Совершенствование норм времени диагностики инфекционных болезней птиц в ветеринарных лабораториях Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

УДК 619:616.9-074:658.54:598.2/.9

СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ НОРМ ВРЕМЕНИ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ ПТИЦ В ВЕТЕРИНАРНЫХ ЛАБОРАТОРИЯХ

Шастин П.Н. - аспирант; Трофимова Е.Н. - д.в.н, доцент Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана

Ключевые слова: нормирование труда, иммуноферментный анализ, болезни птиц, ветеринарная лаборатория.

Keys words: labor regulation, enzyme-linked immunosorbent assay, avian diseases, veterinary laboratory. Key words: labor regulation, enzyme-linked immunosorbent assay, avian diseases, veterinary laboratory.

Обеспечение эффективной защиты сельскохозяйственных животных от болезней было и остается одной из главных задач ветеринарной науки и практики [10].

Наиболее актуальным для промышленного птицеводства является мониторинг особо опасных и экономически значимых болезней кур - ньюкаслской болезни (НБ), гриппа птиц (I II), инфекционной бурсальной болезни (ИББ), инфекционного бронхита кур (ИБК), синдрома снижения яйценоскости-76 (ССЯ-76), реовирусной инфекции птиц (РВП), инфекционного энцефаломиелита птиц (ИЭП), респираторного микоплазмоза и микоплазменного синовита, вызываемых Mycoplasma gallisepticum (МГ) и Mycoplasma synoviae (МС) [9]. Часто причиной внезапного снижения яичной продуктивности кур-несушек во многих регионах России являются инфекционные болезни. При этом продуктивность может снижаться на 20-50% и после перенесенного заболевания яйценоскость птиц, в основном, не восстанавливается до исходного уровня [11].

Ретроспективная диагностика является основополагающим фактором для своевременной защиты поголовья от инфекционных заболеваний. Важную роль играют серологические методы, такие, как реакция диффузионной преципитации (РДП), реакция торможения гемагглютинации (РТГА), реакция нейтрализации (РН) и иммуноферментный анализ (ИФА), которые позволяют обнаружить специфические антитела на ранних стадиях болезни и оценить иммунитет, полученный в результате вакцинации [12,13].

Непрямой вариант ИФА - высокочувствительный и специфичный метод, удобен для анализа больших количеств образцов малого объема в лабораториях с самым простым оснащением [1,2,5,6].

Цель исследования. Разработка норм времени на диагностику болезней птиц мето-

дом иммуноферментного анализа.

Методы и материалы. Исследования проводились на базе Удмуртского ветери-нарно-диагностического центра» (УВДЦ), Чувашской республиканской ветеринарной лаборатории, Татарской межрегиональной ветеринарной лаборатории, Республиканской ветеринарной лаборатории Республики Татарстан по общепринятой методике изучения и нормирования труда ветеринарных работников.

За период исследований было проведено 67 фотографии рабочего дня, 87 хроно-метражных и фотохронометражных наблюдений. Проведены исследования по нормированию труда за работой шести опытных ветеринарных врачей со стажем работы более трех лет. Условия работы ветеринарных специалистов были одинаковыми во всех вышеперечисленных ветеринарных учреждениях.

Биологическим материалом для исследования служили пробы сывороток крови, которые использовали без предварительной обработки для постановки реакции иммуно-ферментного анализа. Отбирали сыворотку крови от птиц в объёме не менее - 0,5 мл., которую доставляли в лабораторию не позднее суток со дня взятия крови при условии хранения сыворотки при температуре от 4 до 6°С [3,14].

Результаты исследований. Иммуно-ферментный анализ проводят в специально оборудованном помещении ветеринарный врач и лаборант. Предварительно ветеринарные врачи проверяют и настраивают оборудование, проводят контроль реакции, консультируют и руководят работой лаборантов, оформляют и выдают результаты экспертизы. Лаборанты подготавливают рабочее место, лабораторную посуду, исследуемые пробы, убирают рабочее место, выполняют поручения ветеринарного врача, утилизируют использованный материал. Единичные слу-

чай исследования являются экспериментальными и в лабораториях не проводятся в постоянной практике. Отдельные исследования работников ветеринарных лаборатории по нормированию труда были проведены в конце 20-го века.

