Научная статья на тему 'Сравнительная характеристика результатов серологических исследований при Нelicobacter pylori-ассоциированных гастритах'

Сравнительная характеристика результатов серологических исследований при Нelicobacter pylori-ассоциированных гастритах Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
122
18
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
HELICOBACTER PYLORI / ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ / ENZYME IMMUNOASSAY / ЭКСПРЕСС-ТЕСТ НА АНТИТЕЛА / ЭКСПРЕСС-ТЕСТ НА АНТИГЕНЫ / ANTIGEN EXPRESS-TEST / ANTIBODY EXPRESS-TEST

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Гасымова М.Ч., Гурбанов А.И.

Представлена сравнительная оценка результатов серологических исследований при Helicobacter pylori-ассоциированных гастритах. Были обследованы образцы крови и испражнения 108 больных гастритом (64 мужчины и 44 женщины). Антитела к H. pylori в сыворотке крови определялись стандартным иммуноферментным анализом (ИФА) и экспресс-методом, антигены в испражнениях экспресс-методом. Методом ИФА антитела к H. pylori были выявлены в крови 56 (51,8%) пациентов, у 52 (48,2%) был отрицательный результат. Таким образом, приблизительно у половины больных с гастритом в сыворотке крови выявляются антитела к H. pylori. Основную долю антител к патогену в сыворотке крови составляют иммуноглобулины класса IgG. Экспресс-тест на антитела в большинстве случаев подтверждает результаты ИФА. Экспресс-тест на определение антигенов H. pylori в испражнениях имеет низкую чувствительность.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Гасымова М.Ч., Гурбанов А.И.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Comparative evaluation of results of serological investigations during Helicobacter pylori-associated gastritis

Comparative evaluation of serological investigation in H.pylori-associated gastritis. Stool and blood samples of 108 patients (64 males and44 females) were examined. Antibodies against H. pylori in serum were detected using standard enzyme immunoassay analysis (EIA) and express test while antigens in stool specimens by express-test. Out of 108 patients in 56 (51.8%) were detected antibodies by EIA. Remaining 52 (48.2%) samples were negative. Thus, antibodies against H. pylori appears in plasma of approximately 50% patients. The majority of antibodies are IgG class antibodies. In majority of cases express-test confirms results of EIA. Express-test for antigen detection in stool specimens has low sensitivity.

Текст научной работы на тему «Сравнительная характеристика результатов серологических исследований при Нelicobacter pylori-ассоциированных гастритах»

8. Способ остеотомии седалищной кости: пат. №13186 Респ. Беларусь, МПК 7 А 61 в 17/56 / О.А. Соколовский, А.В. Белецкий, А.Б. Деменцов, И.З. Минаковский, И.Э. Шпилевский, С.Н. Сер-дюченко, О.В. Ковальчук, Ю.В. Лихачевский; заявитель ГУ «РНПЦ травматологии и ортопедии». -№а20080805; заявл. 17.06.2008; опубл. 30.04.10 // Афщыйны бюл. / Нац. цэнтр Ытэлектуал. уласнасцк - 2010. - №2. - С.57-58.

9. Шевцов, В.И., Макушин В.Д., Тепленький М.П. // Травматология и ортопедия XXI века: Сб. тез. докл. VIII съезда травматологов-ортопедов России. - Самара, 2006. - С.361-362.

10. Bar-On E., Huo M.H., DeLuca P.A. // J. Pediatr. Orthop. B. - 1997. - Vol.6. - P.138-145.

11. Barrett W.P., Staheli LT, Chew D.E. // J. Bone Joint Surg. [Am]. - .1986. - Vol.68. - P.79-87.

12. Campbell P., Tarlow S.D. // J. Pediatr. Orthop. -1990. - Vol.10. - P.6-8.

13. Gage V, Cary J.M. // J. Bone Joint Surg. - 1980. -Vol.62. - P.785-794.

14. Kim HW., Morcuende J.A., Dolan L.A., et al. // J. Bone Joint Surg. Am. - 2000. - Vol.82. - P.1692-1700.

15. Maquet P. // Acta Orthop. Belg. - 1999. - Vol.65, N3. - P.302-314.

16. Millis, M.B., Murphy S.B., Poss R. // Instr. Caurse Lect. -1996. - Vol.45. - P.209-226.

17. Oh C.W., Guille JT., Kumar S.J., Lipton G.E., MacEwen G.D. // Clin. Orthopaedics and Related Research. - 2005. - Vol.434. - P.86-91.

