CC BY
22
УДК 615.371-092.9:616.993
Старовойтова Т.П., Дубровина В.И., Витязева С.А., Корнева А.В., Иванова Т.А., Котлов М.Ю.,
Балахонов С.В.
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ ПЕРЕСТРОЙКИ ОРГАНИЗМА БЕЛЫХ МЫШЕЙ, ИММУНИЗИРОВАННЫХ КЛЕТОЧНЫМИ СТЕНКАМИ FRANCISELLA TULARENSIS РАЗНЫХ ПОДВИДОВ
ФКУЗ Иркутский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия
населения (664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78, Россия)
В настоящее время актуальной проблемой является разработка эффективных вакцин нового поколения, в частности в отношении возбудителя туляремии, что обуславливает поиск антигенных детерминант с высокой иммуногенной активностью. Рядом авторов показано, что белки наружной мембраны F tula-rensis обладают иммунологической активностью. Данный факт послужил основанием для получения и всестороннего изучения клеточных оболочек туляремийного микроба как перспективного компонента при конструировании вакцин. Проведена оценка морфологических изменений в иммунокомпетентных органах экспериментальных животных, иммунизированных клеточными стенками Francisella tularensis разных подвидов. Для выделения клеточных стенок в качестве штаммов-продуцентов использовали F. tularensis subsp. mediaasiatica А-61, F. tularensis subsp. tularensis novicida В-399 A-Cole, F. tularensis subsp. holarctica 306 и вакцинного штамма F. tularensis subsp. holarctica 15 НИИЭГ.
Показано, что клеточные стенки F. tularensis независимо от подвидовой принадлежности штамма-продуцента оказывают стимулирующее действие на выработку антителообразующих клеток, а также на клеточную пролиферацию в Т-зависимых зонах лимфатических узлов и селезёнке. Установлено, что введение этих антигенных препаратов приводит кувеличению паракортикальной зоны, коркового вещества лимфатических узлов и увеличению количества плазматических клеток и малых лимфоцитов. Установлено, что клеточные стенки F. tularensis разных подвидов не вызывают стрессовой реакции организма экспериментальных животных, поскольку во все сроки исследования в надпочечниках экспериментальных животных показатели содержания в опытных образцах аргирофильных и аргентаффинных клеток соответствовали значениям в контроле.
На основании полученных данных существует необходимость дальнейшего детального исследования иммуногенных свойств клеточных оболочек F. tularensis subsp. holarctica 306, F. tularensis subsp. mediasiatica А-61 и F. tularensis subsp. tularensis B-399A-Cole в качестве перспективных компонентов при конструировании вакцин против туляремии.
Ключевые слова: Francisella tularensis, апудоциты, клеточные стенки, морфометрия
COMPARATIVE CHARACTERISTICS OF IMMUNOLOGICAL RECONSTRUCTION OF WHITE MICE IMMUNIZED BY CELL WALL OF DIFFERENT SUBSPECIES OF FRANCISELLA TULARENSIS
Starovoitova T.P., Dubrovina V.I., Vityazeva S.A., Korneva A.V., Ivanova T.A., Kotlov M.Yu.,
Balakhonov S.V.
Irkutsk Antiplague Research Institute of Siberia and Far East awarded with Order of the Red Banner
(664047, ul. Trilissera, 78, Irkutsk, Russian Federation)
At present, development of effective vaccines of new generation is an actual problem, in particular concerning the tularemia causative agent. It determines the need to search antigen determinants with high immunogenic activity. Some authors demonstrate that outer membrane proteins of Francisella tularensis possess immunological activity. This fact gave occasion to isolation and comprehensive study of F. tularensis cellular envelopes as a perspective component in vaccine engineering. The influence of cell walls of F. tularensis was studied for morphological changes in immunocompetent organs of experimental animals. Cell walls were obtained from three virulence strains of living cultures: F. tularensis subsp. mediaasiatica А-61, F. tularensis subsp. nearctica В-399 A-Cole, F. tularensis subsp. holarctica 306 and vaccine strain F. tularensis subsp. holarctica 15 (extracted by Research Institute of Epidemiology and Hygiene). Cell walls of different subspecies of F. tularensis stimulate the production of antibody forming cells and cell proliferation more in T-dependent zones of lymph nodes and spleen. It has been determined that these antigen preparations do not cause stress reaction of the experimental animal organisms.
