CC BY
126
Медицинская иммунология 1999. Т. 1,№1 -2.С.17 - 22 © 1999. СПб РО РА АКИ
СОВРЕМЕННЫЕ ПОДХОДЫ К АНАЛИЗУ ВЛИЯНИЯ СТРЕССА НА ПРОЦЕССЫ МЕТАБОЛИЗМА В КЛЕТКАХ НЕРВНОЙ И ИММУННОЙ СИСТЕМ
Корнева Е.А., Казакова Т.Б.
Институт экспериментальной медицины РАМН,
Санкт-Петербург
Исследования эффектов и механизмов нейрогуморальний регуляции функций иммунной системы в 50-е. годы этого столетия, доверие и интерес к которым существенно пострадали в результате решений Объединенной Сессии АН и АМН СССР 1949г., были возрождены в ИЭМ АМН совместными усн-ЛШМІ1 руководителей и сотрудников двух отделов — Отдела экологической физиологии и Отдела иммунологии. Факт активного участия В. И. Иоффе в развитии этой научной линии малоизвестен, но именно
В.И. Иоффе — как иммунолог, совместно с Д А. Пиритовым — ведущим физиологом того времени, ИНИ-цшгровалн развитие совместных исследований, развернувшихся в настоящее время в интенсивно развивающуюся научную дисциплину, определяемую как иммунофнзиология, психоиейро иммунология, иейроиммуномодуляция. Сотрудница В.И. Иоффе Л.М. Хай вела иммунологическую часть экспериментов, и Владимир Илыгч внимательно, можно сказать, скрупулезно, следим за каждым шагом. каждым результатом, волновался, сомневался, но ггопск продолжал и участвовал в этой работе до миша ее завершения. Как человек широко образованный, всегда стремящийся узнать как можно больше
Адрес для переписки:
Карцева Елена Андреевна
акадеиик РАШ1, профессор, д. м. п.. руководитель Отдела общей патологии и патофизиологии НИН экспериментальной медицины Р.АМН 197376, Санкт-Петербург, ул. академика Павлова, 12. НИ. И экспериментальной медицины РАМН, отдач общей патологии и патофизиологии Теи.. (812) 234-07-24 Факс: (812) 234-07-64 е-тті. komeva@rmnspb.su
и за пределами иммунологии, он понимал перспективность этого направления и сегодня его имя с полным правом может быть внесено в число ученых, иинциировавш их развитие ими у нофизиологии.
В конце 80-х и в 90-е годы иммунофизиология в связи с появлепием новых методических подходов получила дальнейшее развитие на клеточно-молекулярном уровне. В настоящее время перспективным для иммунофизиологии в решен ни ряда проблем является использование методов молекулярной биологии и молекулярной генетики,
Известно, что различного рода физиологические воздействия вызывают активацию определенных клеток, изменения их метаболизма, что реализуется через модуляцию активности гепома.
Появление высокоспецифических, прецизионных методов анализа экспрессии генов позволяет зафиксировать метаболические сдвиги в организме на самых ранних стадиях их развития, а именно, на стадии экспрессии индуцибельных генов.
Использование молекулярно-биологических подходов позволяет выявить экспрессию генов немедленного и раннего ответа и проследить эти процессы параллельно в структурах головного мозга и клетках иммунной системы, что является одной из перспективных линии изучения иейро-иммуновзаимодеп-ствий.
Одним из важнейших достижений в современной биологии и медицине является установление функционального взаимодействия нервной и иммунной сис тем [5,7,301, связь между которыми может осуществляется с помощью общих «молекул коммуникации» и их рецепторов на мембранах клеток. Показано, в частности, влияние пептидных гормонов, синтезирующихся в клетках нервной и эндокринной систем, на функциональную активность клеток иммунной
системы [11 19]. Обнаружение- на мембране лимфоцитов рецепторов к нейромедиаторам [18]. гормонам и нейропептидам [17] явилось доказательством возможности восприятия им м уно ц и гам и регулирующих нейрогуморальиьгх сигналов, Было установлено, что применение адреЛотшетических веществ приводит к изменению метаболической актив и ости (стимуляции) лимфоидных клеток [5]. Анализ воздействия медиаторов парасимпатической нервной системы, в свою очередь, позволил установип> корригирующее (стимулирующее) влияние холинамнметическйх веществ на интенсивность синтеза антител в продуктивную фазу иммунного ответа 11, 251.
