CC BY
0
РОССИЙСКИЙ Willi НШОШЕСКШ 11 Vil ШГРЕСС 2DZ3 АЛ I II
Экспериментальная онкология
СРАВНЕНИЕ МЕТОДОВ СОЗДАНИЯ ОРТОТОПИЧЕСКОЙ МОДЕЛИ ГЕПАТОЦЕЛЛЮЛЯРНОЙ КАРЦИНОМЫ ПЕЧЕНИ
С.В. Гурова, А.С. Гончарова, Т.М. Кечерюкова, А.В. Галина, Д.В. Ходакова, Е.Н. Колесников.
Место работы: ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России,
Ростов-на-Дону, Россия
Эл. почта: gurova.sophie@gmail.com
Цель: Сравнить инъекционный и имплантационный методы создания ксенографта первичного рака печени in vivo. Материалы и методы: Данное исследование проводилось на базе испытательного лабораторного центра ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России. Эксперимент проводили на самцах мышей линии Balb/c Nude в возрасте 10-12 недель. В соответствии с методом создания модели, животных распределили на две группы (n = 8 для каждой группы).
Для создания ксенографта рака печени инъекционным методом клетки линии HepG2 культивировали в среде DMEM с добавлением 10% FBS при температуре 37°С и атмосфере 5% СО2. Затем культуру клеток в количестве 3 х106 ино-кулировали мышам в левую долю печени. Для создания ксенографта рака печени имплантационным методом предварительно ввели мышам клеточную суспензию линии HepG2 в количестве 5х106 подкожно в правый бок для создания опухолевого узла. По достижению подкожных узлов оптимальных размеров (1-1,5 см в диаметре), животных эвтанизировали, выделили новообразование, разделили на небольшие фрагменты и трансплантировали в печень. По достижению гемостаза печень возвращали в брюшную полость, а операционную рану ушивали непрерывным швом. Измерение размеров опухолевых узлов проводили в ходе диагностической лапаротомии при помощи штангенциркуля на 14 сутки.
Результаты: Согласно полученным результатам, импланта-ционный метод создания ксенографта продемонстрировал удовлетворительный результат: приживаемость опухолевого материала составила 100%, показатель выживаемости — 100%, все новообразования были сформированы в виде узлов округлой формы. Тогда как инъекционный метод показал неудовлетворительный результат: клеточная суспензия либо вытекала через прокол, тем самым контаминировав всю брюшную полость, в связи с этим ксенографт менял заданную локализацию и показатель приживаемости оказался значительно ниже, нежели у им-плантационного метода, и составил 50%, большинство опухолевых узлов имели форму вытянутых образований с неровными краями.
Заключение: В рамках нашего исследования подверглись сравнению способы создания ксенографта первичного рака печени in vivo путем инъекции и имплантации опухолевого материала. Проанализировав полученные данные
можно сделать вывод, что наиболее эффективным методом создания ксенографта является имплантационный.
ТРАНСКРИПТОМНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПЛОСКОКЛЕТОЧНОГО РАКА ГОЛОВЫ И ШЕИ ПОСЛЕ ОБЛУЧЕНИЯ ПРОТОНАМИ В ДОЗЕ 10 ИЗОГР
Э.Д. Джуманиязова1, П.А. Вишнякова1,2, Т.Х. Фатхудинов13
Место работы: 1. Научно-исследовательский институт молекулярно-клеточной медицины Российского Университета Дружбы Народов, Москва, Россия; 2. ФГБУ «НМИЦ акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва, Россия; 3. ФГБНУ «Научно-исследовательский институт морфологии человека имени академика А.П. Авцына», Москва, Россия Эл. почта: enar2017@yandex.ru
Цель: Оценить изменения транскриптома в образцах плоскоклеточного рака головы и шеи (ПРГШ) у пациентов после протонного облучения.
Материалы и методы: Биопсийный материал, полученный от 3 пациентов ПРГШ до и после протонного облучения в суммарной дозе 10 изоГр, был подвергнут гомогенизации, очистке и концентрации, после чего была выделена тотальная РНК. Далее из 1 мкг тотальной РНК для секвери-нования на платформе Illumina были приготовлены библиотеки с использованием набора TruSeq RNA Sample Prep Kit v2 с этапом обогащения в 10 циклов. Окончательные библиотеки объединяли в эквимолярных пропорциях перед секвенированием на платформе Illumina HiSeq 2500 с использованием парно-концевых прочтений по 50 оснований. Необработанные прочтения были обработаны с использованием RTA 1.17.21.3 и Casava 1.8.2 (Illumina). Для получения матриц экспрессий из fastq файлов использовался пайплайн nf-core/rnaseq версии 3.0. Пайплайн запускался с референсным геномом GRCh38, выравнивание проводилось с помощью инструмента STAR, а квантификация с помощью Salmon. Анализ дифференциальной экспрессии проводился между опухолевыми образцами до и после облучения. Анализ обогащения был выполнен с помощью программного обеспечения PANTHER 17.0 по классификатору Reactome pathways.
Результаты: В ходе транскриптомного анализа ПРГШ после облучения протонами в дозе 10 изоГр было обнаружено 1414 дифференциально экспрессированных генов. Был обнаружен ряд подавленных сигнальных путей (связанных с низкоэкспрессированными генами) таких как: сигнальный путь STAT5; сигнальный путь PD-1; отмечено подавление MET-опосредованной активации сигнального пути PTK2, подавление передачи сигналов PDGF; нарушение CD22-опосредованной регуляция BCR; подавление MAPK, опосредованной FCERI; подавление FCGR3A-опо-средованного фагоцитоза и FCGR3A-опосредованного
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии
том/vol. 13 #3s1 • 2023
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
