CC BY
62
УДК 616.12-005.4-092.9
СПОСОБНОСТЬ ДИПЕПТИДА Ж2Н-АЛАНИЛ-ЬГЛУТАМИНА ВОССТАНАВЛИВАТЬ ФУНКЦИЮ ИШЕМИЗИРОВАННОГО МИОКАРДА
Е.А. СЕНО! КОСОВА1, С. С. КРУТИЦКИЙ1, Е.А. ВЕЛИКАНОВА1, А.В. ЦЕПОКИНА1, А.А. КУЗЬМИНА1, В.М. ТРЕТЬЯК2, С.В. 0».1В. ГРУЗДЕВА1,
Л.В. АНТОНОВА1, Е.В. ГРИГОРЬЕВ1'2
1Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых
заболеваний», Кемерово, Россия 2Государственное бюджетное образовательное учреждение «Кемеровская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Кемерово, Россия
Цель. Оценить кардиопротективный эффект дипептида глутам ина («Ди пептивен»/ N(2)-L-alanyl-L-gl utamine) на модели изолиро ван ного сердца крысы.
Материалы и методы. Изолированные сердца лабораторных крыс перфузировали по методу Лан-гендорф (n=14). Се рдца опытной груп пы в период реперфузии перфузировали стандартным раствором с входящим в его состав дипептидом глутамина. Контрольная группа исключала фармакологическое воздействие. В ходе экспериментов были зарегистрированы физиологические параметры изолированных сердец. Миокардиальный отток исследован на предмет транслокации маркёров повреждения сердца биохимическими и иммуноферментными методами. Также была оценена флуоресценция кофермента дыхательной цепи NADH в ткане миокарда методом лазерно-индацированной флуоресценции.
Основные результаты. При восп олнении дефицита глутамин а в клетках изолированные сердца без увеличения ЧСС и СКП восстановили свою сокцатителнную способность. В присутствие препарата уровни тропонина I и NO были статистически значимо ниже по сравнению с исходными и контрольными значениями/!. Динамика иранслокации внутриклеточных ферментов в опытной группе в целом не отличалась от контроля, в обеих круппах знатенин на реперфузии находились выше, чем на истодной точке. В группе с добавлением препарата в реперфузионный период уровни сБСЖК и общей концентрации органических перекксей были ститистически выше и сходных и контрольных значений. Перегрузка д ыхательной цепи электронами во время ишемии произошла и обеих группах, однако восстановление, не имеющее статисти-неской значимости, наблюдалось в опытной группе.
Заключение. Вследствие добавления днпепиида глутамина в перфузионный раствор в реперфузион-ном периодо удалось добиться стабилизации структурных белков кардиомиоцитов и восстановления насосной функции. Тем не менее, защита миокарда от окислительного стресса оказалась несостоятельной. Вероятно, ««Дипептивен» следует использовать в сочетани и с другими фармацевтическими препаратами, способными снизить продукцию активных форм кислорода.
Ключевые слова: изолированное сердце, кардиоплегический арест, и шеми я и реперфузия, ^2Н-ала-нил^-глутамина, дипептида глута мин, лазерно-инду цированна я флуоресценция.
ABILITY OF N(2)- L-ALANYL-L-GLUTAMINE TO RESTORE THE FUNCTION OF
ISCHEMIC MYOCARD
E.A. SENOKOSOVA1, S.S. KRUTITSKIY1, E.A. VELIKANOVA1, A.V. TSEPOKINA1, A.A. KUZMINA1, V.M. TRETJAK2, S.V. DENIS OVA2, O.V. GRUZDEVA \ L.V. ANTONOVA1,
E.V.GR IGORIEV1'2
federal State Budgetary Institution "Research institute forComplex Issues of Cardiovascular Diseases",
Kemerovo, Russia 2Kemerovo State Medical Academy, Kemerovo, Russia
The purpose. The goal of this study was to assess the revitalizing effects of N(2)-L-alanyl-L-glutamine («Dipeptiven») on ischemic heart rate.