Цитокины: Интерлейкин-2
В передаче сигнала между нервной и иммунной системами могу т принимать участие и такие биологически активные агенты, как интерлейкины, интер-фероны, гормоны тимуса [47].
Известно, в частности, что цитокины нхраюг нал ную роль в механизмах взаимодействия между ШIС и клетками иммунной системы [21,41]. Они проникают через 1 емаго-энцефаднческий барьер в определенных участках [12] и воздействуют на функции могл а.Информация о повышении уровня некоторых из них (например, интерлейкина-1 (1Ь-1)) на периферии передается и через нервные пути (вагуе), т. е. может поступать в мозг [37]. Кроме того, присутствие цитокинов в клетках мозговой ткани (астроглиаль-ных м, возможно, в нейронах) показано радом авторов на примере интерлейкинов [Ь-8, 1Ъ1Р-а, П'М-у. ТС1:-(3. СМ-СЭР М-СвР ]4, 12. 35. 36. 411.
Интерлейкин-2 является одним из важнейших цитокинов, обеспечивающих контроль над пролифе-рацией и дифференцировкои Т-зависимых иммуно-компетентных клеток, н синтезируется Т-лимфоци гамн хелперамп (ТЫ) под действием 11--1. Однако недавно обнаружено, что астроциты. олипгодендро-циты н некоторые нейрональные клетки также синтезируют 11.-2 [12. 35. 41]. Возможно, в глиальных клетках он выполняет те же функции, что и в иммунной системе 1411. Более того, на поверхности олиго-депдроглнальных клеток была обнаружена и [}-цепъ рецептора 11.-2, способная связывать 1Б-2 |3б]. Со гласно предположению 5е1 с соавт.[41], 1Ь-2 в нервных клетках может ВЫПОЛНЯТЬ те же функция регуляции днффе реп ци ров к 11 и пролиферации клеток, что и в иммунной системе.
Присутствие указанных ростовых факторов в иммунной и нервной системах дало основание выдвинуть гипотезу о роли цитокинов в механизмах взаимодействия между этими системами [36], что, поводимому, может свидетельствовать и о возможной общности механизмов регуляции экспрессии генов цитокинов для нервной и иммунной систем 128].
В настоящее время существует большой объем литературы, посвященной исследованию структурі,! и функций белковых транс-факторов, стимулирую щих экспрессию гена ІБ-2 [42. 22]. К известным транс-факторам относятся: МР-АТ (5 сайтов связывания с промотерно-энхансерной областью тепа 11,-2), NРкВ (1 сайт). АР-1, ОсІ-1/ОАР 40 (но 2 сайта). АР-2. АР-3 (по 1 сайту) [ 13, 27, 451.
Структура этих белков еще не вполне известна, однако все они характеризуются относительно большой молекулярной массой и представлены мульти-комплексной системой, часть белков которой ответственна за активацию транс -фактора, а часть — за его транслокацпю в ядро. Показана так же коопера-пшиость действия транс-факторов [20]. Как правило, все перечисленные транс-факторы, за исключением КР-АТ, являются универсальными для ряда индуци-бельиых генов [24].
Следует отметить, что в проблеме функционального взаимодействия нервной и иммунной систем несмотря на активные исследования, остается много незатронутых направлений, включающих и изучение роли транс-факторов в реализации нейро-им-мупиых взаимодействий. Интенсивные исследования струк туры и функции транс-факторов гена 11.-2 не привели еше к настоящему моменту к окончательным представлениям о природе всех белков, принимающих участие в регуляции экспрессии гена. Нами было показано, что, кроме известных высокомолекулярных транс-факторов гена 11,-2. присутствующих в Т-лимфоцитах, существуют и низкомолеку-лярпые белки, которые были выделены аз ядер клі ток селезенки (СЪ) п ткани головного мозга (МБ) иммунизированных крыс Эти белки имеют общую молекулярную массу: 14, 18. 1,9 кДа. Была изучена их способность связывать ІО Vll.ro специфические регуля торные последовательности гена 1 Г.-2 в райо не -141 4-39 нуклеотидных последовательностей близком к нромотерному участку; расшифровано 10 И-концевых аминокислот; показано стимулирующее действие на синтез ІЬ-2 мРНК іп vii.ro в культуре переживающих Т-лимфоцитов и способность оказывать защитный эффект при иммунодефицит-ном состоянии, вызванном действием іи эт'Тго цитостатика циклоспорина А [2].