18. Porat S., Robin G.C., Howard C.B. // J. Bone Joint Surg. - 1994. - Vol.76-B. - P.463-467.

19. Severin E. // Acta Chir. Scand. - 1941. - Vol.84, Suppl.63. - P.1-142.

20. Siffert R.S.// Clin. Orthop. - 1981. - Vol.160. - P.14—29.

21. Sakalouski A.A., Sakalouski A.M., Kovalchuk O.V New Technique of the Triple Osteotomy of the Pelvis: 6th Congress of the European Federation of National Associations of Orthopedics and Traumatology - Helsinki, 2003. - P.1213.

22. Sokolovsky A.M., Sokolovsky O.A. // J. Bone Joint Surg. Br. - 2001. - Vol.83. -P.721-725.

23. The surgical treatment of established congenital dislocation of the hip results of surgery after planned delayed intervention following the appearance of the capital femoral ossific nucleus / N.M. Clarke [et al.] // J. Pediatr. Orthop. - 2005. - Vol.25. - P.434-439.

24. Thomas C.L., Gage J.R., Ogden J.A. // J. Bone Joint Surg. Am. - 1982. - Vol.64. - P.817-828.

Поступила 21.12.2017 г.

Сравнительная характеристика результатов серологических исследований при Helicobacter pylori-ассоциированных гастритах

Гасымова М.Ч., Гурбанов А.И.

Азербайджанский медицинский университет, Баку

Gasimova M.C., Gurbanov A.I.

Azerbaijan Medical University, Baku

Comparative evaluation of results of serological investigations during Helicobacter pylori-associated gastritis

Резюме. Представлена сравнительная оценка результатов серологических исследований при Helicobacter pylori-ассоциированных гастритах. Были обследованы образцы крови и испражнения 108 больных гастритом (64 мужчины и 44 женщины). Антитела к H. pylori в сыворотке крови определялись стандартным иммуноферментным анализом (ИФА) и экспресс-методом, антигены в испражнениях -экспресс-методом. Методом ИФА антитела к H. pylori были выявлены в крови 56 (51,8%) пациентов, у 52 (48,2%) - был отрицательный результат. Таким образом, приблизительно у половины больных с гастритом в сыворотке крови выявляются антитела к H. pylori. Основную долю антител к патогену в сыворотке крови составляют иммуноглобулины класса IgG. Экспресс-тест на антитела в большинстве случаев подтверждает результаты ИФА. Экспресс-тест на определение антигенов H. pylori в испражнениях имеет низкую чувствительность. Ключевые слова: Helicobacter pylori, иммуноферментный анализ, экспресс-тест на антитела, экспресс-тест на антигены.

Медицинские новости. - 2018. - №3. - С. 82-84. Summary. Comparative evaluation of serological investigation in H.pylori-associated gastritis. Stool and blood samples of 108 patients (64 males and 44 females) were examined. Antibodies against H. pylori in serum were detected using standard enzyme immunoassay analysis (EIA) and express test while antigens in stool specimens - by express-test. Out of 108 patients in 56 (51.8%) were detected antibodies by EIA. Remaining 52 (48.2%) samples were negative. Thus, antibodies against H. pylori appears in plasma of approximately 50% patients. The majority of antibodies are IgG class antibodies. In majority of cases express-test confirms results of EIA. Express-test for antigen detection in stool specimens has low sensitivity. Keywords: Helicobacter pylori, enzyme immunoassay, antigen express-test, antibody express-test. Meditsinskie novosti. - 2018. - N3. - P. 82-84.

Helicobacter pylori в основном является причиной развития гастритов, а в 80% случаев - язв желудка и двенадцатиперстной кишки. Также установлена роль данной бактерии в этиологии рака желудка [1, 2, 12].

