CC BY
36
Таблица 3.
Результаты изучения активности метаболитпого антигена и гипериммунной сыворотки РНГА
Разведение антигена
Разведение сыворотки 1:10 1:20 1:40 о ОС О О о СП о » 5 О (N О
1 10 # # # # # # # # # # #
1 20 # # # # # # # # # # #
1 40 # # # # # # # # # # #
1 80 # # # # # # # # # # #
1 160 # # # # # # # # # # -
1 320 # # # # # # # - - -
1 640 # # # # # #
1 1280 # # # # # #
1 2560 # # # # # #
1 5120 # # # # # #
Из таблиц 2 и 3 видно, что титр соматического и метаболитного антигенов составлял 1:640 и специфических агглютинов к соматическому антигену1 - 1:160 и к метаболитному - 1:320.
Таким образом, методом культивирования неполовозрелых члеников в средах 11РМ1-1640 и 199 и в физиологическом растворе получен метабо-литный, иммунологический активный антиген, содержащий 21,6 мг/л, 48,9 мг/мл, 80,2 мг/мл белков соответственно. Исследования методом гель-хроматографии соматического и метаболитного антигенов Т.за§ша1а обнаружили наличие 11 и 12 фракций антигена с молекулярным весом 6,5-220 кДа и 7,5-116 кДа соответственно. Титр соматического и метаболитного антигенов составлял 1:640, а специфических агглютинов к соматическому антигену - 1:160 и к метаболитному -1:320.
PREPARATION OF ANTIGENS FROM OAENIA SAGINATA (TAENIARHYNCHUS SAGINATUS) AND OBTAINING THE HYPERIMMUNE SERUM TO THEM
D. Temuulen, Z. Batsukh, G. Sumiya, A. Gurbadam, G. Battsetseg, T. Erdenesaikhan
(National Medical University of Mongolia, Institute of Veterinary Medicine,
National Research Center for Infectious Diseases)
We have prepared somatic and secretory antigens and hyperimmune sera to these antigens for serodiagno-sis of human Taenia saginata and bovine cysticercosis and their activity was defined by the reaction of indirect haemagglutination test (IHA).
Литература
1. Зильбер Jl.А. Иммунологические методы исследований. -Москва, 1967. - С.50-115.
2. Allan J.C., Avila G. et al. Immunodmgnosis oftaeina-sis by corpoantigen detection // Parasitology. 1990. dec. - Vol. 101, N.3 - P.473-477.
3. Joshua G.W. et al. Protein antigens in the cyst fluid of Taenia saginata cysticerci // Parasitology. - 1989. -oct. - VoL99, N.2. - P.265-274.
4. Juan Pedro Laclette. et al. Purification of antigen В from Taenia sqlium Cyst cerci by Affinity to Mammalian Collagen // Parasitology. - Vol.76, N.2. - P.273-275.
5. Maizels R.M., Blaxter M.L. Robertson B.D. Parasite antigens Parasite Genes. - New-York. Cambridge, 199!.
6. Xin Zhuan, Su and Annie K. Prestwood Isolation of trichinella-spesific antigens for diagnosis by gradient monoclonal antibody affinity chromotography // Parasitology. - Vol.76, N.6. - 1990. - P.842-848.
7. Morakote N. Charuchinda K. Evaluation of coun-terimmunoelectrophoresis for serodiagnosis of human cysticercosis. // Southeast Asian J Trop med Public Health. - 1986. - Dec. - Vol. 17, N.4. - P.537-42.
© МИНЬКОВ C. A., ВАСИЛЫДОВ М.К., МИНЬКОВ A.C., ЛЯХТЕР Т.Г. -УДК 616.716.4:616-006.634
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ АМЕЛОБЛАСТОМЫ НИЖНЕЙ ЧЕЛЮСТИ
С. А. Миньков, М.К. Василъцов, A.C. Мипьков, Т.Г.<4яхтер.
(Иркутский государственный медицинский университет - ректор акад., МТА и АН ВШ, д.м.н., ироф. A.A. Майборода; кафедра хирургической стоматологии, зав. - доц. И.И. Левен, кафедра гистологии, цитологии и эмбриологии, зав. - д.м.н., ироф. Л.С. Васильева)
Резюме. На основании поисковых экспериментов (кролика) получены модели по клиникоморфологическим характеристикам соответствующих амелобластомной структуре опухолей человека. Делается вывод в сравнении с материалом взятым у собак о приоритетном значении кроликов как животных выбора при получении моделей амелобластомной опухоли.
