CC BY
22Вестник фармации №1 (35) 2007
ФАРМАКОЛОГИЯ И ФАРМАКОТЕРАПИЯ
Т.В.Трухачева, Л.Н.Дунец, Л.М.Залашко, В.М.Царенков, П.Т.Петров
СОВРЕМЕННЫЕ ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА ДЛЯ ЭТИОТРОПНОЙ ТЕРАПИИ ГЕРПЕСВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ Сообщение 1. Антикловир
и бутаминофен
Научно-фармацевтический центр РУП «Белмедпрепараты»
Герпесвирусная инфекция широко распространена в популяции: от 60 до 95% населения инфицированы одним или более из представителей семейства герпесвиру-сов [1]. Наиболее часто встречаются вирусы простого герпеса (Herpes simplex) 1-го и 2-го типов (ВПГ-1 и ВПГ-2), вызывающие офтальмологический и генитальный герпес, вирус Varizella-zoster (VZV), вызывающий ветряную оспу и опоясывающий лишай. По данным ВОЗ, заболевания, вызванные вирусом простого герпеса (ВПГ), занимают второе место (15,8%) после гриппа (35,8%) как причина смертности от вирусных инфекций [2].
В настоящее время в лечении простого герпеса применяют этиотропную противовирусную терапию в комплексе с иммунотерапией (специфической и неспецифической).
В направленной противогерпетиче-ской терапии основное место отводится модифицированным нуклеозидам. Механизм их действия основан на ингибировании синтеза вирусной ДНК.
Основным представителем данной группы лекарственных средств на протяжении более уже 20 лет остается препарат ацикловир.
Ацикловир - 2-амино-9-(2-гидрокси-этоксиметил)-1,9-дигидро-пурин-6-он -
аналог пуринового нуклеозида дезокси-гуанидина, нормального компонента ДНК.
Ацикловир представляет собой белый кристаллический порошок без запаха.
Очень мало растворим в воде, спирте 95%, нерастворим в эфире, растворим в водных растворах минеральных кислот и щелочей
[3].
Ацикловир - первое лекарственное средство (ЛС) для этиотропной терапии герпесвирусной инфекции. ЛС на основе ацикловира широко используются для лечения герпетической инфекции различной локализации и выпускаются в виде таблеток и суспензии для приема внутрь, лио-филизированного порошка для приготовления растворов для внутривенного введения, в виде крема и мази для наружного применения, а также в виде мази глазной.
В Республике Беларусь производство препаратов ацикловира осуществляется на РУП «Белмедпрепараты». На предприятии освоено производство наиболее востребованных лекарственных форм ацикловира: мазь 5% для наружного применения; таблетки 0,2 г; лиофильно высушенный порошок для инфузий 0,25г., 0,5г., 1,0 г.
Субстанция ацикловира (ациклогуа-нозина), используемая в производстве лекарственных форм, зарегистрирована в Министерстве здравоохранения РБ и соответствует требованиям международных стандартов. Для оценки подлинности ЛС используют метод ИК-спектроскопии и метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). При этом проводится сравнение исследуемой субстанции со стандартным образцом - ИК-спектры в области от 3800 нм до 650 нм и времена удерживания на хроматограмме должны совпадать. Субстанцию контролируют на предмет содержания остаточных растворителей в соответствии с требованиями ИБР 26 (метод 5), несмотря на то, что в некоторых фармакопеях этот показатель не является обязательным для контроля. В таблице 1 приведены сравнительные данные об основных контролируемых показателях и требованиях к качеству субстанции ацикловир, предъявляемых зарубежными фар-макопеями и нормативным документом (НД) Республики Беларусь.
Таблица 1
Контролируемые показатели и требования к качеству субстанции ацикловир, предъявляемые ___________________ зарубежными фармакопеями и НД РБ 03570.2006_______________________
Показатели качества НД РБ 03570.2006 Британская фармакопея (ВР 2002) Американская фармакопея (ШР 26)
Остаточные растворители Летучие органические примеси - соответствие требованиям (467, метод 5) Летучие органические примеси - соответствие требованиям (467, метод 5)
Потеря в массе при высушивании Не более 6,0% (метод 1) Не более 6,0% (2.5.12) Не более 6,0% (метод 1, тест 921)
Посторонние примеси 1.Гуанин - не более 0,7% (ВЭЖХ) 2. Сумма примесей не должна превышать 1% (тсх)* 1. Гуанин - не более 0,7%, отдельные примеси - не более 0,5 %, сумма примесей - не более 1% (ВЭЖХ) 2. Сумма примесей не более 0,5% (ТСХ) 1.Гуанин - не более 0,7% (ВЭЖХ) 2. Сумма примесей не должна превышать 1% (ТСХ)
Количественное содержание От 98,0 до 102,0% от указанного количества (ВЭЖХ) От 98,5 до 101,0 % от указанного количества сухого вещества (потенциометрическое титрование) От 98,0 до 101,0 % от указанного количества сухого вещества (ВЭЖХ)
Примечание: * ТСХ - тонкослойная хроматография.