Materials and methods. Isolated hearts of laboratory rats were perfused by Langendorff method (n=7). After
global cardioplegic ischemia hearts of experimental group were perfused by standard solution with N(2)-L-alanyl-L-glutamine. Control group was excluded from the pharmaceuticals on reperfusion. Physiological indices of the hearts were fixed. Classic and highly specific markers of myocardial damage were studied by using biochemistry methods and ELISA. NADH dynamics in the myocardial tissue were also recorded.
Main Results. Levels of troponin I and NO were significantly lower than baseline and control values. Changes in intracellular translocation enzymes fluctuated at low values and were not significantly different from control during reperfusion, but significantly higher than the original translocation. Level of H-FABP and formation of peroxides were significantly higher in compares with original values. Respiratory chain of both groups was overloaded by electrons during the ischemia.
Conclusions. The structure of contractile proteins was stabilized by reperfusion solution with N(2)-L-alanyl-L-
glutamine. However, protection of cardiomyocytes was ineffective from oxidative stress. «Dipeptiven» should be
used in combination with other pharmaceuticals.
Keywords: isolated heart, cardioplegic arrest, ischemia and reperfusion,
N(2)-L-alanyl-L-glutamine, laser induced fluorescence
Введение
Болезни системы кровообращения (БСК) занимают лидирующие позиции среди причин смертности и инвалидизации трудоспособного населения развитых стран мира. В частности, в Российской Федерации в 2014 году БСК стали основанием смерти в 50,4% случаев. Ишемиче-ская болезнь сердца - наиболее распространенная форма БСК [1]. Одной из основных причин ишемии миокарда является стеноз или тромбоз собственных артерий сердца. Поэтому, учитывая степень поражённости и причину патологии, выбор падает на определенный вид лечения: аорто-коронарное шунтирование либо стентирование. Возобновление притока крови - самый эффективный способ прекращения действия патогенных факторов ишемии миокарда и устранения последствий их влияния на сердце. Однако при неадекватных защитных мероприятиях миокард попадает под воздействие эффектов реперфузии, угнетающих его физиологию и восстановление. Основные эффекты: рост образования активных форм кислорода, высокая проницаемость мембран клеток для Ca2+, несостоятельность мито-хондриального аппарата образовывать энергию вследствие как дефицита субстратов во время ишемии, так и повреждающего действия АФК на мембрану митохондрий [2]. Исходя из вышесказанного, можно определить ряд стратегий, направленных на коррекцию одного или нескольких пагубных влияний ишемии и реперфузии. Субстратное обеспечение - перспективное направление в силу того, что может восполнить дефицит субстратов цикла Кребса и наладить синтез энергии. Например, можно компенсировать истощенный резерв аминокислот, добавив их в состав перфузионного раствора. Аминокислота -
глутамин в организме может синтезироваться de novo и ранее считалась заменимой. Сейчас глутамин классифицируется как условно-незаменимая аминокислота при стрессе: при повышении в тканях содержания свободных радикалов, повреждающих клетки, потребность в глутамине увеличивается. Этот процесс происходит в случае ишемии и реперфузии миокарда [3].
Цель исследования
Оценить кардиопротективный эффект ди-пептида глутамина на модели изолированного сердца крысы.
Материалы и методы
Эксперименты были проведены на здоровых взрослых самцах крыс линии Wistar весом 300±50 г. Животные содержались в стандартных условиях вивария без ограничения в пище и воде. Эксперименты и процедуры над лабораторными животными были проведены в соответствии с правилами Европейской конвенции (Страсбург, 1986).