Basing on the findings, we made a conclusion that there is a need for further detailed investigation of immunogenic properties of CE F. tularensis subsp. holarctica 306, F. tularensis subsp. mediasiatica А-61 and F. tularensis subsp. tularensis B-399 A-Cole as perspective components in development of tularemia vaccines. Key words: tularemia, morphometry, apudocytes, cell wall, morphometry
ВВЕДЕНИЕ
Туляремия - зоонозная природно-очаговая бактериальная инфекция, эндемичные очаги которой широко распространены во всем Северном полушарии, в том числе и на территории Российской
Федерации. Возбудитель туляремии - Francisella tularensis, обладающий высокой вирулентностью и контагиозностью, включён в высшую категорию тип A.I, как потенциальный агент биотерроризма [2, 7]. Предупредить вспышку заболевания или купировать
эпидемиологический процесс в очаге позволяет вак-цинопрофилактика [1, 5]. Применяемая в настоящее время живая туляремийная вакцина наряду со своими достоинствами, имеет ряд недостатков, что даёт основание говорить об актуальности проведения исследований в области создания профилактических препаратов. Современная стратегия иммунопрофилактики туляремии во многом определяется поиском средств, способных потенциировать иммунные реакции макроорганизма. На специфичность иммунного ответа макроорганизма у возбудителя туляремии влияют липополисахарид (ЛПС) и белки внешней мембраны (ВМ), которые рассматриваются как основа профилактических и диагностических препаратов [5, 9, 13]. Показано, что независимо от подвидовой принадлежности штаммов-продуцентов, полученные препараты обладают выраженной антигенной активностью, нетоксичны для животных и обладают иммуногенностью [7].
При введении иммуногенных препаратов происходит перестройка иммунной системы, а также изменения в нейроэндокринной системе, тесно с ней связанной [5]. Нейроэндокринная система (АРТО-система), считается одной из систем реагирования, контроля и защиты макроорганизма. Открытие имму-номодулирующих свойств нейропептидов позволило существенно дополнить представление о механизмах передачи сигналов от нервной системы к иммунной. Апудоциты располагаются практически во всех жизненно важных органах и участвуют в поддержании гомеостаза на органном уровне путём выработки биогенных аминов и пептидных гормонов, которые оказывают влияние на хемотаксис моноцитов, поли-морфноядерных лейкоцитов и Т-клеток, регулируют синтез супероксидных анионов макрофагами и тимо-цитами, влияют на тучные клетки, а также на развитие гуморального иммунного ответа. Они оказывают влияние на пролиферацию Т-клеток эффекторов и на активность цитотоксических клеток и ЕКК (естественных клеток киллеров), влияют на выраженность и скорость иммунных реакций, модулируя участие в них иммунокомпетентных клеток и их медиаторов [1, 2, 4, 5, 6, 8]. Исходя из этого, большой интерес представляет оценка структурно-функциональных зон иммунокомпетентных органов, а также роль апудоцитов в иммунном ответе организма экспериментальных животных при введении антигенного препарата.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Оценить в динамике иммунологическую перестройку в организме белых мышей, примированных клеточными стенками (КС) Е tularensis разных подвидов.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В качестве объекта исследования использовали экспериментальные препараты клеточных стенок (КС) Е. tularensis разных подвидов, полученные из штаммов-продуцентов: Е tularensissubsp. mediaasiatica А-61, Е tularensissubsp. tularensis novicida В-399 А-Со1е, Е tularensis subsp. ^1агс^са 306 и вакцинного штамма Е. tularensis subsp. holarctica 15 НИИЭГ.