Как видно из приведенных данных, содержание влаги, посторонних примесей и количественное содержание ациклогуа-нозина в субстанции соответствует требованиям международных стандартов. При контроле за содержанием основного вещества и родственных соединений применяются современные хроматографические методы исследований (ВЭЖХ, ТСХ).
Первое генерическое ЛС, производство которого было освоено в РБ в 1999 году, - мазь Ацикловира 5% (Ц^иепШш Асус1оут 5%). Мазь Ацикловира производства РУП «Белмедпрепараты», как и оригинальный препарат-аналог, изготовлена на мазевой основе, состоящей из по-лиэтиленоксида - 400 и полиэтиленоксида
- 1500, взятых в соотношении 66:29 при следующем соотношении ингредиентов (мас %): ацикловир - 4,5-5,5; мазевая основа - остальное [4,5].
В таблице 2 приведены сравнительные данные о контролируемых показателях и требованиях к качеству лекарственного средства мазь ацикловира 5%, предъ-
являемых зарубежными фармакопеями и ФС на препарат отечественного производства.
Как видно из данных, приведенных в таблице 2, к лекарственному средству отечественного производства предъявляются не менее жесткие требования по качеству, чем того требуют зарубежные фармакопеи. Подлинность лекарственного средства, количественное содержание, содержание посторонних примесей контролируют с применением тех современных методов аналитического контроля, которые обеспечивают получение наиболее точных результатов - УФ-спектроскопии, ВЭЖХ. Осуществляется контроль лекарственного средства по показателю «Микробиологическая чистота». При этом допускается в 1 г препарата не более 100 аэробных бактерий и грибов (суммарно) при отсутствии Enterobacteriaceae, Pseudomonas aeroginosa, Staphylococcus aureus. Препарат стабилен на протяжении 2-х лет при хранении в сухом защищенном от света месте, при температуре не выше 250С.
Таблица 2
Контролируемые показатели и требования к качеству ЛС мазь ацикловира 5%, ________предъявляемых зарубежными фармакопеями и ФС РБ 0380-02_________________
Показатели качества ФС РБ 0380-02 Британская фармакопея (ВР 2002) Американская фармакопея (USP 2б)
Подлинность 1.УФ-спектр в области от 220 до 350 нм имеет максимум при 254±2 нм, минимум при 227±3 нм и плечо при длинах волн от 270±1 до 290±1 нм 2.ВЭЖХ (соответствие времени удерживания стандарта) 1. УФ-спектр в области от 230 нм до 350 нм имеет максимум при 255 нм и плечо при длинах волн от 274 до 290 нм 2. ТСХ в сравнении со стандартом ВРСЯБ ацикловира ВЭЖХ (соответствие времени удерживания стандарта)
рН От 5,0 до 7,0 (ГФ XI, вып.2. с.113) - -
Размер частиц Не более 100 мкм (ГФ XI, вып.2. с.146) - -
Однородность Однородна - -
Масса содержимого упаковки От 4,75 до 5,25 г для 5 г тубы
Посторонние примеси Гуанин не более 0,7%, прочие примеси не более 1% (ВЭЖХ) Гуанин - не более 1% (ТСХ) Гуанин - не более 2,0 % (ВЭЖХ)
Количественное содержание Содержание ацикловира в препарате должно быть от 4,5 до 5,5 % (ВЭЖХ) От 95,0 до 105,0% от указанного количества (от 4,75 до 5,25%) (УФ) От 90,0 до 110,0 % от указанного количества (от 4,5 до 5,5 %) (ВЭЖХ)
Препарат - генерик эквивалентен оригинальному лекарственному средству с фармацевтической и фармакологической точки зрения. Инструкция по применению отечественного ЛС эквивалентна оригинальной.
Мазь Ацикловира 5% показана:
♦ при первичной и рецидивирующей инфекции кожи и слизистых оболочек, вызванной вирусами простого герпеса 1 и 2 типов (в том числе генитальный и ректальный герпес);
♦ для профилактики инфекций кожи и слизистых оболочек, вызываемых вирусами простого герпеса 1 и 2 типов у больных с нарушениями иммунной системы;
♦ при инфекции, вызванной вирусами опоясывающего лишая и ветряной оспы.
Терапевтическая эффективность и безопасность ЛС мазь Ацикловир 5% подтверждены в сравнительных многоцентровых клинических испытаниях, которые были проведены на базе Минского городского клинического кожно-
венерологического диспансера (руководитель доцент В.Г.Панкратова); на базе Витебского областного клинического кожновенерологического диспансера (руководитель В.Е.Спиридонов); на базе Гомельского областного клинического кожно-
венерологического диспансера (руководитель В.Ф.Фещенко). В клинических испытаниях участвовало 180 человек.
На каждой клинической базе в испытуемую группу и в группу сравнения было включено по 30 пациентов. В исследования включались больные в возрасте
18-65 лет с генитальньм и лабиальньм герпесом, способные по состоянию здоровья участвовать в клинических испытаниях и подписавшие информированное согласие на участие в испытаниях.
Продолжительность лечения ЛС мазь Ацикловир 5%, дозировка, режим применения определялись лечащим врачом индивидуально в зависимости от течения патологического процесса и строго в соответствии с Программой клинического исследования ЛС (4-5 раз в день, в течение 7-20 дней).
