].
Антагонист ІЬ-1 в - ІЬ-ША, являясь важным регулятором физиологической активности ІЬ-1, конкурирует с ним за ингибирование рецепторов. При недостаточном уровне эндогенного ІЬ-1 ИА и высокой концентрации ІЬ-1 в происходит связывание последнего с рецепторами в большей степени, что приводит к развитию провоспалительного иммунного ответа [9]. Подтверждением этого служат экспериментальные исследования, в результате проведения которых установлено развитие ревматоидного артрита у дефицитных по ІЬ-1ИА мышей на фоне усиления синтеза про-воспалительных цитокинов, в т. ч. и ІЬ-1 [16]. Полученные нами результаты о содержании ІЬ-1р и ІЬ-ША у пациентов с увеитами на фоне РЗ согласуются с вышеприведенными данными других исследователей. Так, нами установлено, что для герпетических увеитов характерна высокая секреция ІЬ-ША, т. е. преобладание противовоспалительного компонента, в отличие от ассоциированных с РЗ увеитов.
Заключение
Проведенное нами сравнительное исследование цитокинового профиля у больных с увеи-тами герпетической этиологии и на фоне ревматических заболеваний позволяет заключить, что развитие этой офтальмопатологии, сопровождающееся транзиторными изменениями содержания цитокинов в сыворотке крови, зависит от этиологии и стадии воспалительного процесса в сосудистой оболочке глаза. Это открывает новые подходы к прогнозированию клинического течения увеитов и проведению патогенетически обоснованной иммунокорригирующей терапии.
Список использованной литературы:
1. Алексеев В.Н., Кетлинская О.С., Грузинова Т.Л. Цитокины в слезной жидкости, их роль в патогенезе офтальмогерпеса // Вестн. Рос. Акад. наук. - 1996. - №1. - С. 57-59.
2. Глазанова Т.В., Бубнова Л.Н., Мазуров В.И. Способность иммунокомпетентных клеток периферической крови больных ревматоидным артритом и системной красной волчанкой к синтезу цитокинов с про- и противовоспалительными функциями // Цитокины и воспаление. - 2002. - №1. - С. 33-37.
3. Дроздова Е.А. Увеит при ревматических заболеваниях: особенности клиники, диагностика, иммунопатогенез и лечение: Автореф. ... дисс. докт. мед. наук. - Челябинск, 2006. - 48 с.
4. Дроздова Е.А. Взаимодействие цитокинов и оксида азота в реализации иммунного воспаления при увеите ревматической этиологии // Мат-лы научно-практ. конф. «Офтальмоиммунология. Итоги и перспективы». - М., 2007. - С. 107-109.
5. Катаргина Л.А., Архипова Л.Т. Увеиты: патогенетическая иммуносупрессивная терапия. М., 2004. - 100 с.
6. Слепова О.С., Денисова Е.В., Катаргина Л.А., Мешкова Г.И. Роль и особенности нарушений в системе цитокинов при развитии пролиферативных осложнений у детей с периферическими увеитами // Офтальмоиммунология. Итоги и перспективы: сб. науч. тр. - М., 2007. - С. 260-264.
7. Слепова О.С., Илуридзе С.Л. Значение иммунологических исследований при воспалительной, посттравматической и послеоперационной патологии роговицы // Мат-лы научно-практ. конф. «Офтальмоиммунология. Итоги и перспективы». - М., 2007. - С. 265-270.
8. Черешнева М.В., Бахметьев Б.А., Сидоров Д.В., Дианова Д.Г. Исследование цитокинов в сыворотке крови больных с воспалительными заболеваниями глаз // Цитокины и воспаление. - 2002. - №2. - С. 135.
9. Arend WP, Gabay C. Physiologic role of interleukin-1 receptor antagonist // Arthritis Res. - 2000. - N. 2. P. 245-248.
10. Caspi R. Autoimmunity in the immune privileged eye: pathogenic and regulatory T cellsi // Immunol. Res. - 2008. Vol. 42. -N 1-3. - P. 41-50.
11. Cunningham E.T. Jr., Stalder A., Sanna P.P. et al. Localization of tumor necrosis factor receptor messenger RNA in normal and herpes simplex virus-infected mouse eyes // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. - 1997. - Vol. 38. - N 1. - P. 9-15.
12. Ghanekar S., Zheng L., Logar A., et al. Cytokine expression by human peripheral blood dendritic cells stimulated in vitro with HIV-1 and herpes simplex virus // J. Immunol. - 1996. - Vol. 157. - N 9. - P. 4028-4036.
13. Hukkanen V., Boberg E., Salmi A., Erceinna J.P Cytokines in experimental herpes simplex virus infection // Int. Rev. Immunology. - 2002. - Vol. 21. - N 4-5. - P. 355-371.
14. Rothova A, Suttorp-Schulton M, Frits TW. Causes and frequency of blindness in patients with intraocular inflammatory disease // Br. J. Ophthalmol. 1996. - Vol. 80. - P. 332-336.
15. Torun N., Callizo J., Orlic N. Et al. Serum cytokine receptor levels in noninfectious uveitis // Opjtjalmic. Res. - 2005. -Vol. 37. - N 2. - P. 112-116.
16. Van den Berg W.B., Joosten L.A., Kollias G., van De Loo F.A. Role of tumour necrosis factor alpha in experimental arthritis: separate activity of interleukin 1 -beta in chronicity and cartilage destruction // Ann Rheum Dis. - 1999. - Vol. 58. N 1. - P. I40-I48.