Перфузия по Langendorff
Животных анестезировали внутрибрюшин-но тиопенталом натрия (25 мг/кг). Посредством торакотомии сердца были вырезаны и быстро погружены в раствор Кребса-Хензеляйта (T = 4Со). Далее их канюлировали через аорту к системе перфузирования с подачей раствора Креб-са-Хензеляйта следующего состава (ммоль/л): NaCl - 118; NaHCO3 - 25; глюкоза - 11; KCl -4,8; KH2PO4 - 1,2; MgSO4 - 1,2; CaCl2 - 1,2. Раствор был обогащен смесью газов - 95% O2 и 5% CO2. pH находился в диапазоне от 7.3-7.4, температура перфузата поддерживалась на отметке
37-38 °С. Перфузия проходила при постоянном давлении 80 см вод. ст. в течение всех этапов эксперимента.
Протокол перфузирования
Адаптивная перфузия - 20 мин; гипоперфу-зия (20 мл/ч) охлаждённым (4°С) кардиопле-гическим раствором («Кустодиол», Др. Франц Кёлер Хеми ГмбХ, Германия) - 8 мин; глобальная кардиоплегическая ишемия - 240 мин; ре-перфузия - 30 мин. Сердца опытной группы в начальные 8 мин реперфузии перфузировали раствором Кребса-Хензеляйта с входящим в его состав N(2)-L-araHHn-L-rayraMHHa («Дипепти-вен», Фрезениус Каби Австрия ГмбХ, Австрия) в терапевтической дозе, пересчитанной на массу сердца крысы (13,6 мг/мл).
Группы сравнения: опытная группа сердец «Дипептивен» (n=7), перфузируемая по вышеописанному протоколу. Контрольная группа (n=7) исключала фармакологическое воздействие.
Регистрация динамики флуоресценции одного из основных участников окислительного метаболизма - восстановленной формы никотинами-дадениндинуклеотида (НАДН) осуществлена на комплексе многофункциональной лазерной диагностики «ЛАКК-М», НПП «Лазма» (Россия).
Исследуемые параметры
Оценена динамика скорости коронарного протока (СКП, мл/мин), а также частота сердечных сокращений (ЧСС, уд/мин), давления, развиваемого левым желудочком (ДРЛЖ, mm Hg), при помощи введенного в его полость латексного баллончика, который был соединен с датчиком давления, встроенного в аппарат для физиологических исследований МР36 («Biopac Systems, Inc», США).
Активность ферментов креатинфосфокина-зы миокардиальной фракции (КФК-МБ, Ед/л), лактатдегидрогиназы (ЛДГ, Ед/л), аспартата-минотрансферазы (АСТ, Ед/л) оценена методом ферментативной кинетики на автоматическом биохимическом анализаторе Konelab 30i («ThermoFisherSientific», Финляндия). Концентрации сердечного белка, связывающего жирные кислоты (сБСЖК, нг/мл) сердечного тропонина (Troponin I, пг/л) определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием наборов Hycult biotech (США) и Cusabio (КНР). Количественное определение перекиси и оксида азота (NO) также установле-
но ИФА исследованиями при помощи наборов Biomedica Medizinprodukte GmbH & Co KG (Австрия) и R&G (США).
Статистическую обработку полученных данных осуществляли с помощью программы «Statistica 10.0». Достоверность различий определяли с помощью непараметрического критерия Манна-Уитни для несвязных пар и критерием Вилкоксона для зависимых групп. Различия между группами принимали статистически значимыми при р<0,05. Данные представлены в виде графиков по медиане и квартальному размаху.