Влияние стресса на экспрессию генов И-2 и с-Ьб в культуре переживающих Т-лимфоцитов
Хорошо известно, что значительные изменения в иммунной системе могут быть вызваны рядом стрессорных факторов, например, эмоциональным стрессом, болевыми воздействиями, различными психопатологическими состояниями. Так иммоби-лизационный стресс (гдаїгаігії з(;ге5$) оказывает на
иммунную систему ингибирующее действие [43J. 1-Го данным, полученным в лаборатории Glaser а (21], эмоциональный стресс в большей степени влияет на функцию Т-хелперпых клеток 1 типа и подавляет экспрессию 1L-2 и его рецептора.
Одной из причин угнетения функций иммунной системы при стрессе считают повышение уровня глгокркортвкоидных гормонов 16]. В ряде работ было установлено, что глюкокортикоиды ингибируют продукцию IL-2 в лимфоцитах селезенки и периферической крови [10,17,23], блокируя синтез 1L-2 мРНК [46]. Механизм их действия связан с нарушением процесса формирования комплекса транс-факторов АР* I aNF-AT. связывающегося с соответегву-гащими сайтами регуляторной области і єна IL-2 [39 J.
Синтез транс-факторов может служить сигналом наступающих изменений в функциональном состо-;шин клетки. Существует определенный временной период экспрессии трапс-факгоров. Так, например, специфичный для Т-лимфоцитов транс-фактор N Г-АТ является многокомпонентной системой И формируется лишь после того, как будут синтезированы входящие в его состав АР-1 балки, являющиеся продуктом экспрессии лротооінеогенов c-tos и c-jun |38]. При этом экспрессия гена c-fos происходит в более ранние сроки, чем гена c-jun [ 15].
В ходе Т- клеточной активации AF-1 играет регуляторную роль в процессах передачи сигнала с мем -бранных структур клетки в ядро, причем функциональная активность самого комплекса АР-1 зависит or экспрессий его компонентов c-Fas и c-Jun [49]. Следовательно, снижение экспрессии белка c-Fos может играть роль фактора, ограничивающего транс-кршшионную активность не только АР-1, ао и оп гимальное формирован не NF-AT. Однако молекулярные механизмы, связанные с изменениями в экспрессии АР-1 и NF- АТ и модуляции их активности остаются до настоящего времени неизвестными [48].
Таким образом, синтез c-tos м PH К иди c -t us белка может служить маркером наступающих в мета-Лиллзме изменений [16|. Однако подобный факт зафиксирован не ДЛЯ всех ТИПОВ клеток. Ес гь клетки в которых синтез c-Fos белка не происходит. Соб-' тщ’ггар, клетки можно разделять иа два типа по экспрессии c-Fos: те. в которых экспрессия гепа c-fos происходит под действием индукторов (в этих клет-Ivuxc-Ffis принимает участ ие в регуляции пролиферативных процессов) и тс, в которых геи c-fus экспортируется конститутивно а регулирует дИфферШцНровку клеток.
H.J сказаяиого следует, что одним из белков, ак-гиппрующих экспрессию гена 1L-2, является c-Fos бслоїс, входящий в состав транс-факторов гена 1L-2 МЧ н NF-AT. Получены многочисленные данные, си«дітечік!гвующие о том, что синтез c-Fos белка или с las мРНК является маркером изменений, проис-
ходящих в клетках нервной системы в ответ иа при менение самых различных воздействии ва организм | 16]. Синтез с-Ров белка в нейрональных клетках (фиксируется через 20 - 90 минут после воздействия, тогда как синтез с-Го* мРНК обнаруживается уже через секунды Недавно было показано, что и в клетках миокарда, и мышечном слое коронарной арте ргщ уже после 30 минуг эмоционального стресса про исходит индукция синтеза с-1оа мРН К и с^шімРН К, что может служить ранним маркером патофизиологических изменений при ишемической болезни сердца [50].
Если воздействие стресса на экспрессию гена с-ІЬ» в нейрональных клетках активно изучалось [261. то в отношении экспрессии гена 1Ь-2 в клетках головного мозга и корреляции этого процесса с экспрессией с-1о« гена под влиянием стрессориых стимулов известно достаточно мало.