Как видно из таблицы 1 в Татарской межрегиональной ветеринарной лаборатории (ТМВЛ) отмечается увеличение объемов исследований болезней птиц методом ИФА, за 5 лет в 3,5 раза. Обусловлено тем, что ТМВЛ обслуживает несколько субъектов Российской Федерации, а именно Республика Татарстан, Удмуртия, Чувашия, Марий Эл и следующие области: Кировская, Ульяновская, Нижегородская. Такая большая широ-

Таблица 1 - Сведения о лабораторных исследова

лабораториями

комасштабная работа была возложена приказом Федеральной службы по ветеринарному и фитосанитарному надзору от 24 мая 2011 г., для выполнения обеспечения благополучного развития сельскохозяйственного производства и также выявление остатков запрещенных и вредных веществ в организме животных, кормах и кормовых добавках, продуктах животного происхождения. В Республиканской ветеринарной лаборатории РТ наибольший объем исследований проведен в 2012 г. - 2400 экспертиз. В Чувашской республиканской ветеринарной лаборатории отмечается тенденция к увеличению объемов исследований, в 2011 г. - 1856, 2015 - 5426. Рост составил 2,9 раза.

ях болезней птиц, проводимых ветеринарными

2010 - 2015 гг.

Название организации Годы Проведено исследований, шт.

Грип п птиц Инфек цион-ный бронхит Инфекционный ларин-готрахе-ит Синдром снижения яй-цено-скости Мико- плазмоз Инфекционная бурсаль-ная болезнь Реови-русная инфек ция Всего

Татарская межрегиональная ве-теринар-ная лаборатория 2011 1360 724 27 206 157 423 45 2942

2012 2680 1465 210 246 1032 1210 169 7012

2013 4490 785 112 267 65 473 178 6370

2014 4785 976 250 689 1132 1068 250 9150

2015 5325 1453 334 873 1076 987 431 10479

Республиканская ве-теринар-ная лаборатория РТ 2011 1126 0 0 0 0 0 0 1126

2012 2311 0 0 0 89 0 0 2400

2013 1348 0 243 0 0 0 0 1591

2014 885 0 311 0 115 0 0 1311

2015 998 0 516 0 0 0 0 1514

Удмурдский ветеринарный диагностический центр 2011 981 172 162 60 102 172 70 1719

2012 1156 199 163 25 95 255 50 1943

2013 795 343 326 180 164 355 140 2303

2014 2213 382 342 170 210 390 180 3887

2015 2074 90 90 0 193 66 100 2613

Чувашская республиканская ве-теринар-ная лаборатория 2011 1856 0 0 0 0 0 0 1856

2012 896 0 0 0 0 0 0 896

2013 584 0 0 0 0 0 0 584

2014 666 0 710 2136 0 370 0 3882

2015 879 0 690 3387 0 470 0 5426

В Удмуртском ветеринарно-диагностическом центре наименьшее количество исследований проведено в 2011 г., наибольшее в 2013 г. - 3887. Рост объемов исследований обусловлен эпизоотической обстановкой. Больше всего исследований проводится по гриппу птиц, эпизоотическая ситуация по которому остается не благопо-

лучной в ряде регионов. Наибольший объем исследований отмечается в 2015 г. 5325 исследований в ТМВЛ, РВЛ в 2012 - 2311, УВДЦ 2014 - 2311, ЧРВЛ 2011 - 1856.

Для исследования набором ГОЕХХ 100 проб сыворотки крови на определение антител к вирусу инфекционного бронхита кур всего затрачивается 156,7 мин., при одновре-

менном исследований 10 проб - 61,3, одной пробы - 33,3 мин. При исследований единичной пробы сыворотки крови к вирусу гриппа птиц затрачивается 30,8 мин., 10 проб - 44,2, 100 проб - 150,3 мин. При выявлении вируса инфекционной бурсальной болезни

Для определения антител к вирусу те-носиновита или реовируса (набор IDEXX) требуется 156,9 мин. на 100 проб, на 10 проб

- 57, на 1 пробу - 34,4 мин. Затраты времени ветеринарного врача при выявлении возбудителя микоплазмоза при исследований 100 проб составили 143,1 мин, 10 пробы - 42,7, 1 пробы - 28,3 мин. при определении антител к вирусу инфекционного бронхита (набор IDEXX) одной пробы составили 31,5 мин., 10

- 55,2, 100 - 144,8 мин. При проведении массовых одновременно исследуемых проб экономится время на разведение и постановку контролей.

