CC BY
31
46 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
структурой стероидного фрагмента. Синтезированные со- месей и получать высококачественный кристаллический единения были исследованы на способность ингибировать продукт без дополнительной очистки. каталитическую активность CYP17A1 и подавлять рост Заключение. Производимая по данной технологии суб-и пролиферацию клеток карциномы простаты. Наилучшие станция флударабин фосфат полностью соответствует тре-характеристики выявлены для алсевирона (ингибирование бованиям фармакопеи. Субстанция зарегистрирована в МЗ CYP17A1: IC50 = 0,9 ± 0,1 мкМ, подавление роста клеток РБ и производится на РУП «Белмедпрепараты». На основе LNCaP: IG50 = 5,2 мкМ и PC-3: IG50 = 12,7 мкМ). Оптими- полученной фармацевтической субстанции флударабин зирован 7-стадийный синтез алсевирона, позволяющий фосфат на предприятии разработана и внедрена в произ-получать целевой продукт с суммарным выходом 14—16 %. водство технология получения генерического лекарствен-Заключение. Полученные результаты продемонстриро- ного средства «Флударабел, порошок лиофилизированный вали высокий фармакологический потенциал алсевирона. для приготовления раствора для инъекций 50 мг» — аналога оригинального препарата «Флудара» (Германия). И.В. Кравченко, А.М. Кипнис, Т.П. Новик, Т.О. Григорян, М.А. Грецкая, Е.В. Литвинова, Е.И. Квасюк Н.В. Красногорова1, Д.В. Новиков1, С.Г. Фомина1, СПОСОБ ПРОМЫШЛЕННОГО ПОЛУЧЕНИЯ Е.Н. Горшкова1, М.А. Магомедов2, В.В. Новиков1 ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ СУБСТАНЦИИ СРАВНЕНИЕ УРОВНЕЙ ЭКСПРЕССИИ FCyRIIIa ФЛУДАРАБИН ФОСФАТ И FCyRIIIp ГЕНОВ В РАЗНЫХ ФРАКЦИЯХ РУП «Белмедпрепараты», Минск, Республика Беларусь ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У ПАЦИЕНТОВ Введение. Хронические лимфопролиферативные забо- С КОЛОРЕКТАЛЬНЫМ РАКОМ левания (хронические лимфолейкозы) относят к трудно 1ННГУ им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород, Россия; излечимым болезням крови. В начале 90 гг. для их лечения 2ГБУЗ НО «НОКОД», Нижний Новгород, Россия начали использовать ряд препаратов — производных пу- Введение. Гены иммунного ответа FcyRIIIa и FcyRIIIp, риновых нуклеозидов и нуклеотидов, позволивших сущест- относящиеся к низкоаффинным Fc-рецепторам, совпада-венно увеличить число ремиссий и продолжительность жиз- ют на 98 %. FcyRIIIa является молекулярным маркером ни пациентов. К таким препаратам относятся флударабин преимущественно натуральных киллеров, а FcyRIIIp — фосфат, клофарабин, лейкладин и появившийся немного маркером нейтрофилов, а также ряда других лейкоцитов. позднее неларабин. Использование аналогов пуриновых нук- Морфофункциональные изменения в иммуной системе леозидов, нуклеотидов и в первую очередь флударабин фос- в ответ на возникновение бактериальной инфекции зави-фата коренным образом изменило возможности химиотера- сят от присутствия липополисахарида (ЛПС), являющего-пии в лечении заболеваний данного профиля. Флударабин ся основным компонентом клеточной стенки грамотрица-фосфат применяется в основном для терапии пациентов с В- тельных бактерий. клеточным хроническим лимфолейкозом и неходжкинскими Цель исследования — сравнить относительные уровни лимфомами. Активным метаболитом флударабин фосфата мРНК FcyRIIIa и FcyRIIIp генов с количеством клеток является его 5» — трифосфат, образующийся в результате по- в мононуклеарной и нейтрофильной фракциях клеток кро-следовательного фосфорилирования нуклеозида флудараби- ви, а также определить их изменения в ответ на присутст-на (2^-араА) под действием клеточных киназ. Сам нуклео- вие ЛПС. зид, в свою очередь, образуется в результате количественного Материалы и методы. В работе использовали монону-дефосфорилирования флударабин фосфата in vivo после его клеарную и нейтрофильную фракции клеток перифериче-внутривенного введения. ской крови пациентов с колоректальным раком (КРР). Цель исследования — возрастающая потребность флу- Раздельные уровни мРНК FcyRIIIa и FcyRIIIp генов опре-дарабин фосфата для использования в химиотерапии деляли с помощью олигоспецифичных праймеров и зондов при лечении онкологических заболеваний послужила сти- методом ОТ-ПЦР с детекцией в реальном времени отно-мулом для разработки многочисленных методов его син- сительно референтного гена YWHAZ (тирозин-3-моноок-теза. С целью промышленного производства флударабин сигеназа/триптофан-5-монооксигеназа). Выделение раз-фосфата на РУП «Белмедпрепараты» освоена технология личных фракций клеток крови проводили на градиенте его получения на основе коммерчески доступного нукле- плотности фиколл-урографина (р = 1,116 и р = 1,076). озида 2^-араА. Процентное содержание клеток в полученных фракциях Материалы и методы. Синтез флударабин фосфата осу- оценивали в ходе проведения проточной цитофлуориме-ществляется путем взаимодействия флударабина с хлоро- трии. кисью фосфора в триметилфосфате, обработкой реакци- Результаты. Процентное отношение гранулярных онной смеси льдом и ее последующей нейтрализации и негранулярных клеток совпадало с отношением уровней раствором гидроксида натрия. Выделение флударабин мРНК FcyRIIIa и FcyRIIIp генов в нейтрофильной фрак-фосфата производится с помощью хроматографии на ка- ции клеток. В мононуклеарной фракции также наблюда-тионообменной смоле при контролируемой температуре ется совпадение между процентным содержанием клеток и последующей кристаллизацией целевого продукта из со- и отношением FcyRIIIa/FcyRIIIp, однако у одного паци-держащих его фракций. ента с КРР регистрировалось увеличение уровней мРНК. Результаты. Использование стадии хроматографии После инкубации в течение 30 мин в присутствии ЛПС на катионите позволяет отделить флударабин фосфат регистрировалось снижение уровня мРНК FcyRIIIa и по-от присутствующих в реакционной смеси побочных при- вышение уровня мРНК FcyRIIIp гена по сравнению
Спецвыпуск / том 16 / 2017 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
