Специфичность регуляторной популяции ревматоидного фактора Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Физиологические исследования

УДК 616:612.017.1 (045)

Е.Ю. Столярова, Л.В. Бедулева, И.В.Меньшиков, Т.В. Храмова, Ю.В. Никонова СПЕЦИФИЧНОСТЬ РЕГУЛЯТОРНОЙ ПОПУЛЯЦИИ РЕВМАТОИДНОГО ФАКТОРА

В ранее проведенных исследованиях было обнаружено, что популяция ревматоидного фактора, определяемая методом агглютинации танизированных нагруженных гомологичным IgG эритроцитов, участвует в регуляции аутоиммунной реакции в модели коллаген-индуцированного артрита крыс. Специфичность ревматоидного фактора, проявляющего регуляторные свойства, антигенная форма молекулы IgG, несущая антигенные детерминанты для данного ревматоидного фактора, не известны. С целью выяснить специфичность регуляторного ревматоидного фактора исследовали способность разных антигенных форм гомологичного IgG, а также IgG кролика конкурировать за связывание с ревматоидным фактором, индуцировать его продукцию in vivo. Обнаружено, что регуляторный ревматоидный фактор специфичен к новым детерминантам на Fc-фрагментах гомологичного IgG, которые отсутствуют на мономерной нативной молекуле гомологичного IgG, и могут быть индуцированы на IgG методами папаинового гидролиза или тепловой агрегации. IgG кролика, известный как носитель детерминант для ревматоидного фактора и используемый в качестве антигена в тест-системах для его определения, не несет детерминанты для исследуемого ревматоидого фактора.

Ключевые слова: ревматоидный фактор, регуляция аутоиммунных реакций, Fc-фрагменты IgG, иммуноглобулин кролика, панагглютинины.

Ревматоидный фактор (РФ) изначально был определен как аутоантитела против Fc-фрагментов IgG, высокий уровень которого в крови ассоциирован с ревматоидным артритом. Позже было обнаружено, что ревматоидный фактор может взаимодействовать с разными антигенными детерминантами на молекуле IgG - аллотипическими, видоспецифичными, новыми детерминантами, не представленными на мономерной нативной молекуле IgG, но появляющимися при агрегации IgG или образовании иммунных комплексов [1-3]. Поэтому сегодня ревматоидный фактор рассматривают как гетерогенную группу антител, включающую популяции разной специфичности. Расширяющиеся знания о специфичности ревматоидного фактора заставляют по-новому взглянуть на функции ревматоидного фактора, которые до настоящего времени сводятся в основном к участию в формировании иммунных комплексов и усугублению клиники ревматоидного артрита [4]. Существуют факты, указывающие на то, что некоторые популяции РФ могут участвовать в регуляции иммунного ответа [5; 6]. В наших исследованиях было обнаружено, что популяция РФ, определяемая методом агглютинации танизированных нагруженных гомологичным IgG эритроцитов, участвует в регуляции иммунного ответа на бычий коллаген (БК) в модели коллаген-индуцированного артрита (КИА) крыс [7]. В частности, мы показали, что развитие артрита у крыс в данной модели ассоциировано с относительно низкой продукцией РФ в период инициации иммунного ответа. Крысы, у которых наблюдалась интенсивная продукция РФ в этот период, оказались устойчивыми к артриту. Кроме того, нами было показано, что стимуляция продукции РФ у крыс с индуцированным артритом подавляет аутоиммунную реакцию к коллагену и значительно редуцирует симптомы артрита [8]. Поэтому лимфоциты, продуцирующие РФ, могут рассматриваться как потенциальная мишень для разработки средств терапии ревматоидного артрита. Специфичность РФ, проявляющего регуляторные свойства, антигенная форма молекулы IgG, несущая антигенные детерминанты для данного РФ, не известны. Не ясно также, может ли РФ с регуляторными свойствами быть определен с помощью других тест-систем для исследования РФ, в частности в тест-системе, где антигеном служит IgG кролика. В связи с чем целью работы было выяснение специфичности популяции ревматоидного фактора, влияющей на развитие аутоиммунной реакции в модели коллаген-индуцированного артрита и определение антигенной формы молекулы IgG, несущей детерминанты для РФ.