Обсуждение
Скорость коронарного протока в контрольной группе постепенно снижалась на всём временном отрезке реперфузии, в то время как введение препарата сопутствовало сохранению исходных значений данного показателя, что исключает процесс расширения сосудов при реперфузии как адаптивного механизма (рис. 1а). На начальном этапе реперфузии в контрольной группе частота сердечных сокращений изолированных сердец имела статистически значимое увеличение относительно исходных значений со 192,0 (186,0; 200,0) уд/мин до 297,0 (290,0; 303,0) уд/мин (рис. 16). Группа «Дипептивен» показала обратный результат, что не исключает станнинга миокарда. На клеточном уровне развитие станнинга связано с нарушением проницаемости клеточных мембран кардиомиоцитов, что биохимически проявляется продолжающимся выходом в кровь цитозольного сБСЖК [4]. Повышение данного показателя было получено и в наших экспериментах. Известно, что состояние станнинга ведет к неуклонному угнетению насосной функции сердца. Давление, развиваемое левым желудочком в группе «Дипептивен», увеличилось на 10 мин реперфузии до 87,0 (85,0; 98,0) mm Hg и к 30 мин вернулось к исходному уровню 66,5 (62,0; 75,0) mm Hg (рис. 1в). При восполнении дефицита глутамина в клетках изолированные сердца смогли без увеличения ЧСС и СКП за счёт способности камер принять и вытолкнуть больший объём перфузионного раствора восстановить свою сократительную способность, нивелируя в некоторой степени процесс станнинга.
Сердечный БСЖК является небольшим белком, локализованным в цитоплазме в раство-
Рисунок 1. Изменение параметров СКП (а), ЧСС (Ь), ДЛРЖ (с)
Исх - исходные значения; РП10'- 10 мин реперфузионного периода; РП30'- 30 мин реперфузионного периода; *p<0.05, относительно значений контрольной группы;
#р<0.05, относительно значений контрольной на всех точках реперфузионного периода, а также относительно значений группы «Дипептивен» на РП10'; ##р <0.05, относительно исходных значений.
ренной форме, вне связи с другими белками он одним из первых высвобождается в кровь при повреждении миокарда [5]. Нарастание уровня сБСЖК в опекаемом перфузате в опытной группе на протяжении всего периода реперфузии не имело статистистически значимого отличия от такового в контроле (рис. 2а). Исходный уровень сБСЖК составил 1,0 (0,8; 2,0) нг/мл и на фоне введения препарата к 10 мин реперфузии увеличился в 20 раз, достигнув 20,0 (17,7; 21,0) нг/мл. Однако к концу эксперимента показатель снизился до 9,0 (8,7; 11,3) нг/мл, что, тем не менее, в 9 раз превосходило исходный уровень. Если учитывать невысокий выход внутриклеточных ферментов в миокардиальный отток, то данная динамика транслокации сБСЖК может характеризовать немасштабные деструктивные изменения сарколеммы, но охватывающие её целиком в период реперфузии.
Характер прямой, отражающей активность ЛДГ в реперфузионный период, в опытной группе отличался постепенным ростом активности фермента в перфузате к концу эксперимента: исходный уровень: 1,0 (1,0; 5,0) Ед/л, на 10 мин реперфузии: 4,0 (1,0; 15,0) Ед/л, на 30 мин реперфузии: 6,0 (3,5; 9,0) Ед/л. Тогда как в группе контроля данный показатель снизился к 30 мин реперфузии с 7,0 (3,0; 19,0) Ед/л до 4,0 (1,0; 16,0) Ед/л, что свидетельствует о незначительном снижении внутриклеточного рН. В группе «Дипептивен» транслокация внутриклеточного фермента КФК-МБ на 10 мин реперфузии составила 8,0 (5,0; 18,0) Ед/л и была статистически значимо выше исходного уровня 1,0 (1,0; 2,0) Ед/л
(рис. 26). Ферментативная активность ACT к 10 мин реперфузии в обеих группах увеличилась в 15 раз, но только в опытной к 30 мин была статистически значимо ниже относительно контрольных значений (рис. 2г). По полученным данным можно заключить следующее: скорость процессов цитолиза в группе «Дипептивен» ниже и стабилизация сарколеммы после ишемии и реперфузии произошла более быстрыми темпами.
Доказано, что глутамин играет ключевую роль в регуляции синтеза глутатиона - трипепти-да, состоящего из глутамата, цистеина и глицина.