Экспериментальной моделью в опытах служили 90 сертифицированных беспородных белых мышей обоих полов, весом 18-22 г. Животные были разделены на четыре опытных (по двадцать голов в каждой группе) и контрольную (десять интактных белых мышей) группы. Белым мышам опытных групп однократно, подкожно в область правого бедра в объёме 0,5 мл вводили КС F. tularensis в дозе 95 мкг (при пересчёте на белок). Животным контрольной группы вводили изотонический раствор хлорида натрия рН 7,2 в том же объёме.
Белых мышей выводили из эксперимента под наркозом на 3-и, 7-е, 14-е и 21-е сутки с момента иммунизации в соответствии с «Правилами лабораторной практики», утверждёнными Приказом Министерства здравоохранения и социального развития РФ № 708 от 23.08.2010 г.
Для гистологического исследования органы (селезёнка, надпочечники, почки, печень, лёгкие, тимус), регионарный и отдалённый (паховый) лимфатические узлы фиксировали в 10%-м водном растворе формалина рН 7.0-7.2. Обработку материала проводили по общепринятой схеме. Полутонкие целлоидиновые срезы окрашивали общепринятыми методами - гематоксилином и эозином, тионином, для выявления антителообразующих клеток применяли окраску по Браше. С целью выявления аргиро-фильных (АГ) клеток в тканях образцов использовали метод по Гримелиусу, аргентаффинные (АТ) клетки выявляли по Массону [10, 11]. В работе использовали методы обзорной микроскопии [3]. Количественную оценку АТ и АГ клеток подсчитывали в 10 полях зрения при увеличении х400 раз, оценивали их размер, форму, сдвиг ядра в апикальную часть клетки и наличие секреторных гранул в базальной части клетки, которые дают положительную реакцию с серебром [3]. Изменения структурно-функциональных зон в иммунокомпетентных органах оценивали с помощью компьютерной программы «Motic Images Plus» (версия 2). Автоматический анализ изображения производили с помощью светового микроскопа «Zeiss» (Германия) с видеокамерой «Levenhuk» при увеличении х1000. Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью компьютерной программы «Статистика», версия 6 (Новосибирск). Достоверными считали различия при р < 0,05, р < 0,01.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
При макроскопическом исследовании во все сроки наблюдения у белых мышей опытных групп на месте введения препарата, в лёгких, печени, почках, надпочечниках, в лимфатических узлах и в других органах видимые изменения отсутствовали. Селезёнка у животных привитых КС F. tularensis subsp. holarctica 15 НИИЭГ во все сроки исследования была обычного вида и размеров. При введении КС F. tularensis subsp. holarctica 306 и F. tularensis subsp. tularensis novicida В-399 A-Cole на 7-е сутки исследования селезёнка увеличена, но обычной консистенции и вида. У белых мышей примированных КС F. tularensis subsp. mediaasiatica А-61, на 3-7-е сутки селезёнка заметно увеличена, с умеренным
полнокровием сосудов и гиперплазией фолликулов. На более поздние сроки исследования (14-21-е сутки) у животных всех опытных групп изменения отсутствовали.
При микроскопическом исследовании изменения отмечались только в селезёнке и регионарных лимфатических (РЛУ) узлах. У животных всех опытных групп в РЛУ на 3-и сутки исследования имели место пролиферация лимфоидных клеток, наличие полиморфно-ядерных нейтрофилов в паракортикальной зоне и гиперплазия ткани фолликулов. При морфо-метрическом исследовании сравнительный анализ между группами подопытных животных в зависимости от использованного препарата показал, что достоверное различие по увеличению объёмной доли коркового вещества по сравнению с контрольной группой животных имело место на 7-е сутки с постепенным снижением к 21-м суткам. При этом наиболее высокие значения данных показателей отмечались у животных, иммунизированных КС F. tularensis subsp. mediaasiatica А-61 и КС F. tularensis subsp. tularensis novicida В-399 A-Cole. Следует также отметить, что на 3-и сутки установлена тенденция к увеличению Т-зависимой зоны (паракортикальной), в которой происходит антиген-зависимая пролиферация и дифференцировка Т-лимфоцитов. Максимальные значения этих показателей выявлены на 7-е сутки, а к 21-м суткам достоверных различий с контрольной группой не установлено (табл. 1).