Материалы и методика исследований

Для выяснения специфичности РФ, определяемого в тест-системе с использованием в качестве антигена танизированных нагруженных гомологичным IgG эритроцитов и поиска антигенной формы

БИОЛОГИЯ. НАУКИ О ЗЕМЛЕ

молекулы IgG, несущей антигенные детерминанты для РФ, использовали несколько методических подходов.

Во-первых, учитывая известный феномен панагглютининов - антител против танизированных эритроцитов, сравнивали интенсивность реакции агглютинации танизированных эритроцитов и танизированных нагруженных гомологичным IgG эритроцитов РФ-содержашей сывороткой, полученной от интактных крыс и крыс иммунизированных БК. Также исследовали кинетику антител, взаимодействующих с танизированными эритроцитами и антител против танизированных нагруженных гомологичным IgG эритроцитов у крыс иммунизированных БК.

Во-вторых, применяли классический для выяснения специфичности подход. В конкурентной схеме метода, используемого для определения РФ, находили антигены, способные вызывать торможение реакции агглютинации танизированных эритроцитов нагруженных гомологичным IgG. В качестве потенциальных конкурентов были использованы Fc-фрагменты IgG крысы, смесь Fc и Fab-фрагментов IgG крысы, тепловые агрегаты IgG крыс, IgG кролика. Для постановки метода подбирали минимальную агглютинирующую дозу (МАД) РФ-содержащей сыворотки и использовали разведение РФ, соответствующее 2-3 МАД. РФ-содержащая сыворотка была получена от крыс иммунизированных БК.

В-третьих, исследовали способность антигенов индуцировать продукцию РФ in vivo. Для этого крыс иммунизировали мономерным нативным IgG крысы (Sigma), Fc-фрагментами IgG крысы, тепловыми агрегатами IgG крысы, танизированным IgG крысы, IgG кролика (ИМТЕК), бактериальным липополисахаридом (ЛПС) Pseudomonas aeruginosa, используя коммерческий препарат Пирогенал, и определяли уровень РФ в крови крыс в течение 2 недель после иммунизации. Антигены вводили однократно, в составе неполного адъюванта Фрейнда (НАФ) (Sigma).

Fc-фрагменты крысы, использованные для исследования, были получены методом папаинового гидролиза, очищены с помощью ионообменной и эксклюзионной хроматографии и имели чистоту в электрофорезе в ПААГ не менее 90%. Тепловые агрегаты IgG крысы получали нагреванием раствора белка при 63 0C в течение 20 мин. и очищали с помощью эксклюзионной хроматографии. Выход агрегатов IgG составил 20 %.

Также был проведен сравнительный анализ специфичности исследуемого РФ и РФ, определяемого в тесте, где антигеном служит IgG кролика. Для этого крыс иммунизировали БК и исследовали кинетику ревматоидных факторов. Кроме того, определяли способность IgG кролика вызывать торможение реакции агглютинации танизированных нагруженных гомологичным IgG эритроцитов, вызванной РФ, и способность IgG кролика вызывать индукцию РФ против танизированных нагруженных гомологичным IgG эритроцитов.

РФ, специфичный к танизированным нагруженным гомологичным IgG эритроцитам, определяли по методике, описанной ранее [7]. Эритроциты человека группы 0 фиксировали глутаровым альдегидом (ГА), обрабатывали танином, нагружали IgG крыс (Sigma). Исследуемую сыворотку титровали и смешивали с нагруженными эритроцитами в равных объемах, инкубировали при 37 °С в течение 3 ч.

РФ против IgG кролика определяли методом ИФА.

Результаты и их обсуждение

Сравнение специфичности популяции РФ, обладающей регуляторными свойствами, и панагглютининов. Тест-система, используемая нами для определения РФ, была разработана в свое время как тест-система для определения ревматоидного фактора [9]. Предполагается, что антигеном в данной тест-системе служит модифицированный танином IgG сорбированный на эритроцитах [10]. Однако описанный в литературе феномен панагглютининов - антител, вызывающих агглютинацию эритроцитов, обработанных танином, и присутствующих в крови здоровых и больных артритом людей [11; 12], вызвал сомнения в том, что антитела, определяемые в использованной нами тест-системе, являются ревматоидным фактором, то есть антителами против Fc-фрагментов IgG. Поэтому был проведен сравнительный анализ интенсивности реакции агглютинации танизированных эритроцитов (ЭТ) и танизированных нагруженных гомологичным IgG эритроцитов ^TIgG) РФ-содержашей сывороткой, полученной от интактных крыс и крыс иммунизированных БК (табл. 1).