Вместе с тем, пе только нервная система, но и иммунная система реагирует на стимулы неант шейной природы, в том числе и стрессориые. Стресс вызывает изменения метаболизма и в нервной, и в иммунной системах. Выявление экспрессия генов с-ІЬя и 1І--2 в цен тральной нервной системе параллельно с экспрессией тех же геиов в иммунной системе позволит подойти к изучению механизмов стресса» нммунокомпетентных клетках и к взаимодействию двух систем.
Поэтому несомненный интерес представляет изучение пространственно-временного паттерна эксп-рессіптс-іої мРН К, с- Рої белка и 1 Р-2 мРНК в клетках различных структур головного мозга и Т-лимфоцитах в ответ на етрессортгые воздействия.
Существует большое разнообразие видов стрес-са. Рассмотрим изменения метаболизма клетки па примере двух видов стресса: иммобнлизационного (гехГ.гліпі) и ротационного как оказывающих прот и-воположное действие на функциональную активность иммунной системы. Известно, что иммобили-зационньїй стресс, как было показано в ряде работ, оказывает пммуносупресснрующее действие, в то время как ротационный стресс стимулирует функции иммунной системы [5,431. Иммобнлизационный стресс вызывает уменьшение веса селезенки животных [44] и снижение на 59 и 96 % секреции 1Р-2 в лимфоузлах и селезенке, соответственно [43],
В наших опытах сеансы обездвиживания мышей проводили три дня подряд помещением их в специальные домики без фиксации конечностей на 8 часов при комнатной темперагуре без еды и воды, после чего давали животным три дня отдохнуть. Через шесть дней после начала стрессорного цикла животных забивали и выделяли селезеночные Т-лимфоцит ы. Для выяснения функциональной роли СБ иМБв регу нации синтеза ІР-2 мРН К и Т-лимфоиитах животных, подвергнутых стрессу, в качестве сравните льного контроля Г-клетки стимулировали конканавалином А
(Кон А) + pJL-2. Параллельно анализировали способность к продукции IL-2 мРНК Т-лимфоцитов животных, не подвергавшихся стрессу.
Анализ экспрессии гена IL-2 в культуре Т-клет ках tn vitro после выделения их из селезенки подвергнутых стрессу животных метолом спот-гибридизации тотальной РНК с IL-2 кДНК позволил проследить активирующие эффекты СЬ и МБ. Так, при иммобилнзаиионном стрессе наблюдалось снижение продукции IL-2 мРНК на 29 - 30 % в ответ на стимуляцию Кон А + p[L-2 но сравнению с нормой. Подобная же ситуация выявлена и при активации экспрессии гена 11.-2белковыми факторами клеток селезенки и мозга. Однако следует отметить, что снижение продукции мРНК при действии СБ более значительно, чем при стимуляции Кон A -t- pJL-2. При стрессе происходит снижение активирующего действия СБ на 40 - 49 %. В то же время продукция 1L- 2 мРНК под действием М Б снижалась па 21 - 4 % в зависимости от концент рации вносимых в культу ральную среду белков. Сравнивая эти значения с величинами продукции JL-2 мРНК при стимуляции КонА + p[L-2 в условиях стресса, нельзя не отметить, что МБ при их внесении в культуру Т-клеток снижают негативное действие стресса на синтез 1L-2 мРНК.
При ротационном стрессе наблюдается повыше ние содержания IL-2 мРНК и c-fos мРНК в Т-лим-фоцитах селезенки мышей па 40 %, в том числе и при инкубации с СБ и М Б. Таким образом, ротационный стресс оказывал стимулирующее действие на экспрессию генов IL.-2 и c-fos. Tie исключено, что СБ и МБ обладают способностью стимулировать процессы транскрипции на генном уровне не только в Т-лимфошггах, но и в клетках макро- и микроглин или нейронах.
Изучение этого вопроса представляется перспективным.
Влияние стресса на экспрессию генов IL-2 и c-fos в различных структурах головного мозга
Воздействие различных видов стресса, включая болевые, стимулы, ростовые факторы, митогены цАМФ, ЛИС, форболовые эфиры, хирургическое воздействие, фармпрепараты и т. п. на экспрессию c-Fos белка, активно изучалось рядом авторов [8,1 б, 26,31] с применением иммунохимических методой, однако и до настоящего времени механизмы процессов трансмиссии и модуляции ноцицептивной информации в центральной нервной системе остаются н е в ыя с н е н н ым и.