Состояние проблемы этиологии и патогенеза ни тесно связано с вопросом происхождения эии-амелобластом на протяжении длительного време- телиальной ткани внутри челюстных костей и
способности нх к пролиферации, вследстшш чего могут развиваться опухоли и оиухолеиодобные образования.
В подробном библиографическом исследовании профессора Ю.И. Вернадского [1] говорится о попытках объяснить этот вопрос научно-логическими умозаключениями, основанными на клинико-морфологических наблюдениях за счет:
- эпителия эмалевого органа зубного зачатка -И.Г. Лукомский [4], А.И. Абрикосов (1956), АЛ. Козырева [3];
- за счет метаплазии элементов соединительной ткани в эпителиальную - О.В. Петрова (1956);
- погружения в кость челюсти покровного эпителия полости рта - И.Г. Лукомский [4], АЛ. Козырева [3], Н.Я. Резников (1960).
О возможности развития амелобластомы из эпителия эмалевого органа зубного зачатка свиде-тельстуют морфологические находки в структуре амелобластом эмали на стадии начального её развития.
Что касается роли покровного эпителия полости рта свидетельствуют несколько случаев, описанных И.Г. Лукомским [4], где автор проследил морфологическую связь покровного эпителия полости рта с эпителием амелобластомы. На этом автор построил свою гипотезу, поставив иод сомнение способность островков Малассе к пролиферации. Однако, профессором Ю.И. Вернадским не упоминается о каких-либо попытках авторов воспроизвести амелобластому в условиях эксперимента.
В свободном поиске но Интернет}' мы получили информацию о попытках определения гена амелобластомы человека [12] и не нашли ни одной работы, связанной с индуцированием этой опухоли.
Проводя поисковые многосерийные эксперименты но тематике способности остатков зубообразовательного эпителия островков Малассе к пролиферации у различных животных74 в сопоставлении с секционным материалом человека, мы обратили внимание на принципиально отличную реакцию зубообразовательного эпителия кролика [8]. Эксперименты на кроликах привели к развитию опухолей близких но клинико-морфолиги-ческим данным к амелобластоме. В связи с этим нами была оформлена заявка [7].
Анализ литературных данных показал, что наиболее близким к предлагаемому относится способ создания модели радикулярной кисты челюсти [5]. Выбор прототипа обусловлен одинаковым источником развития эпителия внутри челюстной кости, фигурирующим в перечисленных выше данных большинства исследователей.
Большинство этих авторов предполагают генез радикулярных кист, амелобластом, так называемого "центрального рака челюстей" с пролиферацией остатков зубообразовательного эпителия и одновременно часть этих авторов категорически возражают против возможности такой пролиферации [4].
Принципиальным отличием предлагаемого способа от прототипа явилось воздействие не на остатки зубообразовательного эпителия собаки, а на постоянно функционирующий зубообразовательный эпителий корней зубов кролика, которые как известно, растут в течение жизни у этого животного.
Техническим результатом предлагаемого способа явилось воспроизведение специфического опухолевого роста с учетом профилактики воспалительных явлений и одноэтаиности воздействия.
Вторым принципиальным отличием от прототипа явилось экстраоральное введение раздражителей. так как внутризубное помещение этих раздражителей у кроликов к искомому результату не привели. В третьих, подведение раздражителя каменноугольной смолы в губчатое вещество челюсти, как можно ближе к поверхности корней зубов осуществили в целлоидиновой капсуле с двумя отверстиями диаметром 0,2 мм, что обеспечивало пролонгацию воздействия. Для уменьшения ожидаемой воспалительной реакции создавали дренажное отверстие в кортикальном слое челюсти на расстоянии 5-7 мм дистальнее от места расположения капсулы с каменноугольной смолой. Опытным путем для взрослой особи кролика были установлены оптимальные массы введения насты, содержащей гистидин (15-18 мг) и каменноугольной смолы (25-30 мг вместе с капсулой).Таким образом , новая совокупность признаков соответствовала критерию "новизны" и другим критериям изобретательского уровня.