Рисунок 2. Транслокация маркёров повреждения миокарда БСЖК (а)
Исх - исходные значения; РП10'- 10 мин реперфузионного периода; РП30'- 30 мин реперфузионного периода;
*p <0.05, относительно значений контрольной группы;
#р <0.05, относительно значений контрольной и опытной групп на всех точках реперфузии; ##р <0.05 относительно исходных значений.
Ед-л ЛДГ
b
КФК-МБ
Исх РШО' РПЗО'
контроль U Дипептивен
с
ACT
Ед-л
на фоне присутствия препарата в перфузионном растворе и, как следствие, более выраженного оксидативного стресса, в 3,2 раза статистически значимо понизилась концентрация N0 в сравнении с исходным уровнем (рис. 36).
Причина может быть следующей: при вновь поступившем кислороде N0 перешёл в форму 0N00- (сильного окислителя - пероксинитри-та), который способствует повреждению мембран эндотелиоцитов совместно с другими АФК [7]. Вероятно, концентрация препарата была недостаточной для адекватного синтеза глутатиона и последующей защиты кардиомиоцитов.
Добавление в перфузионный раствор «Ди-пептивена» обеспечило статистически значимое снижение уровня тропонина I в оттекаемом пер-фузате на всём периоде реперфузии с минимумом на 30 мин - 11,0 (8,8; 13,4) пг/л, указывая на меньшую напряженность стенок миокарда (рис. 3в) [8]. Данный эффект снижения сердечного тропонина уже был получен при периоперационном использовании ^2)^-аланин^-глутамина у пациентов в дозе 0,4 мг/кг/сут на протяжении 1-х суток [9]. Настоящий эффект снижения тропонина I, возможно, связян со снижением концентрации N0. Скорее всего, присутствует следующая связь процессов: взаимодействие кислорода с оксидом азота на реперфузии приводит к образованию пе-роксинитрита в сосудистой стенке. Пероксини-трит индуцирует перикисное окисление липидов в мембранах, вызывает однонитевые разрывы ДНК, ингибирует митохондриальное дыхание, активирует тканевые металлопротеиназы, которые и участвуют в деградации тропонина I [10].
d
Рисунок 2. Транслокация маркёров повреждения миокарда ЛДГ (b), КФК-МБ (c), АСТ (d)
Исх - исходные значения; РП10' -10 мин реперфузион-ного периода; РП30'- 30 мин реперфузионного периода; *p <0.05, относительно значений контрольной группы; #р <0.05, относительно значений контрольной и опытной групп на всех точках реперфузии; ##р <0.05 относительно исходных значений.
Глутатион защищает клетки от окислительного повреждения [3, 6]. Уровень общей концентрации органических перекисей, указывающий на степень образования АФК, в опытной группе был статистически значимо выше на всём периоде реперфузии по сравнению с контролем (рис. 3а), что, возможно, подтверждается высоким выходом сБСЖК через поврежденную мембрану. Также 48
| ^ Общая концентрация органических перекисей
ПО
95 —
Исх РП10' РПЗО'
а
Рисунок 3. Динамика органических перекисей (а)
Исх - исходные значения; РП10' - 10 мин реперфузионного периода; РП30' - 30 мин реперфузионного периода; *p <0.05, относительно значений контрольной группы; #р <0.05, относительно значений опытной и контрольной групп на всех точках реперфузии; ##р <0.05, относительно исходных значений.
контроль
Рисунок 3. Динамика оксида азота (Ь) и сердечного тропонина (с)
Исх - исходные значения; РП10' - 10 мин реперфузионного периода; РП30' - 30 мин реперфузионного периода; *p <0.05, относительно значений контрольной группы;
#р <0.05, относительно значений опытной и контрольной групп на всех точкахреперфузии; ##р <0.05, относительно исходных значений.