Часть трудностей, возникающих при их анализе, связана с множественностью пугей передачи сигнала в клетках нервной системы, с многокомпонеит-
ноетыо мишеней и «молекул коммуникации», принимающих участие в этих процессах, а также — с отсутствием до недавнего времени прецизионных методов исследования 129,321. Вот почему развитие молекулярно-биологических методов анализа экспрессии генов немедленного и раннего ответа дает возможность на еауых ранних стадиях реализации информационного сигнала и изменении метаболизма клетки проследить реакцию нервной системы па поступающий извне, п и му л.
Исследования экспрессии гена c-fos в клетках головного и спинною мозга животных под влиянием ноцицептнвных стимулов или различных видов стресса с использованием различных методических подходов: определения c-fos белка методом имму нопрецн-питации с антителами к c-Fos, или c-fos мРНК методом гибридизации с c-fos кДНК зондом, позволяют судить о функциональных изменениях в нервной системе под действием тех или иных стимулов.
В наших экспериментах изучалось влияние ротационного стресса на экспрессию c-fos мРНК, c-Fos белка и 1L-2 мРНК в различных структурах головного мозга крыс. Для анализа синтеза м РПК в головном мозгу были выбраны разные сроки забора ткани и приготовления срезов в зависимости от того — исследовали ли синтез c-fos мРИК. c-Fos белка, ил и П.-2 м PH К В первом случае живот ное получало наркоз и проводилась перфузия через 30 60 мин после
стресса, во втором и третьем случаях — через 30 мин - 4 часа. Наибольшая активация экспрессии c-fos м PI IК была выявлена через 30 мин после стресса, в то время, как синтез c-Fos белка был зафиксирован только через 2 часа, а синтез IL-2 мРНК — через 4 часа после стрессориого воздействия
Анализ экспрессии генов c-fos и IL-2 у контрольных .животных позволил сравнить фоновые значения содержания мРНК указанных генов и c-Fos белка и их изменения после ротационного стресса. Повышенный уровень экспрессии c-fos мРНК был зафиксирован уже через 30 минут после применения стрессориого стимула в клетках латеральной гипоталамической зоны (LHА), таламуса, мот орной зоне коры и хвостатом ядре. Исследование синтеза I L.-2 мРНК позволило обнаружить стимулирующее воздействие стресса на экспрессию гена 11 ,-2 через
4 часа после применения стимула во внутренней капсюле таламуса, моторной зоне коры и LHA. Наличие окрашенных клеток, содержащих комплекс IL-2 мРПК -- TL-2 кДНК, в LliA было значительно меньше, чем в случае с c-fos мРНК c-fos - кДНК, причем преимущественное распределение комплекса наблюдали в паравентрикулярном ядре.
Таким образом, могут существоват ь по крайней мере два варианта регуляции гена IL-2 в лимфоидных и нейрональных клетках:
1. Каждый тип клеток синтезирует белковые трансактивирутощие факторы самостоятельно;
2. Существует трааспорт этих белков или обмен между метками иммунной и нервной систем.
Следовательно, ядерные белковые транс-факторы могут служить объединяющим звеном между нервной н .иммунной системами в механизмах регуляции экспрессии нндуцибельных генов. Высказанная нами гипотеза расширяет имеющиеся представления о природе и механизмах иейроиммуиовзаимо-цействий в условиях стресса на уровне т ранс-факторных белков (включая низкомолекуляр-иые ядерные белковые факторы СБ и МБ, и с-Гоа), регулирующих экспрессию гена [[.-2. Впервые удалось показать, что в нервной и в иммунной системах после ротационного стресса происходит активация экспрессии генов с-1о$ и 11.-2. что ведет к изменению иммунного ответа в Т-клетках. Следовательно, стресс оказывает модулирующее воздействие на процессы, протекающие как в нервной, так и в иммунной системах, реализуя их на уровне экспрессии генов.
Впервые выявлен пространствен но- временной паттерн экспрессии генов с-Гох н [1.-2 у животных при гтрессораых воздействиях в Т-лимфоцитах и головном мозгу, что свидетельствует о последовательной активации генов немедленного н раннего ответа. Дальнейшие исследованиия позволят ставить вопрос о значимости активации клеток головного мозга для функций иммунной системы.
Список литературы
!. Гуиіин Г.В., Яковлева Е.Э. // Нейрогуморальная регуляция иммунного гомеостаза. — 19У6. — Л. —
С. І01 - 102.