Исследование лимфатических узлов опытных животных показало, что с 3-х суток после иммунизации отмечается увеличение количества фолликул со светлыми центрами, появление плазмобластов в реактивном центре и короне узелка и единичные
плазматические клетки. Максимальное число плазматических клеток в мозговых тяжах лимфатического узла отмечается на 7-е сутки исследования, показатели в 13,2-17,5 раза превышают таковые значения у интактных животных (табл. 2). При этом не отмечено достоверного отличия между группами по срокам исследования. На 3-и сутки эксперимента установлено повышение количества малых лимфоцитов в короне лимфатического узелка у животных опытных групп. Малые лимфоциты являются наиболее активными участниками иммунных реакций, повышение их содержания отражает развитие иммунологической перестройки в организме животных. Согласно полученным данным, пролиферация малых лимфоцитов отмечается на 3-14-е сутки, превышая показатели у интактных животных на 10-15 %. Наиболее значимые отличия отмечаются на 7-е сутки у животных, иммунизированных КС F. tularensis subsp. tularensis novicida В-399 A-Cole (на 15 %) и F. tularensis subsp. mediaasiatica А-61 (на 16,2 %). К 21-м суткам их число снижается, оставаясь при этом выше значений интактных животных.
Таким образом, установлено, что введение экспериментальных препаратов КС, полученных из четырёх штаммов культур F. tularensis, приводит к увеличению паракортикальной зоны, коркового вещества лимфатических узлов и увеличению количества плазматических клеток и малых лимфоцитов. Данный процесс может указывать на стимуляцию иммунных реакций организма и усиление иммунного ответа.
При гистологическом исследовании селезёнки на 3-и сутки у животных опытных групп отмечается полнокровие венозных сосудов, гиперплазия лим-
Таблица 1
Соотношение структурных зон лимфатических узлов экспериментальных животных (М ± т)
КС Зона Сроки наблюдения, сутки
3 7 14 21
F. tularensis subsp. holarctica 15 НИИЭГ КВ 33,6 ± 0,4 37,1 ± 0,6* 35,9 ± 0,9 33,8 ± 0,6
ПКЗ 11,8 ± 0,7 12,5 ± 0,9 11,5 ± 0,2 11,3 ± 0,4
МВ 54,6 ± 0,9 50,3 ± 0,4 52,6 ± 0,7 54,9 ± 0,9
F. tularensis subsp. holarctica 306 КВ 33,8 ± 0,4 37,8 ± 0, *4 36,4 ± 0,5* 34,2 ± 0,5
ПКЗ 11,7 ± 0,1 12,7 ± 0,9 12,1 ± 0,9 11,7 ± 0,9
МВ 54,5 ± 0,8 49,5 ± 0,7* 51,1 ± 0,4 54,1 ± 0,3
F. tularensis subsp. mediaasiatica А-61 КВ 34,2 ± 0,7 39,1 ± 0,6 36,2± 0,4 34,1 ± 0,8
ПКЗ 11,9 ± 0,2 13,0 ± 0,3 * 11,9 ± 0,9 11,0± 0,3
МВ 53,9 ± 0,5 47,9 ± 0,9 * 51,9 ± 0,6* 54,9 ± 0,3
F. tularensis subsp. novicida В-399 A-Cole КВ 35,1 ± 0,9* 40,6 ± 0,3* 38,5 ± 0,1 * 35,2 ± 0,9
ПКЗ 12,2 ± 0,5 13,4 ± 0,9 * 12,1 ± 0,9 11,8 ± 0,5
МВ 52,7 ± 0,7 46,0 ± 0,4 * 49,4 ± 0,6 * 53,0 ± 0,8
Контроль КВ 30,3 ± 0,8
ПКЗ 10,9 ± 0,3
МВ 58,8 ± 0,5
Примечание. КВ - корковое вещество; ПКЗ - паракортикальная зона; МВ - мозговое вещество; * - р< 0,05 (по сравнению с контролем).