Все исследованные РФ-содержащие сыворотки не взаимодействовали с нативными эритроцитами человека, неспецифически незначительно взаимодействовали с эритроцитами фиксированными глутаровым альдегидом. Сыворотка интактных крыс вызывала агглютинацию танизированных и та-низированных нагруженных IgG эритроцитов в равной степени. Титр сыворотки иммунизированных

БК животных, полученной на максимуме РФ, в реакции агглютинации с ЭТIgG, достоверно выше, чем при использовании в качестве антигена ЭТ. Однако сравнительный анализ кинетики антител в ходе иммунного ответа против БК, выявляемых в агглютинационном тесте, где антигеном служили ЭТ и ЭТIgG, показал, что уровень антител, определяемых в тесте с танизированными эритроцитами изменяется синхронно с изменением уровня антител, определяемых в тесте с танизированными, нагруженными IgG эритроцитами (рис. 1). Максимумы образования антител против танизированных эритроцитов и танизированных нагруженных IgG эритроцитов совпадают во времени.

Таблица 1

Титр РФ-содержащей сыворотки крыс против танизированных эритроцитов и ЭТIgG

Исследованные сыворотки Эритроциты на стадиях последовательной обработки при приготовлении тест-системы

Нативные эритроциты Эритроциты, фиксированные ГА Эритроциты, фиксированные ГА, танизированные (ЭТ) Эритроциты, фиксированные ГА, танизированные, нагруженные IgG крыс (ЭТДО)

РФ-содержащая сыворотка интактных крыс (титр^Э), (п=40) 0 36±16,2 140±210,2 147,4±253,7

РФ-содержащая сыворотка крыс, иммунизированных БК, полученная на максимуме РФ в крови (титр^Э), (п=25) 0 40±32,6 568,6±971,5 1525,9±2978.3* (Р = 0,04)

Сыворотка кролика против IgG крысы (титр) 0 16 256 16192

Антисыворотка против IgG человека (НИИ ЭМ предприятие по производству бакпре-паратов им. Гамалеи), (титр) 128 128 256 16192

Рис. 1. Кинетика антител, определяемых в тест-системе с танизированными эритроцитами и РФ, определяемого в тест-системе с танизированными, нагруженными IgG эритроцитами в ходе иммунного ответа против БК. Каждая точка представлена средним от 7 крыс±SD

БИОЛОГИЯ. НАУКИ О ЗЕМЛЕ

Из этих данных следует, что популяция РФ с регуляторными свойствами и панагглютинины -одни и те же антитела, и танизированные эритроциты ненагруженные IgG уже несут антигенные детерминанты, с которыми взаимодействует РФ. Несмотря на то, что данный эксперимент не раскрывает природу этих детерминант, можно предполагать, что они имеют иммуноглобулиновую природу. Так обнаружено, что антисыворотка против IgG человека (табл. 1) взаимодействует с нативными эритроцитами. То, что эритроциты несут IgG на своей поверхности в норме, описано в литературе [13]. Возможно, при обработке эритроцитов легким денатурирующим агентом - танином молекулы IgG, присутствующие на мембране эритроцитов, приобретают новые детерминанты, которые исходно на молекуле IgG отсутствуют.

Исследования специфичности РФ, обладающего регуляторными свойствами, методом конкурентного анализа. Исследование реакции агглютинации танизированных нагруженных IgG эритроцитов, вызванной РФ-содержащей сывороткой, полученной от крыс иммунизированных БК, в присутствии Fc-фрагментов IgG крысы, смеси Fc- и Fab-фрагментов IgG крысы, тепловых агрегатов IgG, а также IgG кролика, показало, что только чистые Fc-фрагменты IgG крысы конкурируют за связывание с РФ-содержащей сывороткой (табл. 2). Примесь Fab-фрагментов мешает конкуренции Fc-фрагментов за связывание с РФ. Тепловые агрегаты гомологичного IgG вызывали спонтанную агрегацию танизированных нагруженных IgG эритроцитов, что не позволило выяснить их способность взаимодействовать с РФ.