Оценку эффективности лечения проводили на основании критериев, представленных в индивидуальной регистрационной карте, при этом учитывали объективные и субъективные эффекты, общее состояние больного, побочные действия мази Ацикловира 5% и изменения параклинических показателей. Результаты лечения оценивали методом клинического наблюдения и динамического протоколирования.
Критерии эффективности ЛС: эффект положительный - наблюдается клиническая эффективность ЛС; эффект отрицательный - отсутствие клинической эффективности ЛС - ухудшение состояния
- усиление гиперемии, отека кожи, зуд слизистых.
Оценка переносимости применения исследуемого ЛС проводилась на основании обследования больных врачом-исследователем и оценки его действия самими пациентами.
В качестве объективных критериев, позволяющих анализировать безопасность испытуемой мази, использовали:
♦ отсутствие негативного влияния на комплекс регистрируемых параметров биологических жидкостей (крови, мочи);
♦ функциональное состояние органов и систем организма;
♦ отек и гиперемия кожи и слизистых оболочек, эрозии кожи и слизистых.
Среди субъективных критериев оценивали зуд кожи и слизистых, головокружение, слабость, головную боль. Оценку осуществляли по бальной системе: 0 -отсутствие симптомов; 1 - симптомы вы-
ражены слабо; 2 - симптомы выражены умеренно; 3 - симптомы сильно выражены.
В результате проведенных клинических испытаний установлено, что препарат мазь Ацикловир 5% характеризуется удовлетворительной эффективностью, переносимостью и безопасностью при применении в указанных дозировках. По эффективности препарат мазь Ацикловир 5% производства РУП «Белмедпрепараты» аналогичен препарату сравнения. Исследуемый препарат - генерик не оказывает отрицательного действия на комплекс клинико-лабораторных показателей.
По результатам клинических испытаний рекомендовано применять ЛС в качестве противогерпетического средства при лечении простого герпеса лабиального, генитального и опоясывающего лишая.
Лекарственное средство мазь Ацикловир 5% производства РУП “Белмедпрепараты” в применяемых дозировках (4-5 раз в день) обладает удовлетворительной эффективностью, переносимостью и безопасностью применения. Срок лечения больных простым герпесом должен быть не менее 7-14 дней, а у больных опоясывающим лишаем от 14 до 21 дня.
На РУП «Белмедпрепараты» освоено производство препарата мазь Ацикловир 5% для наружного применения в тубах по 5 и 15 грамм. На рисунке 1 приведена диаграмма, отражающая объемы производства препарата на протяжении последних 3 лет.
Несмотря на значительное количество фармацевтических фирм, поставляющих данное ЛС в Республику Беларусь, объемы производства, планируемые в соответствии с заявками РУП «Фармация», и, соответственно, реализации отечественного ЛС, значительно возросли.
Пероральная лекарственная форма Ацикловир таблетки 0,2 г широко применяется в клинической практике и описана в зарубежных фармакопеях. Разработка генерического ЛС РУП «Белмедпрепараты» была осуществлена с учетом требований, изложенных в фармакопеях и требований уполномоченных органов, предъявляемым к разработке лекарственных средств генерического ряда в Республике Беларусь. В
таблице 3 приведены сравнительные данные о контролируемых показателях и требованиях к качеству препарата таблетки Ацикловир 0,2 г, предъявляемых зарубеж-
ными фармакопеями и фармакопейной статьей на препарат отечественного производства.
Рис.1. Объемы производства мази Ацикловир 5% в 2004-200б гг. на РУП «Белмедпре-параты»
Как видно из приведенных данных, по всем характеристикам генерический препарат производства РУП «Белмедпре-параты» соответствует международным стандартам. Такие показатели, как «Подлинность», «Количественное определе-
ние», «Посторонние примеси» контролируются с использованием современных аналитических методов, в основном -ВЭЖХ. В соответствии с [б] также осуществляется контроль по ряду других показателей. Средняя масса таблеток составляет
от 0,390 до 0,430 г, отклонение в массе отдельных таблеток не более ±5% от средней массы [6], распадаемость составляет не более 15 мин. Контролируется микробиологическая чистота препарата - в 1 г лекарственного средства допускается не более 1000 аэробных бактерий и 100 грибов, при отсутствии Escherichia coli. ЛС стабильно на протяжении 2 лет при хранении в сухом защищенном от света месте при температуре не более 250С.