2. Головко О.И., Гришина Т.В., Новикова П.С . Носов М.Л., Мюльберг А.А.. Корнева Е.А., Казакова Т.Б.// Нейрохимия. — 1996. - Т 13. -
3.-С. 195-205.
3 Казакова Т.Б.. Гришина Т.В., Головко О.И. Гущин Г.В. // Бюлл.эксп.биол.н мед. — 1994. -№ 5. -С. 523 - 526.
1 Киселев О.И., Камбарова Д.К., Цвейбах А.С.. Балоян Л.П.. Иваненко А.И. // Физиол. Журн. СССР. - 1988. - Т. 74. - № 4. - С. 497 - 503.
5 Корнева Е.А. // Вестн. Акад. Мед. Наук СССР. -1988.-T.il.-С. 75- 85.
6 Корнева Е.А., Шхивек Э.К. // Гормоны и иммун нпя система. — Л. — Наука. — 1988. — С. 1 - 251
7 Чклене ПИ;., Корнева Е.А., Склярова С.Н., Клименко В.М., Клуша В.Е., Иевиня Н.Г., Вег-мер Р.Э.. Папсуевич О.С. // Рига, Дать. Акад. Наук. - 1987. - С. 1 - 54.
8. .'Vibe —Fessard D., Berkley L.. Kruger 11.. Ralston H., Willis W.// Brain Res. Rev. - 1985. — VoL 9. - P. 217 -296.
9. Ли gel P. and Karin M. // Biochim. BLophys. Acta -1991.-№ 1072. - P. 129- 157.
10 Arva S.K.. Wong —Staal F.. Gallo R.C. // J ImiiHi not - 1984. - Vol. 133. - P. 273 - 276. '
11.Azad N.. Agrawal C.. Emmanuele M. A. Kelley MR.. Mobagheghpour N.. Lawrence A.M., Emmanuele N.V. // Amer. J Reprod. Immunol. — 1991. - Vol. 26. - № 4. - P, 160 - 172.
12. Banks W.A., Kastin A,)., Broadwell R.D.//Neuro lmmunoModulafion. — 1995. — Vol. 2. — № 4. -P. 241 -248.
13. Barve S.S., Cohen D A., De Benedecti A.. Rhoads R.E., Kaplan A.M.// [. Immunol. — 1994. -Vol. 152. — № 3. — P. 1171 - 1181.
14. Bhushan A., Slapak Ch.A., Levy St B.. Tritton TLR.// Biochem.Biophys. Res. Comm. -1996. Vol. 226. - № 3. - P. 819 - 821.
15. BuHit E.//J. Comparative Neurology - 1990 -Vol. 296. - P. 0517 -530.
16. Bullit E.,Lee Ch.. Light A.. Willcocksori 11.// Brain Res. -1992. - Vol. 580. - P. 172 - 179.
17. Crabtree G.R.. Munk A., Smith K.L. // J. Immunol. — 1980. — Vol. 124. — № 5. P.2430 -2435.
18. Coffey R.G.. Hadden J.W.// Fed. Proc. - 1985. -Vol. 44. -P. 112-115.
19. Devoino L., Cheido М.. Idova G„ Morazova N. PapsievichO., OChipensG.// in: Neuropeptides and im.mnnopeptid.es. -N.-Y. Acad. Sci. ed. О — Doriso, Panerai. - 1990.- Vol. 594. -P. 449 -451.
20. Garritv P. A.. Chen D.. Rothenberg E.V tuid Wold B.J. // Mol. Cell. Biol. - 1994 - Vol. 1 4. -J*3. - P. 2159 - 2169.
21. Glaser R.. Kennedy S., Lafnse W.P., Bonneau R.H., Speicher C., Hell house J., Kiecolt —Glaser J.K. // Arch. Gen. Psychiatry. — 1990. — Vol. 47. -P. 707 - 712.
22. Goldstone S.D . Fragonas J. —Ch. Jeitner Th.M. Hunt N.H // Biochim. Biophys. Acta. — 1995. -Vol. 1263. - № 2. - P. 114- 122.