Таким образом, установлено, что «Дипепти-вен», входящий в состав раствора Кребса-Хен-зеляйта, вызвал более выраженный окислительный стресс, уменьшение продукции N0, которые привели к статистически значимому снижению концентрации тропонина I в миокардиальном оттоке, а также к вероятной эндотелиальной дисфункции. Уровень сБСЖК на реперфузионном периоде статистически значимо превышал доише-мические значения. Эти совокупные данные указывают на то, что добавление в перфузионный раствор препарата способствовало стабилизации структуры и функционирования только сократительных белков, но не уменьшило образования АФК и не привело к стойкой стабизизации клеточной мембраны после 4 - часовой кардио-плегической ишемии. Можно предположить, что глутамин в период реперфузии увеличил энергообразование и улучшил сократительную функцию оставшихся жизнеспособных кардиомио-цитов, и в некоторой степени поспособствовал восстановлению функции «оглушенных» клеток.
Применение лазерно-флуоресцентного анализа в экспериментальной модели изолированного сердца продемонстрировало свою эффективность [11]. Описывая характер изменения флуоресценции кофермента НАДН (рис.4), можно выделить следующие особенности: если в контрольной группе, несмотря на удовлетворительный показатель перекисного статуса, зафиксировано неуклонное угасание флуоресценции кофермента, то группе «Дипептивен» присуще деление прямой графика на отрезки спада и подъёма. Однако ни в одной группе не произо-
шло возврата флуоресценции до исходного уровня. В обеих группах отмечена перегрузка дыхательной цепи электронами во время ишемии. Незначительное восстановление имела группа «Дипептивен».
Рисунок 4. Динамика флуоресценции НАДН
Исх - исходные значения; РП10' - 10 мин реперфузионного периода; РП30' - 30 мин реперфузионного периода; #р <0.05, относительно значений опытной и контрольной групп на всех точках реперфузии.
Выводы
1. Введение дипептида глутамата в состав пер-фузионного раствора в период реперфузии изолированного сердца оказало стабилизирующий эффект на структуру сократительных белков.
2. Препарат в концентрации 13,6 мг/мл не поспособствовал защите клеток от окислительного повреждения.
3. Целесообразнее применять «[ипептивен» в комплексе с другим препаратом, обладающим
более выраженным эффектом в отношении защиты клеток от АФК.
Средства на проведение исследования были получены по программе УМНИК из Фонда содействия развитию малых форм предприятий в научно-технической сфере. Исследование выполнено в Федеральном государственном бюджетном научном учреждении «Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний».
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ/ REFERENCES
1. Бокерия Л.А., Гудкова Р.Г. Сердечно-сосудистая хирургия - 2014. Болезни и аномалии системы кровообращения. М; 2015.
Bokeriya L.A., Gudkova R.G. Serdechno-sosudistaya khirurgiya - 2014. Bolezni I anomalii sistemy krovoobrashcheniya. Moscow; 2015. [In Russ].
2. Маслов Л.Н., Халиулин И.Г. Ишемическое посткондиционирование сердца. Анализ экспериментальных и клинических данных. Комплексные проблемы сердечно-сосудистых заболеваний. 2015; (3):37-46. doi: 10.17802/2306-1278-2015-3-37-46.
Maslov L.N., Khaliulin I.G. Ischemic postconditioning of heart. Analysis of experimental and clinical data. Complex Issues of Cardiovascular Diseases . 2015;(3):37-46. [In Russ]. doi:10.17802/2306-1278-2015-3-37-46.
3. Ложкин C.H., Тиканадзе А.Д. ТюрюминаМ.И. Глутамин и его роль в интенсивной терапии. Вестник интенсивной терапии. 2003; 4: 64-69.
Lozhkin S.N., Tikanadze A.D., Tjurjumina M.I. Glutamin i ego rol v intensivnoj terapii. Intensive care herald. 2003; 4: 64-69. [In Russ].