Таблица 3
Контролируемые показатели и требования к качеству ЛС таблетки Ацикловир 0,2 г, __________предъявляемые зарубежными фармакопеями и ФС РБ 0380-02_________________
Показатели качества ФС РБ 0380-02 Британская фармакопея, BP2002 Американская фармакопея, USP 2б
Подлинность 1. УФ-спектр в области от 220 нм до 350 нм 1. УФ-спектр в области от 230 нм до 350 нм ВЭЖХ на хроматограмме испытуемого раство-
имеет максимум при длине волны (254±2) нм, минимум при длине волны (227±3) нм и плечо в области от 270 нм до 290 нм 2. ВЭЖХ (в сравнении с РСО) имеет максимум при 255 нм и плечо при длинах волн от 274 до 290 нм 2. ТСХ в сравнении со стандартом БРСЯБ ацикловира ра время удерживания основного пика должно совпадать со временем удерживания основного пика на хроматограмме ШР стандарта
Растворение Не менее 75%, через 45 мин (расчет содержания по УФ-спектру, максимум при 254 нм) Не менее 70%, через 45 мин (расчет содержания по УФ-спектру, максимум при 255 нм) Не менее 80%, через 45 мин (расчет содержания по УФ-спектру, максимум при 254 нм)
Посторонние примеси Гуанин - не более 0,7%, сумма примесей - не более 2,0% (ВЭЖХ) Гуанин не более 1% (ТСХ)
Количественное содержание От 0,190 до 0,210 г считая на среднюю массу одной таблетки (ВЭЖХ) От 0,190 до 0,210 г считая на среднюю массу одной таблетки (УФ) От 0,190 до 0,210 г считая на среднюю массу одной таблетки (ВЭЖХ)
Производство пероральной лекарственной формы освоено на РУП «Белмедпрепараты» с 2001 года. С целью регистрации ЛС были проведены исследования его биоэквивалентности оригинальному препарату. Исследования проведены на базе Витебского государственного медицинского университета под рук. доц. Воронова Г. Г.
В исследованиях принимало участие 12 добровольцев. Доказано соответствие основных фармакокинетических параметров оригинального и генерического ЛС.
Показаниями для применения препарата являются:
♦ первичные и рецидивирующие инфекции кожи и слизистых оболочек, вызванные вирусами простого герпеса 1 и 2 типов (в том числе генитальный и ректальный герпес);
♦ профилактика инфекций кожи и слизистых оболочек, вызываемых вирусами простого герпеса 1 и 2 типов у больных с нарушениями иммунной системы;
♦ инфекции, вызванные вирусами опоясывающего лишая и ветряной оспы.
На рисунке 2 приведены данные о динамике объемов производства препарата за период 2004 -2006 г. г.
Парентеральную лекарственную форму - Ацикловир, 0,25 г, 0,5 г, и 1,0 г порошок лиофилизированный для приготовления раствора для инфузий, до последнего времени в Республике Беларусь не производили. Эта лекарственная форма необходима для лечения больных с тяжелыми формами инфекций кожи и слизистых оболочек, вызванных вирусами простого герпеса 1 или 2 типов; в составе комплексной терапии пациентов с выраженным иммунодефицитом, в т.ч., при развернутой клинической картине ВИЧ-инфекции (число клеток СБ4+ менее 200/мм3), и у пациентов, перенесших трансплантацию костного мозга; при инфекциях, вызванных вирусами опоясывающего герпеса, ветряной оспы; для профилактики цитомегаловирусной инфекции после трансплантации костного мозга [7,8].
б
Рис. 2. Объемы производства препарата таблетки Ацикловир 0,2г №10 за период 2004-2006 г.г.
В клиниках Республики Беларусь фективной терапии наиболее распростра-
применяются такие лекарственные средства как Герпесин, лиофилизированный по-
рошок для инъекций (Рііуа, Чехия), Зови-ракс, лиофизированный порошок для ин-фузий (СІахоБтіШКІет, Италия), Ксорокс, порошок для инъекций (К’Ш2ёа ОтЬИ, Австрия), Медовир, порошок для инъекций (Ме^еЬетіе, Кипр). В августе 2006 года в МЗ РБ был зарегистрирован Ацикловир
0,25г, 0,5 г, и 1,0 г лиофилизированный порошок для инфузий производства РУП «Белмедпрепараты». Качество и состав ЛС соответствует зарубежным аналогам. В таблице 4 приведены сравнительные данные о контролируемых показателях и требованиях к качеству ЛС Ацикловир лио-филизированный для инфузий, предъявляемых зарубежными фармакопеями и ФС на ЛС отечественного производства. Производство препарата планируется в 1 квартале 2007 года.
Таким образом, в результате разработки и освоения производства лекарственных форм ацикловира для наружного, перорального и парентерального применения в Республике Беларусь создан фармацевтический базис для полноценной и эф-
ненных форм герпесвирусной инфекции с
использованием лекарственных средств отечественного производства.
Несмотря на высокую и специфическую активность ацикловира по отношению к ВПГ, это ЛС имеет ряд недостатков. В первую очередь, это его низкая растворимость в воде [3,9]. В связи с этим он характеризуется относительно низкой биодоступностью (при пероральном применении биодоступность составляет 15-30%, при наружном - 30-50% [10]. С целью преодоления этого недостатка созданы технологии получения производных ацикловира, в частности, его эфиров, которые хорошо растворимы в воде и обладают более высокой биодоступностью. На основе некоторых из них созданы эффективные проти-вогерпетические средства, среди которых наиболее широкое применение нашел Ва-лацикловир, содержащий валиновый эфир ациклогуанозина [7,8]. Многолетний опыт применения ЛС, содержащих ациклогуа-нозин и его производные, многочисленные мультицентровые клинические испытания и исследования фармакокинетики новых лекарственных средств подтвердили более
высокую биодоступность эфиров по сравнению с ацикловиром. В результате исследования фармакокинетических особенностей лекарственных средств на основе ацикловира, валацикловира и других производных ациклогуанозина показано, что в процессе метаболизма происходит разрушение эфиров и в качестве противогерпе-тического агента действует, собственно,
ацикловир. Таким образом, применение производных ацикловира не позволяет преодолеть проблемы развития резистентности к ациклогуанозину. Наряду с этой проблемой клинические испытания позволили выявить еще одну значимую проблему применения этих ЛС - гепато - и неф-ротоксичность [11-13].