Заключение. 1. В ФГБУ Татарской межрегиональной ветеринарной лаборатории в среднем за 5 лет произведено 7190,6 исследований на вирусные болезни птиц методом иммуноферментного анализа; в БУ УР Удмуртском ветеринарно-диагностическом центре - 2493; в БУ ЧР Чувашской республиканской ветеринарной лаборатории - 2528,8; в ГБУ Республиканская ветеринарная лаборатория Республики Татарстан - 1588,4 исследований. 2. Оптимальным количеством одновременно исследуемых проб методом ИФА 100 и более проб, что способствует, благодаря чему уменьшается время процессов при постановке реакции. 3. Ветеринарный специалист при исследовании на болезни птиц иммуноферментным анализом с использова-

(набор ФГБУ «ВНИИЗЖ) 1 пробы затраты времени составили 52,1 мин., 10 - 153, 100 -322 мин. Также при каждой реакции ставятся отрицательный и положительный контроли, каждый вносится в две соответствующие лунки.

нием набора ФГБУ «ВНИИЗЖ» затрачивает больше времени, чем при использовании набора IDEXX. Диагностика 100 проб инфекционного бронхита кур составила 156,7 мин, 10 - 61,3, 1 - 33,3 мин. набором IDEXX, соответственно 322,153 и 52,1 мин. набором ФГБУ «ВНИИЗЖ».

ЛИТЕРАТУРА:

1. Апалькин, В.А. Нормирование труда работников ветеринарных лабораторий / В.А. Апалькин, И.Н. Никитин // Ветеринария. -2006. - № 1. - С. 7-10.

2. Верховский, О.А. Иммунофермент-ные тест-системы для оценки иммунногенно-го статуса птиц / О.А. Верховский., Т.А.Тимофеева, С.Л. Кальнов // БИО. - 2004.

- №5. - С.31-32.

3. Ветеринарные правила лабораторной диагностики гриппа А птиц: Приказ МСХ РФ от 3.04.2006 г. № 105 // Вет. консультант. -2006. - № 12. - С. 8-9.

4. Джавадов, Е.Д. Диагностика и профилактика новых инфекционных болезней птиц / Е.Д. Джавадов // Farm Animals. - 2013.

- №. 2 (3).

5. Егоров, А.М. Теория и практика им-муноферментного анализа. М.: Высш. школа,

- 1991. 345 с.

6. Иммуноферментный анализ / под ред. Т.Т. Нго, Г. Ленхофф. М.: Мир, - 1988. -336 с.

Таблица 2 - Затраты рабочего времени ветеринарных специалистов на диагностику болезней птиц

методом ИФА

Наименование работ (услуг) Затраты на исследование при одновременном исследовании, мин.:

1 пробы 10 проб 100 проб

Определение антител к вирусу инфекционного бронхита кур (набор IDEXX AI, США) 33,3±0,7 61,3±1,1 156,7±1,4

Определение антител к вирусу гриппа птиц (набор IDEXX М, США) 30,8±0,62 44,2+0,8 150,3±1,1

Определение антител к вирусу инфекционной бурсальной болезни (набор ФГБУ «ВНИИЗЖ») 52,1±0,2 153+0,6 322±1,5

Определение антител к вирусу теносиновита (набор IDEXX М, США) 34,4±0,43 57+0,7 156,9±1,2

Определение антител к возбудителю микоплазмоза (набор IDEXX М, США) 28,3±0,21 42,7+1,1 143,1±1,8

Определение антител к вирусу инфекционного бронхита (набор IDEXX AI, США) 31,5±0,5 55,2±0,8 144,8±1,3

7. Луговская, Н.Н. Сравнительная оценка коммерческих тест-систем для диагностики гриппа птиц / Н.Н. Луговская, М.А. Циванюк, Н.С. Мудрак // Ветеринарная медицина 87. Мiжвiдомчий тематичний науко-вий збiрник. Харюв. - 2006. - С. 307-312.