Таблица 2

Агглютинация ЭТIgG IgG эритроцитов РФ-содержащей сывороткой в присутствии антигенов - потенциальных носителей детерминант для РФ

2-3 МАД РФ-содержащей сыворотки (титр) ЗФР (контроль) Fc-фрагменты IgG крыс (0,5 мг/мл) Смесь Fc- и Fab-фрагментов IgG крыс (0,5 мг/мл) IgG кролика (0, 4 мг/мл)

256 + - + +

Примечание. (+) - наличие агглютинации, (-) - отсутствие агглютинации.

10000

е

Си

100

1

0 7 14

дни после иммунизации " ■ " крыс —А— Бс-фрагменты ^С крыс

♦ тепловые аггрегаты ^С крыс —• - танизированный ^О крыс

—•— лпс

—♦ " ^О кролика

Рис. 2. Кинетика РФ в ответ на введение различных антигенов. IgG крысы (500 мкг, внутрикожно),

Fc-фрагменты IgG крыс (500 мкг, внутрикожно), тепловые аггрегаты IgG крыс (500 мкг, внутрикожно), танизированный IgG крыс (500 мкг, внутрикожно), ЛПС (50 мкг, внутрибрюшинно), IgG кролика (500 мкг внутрикожно). Каждая точка представлена средним от 3 крыс±SD

Таким образом, РФ, определяемый в тест-системе, где антигеном служат танизированные нагруженные гомологичным IgG эритроциты, специфичен к Fc-фрагментам гомологичного IgG. IgG кролика не несет детерминант для РФ, определяемого в тесте агглютинации танизированных нагруженных IgG эритроцитов.

Индукция РФ, обладающего регуляторными свойствами. Третьим подходом в исследовании специфичности РФ было изучение способности разных антигенных форм гомологичного IgG (мономерного нативного IgG крысы, Fc-фрагментов IgG крысы, тепловых агрегатов IgG крысы, танизиро-ванного IgG крысы), а также IgG кролика и ЛПС индуцировать продукцию РФ in vivo. Результаты определения уровня РФ у иммунизированных данными антигенами крыс представлены на рис. 2.

Повышение уровня РФ в крови иммунизированных животных вызывают Fc-фрагменты IgG крысы и тепловые агрегаты IgG крыс (рис. 2). Индукция РФ Fc-фрагментами гомологичного IgG или тепловыми агрегатами мономерного гомологичного IgG при отсутствии его повышения мономерным нативным гомологичным IgG свидетельствует о том, что РФ специфичен к новым детерминантам на Fc-фрагментах, которые появляются в процессе получения Fc-фрагментов методом папаинового гидролиза IgG или тепловой модификации гомологичного IgG, то есть являются индуцируемыми. Обработка IgG танином не привела к индукции детерминант для РФ с регуляторными свойствами, также они отсутствуют на IgG кролика. ЛПС не вызвали повышения уровня РФ. Иммунизация ЛПС является широко используемой моделью индукции ревматоидного фактора [14]. Однако полученные нами данные показывают, что ЛПС не вызывает повышения популяции регуляторного РФ, определяемой в тесте агглютинации танизированных нагруженных IgG эритроцитов.

Сравнение специфичности РФ против танизированных нагруженных гомологичным IgG эритроцитов и РФ против IgG кролика. В качестве антигена для определения РФ в научных и клинических исследованиях широко используют IgG кролика. Использование IgG кролика облегчает стандартизацию тест-систем для определения РФ, так как мономерный нативный IgG кролика несет детерминанты, которые на IgG человека появляются только после тепловой агрегации [3] или связывания с антигеном [15]. Кроме того, принято считать, что специфичность теста, использующего IgG кролика для определения РФ при диагностике ревматоидного артрита человека, существенно выше, чем специфичность теста агглютинации латекса нагруженного IgG человека [16]. Чтобы выяснить, являются РФ специфичный к IgG кролика и РФ специфичный к танизированным нагруженным гомологичным IgG эритроцитам (3TIgG) одними и теми же антителами или разными, исследовали кинетику РФ против данных антигенов в ходе иммунного ответа, вызванного иммунизацией крыс БК (рис. 3).