Таблица 4
Контролируемые показатели и требования к качеству ЛС Ацикловир порошок лиофилизированный для приготовления раствора для инфузий, предъявляемых зарубежными __________________________фармакопеями и ВФС РБ 0985-0б ______________________
Показатели качества ВФС РБ 0985-06 Британская фармакопея, ВР 2002 Американская фармакопея, ИБР 26
Подлинность ВЭЖХ - по совпадению времени удерживания основного пика ацикловира и РСО ацикловира 1. УФ-спектр в области от 230 нм до 350 нм имеет максимум при 255 нм и плечо при длинах волн от 274 нм 2. ТСХ в сравнении со стандартом ацикловира ВЭЖХ - по совпадению времени удерживания основного пика ацикловира стандарта
рН От 10,5 до 12,0 От 10,7 до 11,7 От 11,0 до 12,5
Посторонние примеси ВЭЖХ Гуанин - не более 1,0%; - любая другая индивидуальная примесь -не более 0,5%; - суммарное содержание всех других примесей - не более 1,0% Гуанин не более 1,0%;прочие примеси не более 0,5% Гуанин не более 1,0%; прочие примеси не более 1,0%
Количественное содержание От 92,5% до 107,5% для дозировок 0,25 г; и 0,5 г, 95% - 105% для дозировки 1,0 г. (ВЭЖХ) От 95,0% до 105,0% от указанного количества (УФ) От 93,0% до 107,0% от указанного количества (ВЭЖХ)
Ацикловир - ЛС блокирующее вирусную тимидинкиназу, имеет тенденцию заменяться более новыми антивирусными агентами. В рамках выполнения Государственной научно-технической программы (ГНТП) «Лекарственные средства» был разработан и освоен в производстве на РУП «Белмедпрепараты» новый лекарст-
венный препарат на основе бутаминофена [14,15]. Бутаминофен представляет собой антиоксидант фенольной природы. Это 2-гидрокси-3,5-ди-трет- бутил-Ы- фенилани-лин, СгоНэтЫО, молекулярная масса -297,42. Химическая схема синтеза субстанции бутаминофена приведена на рис.
3.
/уои
^ои
Пирокатехин
ио
К
И2Б04
Ж2 Л
А, мои
Д^и и ъ і
>Л^ои [А
3,5-ди-трет-бутил- пирокатехин и Бутаминофен
Рис.3 . Схема синтеза 2-гидрокси-3,5-ди-трет-бутил-Ы-фениланилина -бутаминофена
Субстанция бутаминофена представляет собой белый или белый с сероватым оттенком порошок без вкуса и запаха с температурой плавления 147-150° С. Легко растворим в хлороформе и эфире, умеренно растворим в гексане и спирте этиловом 95%, практически нерастворим в воде. Субстанция стабильна на протяжении 2 лет при хранении [16].
На основе субстанции бутаминофе-Бутаминофена (ВФС РБ 0595-05)
Масла вазелинового медицинского (ГОСТ Вазелина медицинского (ГОСТ 3582-84)
на была разработана лекарственная форма
- мазь для наружного применения.
При разработке состава и технологии производства мази на основе субстанции бутаминофена была изучена возможность использования различных мазевых основ: липофильных и эмульсионных.
В качестве наиболее оптимальной была выбрана следующая рецептура состава мази бутаминофеновой 2 %:
2,0 г
64-78) 2,0 г
до 100,0 г
Технологический процесс получения мази на основе бутаминофена включает стадии приготовление концентрата мази, подготовки мазевой основы, получение мази бутаминофеновой 2 %, упаковки и маркировки продукции.
В качестве критериев стандартизации мази бутаминофеновой 2 % для наружного применения были выбраны требования, предусмотренные соответствующими нормативными документами.
С целью подготовки статьи на мазь бутаминофеновую 2 % были разработаны методики проведения испытаний по следующим показателям качества: подлинность, pH, посторонние примеси, микробиологическая чистота, количественное определение. В соответствии с требованиями общей статьи “Статистическая обработка результатов химического экспе-
римента и биологических испытаний” [6] была проведена метрологическая оценка результатов испытаний ЛС по перечисленным выше показателям качества.
Краткая характеристика основных показателей, определяющих качество мази бутаминофеновой 2 %, с указанием допустимых значений и методов испытания (показатели качества приведены в соответствии с действующей ФС РБ 0595-05 “Мазь бутаминофеновая 2 %”), приведена в таблице 5.
В процессе проведения медикобиологических (доклинических) испытаний противогерпетической мази на основе субстанции бутаминофена, была исследована токсикологическая безопасность и специфическая противогерпетическая активность препарата.