Способ осуществляли следующим образом. Под внутривенным наркозом амитал-натрия 6% из расчета 0,4-0,5 мл базового раствора на 1 кг веса животного обнажали край нижней челюсти. Отслойку мягких тканей проводили до проекции одной трети верхушечной части корней жевательных зубов. В передней части этой группы зубов обратно конусным бором создавали воспринимающую полость как можно ближе к проекции корня зуба, в которую после гемостаза вводили насту, содержащую 15-18 мг гистидина (Т-соля-нокислого) замешанную на основе белой глины. Отступя дистально на 10-15 мм к проекции крайнего из этой группы зубов, создавали вторую воспринимающую полость, в которую помещали каменноугольную смолу в целлоидиновой капсуле с отверстиями 0,2 мм и длиной 3-4 мм общей массой 25-30 мг. В качестве химического онкогенно-го раздражителя использовалась среднетемиера-турная тяжелая каменноугольная смола ФУ-16, произведенная на заводе полукоксования (цех 7/8) производственного объединения "Ангарскнефте-оргсинтез" из молодых углей Черемховского угольного бассейна. Она используется в качестве антиокислителя при производстве алюмииния и сырья для получения пирокатехина, резорцина и др. соединений [6,10,11].
Для приготовления целлоидиновой капсулы использовали стальную проволоку диаметром 0,2 мм. Ее покрывали тонким слоем вазелинового
Рис.1 и 2. Клетки эпителия в иунктате экспериментальной амелобластоиодобных опухолей. Ув. 90x7 (3)
масла, погружали в густой раствор целлоидина. Затем торец проволоки освобождали от целлоидина, погружали в подогретую каменноугольную смолу. По мере извлечения проволоки относительно целлоидиновых стенок за счет поршневого эффекта шло заполнение канала целлоидиновой трубки каменноугольной смолой. Лезвием безопасной бритвы после остывания смолы можно нарезать капсулы нужных размеров ио необходимому весу.
После введения раздражителей входные отверстия в костной полости пломбировали медной или серебряной амальгамой. Отступя дистально от второй воспринимающей полости на 5-6 мм, создавали дополнительное дренажное отверстие диаметром 1,5-2 мм для устранения избыточного внутрикостного давления, возникающего как ответная реакция на оперативное вмешательство и химический раздражитель, помещенный в капсуле. Послойные швы накладывали таким образом, чтобы линия швов не совпадала со сделанными отверстиями. Между швами оставляли дренаж до периода заживления кожной раны. Для этого дренажную резинку подшивали к кожному краю. Это важно для того, чтобы животное их раньше времени не сместило или выдернуло при почесывании лапами. Рацион питания был обычным. Клиническое наблюдение проводили от 3 до 6 и более месяцев. Всего в эксперименте участвовало 12 животных. Из них 3 ио вышеописанной методике. В 2 из 3-х случаях был получен опухолевый рост.
Примером может служить кролик (самка) оперированный но выше описанной методике. Послеоперационный период протекал без выраженных воспалительных проявлений. Рана зажила первичным натяжением. Спустя 3 месяца стало заметным муфтообразное вздутие нижней челюсти, которое постепенно стало увеличиваться и к 6 месяцам достигло размеров представленных на рисунке 3.
Была проведена тонкоигольная асиирационная пункция новообразования. Мазок мутноватой жидкости окрасили ио Паиентейму и Романов-скому-Гимза. В мазке обнаружили клетки плоско-
го эпителия с элементами атииии (рис.1 и 2). Животное иод наркозом аминал-натрия было выведено из эксперимента. Гистотоиографические срезы поперек "вздутой" челюсти обнаружили наличие самостоятельных кистозных полостей, которые были заполнены отличающимся ио внешнему виду содержимым, что подчеркивало наличие самостоятельных полостных образований (рис.З).