500 т

400 -

е

Си &

к

300 --

Р 200 -

100 -

т 40000

0

7

42

14 21 28 35 дни после иммунизации

РФ против 1§0 кролика - • - РФ против ЭТ1§С

+ антитела против БК

Ы pq

-- 30000

-- 20000 5

-- 10000

& S

Рис. 3. Кинетика РФ, определяемого методом агглютинации танизированных нагруженных гомологичным IgG эритроцитов, и РФ, специфичного к IgG кролика у крыс, иммунизированных БК и оказавшихся устойчивыми к коллаген-индуцированному артриту. Каждая точка представлена средним от 7 крыс±SD

БИОЛОГИЯ. НАУКИ О ЗЕМЛЕ

Обнаружено, что иммунизация крыс БК в НАФ вызывает повышение уровня обоих исследуемых РФ (рис. 3) у крыс, оказавшихся устойчивыми к артриту. Однако временные максимумы образования РФ против IgG кролика и РФ против ЭТIgG не совпадают. Так, максимум РФ против ЭТIgG наблюдается на 7-й день после иммунизации БК, тогда как РФ против IgG кролика - на 21 день, более того, кинетика исследуемых ревматоидных факторов носит реципрокный характер. Данный факт служит основанием утверждать, что РФ против IgG кролика и РФ против ЭТIgG - разные по специфичности популяции ревматоидного фактора. В пользу данного вывода свидетельствуют также представленные выше факты, что IgG кролика не вызывает торможение агглютинации танизированных нагруженных IgG крысы эритроцитов (табл. 2) и не индуцирует продукцию РФ против ЭТIgG в течение 14 дней после иммунизации (рис. 2). Заслуживает внимания факт повышения РФ против IgG кролика у устойчивых к артриту крыс в период инициации иммунного ответа. Данный факт наводит на мысль, что РФ против IgG кролика, как и РФ против ЭТIgG, может быть фактором регуляции иммунного ответа.

Ревматоидный фактор, обладающий регуляторными свойствами в отношении аутоиммунной реакции, развивающейся у крыс в ответ на иммунизацию БК, был обнаружен нами ранее с помощью агглютинационной тест-системы, использующей в качестве антигена танизированные нагруженные гомологичным IgG эритроциты. Однако известный из литературы факт о панагглютининах - антителах, агглютинирующих танизированные эритроциты, обнаруживаемых у здоровых и больных аутоиммунными заболеваниями людей, заставил усомниться в том, что с помощью данной тест-системы определяются аутоантитела против Fc-фрагментов IgG, то есть ревматоидный фактор. Мы также обнаружили, что антитела против танизированных эритроцитов, то есть панагглютинины и ревматоидный фактор, определяемый в тесте с танизированными нагруженными гомологичным IgG, являются сходными по специфичности антителами. Об этом свидетельствует отсутствие различий в кинетике РФ и панаглютининов в ходе иммунного ответа на БК (рис. 1).

С целью выяснить, является ли изучаемый нами фактор ревматоидным фактором, то есть антителами специфичными к Fc-фрагментам гомологичного IgG, использовали несколько подходов. Мы обнаружили, что Fc-фрагменты конкурируют с ЭТIgG за связывание с РФ (табл. 2) и индуцируют продукцию РФ in vivo (рис. 2). Таким образом, фактор регуляции аутоиммунной реакции в модели КИА крыс является истинным ревматоидным фактором, то есть антителами специфичными к Fc-фрагментам гомологичного IgG.

Индукция РФ Fc-фрагментами гомологичного IgG, при отсутствии его повышения в ответ на иммунизацию мономерным нативным гомологичным IgG, свидетельствует о том, что регуляторный РФ специфичен к новым детерминантам на гомологичных Fc-фрагментах, которые отсутствуют на константных участках мономерного нативного гомологичного IgG и могут быть индуцируемы методом папаинового гидролиза IgG. Антигенные детерминанты для регуляторного РФ могут присутствовать и на тепловых агрегатах IgG, поскольку они так же, как и Fc-фрагменты, вызывают продукцию РФ in vivo, однако получить более убедительные доказательства в пользу этого с использованием метода конкуренции не удалось в связи с тем, что тепловые агрегаты гомологичного IgG спонтанно агглютинируют ЭТIgG.