Таблица 5
Основные показатели качества мази бутаминофеновой 2 %_________________
№ п/п Наименование показателя Допустимые пределы Метод контроля
1 Описание Мазь от белого или белого с буроватым оттенком цвета до желтого или желтого с буроватым оттенком цвета Визуальный
2 Подлинность 1. Появление красно-бурого окрашивания е реакции испытуемого раствора с кислотой уксусной “х.ч. ледяной” и раствором натрия нитрита при нагревании (аминогруппа) Качественная реакция
2. УФ-спектр поглощения испытуемого раствора в области от 230 до 320 нм должен быть идентичен спектру раствора РСО бутамино-фена Спектрофотометри- ческий
3 Однородность Не менее чем в 3 пробах из 4 не должно наблюдаться видимых частиц Визуальный
4 Размер частиц Не более 100 мкм ГФ XI, вып. 2, с. 145
5 Масса содержимого упаковки Не менее 3 г или 5 г Весовой
6 рН 5,5 - 7,5 ГФ XI, вып. 1, с. 113; потенциометрический
7 Микробиологическая чистота В 1 г мази допускается наличие не более 102 аэробных бактерий и грибов при отсутствии Enterobacteriaceae, Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus ГФ XI, вып. 2, с. 193 и Изменение к ней от 16.04.2002 г., категория 2
8 Посторонние примеси Не более 5,0 % ТСХ
9 Количественное определение Содержание бутаминофена в мази должно быть от 1,8 % до 2,2 % Спектрофотометриче- ский
10 Упаковка В соответствии с разделом “Упаковка” ФС РБ 0595-05
11 Маркировка В соответствии с разделом “Маркировка” ФС РБ 0595-05
12 Хранение В защищенном от света месте при температуре от 15 до 25°С. Список Б
13 Срок годности 2 года
В ходе исследования токсикологической безопасности бутаминофена и его мазевой лекарственной формы было установлено, что бутаминофен характеризуется низкой токсичностью (ЬБ50 определить не удалось). В условиях доклинических испытаний бутаминофен и мазь на его основе не проявляли местно-раздражающего, кожно-резорбтивного действия и не обладали аллергизирующими свойствами. Эм-бриотоксических, тератогенных или мутагенных эффектов бутаминофена выявлено не было. Хроническое ежедневное введение бутаминофена лабораторным животным в течение 30 дней не приводило к су-
щественным функциональным или структурным нарушениям со стороны жизненно важных систем организма.
Результаты изучения токсичности и биологической безопасности бутаминофе-на позволили заключить, что в исследованных дозах ЛС характеризуется низкой токсичностью и является биологически безвредным для организма экспериментальных животных. В процессе исследований не было выявлено каких-либо побочных эффектов, ограничивающих проведение клинических испытаний ЛС.
В экспериментах in vitro была изучена противогерпетическая активность
субстанции бутаминофена по отношению к вирусам Herpes simplex MC, Varicella zoster NC, Herpes genitalis LC (штаммы из коллекции БелНИИЭМ МЗ РБ). Установлено, что на культуре клеток по степени выраженности противовирусного эффекта бутаминофен сопоставим с ацикловиром и фосфоноуксусной кислотой (ФУК), однако он может быть активнее указанных средств в тех случаях, когда инфицирование происходит ацикловир-устойчивым или ФУК-устойчивым вариантом вируса простого герпеса. Это является существенным преимуществом бутаминофена, поскольку резистентность вируса герпеса к противовирусным ЛС снижает эффективность терапии.
В экспериментах на лабораторных животных на модели экспериментального герпетического кератоконъюктивита у кроликов установлено, что мазь бутами-нофеновая 2 % обладает лечебным действием при местной терапии. В результате лечения у животных снижалась интенсивность клинических симптомов заболеваний, сокращались сроки их регрессии. Сравнение специфической активности мази на основе бутаминофена с мазью Ацикловир показало, что исследуемые препараты обладают сопоставимой противовирусной активностью. По результатам доклинических медико-биологических испытаний было рекомендовано проведение клинических испытаний мази бутаминофено-вой 2 %.
В соответствии с решением Фармакологического комитета МЗ РБ первая фаза клинических испытаний была проведена на базе 4-й Городской клинической больницы г. Минска. Испытания проведены с участием специалистов кафедры фармакологии Белорусского государственного медицинского университета (БГМУ) (руководитель д.м.н. Кевра М.К). Цель испытаний - изучение переносимости и безопасности мази бутаминофеновой 2 % у человека. Основные задачи испытаний: исследование местного и общего действия ЛС при аппликации на кожу и слизистые оболочки здоровым добровольцам.
В результате проведения I-й фазы клинических испытаний мази бутамино-
феновой 2 % установлено, что данное ЛС при курсовом нанесении на кожу и слизистые оболочки хорошо переносилось здоровыми добровольцами. Мазь не вызывала локальных изменений кожи и слизистых оболочек на протяжении 3-х разового ежедневного применения в течение 4-х недель, а также и в более отдаленный период (через 2 недели после окончания курса аппликаций). При длительном применении ЛС не оказывало заметного резорбтивного действия на организм здоровых добровольцев.