Рис.З. Внешний вид удаленной нижней челюсти кролика (вид сверху)
Рис.4. Амелобластоиодобная опухоль у кролика. Видны две самостоятельные полости, выстланные 2-3 слоями плоского эпителия на "конусовидной соединительнотканной основе. Ув. 20x7
Эти полости имели выстилку из 2-3 слоев плоских эпителиальных клеток. В местах прилегания
Puc.5. Формирование дочерних кистозных полостей, содержащих характерный для иолшшстом "решкули-рованный" эпителий ( стрелка). У в. 20x7
ИИМИИИИИИНІ■ тшшшшт і -М«». УИ¥ **'Н4
Ї':'Ж . *4 ¿да 7iÎ- Я
>édP/' ¿¿¿¡с[Лі
''Y^* r / ■¿r’L’V *• 2к#*імей
BKW N
^ Мж&'Ш
’¿¡ъ jühWî!îіНіЖИняВ
■■ щр^ЙрїЧІ*. 'Ji
її j^^,cb.xow-> j.« .’F 4«<&01з
Puc.6. Эмалеиодобная субстанция, иршіегающая к эпителиальной поверхности в развивающейся амелобла-стомной структуре (стрелка). Ув. 20x7
кистозных образований к наружной кортикальной пластинке нижней челюсти со стороны надкостницы отмечались признаки оппозиционного роста кости. Базальная основа новообразования была представлена тонким слоем соединительной ткани, выстланной изнутри такими же 2-3 слоями плоских эпителиальных клеток, которая местами образовывала выпячивания, вершиной обращенной внутрь челюсти к тонким межкистозным перегородкам Это, но нашему мнению, является морфологическим признаком, характерным для поликистозных форм аме-лобластомы [2]. Эти перегородки затем вновь расширяясь образовывали дочерние более мелкие кистозные полости с ретикулированным эпителием и характерным эпителиальным синцитием (рис.4). В области некоторых дочерних кистозных образований обнаружено эмалеиодобное вещество, прилегающее к эпителиальной поверхности (рис.5).
Наличие всех этих структурных особенностей пролиферирующего зубообразовательного эиите-
лия постоянно растущих зубов кролика, но нашему мнению, соответствует основным морфологическим признакам, характерным для поликистозных форм амелобластомы [2]. Нужно отметить, что клинически процесс протекал без свищей, а так как нигде не были обнаружены связи с покровным эпителием полости рта кролика, мы можем утверждать, что эпителий был именно зубообразовательного органа и гипотеза И.Г. Луком-ского в ходе данного эксперимента не нашла своего подтверждения. Что касается концепции
О.В. Петровой, то нами она не проверялась.
Ввиду того, что при наших поисковых экспериментах на собаках нам приходилось применять введение указанных раздражителей экстраораль-ным путем, подобным описанному выше и мы не смогли получить подобных заявленному результатов. можно сделать вывод о целесообразном использовании для моделирования амелобластом именно кролика, как животного выбора.
THE WAY OF MODELLING AMELOBLASTOMA OF LOW JAW
S.A. Minjkov, M.K. Vasiljtsov, A.S. Minjkov, T.G. Lakhter
(Irkutsk State Medical Academy)
On the base of search experiments (on a rabit) there have been obtained the models corresponding to the ameloblastonic structure of human tumors on the clinical and morphological descriptions. The conclusion is made of the priority significance of rabits as the animals of choice in obtaining the models of ameloblastomic tumor as compared with the material taking from dods.
Литература
1. Вернадский Ю.И. Основы челюстно-лицевой хирургии и хирургической стоматологии // М.: "Мед. литература". - 2000. - С.293-300.
2. Ермолаев И.И. Морфология адамантином // Сб.:
Теория и практика стоматологии. - М., 1965. -Выи.8. - С.49-54.
3. КозыреваА.Л. Клиника и лечение адамантином, цементом, одонтом. - М.: Медгнз. - 1959. - С. 120.
4. Лукомский И.Т. Одонтогенные опухоли. - М., 1927. -С.250.
5. Миньков С.А., Васильцов М.К. Способ создания модели радикулярной кисты челюсти. A.C. 703859 приоритет от 15 февраля 1978 г.
6. Миньков A.C., Миньков С.А Способ моделирования внутриглазной меланомы. A.C. 1489456 приоритет от 26 января 1987 г.
7. Миньков С.А., Васильцов М.К., Миньков A.C., Ляхтер T.L. Способ моделирования амелобластомы нижней челюсти. Заявка №2001131246, приоритет от 19.11.01.
8. Миньков С.А., Васильцов М.К. Сравнительная оценка реакции остатков зубообразовательного эиителия при моделировании кистозных образований челюсти у различных животных // Бюл. Восточно-Сибирского научного центра Сибирского отделения Российской академии медицинских наук. -Иркутск, 2000. -№1 (11). -С.36-41.
9. Паникаровский В.В., Еригорьян АС., Миньков С.А Возрастные особенности остатков зубообразовательного эиителия и их реакция при хроническом периодонтите // Стоматология. - 1988. -№4. - С.6-10.
10. Шабад JI.М. О циркуляции канцерогенов в окружающей среде. М., Медицина, 1973. - 367 с.
11. Известия НИИ нефте- и углехлмического синтеза // Науч. конф. Иркутского гос. ун-та им. A.A. Жданова:'Тез. докл. - Йркутск, 1969. - ТХП. - С.99-217.