Таблица 2
Количество плазмоцитов в мозговых тяжах регионарных лимфатических узлов экспериментальных животных
Сроки наблюдения, сутки Контроль КС
F. tularensis subsp. holarctica 15 НИИЭГ F. tularensis subsp. holarctica 306 F. tularensis subsp. mediaasiatica А-61 F. tularensis subsp. novicida В-399 A-Cole
3 0,52 ± 0,03 1,81 ± 0,36 2,12 ± 0,40* 2,61 ± 0,55* 2,40 ± 0,12*
7 7,52 ± 0,72* 7,91 ± 0,39* 8,62 ± 0,44* 9,11 ± 0,04*
14 5,11 ± 0,35* 4,93 ± 0,54* 5,31 ± 0,32* 5,91 ± 0,21*
21 2,32 ± 0,06* 2,12 ± 0,14* 2,44 ± 0,38* 2,50 ± 0,15*
Примечание. * - p < 0,05 (по сравнению с контролем).
Таблица 3
Соотношение объёмных долей красной и белой пульпы селезёнки экспериментальных животных (М ± т)
КС Сроки наблюдения, сутки
Объемная доля 3 7 14 21
F. tularensis subsp. holarctica 15 НИИЭГ БП 32,6 ± 0,2 40,9 ± 0,3* 40,7 ± 0,9* 37,2 ± 0,8
КП 67,4 ± 0,7 59,1 ± 0,4* 59,3 ± 0,6* 62,8 ± 0,5
F. tularensis subsp. holarctica 306 БП 34,6 ± 0,4 39,5 ± 0,9* 38,9 ± 0,4* 36,9 ± 0,8
КП 65,4 ± 0,2 60,5± 0,4* 61,1 ± 0,8 53,1 ± 0,3*
F. tularensis subsp. mediaasiatica А-61 БП 35,1 ± 0,9 43,1 ± 0,2* 43,4 ± 0,9* 38,1 ± 0,7
КП 64,9 ± 0,3 56,9 ± 0,4* 56,6 ± 0,2* 61,9 ± 0,9
F. tularensis subsp. novicida В-399 A-Cole БП 34,9 ± 0,7 46,9 ± 0,5* 46,1 ± 0,5* 40,1 ± 0,6*
КП 65,1 ± 0,3 53,1 ± 0,3* 53,9 ± 0,7* 59,9 ± 0,3
Контроль БП 28,8 ± 0,7
КП 71,2 ± 0,5
Примечание. * - p < 0,05 (по сравнению с контролем).
фатических фолликулов, увеличение ретикулярных клеток.
При проведении анализа изменений структурных зон селезёнки белых мышей, вызванных введением КС F. tularensis разных подвидов, отмечено, что, начиная с 3-х суток исследования, имеет место преобладание белой пульпы над красной за счёт увеличения реактивных центров и периартериальных зон фолликулов. Развитие центра размножения зависит от антигенной стимуляции и играет важную роль в развитии В-клеток памяти и в выработке плазматических клеток. Максимального значения относительно контроля данные показатели достигает на 7-14-е сутки. Следует отметить, на 7-е сутки у животных, иммунизированных F. tularensis subsp. tularensis novicida В-399 A-Cole, преобладает доля белой пульпы над красной (выше значений в контроле в 1,6 раза). В других опытных группах этот показатель был в пределах от 1,3 до 1,5 раза с последующим снижением
Анализ результатов, полученных у всех групп животных, начиная с 3-х суток, позволил выявить увеличение плазматических клеток в селезёнке, однако максимальные значения наблюдаются на 7-е сутки исследования у белых мышей, привитых F. tularensis subsp. tularensis novicida В-399 A-Cole и F. tularensis subsp. mediaasiatica А-61. К последующим срокам наблюдения (14-21-е сутки) значение сни-
жается, оставаясь значительно выше показателей в контроле (табл. 4).
При иммунизации экспериментальных животных количество апудоцитов и синтезируемых ими биологически активных веществ меняется. Реакция клеток АРТО-системы у опытных белых мышей на 3-7-е сутки эксперимента в лимфатических узлах, селезёнке и тимусе была снижена, по сравнению с контролем. Данные изменения могут быть связаны с выходом биологически активных веществ, образующихся в клетках, в межклеточную жидкость, которые оказывают влияние на межклеточное взаимодействие. Биологически активные вещества, выделяемые клетками АРШ-системы, являются про-лиферотропными и могут как активировать, так и подавлять процесс клеточного деления, способствуя стимуляции иммунного процесса [12]. На более поздних сроках исследования количество апудоцитов в опытных группах не отличались от контрольных. Это можно связать с тем, что уровень гормонов в организме экспериментальных животных не отличается от интактных животных, что даёт возможность развиться сбалансированному процессу пролиферации и апоптозу.
В надпочечниках во все сроки исследования количество АГ и АТ клеток соответствовало значениям в контроле, что указывает на отсутствие стрессовой реакции в организме иммунизированных животных [5].
Таблица 4
Количество плазмоцитов в селезёнке экспериментальных животных (М ± m)
Сроки наблюдения, сутки Контроль КС
F. tularensis subsp. holarctica 15 НИИЭГ F. tularensis subsp. holarctica 306 F. tularensis subsp. mediaasiatica А-61 F. tularensis subsp. novicida В-399 A-Cole
3 0,78 ± 0,07 3,10 ± 0,02* 3,72± 0,05* 3,81 ± 0,07* 4,11 ± 0,02*
7 5,92 ± 0,14* 6,20 ± 0,34* 6,61 ± 0,43* 6,02 ± 0,04*
14 3,91 ± 0,09* 4,13 ± 0,25* 3,90 ± 0,03* 4,54 ± 0,12*
21 1,41 ± 0,05 1,94 ± 0,03* 2,75 ± 0,08* 3,13 ± 0,05*
Примечание. * - p < 0,05 (по сравнению с контролем).
Таким образом, результаты проведённого исследования показали, что клеточные оболочки F. tularensis разных подвидов оказывают стимулирующее действие на выработку антителообразующих клеток, а также на клеточную пролиферацию в большей степени в Т-зависимых зонах лимфатических узлов и селезёнке и не вызывают стрессовую реакцию в организме экспериментальных животных.
ЛИТЕРАТУРА REFERENCES
1. Абрамов В.В., Абрамова Т.Я., Козлов В.А. Принципы вегетативной регуляции функций иммуноком-петентных клеток: фундаментальное и прикладное значение // Успехи современной биологии. - 2006. -Т. 126, № 4. - С. 379-387.
Abramov VV, Abramova TY, Kozlov VA. (2006). Principles of vegetative regulation of immunocompetent cells functions: fundamental and applied significance [Printsipy vegetativnoy regulyatsii funktsiy immunokompetentnykh kletok: fundamental'noe i prikladnoe znachenie]. Uspekhi sovremennoy biologii, (4), 379-387.
2. Абрамов В.В., Козлов В.А., Кармацких О.Л. Взаимодействие нервной и иммунной систем. - Оренбург, 1990. - 172 с.
Abramov VV, Kozlov VA, Karmatskikh OL. (1990). Interaction of nervous and immune systems [Vzaimodeystvie nervnoy i immunnoy sistem]. Orenburg, 172 p.
3. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. -М.: Медицина, 1990. - 384 с.
Avtandilov GG. (1990). Medical morphometry [Med-itsinskaya morfometriya]. Moskva, 384 p.
4. Акимаев И.Г. Взаимодействие основных регу-ляторных систем (нервной, эндокринной и иммунной) и клиническая манифестация их нарушений // Клиническая медицина. - 1997. - № 11. - С. 8-13.
Akimaev IG. (1997). Interaction of the main regulatory systems (nervous, endocrine and immune) and clinical manifestation of their disorders [Vzaimodeystvie osnovnykh regulyatornykh sistem (nervnoy, endokrinnoy i immunnoy) i klinicheskaya manifestatsiya ikh narush-eniy]. Klinicheskaya meditsina, (11), 8-13.
5. Бугоркова С.А., Задумина С.Ю., Кутырев В.В. Реакция клеток APUD-системы экспериментальных биомоделей на подкожную иммунизацию вакцинным штаммом Yersinia pestis EB // Проблемы особо опасных инфекций. - 2008. - № 3 (97). - С. 46-49.
Bugorkova SA, Zadulina SY, Kutyrev VV (2008). Reaction of APUD-system cells of experimental biomodels to subcutaneous immunization by Yersinia pestis EV vaccine strain [Reaktsiya kletok APUD-sistemy eksperi-mental'nykh biomodeley na podkozhnuyu immunizatsiyu vaktsinnym shtammom Yersinia pestis EB]. Problemy osobo opasnykh infektsiy, (3), 46-49.
6. Коржевский Д.Э., Драй Р.В., Костюкевич С.В. Иммуноцитохимический метод выявления ЕС - (эн-терохромаффинных) клеток эпителия слизистой оболочки кишки крысы // Морфология. - 2008. -№ 1. - С. 78-81.
Korzhevskiy DE, Drai RV, Kostiukevich SV. (2008). Immunocytochemical method for the demonstration of EC
- (enterochromaffin) cells in the gut mucosal epithelium of the rat [Immunotsitokhimicheskiy metod vyyavleniya ES - (enterokhromaffinnykh) kletok epiteliya slizistoy obolochki kishki krysy]. Morfologiya, (1), 78-81.
7. Кузнецова Е.М., Шепелёв И.А., Волох О.А. Структурно-функциональная характеристика основных антигенов Francisella tularensis // Проблемы особо опасных инфекций. - 2009. - № 2 (100). - С. 44-49.
Kuznetsova EM. (2009). Structural and functional characterization of main Francisella tularensis antigens [Strukturno-funktsional'naya kharakteristika osnovnykh antigenov Francisella tularensis]. Problemy оsobo оpasnykh infektsiy, (2), 44-49.
8. Ленинджер А. Основы биохимии. В 3 т. - М.: Мир, 1985. - Т. II. - С. 376-731.
Lenindzher A. (1985). Fundamentals of biochemistry [Osnovy biokhimii]. Moskva, (2), 376-731.
9. Медуницин Н.В. Вакцинология. Изд. 3-е, пере-раб. и доп. - М.: Триада-Х, 2010. - 512 с.
Medunitsin NV. (2010). Vaccination [Vaktsinologiya]. Moskva, 512 p.
10. Меркулов Г.А. Курс патологической техники.
- М.: Медицина, 1969. - 423 с.
Merkulov GA. (1969). Pathohistological techniques course [Kurspatologicheskoy tekhniki]. Moskva, 423 p.
11. Пирс Э. Гистохимия. - М.: Иностранная литература, 1962. - 962 с.
Pierce E. (1962). Histochemistry [Gistokhimiya]. Moskva, 962 p.
12. Суходоло И.В., Геренг Е.А. Структурно-функциональная организация клеток диффузной эндокринной системы в дыхательных путях в норме и при патологии // Бюллетень сибирской медицины. -2008. - № 1. - С. 71-75.
Sukhodolo IV, Gereng EA. (2008). Structurally functional organization of diffuse endocrine system cells in the respiratory tract in normal and pathological conditions [Strukturno-funktsional'naya organizatsiya kletok diffuznoy endokrinnoy sistemy v dykhatel'nykh putyakh v norme i pri patologii]. Byulleten' sibirskoy meditsiny, (1), 71-75.