4. Андрюков Б.Г., Гельман Е.А., Габасова Т.В., Логинова Т.В., Демьяненко Н.Б., Матвеев О.Н. Уровень в крови белка, связывающего жирные кислоты, в первые часы после острой ишемии миокарда после проведения успешного тромбо-лизиса: прогноз и рискометрия осложнений. Фундаментальные исследования. 2008; 2: 25-27.
Andrjukov B.G., Gelman E.A., Gabasova T.V., Loginova T.V., Demjanenko N.B., Matveev O.N. Uroven v krovi belka, svjazyvajushhego zhirnye kisloty, v pervye chasy posle ostroj ishemii miokarda posle provedenija uspeshnogo trombolizisa: prognoz i riskometrija oslozhnenij. Fundamental research. 2008; 2: 25-27. [In Russ].
5. Hermens W.T. Mechanisms of protein release
Для корреспонденции: Сенокосова Евгения Андреевна
Адрес: 650002, г. Кемерово, Сосновый бульвар, д. 6 Тел. +7(3842) 64-38-02, E-mail: [email protected]
from injured heart muscle. Dev Cardiovasc. Med. 1998; 205:85-98.
6. Калинина E.B., Чернов H.H., Новичкова МД Роль глутатиона, глутатионтрансферазы и глутаре-доксина в регуляции редокс-зависимых процессов. Успехи биологической химии. 2014; 54:299-348.
Kalinina E. V., Chernov N.N., Novichkova M.D. Rol glutationa, glutationtransferazy i glutaredoksina v reguljacii redoks-zavisimyh processov. Uspehi biologicheskoj himii. 2014; 54:299-348. [In Russ].
7.MarkovH.M. Nitrous oxide and atherosclerosis. nitrous oxide, Dysfunction of Vascular Endothelium, and Pathogenesis of Atherosclerosis. Cardiology. 2009; 49(11): 64-74.
8. Jaffe A.S., Wu A.H.B. Troponin ReleaseReversible or Irreversible Injury? Should We Care? Clin. Chem. 2012; 58: 1148-1150.
9. Ломиворотов B.B., Ефремов C.M., Шмы-рев В.А., Пономарев Д.Н., Святченко А.В., Князъкова Л.Г. Кардиопротективные эффекты глутамина у пациентов с ишемической болезнью сердца, оперированных в условиях ИК. Анестезиология и реаниматология. 2012; 2:14-18.
Lomivorotov V.V., Efremov S.M., Shmirev V.A., Ponomarev D.N., Svyatchenko A.V., Knyazkova L.G. Glutamine cardioprotective effects in patients with ischemic heart disease, operated under cardiopulmonary bypass. Russian journal of Anaesthesiology and Reanimatology. 2012; 2:14-18. [In Russ].
10. Менъщикова Е.Б., Зенков Н.К., Ланкин B.3., Бондарь И.А., Труфакин В.А. Окислительный стресс: Патологические состояния и заболевания. Новосибирск; 2008; 284 с.
Menshhikova E.B., Zenkov N.K., Lankin V.Z., Bondar I.A., Trufakin V.A. Okislitelnyj stress: Patologicheskie sostojanija i zabolevanija. Novosibirsk; 2008; 284 c. [In Russ].
11. Салмин В.В., Салмина А.Б., Фурсов А.А., Фролова О.В., Лалетин Д.И., Фурсов М.А. и др. Использование флуоресцентной спектроскопии для оценки ишемического повреждения миокарда. 2011; 2(4): 142-157.
Salmin V.V., Salmina A.B., Fursov A.A., Frolova O.V., Laletin D.I., Fursov M.A. et al. Application of fluorescence spectroscopy for assesment of myocardial ischemic injury. Journal of Siberian Federal University. 2011; 2(4):142-157. [In Russ].
Статья поступила 20.06.2016.
For correspondence: Senokosova Evgeniya
Address: 6, Sosnoviy blvd., Kemerovo, 650002, Russian Federation
Tel. +7(3842) 64-38-02, E-mail: [email protected]