IgG кролика, известный как носитель детерминант для ревматоидного фактора и используемый в качестве антигена в тест-системах для его определения, не несет детерминанты для РФ, определяемого в тесте агглютинации танизированных нагруженных IgG эритроцитов. На это указывают факты, что IgG кролика не конкурирует с ЭТIgG за связывание с РФ против ЭТIgG и не индуцирует его продукцию. Поэтому РФ против ЭТIgG не может быть определен в тесте с использованием в качестве антигена IgG кролика.

Также в пользу того, что ревматоидный фактор, определяемый в тесте агглютинации ЭТIgG, и РФ специфичный к IgG кролика - разные по специфичности ревматоидные факторы, свидетельствует факт, что кинетические кривые этих ревматоидных факторов в ходе иммунного ответа на БК носят реципрокный характер. Однако РФ специфичный к IgG кролика, как и РФ против ЭТIgG, также может обладать регуляторными свойствами в отношении иммунного ответа против коллагена в модели КИА крыс. В пользу этого свидетельствует повышение РФ против IgG кролика в период инициации иммунного ответа против БК и реципрокный характер изменения уровня РФ против IgG кролика и антител к коллагену у крыс иммунизированных БК (рис. 3). Участие РФ против IgG кролика в регуляции требует дальнейших исследований.

Таким образом, выяснена специфичность популяции ревматоидного фактора, обладающего су-прессорной активностью в отношении аутоиммунной реакции в модели КИА крыс. Знания о специфичности регуляторного РФ послужат основой для разработки лекарственного средства для лечения ревматоидного артрита и раскрытия механизмов регуляции аутоиммунных реакций с участием ревматоидного фактора.

Выводы

Ревматоидный фактор, определяемый методом агглютинации танизированных нагруженных гомологичным IgG эритроцитов, обладающий супрессорной активностью в отношении аутоиммунной реакции в модели коллаген-индуцированного артрита крыс, специфичен к новым детерминантам на Fc-фрагментах гомологичного IgG, которые отсутствуют на мономерной нативной молекуле гомологичного IgG, и могут быть индуцированы на IgG методами папаинового гидролиза или тепловой агрегации. IgG кролика, известный как носитель детерминант для некоторых ревматоидных факторов, не несет детерминанты для исследуемого ревматоидного фактора. Неожиданным оказалось то, что регуляторная популяция ревматоидного фактора по специфичности сходна с антителами, получившими название панагглютинины.

Благодарности

Работа поддержана грантом ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» «Разработка технологии получения антигенных детерминант на фрагментах иммуноглобулина G для индукции регуляторных антител, подавляющих аутоиммунные реакции», 2012-2013.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Ota T. Present status and problems with rheumatoid factor as a laboratory test // Rinsho Byori. 2003. Vol. 51. P. 649-655.

2. Brown E.J., Bekisz J.J. Neoantigens appear in human IgG upon antigen binding: detection by antibodies that react specifically with antigen-bound IgG // Immunol. 1984. Vol. 132. P. 1346-1352.

3. Dissanayake S., Hay F.C., Roitt I. The binding constants of IgM rheumatoid factors and their univalent fragments for native and aggregated human IgG // Immunology. 1977. Vol. 32. P. 309-318.

4. Fehr T., Bachmann M. F., Bucher E., Kalinke U., Di Padova F.E, Lang A.B., Hengartner H., Zinkernagel R.M. Role of Repetitive Antigen Patterns for Induction of Antibodies Against Antibodies // J. Exp Med. 1997. Vol. 185. P. 1785-1792.

5. Nemazee D.A., Sato V.L. Induction of rheumatoid antibodies in the mouse. Regulated production of autoantibody in the secondary humoral response // J. Exp. Med. 1983. Vol. 158. P. 529 - 545.

6. Carson D.A., Chen P.P., Fox R.I., Kipps T.J., Jirik F., Goldfien R.D., Silverman G., Radoux V., Fong S. Rheumatoid factor and immune Networks // Ann. Rev. Immunol. 1987. Vol. 5. P. 109-126.