13. Фирстова В.В., Калмантаева О.В., Горбатов А.А., Тюрин Е.А. Специфические клеточные реакции, от-
ражающие наличие поствакцинального противоту-ляремийного иммунитета // Бактериология. - 2016. -Т. 1 (1). - С. 102-108.
Firstova VV, Kalmantayeva OV, Gorbatov AA, Tyu-rin EA. (2016). Specific cellular reactions reflecting antitularemia postvaccinal immunity [Spetsificheskie kletochnye reaktsii, otrazhayushchie nalichie post-vaktsinal'nogo protivotulyaremiynogo immuniteta]. Bakteriologiya, (1), 102-108.
Information about the authors
Дубровина Валентина Ивановна - доктор биологических наук, заведующая лабораторией патофизиологии ФКУЗ Иркутский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия населения (664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78; тел.: (3952) 22-01-35, факс: (3952) 22-01-40; e-mail: dubrovina-valya@mail.ru)
Dubrovina Valentina Ivanovna - Doctor of Biological Sciences, Head of Pathophysiological Laboratory of Irkutsk Antiplague Research Institute of Siberia and Far East awarded with Order of the Red Banner (664047, Irkutsk, ul. Trilissera, 78; tel. (3952) 2201-35; fax (3952) 22-01-40; e-mail: dubrovina-valya@mail.ru)
Старовойтова Татьяна Пантелеевна - научный сотрудник лаборатории патофизиологии ФКУЗ Иркутский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия населения (e-mail: adm@chumin.irkutsk.ru)
Starovoitova Tatyana Panteleyevna - Research Officer at the Pathophysiological Laboratory of Irkutsk Antiplague Research Institute of Siberia and Far East awarded with Order of the Red Banner (e-mail: adm@chumin.irkutsk.ru)
Витязева Светлана Александровна - кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник отдела микробиологии чумы ФКУЗ Иркутский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия населения (e-mail: adm@chumin.irkutsk.ru) Vityazeva Svetlana Aleksandrovna - Candidate of Medical Sciences, Senior Research Officer at the Department of Plague Microbiology of Irkutsk Antiplague Research Institute of Siberia and Far East awarded with Order of the Red Banner (e-mail: adm@ chumin.irkutsk.ru)
Корнева Александра Владимировна - младший научный сотрудник биохимического отдела ФКУЗ Иркутский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия населения (e-mail: adm@chumin. irkutsk.ru)
Korneva Aleksandra Vladimirovna - Junior Research Officer at Irkutsk Antiplague Research Institute of Siberia and Far East awarded with Order of the Red Banner (e-mail: adm@chumin.irkutsk.ru)
Иванова Татьяна Александровна - заведующая лабораторией экспериментальных животных ФКУЗ Иркутский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия населения (e-mail: ita0707@mail.ru)
Ivanova Tatyana Aleksandrovna - Head of the Laboratory of Experimental Animals of Irkutsk Antiplague Research Institute of Siberia and Far East awarded with Order of the Red Banner (e-mail: adm@chumin.irkutsk.ru)
Котлов Михаил Юрьевич - лаборант-исследователь лаборатории патофизиологии ФКУЗ Иркутский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия населения (e-mail: adm@chumin.irkutsk.ru)
KotlovMikhayl Yuryevich - Junior Research Officer at the Pathophysiological Laboratory of Irkutsk Antiplague Research Institute of Siberia and Far East awarded with Order of the Red Banner (e-mail: konstmikhkor@yandex.ru)
Балахонов Сергей Владимирович - доктор медицинских наук, профессор, директор ФКУЗ Иркутский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия населения (e-mail: adm@chumin.irkutsk.ru)
BalakhonovSergey Vladimirovich - Doctor of Medical Sciences, Professor, Director of Irkutsk Antiplague Research Institute of Siberia and Far East awarded with Order of the Red Banner (e-mail: adm@chumin.irkutsk.ru)