23. Granlli —Piperno A., McHugh P. // Proc. Natl Acad. Sci. USA. - 1991. - Vol. 88 - P. 11431 -11434.
24 Grahstein K., Dower S., Gillis S , Urdal U.S.. Larsen A. // J. Immunol. — 1986. - Vol. 136. -P. 4503 - 4 508.
25. HaddenJ.W., Johnson E.M. Hadden E.M.ei al. // Immune Recognition. —New York. — 1975. -P. 135 - 143.
26. HonkaniemiJ.//NeuTotraiu>miUers.glucocorticoid receptors and proto-oncogenes in the rat amygdaloid complex and hypothalamic paraventricular nucleus. - 1992. - P. 1 - 852.
27. Israel A. // Nature. - 1994. — Vol. 369. — P. 443 -444.
28. Kazakova T.B., Golovko O.I., Gushchin G.V., Lebedeva L.V.. Dolgi O.D, Karandaschov E.A., Mu I berg A.A. // Biotechnology Therapeutics. -1993. - Vol. 4. -№ 1&2. - P. 63 - 76.
29. Kemplay S.. Webster K.// Neurosci, - 1986. -Vol. 17. - P. 769 - 789.
30. Korneva E.A.. Grigotjev V.A., Klimenko V.M., Stolarov I.D. // Nauka., L. — 1989. — P. 1 -147.
31. Lanten —Minet M., Isnardon P., de Pomciery J. Menetrev D.// Neurosci. — 1993. — Vol. 55. — P. 737 -753.
32. McMahon S.B., WallP.D.// Drain Res. - 1985. -Vol. 333. -P. 19 - 26.
33. Merril J.//Ann. N-Y. Acad.Sci. - 1990. — Vol. 594.-P. 188- 199.
34. Mosmann T.R. and Coffman R.L.// Annu. Rev. Immunol. —1989. —Vol. 7, — P. 145 - 173.
35. Mouzaki A., Rungger D. // Blood. 1994. -Vol. 84. - №8. - P. 151 - 160.
36. Okamoto J., Minamoto S.. Shimizu K., Mogami H . Tanigucbi T. J/ Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -
1990. - Vol. 87. - P. 6584 - 6588.
37. Oladehin A.,BIatteis C.M. // Internal. Symp. Pharmae. Thermoregul. —1996. — P. El4/73.
38. Orlandini M., Marconcini L.. Ferruzzi R., Olivero S.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA — 1996. — Vol. 93. —№ 21.- P. 11675 - 11680.
39. Paliogiarmi P., Rapits A., Ahuja S.S.. Najjar S.M. Boumpas T.D. // J. Clin. Invest. — 1993. Vol. 91. - P. 1481 - 1489.
40. Potegal M., Ferris C.F, Hebert M.. Meyerhoff )., Skaredoff L// Neurosci. — 1996. — Vol. 75.
№ 3. - P. 869 - 880.
11. Sei Y„ Vii kovic I... Yokoyama M.M. //Neurolmmu-noModulatiou. -1995. - № 2. - P. 121 - 133.
42. Segil N.. Roberts S.B.. Heintz N. // Science. — 1991. - Vol. 254. - P. 1814 - 1816.
43. Sheridan J.F.. Feng N., Bonneau R.H., Allen C.M.. 11iLQeycutt B.S.. Glaser R. //J. Neuroimmunol. —
1991.-Vol. 31-P. 245 - 255.
44. Tarcic N.. Levitan G., Ben —Yosef D.. Prous D.,
Ovadia H., Weiss R. // NeutoImnninoModuia-tiorjL - 1995. - Vol. 2 - № 5 - P. 249 257.
45. Ullman K.. Flanagan M., Edwards C.. Crabtree G. // Science. -1991. - Vol. 254. - P. 558 - 562.
46. Vacca A., FelH M.P., Farina A.R., Martinotti S.. Maroder M., Screpanu I., Meco I)., Petrangeli E., Frati L., Gulino A. // f. Exp. Med. — 1992. -Vol. 175. - P. 637 -646.
47. Wolfe S.A.. Souza E.B. // NPP Books. — 1992. — P. 927 - 958.
48. Vaseen N.R., Park J., Kerpolla T., Curran T.. Shar-ma S.// Mol.Cell Biol. - 1994 - Vol. 14. - P. 6886.
49. Whisler R.L., Beiqing L., CLen M.// Cell. Immunology - 1996. - VoL 169. - N1; 2. - P. 185 - 195.
50. Ueyama T., Umemoto S., Senba E.// Life -Sci. — 1996. - Vol. 59. - № 4. - P. 339 - 347.