12. Toyosawa S., Fujiwara Т., Ooshima Т., Shintani S., Sato A., Ogawa Y., Sobue S., Ijuhin N. Cloning and
characterization of the human ameloblastin gene. // Departament of Oral Pathologi, Osaka University Faculty of Dentistry. - Osaka, Japan. - 1-8 Yamadaoka, Suita, 2001. - P.565-0871, Toyosawa@dent.osaka-
u. ac.jp.
© ТИРСКАЯ О.И., МОЛОКОВ В.Д., ВАСИЛЬЕВА Л .С, -УДК 616.342.17-008.1-08
ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ВВЕДЕНИЯ АНТИБИОТИКОВ МЕТОДОМ ТРАНСМЕМБРАННОГО ДИАЛИЗА ПРИ ЛЕЧЕНИИ ПАРОДОНТИТА
О. И. Тирская, В. Д. Молоков, Л.С. Васильева.
(Иркутский государственный медицинский университет - ректор акад., МТА и АН ВШ, д.м.н., проф. A.A. Майборода; кафедра терапевтической стоматологии, зав. - д.м.н., проф. В.Д. Молоков, кафедра гистологии, зав. - д.м.н., проф. Л.С. Васильева)
Резюме. Проведено лечение 30 больных в возрасте 31-50 лет с хроническим генерализованным пародонтитом средней степени тяжести в стадии обострения. Установлено более раннее купирование воспаления в тканях пародонта при введении антибиотика трансмембранным диализом по сравнению с наложением десневых повязок. Эти данные позволяют рекомендовать метод трансмембранного диализа для лечения хронического генерализованного пародонтита.
Результат терапевтического лечения заболеваний пародонта в большой степени зависит от интенсивности и продолжительности воздействия нротивомикробного препарата на очаг поражения. Местное использование медикаментозных препаратов не всегда даёт возможность добиться желаемого лечебного эффекта в связи с анатомическими и физиологическими особенностями полости рта, способствующими быстрому вымыванию лекарственных средств [4.5]. При системном приеме препаратов (нероральном и инъекционном) бывает сложно создать необходимую эффективную концентрацию вещества в очаге воспаления из-за микроциркуляторных расстройств в зоне поражения, возникающих при хроническом воспалении [2]. При увеличении же доз препарата и продолжительности их приема возрастает частота побочных реакций. Поэтому важным вопросом в проблеме лечения пародонтита остается поиск оптимальных способов введения препаратов в ткани пародонта, обеспечивающих атравматичность, достижение эффективной концентрации препарата в очаге воспаления и сохранение ее в течение необходимого промежутка времени. По данным Б.С. Гракова [1] наиболее оптимальным местным способом введения антибиотиков является трансмембранный диализ. Вместе с тем сведений о применении метода трансмембранного диализа при лечении заболеваний пародонта в доступной литературе нами не обнаружено.
Целью нашей работы явилось исследование лечебного эффекта трансмембранного диализа антибиотиков в лечении больных с хроническим генерализованным пародонтитом.
Материалы и методы Под клиническим наблюдением находилось 30 женщин в возрасте от 31 до 50 лет с диагнозом хронический генерализованный пародонтит в стадии обострения средней степени тяжести. Десяти больным проводилось лечение с помощью наложения десневой повязки на основе антибиотикосодержащей мази (группа сравнения), двадцати другим - с помощью раствора антибиотика и ди-мексида в соотношении 9:1, вводимого методом трансмембранного диализа (основная группа). Как при диализе, так и при лечении десневыми повязками использовались антибиотики группы линко-замидов, макролидов и аминогликозидов (антибиотик выбирался с учетом чувствительности микрофлоры народонтального кармана). Диализатор (рационализаторское предложение №4198) или десневую повязку накладывали на 25 минут два раза в день. Для контроля клинической эффективности местного лечения использовали индекс гигиены (ИГ), пробу Шиллера-Писарева, на-пиллярно-маргинально-альвеолярный индекс
(РМА), пробу Кулаженко.
Наличие воспаления в десне оценивали при помощи пробы Шиллера-Писарева и индекса РМА но Parma (1960). Для определения индекса РМА окрашивали десну в области обследуемых зубов раствором Шиллера-Писарева. Состояние тканей пародонта оценивали следующим образом: Р - 1 - воспаление десневого сосочка,
М - 2 - воспаление десневого края,
А - 3 - воспаление альвеолярной десны. Полученные цифры суммировали, индекс определяли но формуле:
