CC BY
3
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2022; ТОМ 67; №2 |
трансплантации аллогенных гемопоэтических клеток от гапло-идентичного донора (гапло-ТГСК) при наличии у донора инги-биторного KIR, к которому нет лиганда у реципиента, донорские НК-клетки могут активироваться против остаточных лейкемиче-ских клеток.
Цель работы. Определить влияние ингибиторных KIR-рецепторов и их лигандов на результаты гапло-ТГСКу пациентов с острыми лейкозами.
Материалы и методы. В анализ было включено 62 пациента (34 мужчины/28 женщин) с острым миелоидным лейкозом (ОМЛ, п=30) и острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ, п=32), которым была выполнена гапло-ТГСК в НМИЦ гематологии в период с мая 2018 по февраль 2021 г. Характеристики пациентов представлены в таблице. HLA-генотипирование доноров и реципиентов проводили методом PCR-SBT. KIR-генотипирование геномной ДНК проводили наборами KIR-lype SSP Kit. Анализ долгосрочных результатов гапло-ТГСК проводили по методу Каплана—Мейера. Сравнение показателей выживаемости в группах выполняли при помощи log-rank теста. Статистически значимыми считали различия при р<0,05.
Результаты и обсуждение. В нашем исследовании у 41 (66%) пациента (17 пациентов с ОМЛ и 24 — с ОЛЛ) из 62 не было лиганда для ингиби-торного KIR-донора, то есть потенциально у этих пациентов мог развиться НК-клеточный аллореак-тивный иммунный ответ, что при статистическом анализе достоверно улучшило ОВ (94% против 54%, р=0,0351, рис. А) и БРВ (82% против 52%, р=0,0344, рис. Б), а также существенно снизило ВРР (12% против 42%, р=0,1) у пациентов с ОМЛ. При этом улучшение БРВ и снижение ВРР не повлекло за собой увеличения вероятности развития РТПХ, ни острой («нет лиганда» — 17% против «есть лиганд» — 31%, р=0,15, рис. В), ни хронической ее формы (6% против 16%, р=0,37, рис. Г). Долгосрочные результаты гапло-ТГСК у пациентов ОЛЛ в зависимости от отсутствия/наличия лиганда для ингибирующего KIR не различались (ОВ: 74% против 75%, р=0,9, рис. Д; БРВ: 66% против 62,5%, р=0,75, рис. Е).
Заключение. НК-клеточная аллореактивность, обусловленная отсутствием лиганда для ингиби-торного KIR донора, может улучшить долгосрочные результаты гапло-ТГСК пациентов с ОМЛ,
но не с ОЛЛ, что может быть обусловлено неспособностью НК-клеток уничтожать остаточные лейкемические клетки при ОЛЛ из-за отсутствия на них экспрессии молекул, обеспечивающих межклеточное взаимодействие, таких как 1САМ-1.
Параметры Нетлиганда для KIR (аллореак-тивные НК) (п=41) Естьлиганддля KIR (п=21)
Медиана наблюдения (интервал) 15,3 (3-42,5)месяцев
Пол (мужчины/женщины) 23/18 11/10
Возраст (медиана,интервал) 29 (19-63) 1 (18-58)
Диагноз • ОМЛ • ОЛЛ 17 (41%) 24 (59%) 13 (62%) 8 (38%)
Деплеция • 1путе(ПТ-ЦФ) • 1п у^го (ТС1^а|3) 22 (54%) 19 (46%) 8 (38%) 13 (62%)
Режим кондиционирования, п (%) • миелоаблативный • пониженной интенсивности 14 (34%) 27 (66%) 9 (43%) 12 (57%)
Конова З. В., Паровичникова Е. Н., Гальцева И. В., Капранов Н. М., Давыдова Ю. О., Куликов С. М., Дроков М. Ю., Попова Н. Н., Старикова О. С., Дубняк Д. С., Васильева В. А., Масликова У. В., Омарова Ф. А., Кузьмина Л. А., | Савченко В. Г.
СРАВНЕНИЕ РЕКОНСТИТУЦИН НАТУРАЛЬНЫХ КНЛЛЕРНЫХ КЛЕТОК ПОСЛЕ ТРАНСПЛАНТАЦИИ АЛЛОГЕННЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ОТ ГАПЛОИДЕНТИЧНОГО ДОНОРА В ЗАВИСИМОСТИ
ОТ ВАРИАНТА Т-КЛЕТОЧНОЙ ДЕПЛЕЦИИ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. После трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток от гаплоидентичного донора (га-пло-ТГСК) натуральные киллерные клетки (НК-клетки) могут играть решающую роль в предотвращении ранних рецидивов и инфекционных осложнений, так как восстанавливаются одними из первых. А при выполнении гапло-ТГСК с деплецией TCR-ap-позитивных Т-лимфоцитов, реакция «трансплантат против лейкоза» осуществляется только за счет донорских НК клеток. Дифференцировка НК-клеток проходит от незрелых (CD56bright) к зрелым (CD56dim) и терминально дифференцированным. Для осуществления аллореактивного НК-клеточного иммунного ответа необходима дифференцировка НК-клеток до «эффекторной» субпопуляция CD56dimCD16*, а также субпопуляций, характеризующихся экспрессией на «эффекторных» НК-клетках KIR и/или CD57.
Цель работы. Изучить темп и особенности реконституции НК-клеток после гапло-ТГСК.
Материалы и методы. В исследование было включено 29 пациентов с острыми лейкозами, которым была выполнена гапло-ТГСК в НМИЦ гематологии в период с апреля 2020 по июнь 2021 г. 15 пациентам — с использованием посттрансплантационного цикло-фосфамида (ПТ-ЦФ), 14- с предшествующей с TCR-aß-деплецией. Для оценки реконституции НК-клеток всем пациентам выполнялись иммунофенотипические исследования образцов периферической крови на +14, +30, +60, +90 и +180 дни после гапло-ТГСК с помощью 12-цветного проточного цитометра. При анализе субпопуляций НК-клеток были использованы моноклональные антитела к антигенам дифференцировки человека CD3, CD8, CD158a, CD158b, CD158e, CD159a, CD57, CD16, CD56, CD14, CD45, CD62L. Для статистической обработки данных применяли программное обеспечение SAS 9.4 (Sas institute inc., Сагу, NC, USA). Статистически значимыми считали различия при р <0,05.
Результаты и обсуждение. В случае выполнения га-пло-ТГСК с TCR-aß-деплецией НК-клетки, быстрее достигают
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
зрелого иммунофенотипа: уже к +30 дню после ТГСК медиана трансфузиям лимфоцитов донора, но это требует дальнейших доли CD56dimCD16+ НК-клеток при TCR-aP-деплеции — 57% исследований, против 9% при использовании ПТ-ЦФ, р=0,0045. Достоверные различия сохраняются до +90 дня после гапло-ТГСК: 74% против 41% (р=0,0079) на +60 день, 81% против 46% (р=0,0076) на +90 день (рис.). Те же результаты были получены при анализе абсолютных значений (кл/мкл). Достоверные различия были получены только для зрелых субпопуляций НК-клеток, количество незрелых (CD56brightCD16~) и промежуточных (CD56dimCD16+, но сохранивших экспрессию NKG2A и/или CD62L, не экспрес-сирующие KIR или CD57) существенно не отличались в двух группах (табл.).