Для оценки терапевтической эффективности мази у больных с герпетической патологией кожи, были проведены мультицентровые открытые сравнительные рандомизированные клинические испытания (вторая фаза). В соответствии с решением Фармакологического комитета МЗ РБ, испытания проводились на следующих клинических базах: в Витебском областном клиническом кожновенерологическом диспансере (кафедра дерматовенерологии ВГМУ), в Городском клиническом кожно-венерологическом
диспансере г. Минска (кафедра кожных и венерических болезней БГМУ) и в Гомельском областном кожно-венерологическом диспансере. Задачей испытаний являлось изучение терапевтической эффективности, переносимости и безопасности ЛС, изучение преимуществ и недостатков мази в сравнении с мазью ацикловира 5%, уточнение режимов и сроков применения ЛС, выяснение возможностей возникновения побочных эффектов ЛС и способов их коррекции. При проведении II фазы клинических испытаний мазь бутаминофено-вая 2% была назначена 90 пациентам (испытуемая группа), мазь ацикловира 5% (производства АЗТ «Фарма») также получали 90 больных с герпетической инфекцией кожи и слизистых оболочек (контрольная группа). В группе пациентов, получавших мазь бутаминофеновую 2%, было 44 (48,9%) мужчин и 46 (51,1%) женщин. В группе больных, пролеченных мазью ацикловира 5%, было 34 (37,8%) мужчин и 56 (62,2%) женщин.
В исследования были включены па- группа) и 18-72 года (контрольная группа).
циенты в возрасте 21-75 лет (основная
Таблица 6
Распределение пациентов по клиническим формам заболевания, лечение которых проводи-
лось в рамках клинических испытаний с применением мази бутаминофеновой 2% ________(РУП «Белмедпрепараты») и мази ацикловир 5% (АЗТ «Фарма»)__________
Клиническая форма заболевания (НКБ-10) Основная группа (мазь бутаминофеновая 2%) Группа сравнения (мазь ацикловира 5%)
Опоясывающий лишай 20 (22,2%) 11 (12,2%)
Herpes simplex Герпетический везикулярный дерматит (В00.1) 41 (45,6%) 55 (61,1%)
Генитальная герпетическая инфекция (А. 60) 29 (32,2%) 24 (26,7%)
Всего: п = 90 (100%) п = 90 (100%)
Больным герпетической инфекцией, включенным в основную и контрольную группы, проводилось клинико-
лабораторное обследование до лечения (сбор анамнеза, в т. ч. аллергологического и фармакологического, клиническое обследование, оценка состояния кожи и слизистых оболочек, общий анализ крови, общий анализ мочи, биохимическое исследование крови, обследование на сифилис -КСР, ИФА, при необходимости - РИФ или ИФА на хламидии, посев на уреа- , микоплазмы, мазок и посев на гонококки, мазок на трихомонады), в процессе лечения и по окончании терапии (клиническое обследование, оценка состояния кожи и слизистых оболочек, общий анализ крови, общий анализ мочи, биохимическое исследование крови).
Результаты лечения оценивались методом ежедневного клинического наблюдения и динамического протоколирования: исходно и через 7 - 14 - 21 - 35 дней после начала лечения.
Эффективность ЛС анализировали на основании данных по срокам рассасывания отека в области очага, срокам разрешения гиперемии в области очага, срокам разрешения сыпи (пузырьков, эрозий). Итоговая оценка эффективности ЛС мази бутамино-феновой и мази ацикловира проводилась в баллах, с учетом средней продолжительности лечения герпесвирусной инфекции:
0 баллов - отсутствие эффекта,
1 балл - слабый эффект (исчезновение всех клинических проявлений после 21 дня использования мази),
2 балла - хороший эффект (исчезновение всех клинических проявлений до 21 дня использования мази),
3 балла - отличный эффект (исчезновение всех клинических проявлений до 14 дней использования мази).
Переносимость ЛС оценивали как удовлетворительную при отсутствии побочных эффектов или легкой степени их выраженности; как неудовлетворительную
- при появлении выраженных побочных реакций, требующих отмены ЛС.
В результате проведенных испытаний установлено, что мазь бутаминофено-вая 2% обладает удовлетворительной клинической эффективностью при лечении герпетических поражений кожи и слизистых оболочек, хорошей переносимостью и безопасностью при местном применении в изученных дозировках (при нанесении тонкого слоя мази на пораженный участок кожи 4 раза в день в течение нескольких недель). По эффективности лечения герпетических поражений кожи мазь бутамино-феновая 2% практически не уступала мази ацикловира 5% (АЗТ «Фарма»), при этом испытуемое ЛС было более эффективно по сравнению с мазью ацикловира 5% при лечении герпетических поражений, лока-
лизованных на слизистых оболочках. Например, при применении мази бутамино-феновой 2% в лечении больных с простым пузырьковым герпесом, сроки рассасывания отека в области очага составляли 3,7+0,33 дня (для препарата сравнения -4,5+0,24 дня); сроки разрешения гиперемии составляли 6,4 + 0,51 дня (препарат сравнения - 6,8 + 0,3 дня); сроки разрешения сыпи (пузырьков и эрозий) - 5,1 + 0,23 дня (препарат сравнения - 5,6 + 0,27 дня).
В целом, исчезновение клинических симптомов у больных с герпетической инфекцией при применении мази бутамино-феновой 2% происходило в несколько более короткие сроки, чем при применении мази ацикловира 5% [17].