Существует множество методов для диагностики заболеваний, вызванных H. pylori [4, 5, 6, 10]. Эти методы подразделяются на инвазивные и неинвазивные. К инвазивным относят гистологическое, микробиологическое исследование, ПЦР-исследование биоптатов и желу-

дочного сока, взятых при эндоскопии, к неинвазивным - определение серологическим методом в сыворотке крови антител к H. pylori, дыхательный уреаза тест (ДУТ), определение антигенов H. pylori в крови, испражнениях и слюне [1, 2, 3, 11].

В настоящее время неинвазивные методы сохраняют свою актуальность. Однако определение в сыворотке крови антител не всегда дает информацию о характере гастродуоденальных инфекций, вызванных H. pylori. Кроме

того, H. pylori длительное время может существовать в организме как комменсал, и титр антител в сыворотке остается повышенным длительное время после проведения антибактериальной терапии. Поэтому были предложены методы, лишенные данных недостатков и позволяющие определить антигены H. pylori в клинических материалах. В последнее время все больше используют тесты для определения антигенов H. pylori в испражнениях [7-9]. Эти тесты могут быть перспективными, учитывая их не-

МЕДИЦИНСКИЕ НОВОСТИ

№ 3 • 2018

82

Рисунок 1

Экспресс-тест на определение антител в сыворотке крови (позитивный результат)

Рисунок 2

Экспресс-тест на антиген в образце испражнений (положительный результат)

инвазивность, простоту и возможность оценивать эффективность лечения H. pylori-инфекции.

Цель исследования - провести сравнительную оценку результатов серологических исследований при H. pylori-ассоциированных гастритах.

Материалы и методы

Были обследованы образцы крови и испражнения 108 больных гастритом (64 мужчины и 44 женщины). Антитела к H. pylori в сыворотке крови определяли стандартным иммуноферментным анализом (ИФА) и экспресс-методом, антигены в испражнениях - экспресс-методом.

С помощью ИФА определяли титры антител IgM и IgG. Для данной цели использовали наборы реактивов BC-1051 (BioCheck, Канада).

В качестве экспресс-теста на определение антител использовали GM-test (GM R-HPY Ab-1C, Голландия). При помощи этих тестов возможно в короткое время определить наличие или отсутствие антител к H. pylori. Перед проведением исследования образцы крови (сыворотка и плазма) и тесты оставляли на 15-20 минут при комнатной температуре. Тесты должны быть использованы не позднее чем через час после извлечения из пакетиков. Извлеченные из пакетиков тесты располагают на чистой и гладкой поверхности. В S-лунку добавляется 1 капля (примерно 50 мкл) сыворотки или плазмы крови, затем 1 капля буферного раствора и засекается время

(таймер) (нужно следить, чтобы не было воздушных пузырьков в лунке). Результат оценивается через 10 минут. При положительном результате появляются две четко различаемые красные линии (на контрольной (C) и тест (T) зонах) (рис. 1). При негативном результате -красная линия появляется только в контрольной зоне (C). При недостоверном результате красная линия появляется только в зоне T.

Антигены H. pylori в образцах испражнений определяли с помощью экспресс-метода, когда возможно в короткое время определить наличие антигена в испражнениях. С этой целью использовали GM-test (GM R-HPY Ag-1C). Перед проведением исследований образец и тесты содержались при комнатной температуре. Взятый из нескольких частей образца материал смешивался с буферным раствором теста. Далее в S-лунку теста добавляется 3 капли (приблизительно 75 мкл) получившейся смеси и засекается время. Ожидается образование цветной линии, интерпретация результата осуществляется через 10 минут. При положительном результате появляются две четко различаемые розовые линии на зонах C и Т (рис. 2). При негативном результате линия появляется только в зоне C. При недостоверном результате линия не появляется ни в одной зоне. Такой результат бывает при допущении ошибок в технических процедурах или же по истечении срока годности реактивов.

Получены данные относительно чувствительности и специфичности используемых тестов. Чувствительность метода (ЧМ) - это соотношение числа подлинно-положительных результатов к общему числу положительных результатов.

ЧМ=ПП/ИП+ЛОх100%, где ПП - число подлинно-положительных результатов, ЛО - число ложно-отрицательных результатов.

Следовательно с увеличением числа ложно-отрицательных результатов уменьшается чувствительность теста.