Заключение. Темп реконституции и приобретение ал-лореактивного фенотипа НК-клетками зависит от варианта Т-клеточной деплеции, быстрее восстановление происходит при выполнении гапло-ТГСК с TCR-aP-деплецией. При использовании ПТ-ЦФ восстановление популяции зрелых НК-клеток происходит в более поздние сроки (от 3 до 6 месяцев) и такие пациенты могут получить преимущество от трансфузий НК-клеток донора на посттранплантационном этапе. Такой подход может рассматриваться как достойная альтернатива
Таблица. Динамика восстановления различных субпопуляций НК-клеток в зависимости от варианта деплеции Т-клеток (в таблице указаны абсолютные значения — кл/мкл)
Популяции Субпопуляции НК-клеток на +30 день на +60 день на +90 день
TCRap ПТ-ЦФ P TCRap ПТ-ЦФ P TCRap ПТ-ЦФ P
Незрелые НК CD56br¡ghtCD16- 0,0661 0,021 0,25 0,035 0,0310 0,34 0,02 0,0420 0,79
CD56br¡ghtCD16-KG2A+ 0,0650 0,020 0,25 0,035 0,0305 0,34 0,02 0,0410 0,79
CD56br¡ghtCD16-KG2A+KIR- 0,0893 0,007 0,29 0,034 0,0542 0,49 0,04 0,0263 0,89
Промежуточные НК CD56ld¡mCD16+NKG2A+CD62L+CD57- 0,0048 0,0007 0,051 0,033 0,0479 0,49 0,03 0,0260 1
CD56d¡mCD16+NKG2A+ 0,0883 0,0071 0,31 0,033 0,0527 0,46 0,28 0,0261 0,95
CD56d¡mCD16+NKG2A+KIR- 0,0818 0,0061 0,49 0,031 0,0511 0,18 0,02 0,0141 0,74
Зрелые НК CD56d¡mCD16+ 0,1852 0,0041 0,009 0,236 0,0495 0,09 0,18 0,1102 0,053
CD56d¡mCD16+NKG2A-CD62L-CD57+ 0,0010 0,0000 0,016 0,019 0,0032 0,02 0,01 0,0007 0,002
CD56d¡mCD16+KIR+CD57+ 0,0589 0,0011 0,000 0,053 0,0053 0,01 0,09 0,0238 0,009
Королева А. А., Зоренко В. Ю., Полянская Т. Ю., Карпов Е. Е., Садыкова Н. В., Петровский Д. Ю., Сампиев М. С., Мишин Г. В.,
Голобоков А. В., Хаупшева А. В.
КЛИНИЧЕСКИЙ СЛУЧАЙ ОПЕРАТИВНОГО ЛЕЧЕНИЯ ГЕМОФИЛИЧЕСКОЙ АРТРОПАТИИ У ЖЕНЩИНЫ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Гемофилия — это сцепленное с Х-хромосомой, наследственное нарушение свертываемости крови, связанное с дефицитом VIII или IX фактора крови. Преимущественно гемофилией болеют мужчины. Крайне редко симптомы гемофилии могут наблюдаться у женщин. Причиной развития гемофилии у женщин могут являться случаи, при которых обе Х-хромосомы несут повреждения гена фактора свертывания крови или случаи асимметричной инактивации Х-хромосомы. Наличие частых гемартрозов у женщин также могут приводить к развитию гемофилической артропатии, требующей оперативного вмешательства.
Цель работы. Продемонстрировать собственный опыт оперативного лечения гемофилической артропатии у женщины.
Материалы и методы. Пациентка Т., 39 лет, была госпитализирована в ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России с деформирующим артрозом коленных, голеностопных, локтевых, плечевых и тазобедренных суставов. Объем движений в левом коленном суставе в пределах 150/100°, стойкая сгибательно-разгиба-тельная контрактура. Левый голеностопный сустав деформирован, движения в суставе ограничены в пределах 30°. При выполнении рентгенологического исследования левого коленного, левого голеностопного, а также тазобедренных суставов были выявлены признаки деформирующего артроза 3-4 ст. (по классификации Келлгрена-Лоуренса). По данным лабораторных исследований
было выявлено снижение уровня фактора VIII в крови. Был выполнен молекулярно-генетический анализ на носительство гемофилии А, показавший наличие у пациентки в гене F8 распространенной мутации — инверсии интрона 22, ассоциирующейся с тяжелой формой гемофилии А, в гетерозиготной форме.
Результаты и обсуждение. На фоне заместительной гемо-статической терапии рекомбинантным препаратом фактора VIII, из расчета 60 МЕ/кг веса, пациентке было выполнено оперативное вмешательство в объеме эндопротезирования левого коленного сустава, а также артролиз левого голеностопного сустава. Проводилась заместительная гемостатическая терапия рекомби-нантными препаратами фактора свертывания VIII, при этом концентрация фактора VIII в крови составляла не менее 45%, фактор Виллебранда не превышал 145%. Послеоперационный период протекал без осложнений, был достигнут объем движений 180/100 градусов. Движения в левом коленном и левом голеностопном суставах безболезненные.
Заключение. Было показано, что течение и тактика терапии гемофилии у женщин не отличается от мужчин. При наличии анамнеза длительных кровотечений и выявлении дефицита VIII фактора с целью дифференциальной диагностики рекомендовано проведение молекулярно-генетического исследования (HUMARA-тест).