У всех пациентов с герпетической инфекцией кожи и слизистых оболочек, получавших лечение мазью на основе бу-таминофена, был достигнут хороший клинический эффект. Побочных реакций на аппликации мази бутаминофеновой 2% в ходе клинических испытаний выявлено не было. Индивидуальная непереносимость препарата не зарегистрирована. В ходе проведения испытаний были определены рекомендуемые дозы и продолжительность курса лечения ЛС.
Таким образом, в процессе проведения экспериментальных и клинических исследований установлено, что мазь бута-минофеновая 2 % обладает противовирусной активностью при лечении герпетических заболеваний кожи и слизистых оболочек (ВПГ-инфекция, опоясывающий лишай). ЛС способствует быстрому купированию воспалительного процесса, снижает зуд, отек, гиперемию, ускоряет образование корок, препятствует появлению свежих высыпаний. Предотвращает прогрессирование процесса, снижает вероятность кожной диссеминации.
На основании полученных результатов мазь бутаминофеновая 2 % была разрешена к медицинскому применению в качестве противовирусного (противогерпе-тического) средства при герпетических заболеваниях кожи и слизистых оболочек (герпес лабиальный, генитальный, опоясывающий лишай). Регистрационное удостоверение МЗ РБ № 05/08/941 от 29.09.2005г.
Производство мази бутаминофено-вой 2% освоено на РУП «Белмедпрепара-ты» с 2005 года, в 2005 году произведено и реализовано 13,38 т.уп., в 2006 г. - 17,79 т. уп.
Несмотря на успешное создание на основе бутаминофена мазевой лекарственной формы, возможности создания с использованием этой субстанции лекарственных форм для системного применения весьма ограничены. Это связано в первую очередь с плохой растворимостью этого соединения в воде и водных растворах. Поиск соединений с противовирусной активностью, обладающих хорошей растворимостью в воде, по-прежнему является актуальной задачей. Среди нуклеозидов перспективным направлением поиска является группа производных цитидина, которые, в отличие от производных гуанози-на, к которым относится ацикловир, хорошо растворимы в воде.
ЛИТЕРАТУРА
1.World Health Organization. Prevention and control of herpesvirus diseases. Clinikal and laboratory diagnosis and chemotherapy. A WHO meeting. Bull WHO 1985 -63 (2). - P. 185-201.
2. Герпес: этиология, диагностика, лечение/ И.Ф. Баринский [и др.]; М: Медицина, 1986. - 272 с.
3. Ацикловир, субстанция. НД РБ 03570.2006
4. Машковский, М. Д. Лекарственные средства/М.Д.Машковский.-Т. 1-2. М.: Новая волна, 2005. - 1206 с.
5.Мазь ацикловира 5 %. ФС РБ 038002.
6.ГФ XI ,выпуск 1
7.R. F. Pass, M.R. Schleiss, M. Boeckh and W. Garret. Herpes.// The Journal of International Herpes Management Forum. - 2003.
- Vol. 10 (1). - P.101-118.
8.Baker DA, Blythe JG. Once-daily valaciclovir hydrochlorid for suppression of recurrent genital herpes. //Obstet Gynecol.-1999. - Vol. 8 (1). - P.91-98.
9.Британская фармакопея, BP 2002.
10.Циклоцитидинмонофосфат, субстанция. ВФС РБ 0789 - 03.
11.Madhu Vajpayee, Neena Malhotra. Antiviral drugs against herpes infections // Indian J. Pharmacol. 2000 vol. 32. - Р. 330338.
12.Stephen K. Tyring, MD, PhD; John M. Douglas, Jr, MD; Lawrence Corey, MD; Spotswood L. Spruance, MD; J0rgen Esmann, MD. A Randomized, Placebo-Controlled Comparison of Oral Valacyclovir and Acyclovir in Immunocompetent Patients With Recurrent Genital Herpes Infections // Arch Dermatol. -1998. - 134/ - P. 185-191.
13.Anders Hellden, Jan Lycke, Tatiana Vander, Jan-Olof Svensson, Ingegerd Odar-Cederlof and Lars Stahle. The aciclovir metabolite CMMG is detectable in the CSF of subjects with neuropsychiatric symptoms during aciclovir and valaciclovir treat-ment//Journal of Antimicrobial Chemotherapy. - 2006. - 57(5). - P. 945-949.
14.Патент ВУ 6594 C1- Средство против вируса герпеса.
15.Патент ВУ 6503 C1- Противовирусное средство для лечения инфекций, вызванных вирусом простого герпеса.
16. Бутаминофен, субстанция ФС РБ 0595-05.
17. Опыт использования отечественных пртивовирусных препаратов для наружного лечения герпетической инфекции кожи и слизистых оболочек//В.Г. Панкратов [и др.]; Белорусский медицинский журнал - 2003.- №4 (6). - С. 118 - 121.
18.Порошок лиофилизированный ацикловира 0,25 г, 0,5 г и 1,0 г для приготовления раствора для инфузий. ВФС РБ 0985-06.
19.Мазь «Нуклеавир» глазная. ВФС РБ 0905 - 05.
Поступила 20.12.2006 г.