Специфичность метода (СМ) - процентное соотношение подлинно-отрицательных результатов к общему числу отрицательных результатов.

СМ=ПО/ПО+ЛПх100%, где ПО - число подлинно-отрицательных результатов, ЛП - число ложно-положительных результатов.

Таким образом, с увеличением ложно-положительных результатов уменьшается специфичность теста [14]. Результаты и обсуждение С помощью метода ИФА антитела к H. pylori были выявлены в крови 56 (51,8%) больных, у 52 (48,2%) - был отрицательный результат (рис. 3). IgG был выявлен - у 49 (87,5%) пациентов, IgM - 2 (3,5%), IgG и IgM - 5 (8,9%) (рис. 4).

Экспресс-методом антитела к H. pylori были выявлены в крови 62 (57,5%) пациентов, у 46 (42,5%) - был отрицательный результат. Из 56 больных, у которых были выявлены антитела методом ИФА, у 48 - экспресс-тест был положительным. Иными словами, в 87,5% случаев результаты ИФА были подтверждены результатами экспресс-теста. В то же время только у 21 (37,5%) из 56 ИФА-положительных больных экспресс-тест на антигены был положительным (рис. 5).

Рисунок 3

Частота выявления антител к H. pylori методом ИФА у больных с гастритом

№ 3 • 2018

МЕДИЦИНСКИЕ НОВОСТИ

Рисунок 5 Результаты экспресс-тестов на антитела и на антигены H. pylori у больных с положительными результатами ИФА

зооооооооо 1

/

и Экспресс-тест Экспресс-тест на антителла на антигенны

При применении экспресс-теста на антигены H. pylori в образцах испражнений положительный результат был у 26 (24%) больных, отрицательный - у 82 (75,9%). Из 62 пациентов с положительным результатом экспресс-теста на антитела только у 21 (33,9%) были выявлены антигены H. pylori в испражнениях.

В проведенных нами исследованиях специфичности ИФА и экспресс-метода на определение антител к H. pylori были 100%, чувствительности - 61,3% и 87,7% соответственно. Этот результат подтверждает данные ранее проведенного исследования, показавшего, что на ранних стадиях H. py/orz-инфекции чувствительность ИФА достигает 100% [15].

Несмотря на то, что специфичность экспресс-теста на антигены H. pylori имела одинаковые с другими двумя тестами величины, чувствительность была очень низкая -36,7%. Однако есть данные относительно высокой чувствительности (80,5%) антиген-теста у H. pylori-серопозитивных больных с хроническим атрофическим гастритом [16].

Выводы:

1. Приблизительно у половины больных с гастритом в сыворотке крови выявляются антитела к H. pylori.

2. Основную долю антител к H. pylori в сыворотке крови составляют иммуноглобулины класса G.

3. Экспресс-тест на антитела в большинстве случаев подтверждает результаты ИФА.

4. Экспресс-тест на определение антигенов H. pylori в испражнениях имеет низкую чувствительность.

Л И Т Е Р А Т У Р А

1. Qarayev Z.O., Qurbanov A.I. Tibbi mikrobiologiya V3 immunologiya. - Baku, 2010. - 850 р.

2. Patrick R.Murray, Ellen Jo Baron, et al. // Manual of Clinical Microbiolgy. - 2007. - P.947-956.

3. Cemile Sonmez // Helicobacter pylori. - 2013. -P.318-327.

4. Saurabh Kumar Patel, Chandra Bhan Pratap, Ashok Kumar Jain, et al. // World J. Gastroenterol. -2014. - Vol.20, N36. - P.12847-12859.

5. Besséde E., Arantes V, Mégraud F, Coelho L.G. // Helicobacter. - 2017. - Vol.9.

6. Yao-Kuang Wang, Fu-Chen Kuo, Chung-Jung Liu, et al. // World J. Gastroenterol. - 2015. - Vol.21, N40. - P.11221-11235.

7. Elvira Garza-González, Guillermo Ignacio Perez-Perez, Héctor Jesús Maldonado-Garza, et al. // World J Gastroenterol. - 2014. - Vol.20, N6. - P.1438-1449.