7. Beduleva L., Menshikov I. Role of idiotype-anti-idiotype interactions in the induction of collagen-induced arthritis in rats // Immunobiology. 2010. Vol. 215. P. 963-970.

8. Меньшиков И.В., Бедулева Л.В. Применение Fc-фрагментов иммуноглобулина класса G в качестве антигена для лечения ревматоидного артрита, средство и способ лечения // Патент на изобретение № 2385164. 2010.

9. Zutshi D.W. Reading C.A., Epstein W.V., Ansell B. M., Holborow E. J. FII haemagglutination test for serum anti-gammaglobulin factors in arthritides sero-positive and sero-negative by other tests // Ann Rheum. Dis. 1969. Vol. 28. P. 289-299.

10. Oreskes I, Mandel D. Reactivity of sized thermal aggregates of immunoglobulin G with IgM rheumatoid factor // Immunology. 1984. Vol. 51. P. 115-121.

11. Голод И.С. О факторе, агглютинирующем танизированные эритроциты // Лабораторное дело. 1969. №11. С. 676-677.

12. Hubinon P.O., Ghysdael P., Thys O. Production of an agglutinating auto-antibody (panagglutinin) active upon tanned erythrocytes in the rabbit // Nature. 1959. Vol. 184. P. 1250-1251.

13. Szymanski I.O., Odgren P.R., Fortier N.L., Snyder L.M. Red blood cell associated IgG in normal and pathologic states // Blood. 1980. Vol. 55. P. 48-54.

14. Kanoh M., Utsumi S., Hino T. Induction of rheumatoid factors in mice by immune complexes of bacterial lipopoly-saccharide with mouse IgG antibody // Eur. J. Immunol. 1986. Vol. 16. P. 63-68.

15. Кульберг А.Я. Атииммуноглобулины. М.: Медицина, 1978. 182 с.

БИОЛОГИЯ. НАУКИ О ЗЕМЛЕ

16. Tuomi T. Which antigen to use in the detection of rheumatoid factors? Comparison of patients with rheumatoid arthritis and subjects with 'false positive' rheumatoid factor reactions // Clin Exp Immunol. 1989. Vol. 77. P. 349-355.

Поступила в редакцию 15.06.12

E. Yu. Stolyarova, L. V. Beduleva, I. V. Menshikov, T. V. Khramova, Yu. V. Nikonova Specificity of regulatory rheumatoid factor subset

Rheumatoid factor subset detected by agglutination techniques employing rat IgG-coated tanned erythrocytes as antigen is involved in autoimmunity regulation in collagen-induced arthritis. Specificity of regulatory rheumatoid factor subset was unknown. We have found out that regulatory rheumatoid factor subset recognizes neoantigens in Fc fragments of homologous IgG induced by papain cleavage or thermal aggregation of IgG. Generally used rabbit IgG does not bear antigenic group for this rheumatoid factor.

Keywords: rheumatoid factor, autoimmunity regulation, Fc fragments of IgG, rabbit immunoglobulin, panagglutinin.

Столярова Елена Юрьевна, студентка E-mail: shima 12@yandex.ru

Бедулева Любовь Викторовна, доктор биологических наук, профессор E-mail: blv76@mail.ru

Меньшиков Игорь Викторович, доктор биологических наук, профессор E-mail: miv140560@yandex.ru

Храмова Татьяна Владимировна, студентка E-mail: khratat@mail.ru

Никонова Юлия Валерьевна, студентка E-mail: luferia100@mail.ru

ФГБОУ ВПО «Удмуртский государственный университет» 426034, Россия, г. Ижевск, ул. Университетская, 1 (корп. 1)

Stolyarova E.Yu., student E-mail: shima 12@yandex.ru

Beduleva L.V., doctor of biology, professor E-mail: blv76@mail.ru

Menshikov I.V., doctor of biology, professor E-mail: miv140560@yandex.ru

Khramova T.V., student E-mail: khratat@mail.ru

Nikonova J. V, student E-mail: luferia100@mail.ru Udmurt State University

426034, Russia, Izhevsk, Universitetskaya st., 1/1