8. Stephanie A. Chisholm, Claire L. Watson, E. Louise Teare, et al. // Journal of Medical Microbiology. -2004. - Vol.6. - P.623-627.

9. Zeki Calik, Murat Karamese, Osman Acar, Selina Aksak Karamese, et al. // Brazilian Journal of Microbiology. - 2016. - Vol.4, N7. - P.167-171.

10. Gregory Sharp // Pathology & Laboratory Medicine. - 2016. - Vol.4. - P.19.

11. Ramesh Rana, Sheng Lan Wang, Jing Li, et al. // Journal of Biomedicine. - 2017. - Vol.2. - P.12.

12. Wroblewski L.E., Peek R.M. Jr., Wilson KT // Clin. Microbiol. Rev. - 2010. - Vol.23, N4. - P.713-739.

13. Schwarzer A., Lottspeich C., Rüssmann H., et al. // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. - 2007. -Vol.26, N7. - P.475-480.

14. Diagnostic microbiology / Ed. By Ellen Jo B and Sydney M.F - Toronto, 1991. - 861 p.

15. Pandya H.B., Patel J.S., Agravat H.H., et al. // J. Clin. Diagn. Res. - 2014. - Vol.8. - P.6.

16. Moon H.W., Lee SY, Hur M., et al. // Korean J. Intern. Med. - 2016. - Vol.3. - P.417-422.

Поступила 20.12.2017 г.

Статья размещена на сайте www.mednovosti.by (Архив МН) и может быть скопирована в формате Word.

ВЫХОДНЫЕ ДАННЫЕ Адрес для переписки: Журнал «Медицинские новости»

220004, Минск, включен в электронные базы

«Медицинские новости» № 3 (282) 2018 г. ул. Короля, 51, офис 22 (7 этаж) данных «КиберЛенинка»

Рецензируемый научно-практический Тел.: (+375-17) 200-06-41 (гл. редактор), и РИНЦ eLIBRARY.ru

информационно-аналитический журнал. 200-07-01, факс: 200-07-02 Цитируемость - 6614.

Свидетельство о регистрации № 965 Velcom (+375-29) 695-94-19 impact factor - 0,237.

выдано Министерством информации Е-mail: redakcia1995@mail.ru индекс Хирша - 12.

Республики Беларусь 9 июля 2010 года. (для рекламодателей);

Периодичность - 1 раз в месяц mednovosti1995@mail.ru Подписка: по каталогам

(для авторов) РУП «Белпочта»

Учредитель www.mednovosti.by и РУП «Белсоюзпечать»

Частное издательское индексы: 74954 (инд.),

унитарное предприятие Ответственность 749542 (вед.);

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

«ЮпокомИнфоМед». за достоверность Украина (ГП «Пресса»),

Юридический адрес и интерпретацию предоставленной Литва (АО «Летувос паштас»),

220018, г. Минск, ул. Якубовского, 70-5. информации несут авторы. Латвия (ООО «Подписное

УНП 191350993 Редакция оставляет агентство PKS»),

за собой право Болгария (Фирма INDEX),

Редакция по своему усмотрению РФ (ООО «Информнаука»),

Шарабчиев Юрий Талетович размещать полные тексты РФ (ЗАО «МК-Периодика»),

(главный редактор, директор) публикуемых статей Молдова (ГП «Пошта Молдовей»)

Ясевич Татьяна Владимировна на сайте редакции

(редактор, зам. директора) www.mednovosti.by Подписано в печать 27.03.2018 г.

Капля Марина Николаевна и в электронных базах данных Формат 60х84 1/8.

(отв. секретарь, (на сайтах) своих партнеров Гарнитура Helvetica Narrow.

маркетолог) Уч.-изд. л. 12,0.

Жданова Я.П. (редактор) По данным Google Analytics Заказ .

Колоницкая О.М. (дизайн, верстка) (февраль 2018 г.):

посещаемость сайта Типография: Государственное

Цена свободная. www.mednovosti.by - 118600; предприятие «СтройМедиаПроект»

Тираж распространения, включая читаемость журнала ЛП № 02330/71 от 23.01.2014

электронную подписку, 1108 экз. «Медицинские новости» - 9300. ул. В. Хоружей, 13/61, 220123, г. Минск

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.