8. Методические рекомендации по нормированию труда ветеринарных специалистов (Одобрено НТС МСХ РФ 26 декабря 2014г.). URL: http//www.consultant.ru/document/cons_doc_L AW_174390/).

9. Мудрак,. Н.С. Создание и внедрение в промышленное птицеводство системы комплексного серологического мониторинга инфекционных болезней на основе иммуно-ферментного анализа: дисс. - канд. Вет. наук: 06.02.02 / С.Н. Мудрак. - Владимир, - 2010. -С. 40.

10. Смирнов, А.М. Роль ветеринарной науки в обеспечении благополучия животноводства страны / А.М. Смирнов // Ветеринар-

ная патология. - 2008. - № 4. - С.12-13

11. Хохлачев, О.Ф. Ассоциированное течение инфекционного бронхита и синдрома снижения яйценоскости кур / О.Ф. Хохлачев, А.Б. Терюханов // Ветеринария. - 2005. - №. 11. - С. 12-16.

12. Циванюк, М.А. и др. Непрямой вариант ИФА для выявления и количественного определения антител к вирусу гриппа птиц при тестировании проб в одном разведении / М.А. Циванюк, Н.Н. Луговская, Н.С. Мудрак, В.В. Дрыгин, Е.В. Белик // Ветеринарная патология. - 2007. - №. 4. - С.17-21.

13. Чвала, И.А. Разработка диагностического набора для определения уровня антител к вирусу гриппа птиц в РТГА / И.А. Чвала, М.А. Циванюк, Н.Н. Луговская // 3-й Международный ветеринарный конгресс по птицеводству. - М. - 2007. - С. 73-78.

14. Manual of Standards for Diagnostic Tests and Vaccines, 4-th ed., OIE, 2000.

СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ НОРМ ВРЕМЕНИ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ

ПТИЦ В ВЕТЕРИНАРНЫ1Х ЛАБОРАТОРИЯХ

Шастин П.Н., Трофимова Е.Н.

Резюме

Целью данной работы является разработка норм времени на диагностику болезней птиц методом иммуноферментного анализа. Было проведено 67 фотографии рабочего дня, 87 хрономет-ражных и фотохронометражных наблюдений. Исследования проводились на базе Удмуртского ветеринарно-диагностического центра, Чувашской республиканской ветеринарной лаборатории, Татарской межрегиональной ветеринарной лаборатории, Республиканской ветеринарной лаборатории Республики Татарстан по общепринятой методике изучения и нормирования труда ветеринарных работников. Для проведения серологических исследований методом иммуноферментного анализа отбирали сыворотку крови в определённом объёме: от птиц - не менее - 0,5 мл. Её необходимо доставить в лабораторию не позднее суток со дня взятия крови при условии хранения сыворотки при температуре от 4 до 6°С. В Татарской межрегиональной ветеринарной лаборатории отмечается увеличение объемов исследований болезней птиц методом ИФА, за 5 лет в 3,5 раза. Объясняется это расширением зоны исследований - 7 субъектов РФ. В Республиканской ветеринарной лаборатории РТ наибольший объем исследований проведен в 2012 г. - 2400. В Чувашской республиканской ветеринарной лаборатории отмечается тенденция увеличения объемов исследований, в 2011 г. - 1856, 2015 - 5426. Рост составил в 2,9 раза. В Удмуртском ветеринарно-диагностическом центре наименьшее количество исследований проведено в 2011 г., наибольшее в 2013 г. - 3887. В ФГБУ Татарской межрегиональной ветеринарной лаборатории в среднем за 5 лет произведено 7190,6 исследований на вирусные болезни птиц методом иммуноферментного анализа; в БУ УР Удмуртском ветеринарно-диагностическом центре - 2493; в БУ ЧР Чувашской республиканской ветеринарной лаборатории - 2528,8; в ГБУ Республиканская ветеринарная лаборатория Республики Татарстан - 1588,4 исследований.

IMPROVEMENT OF TIME NORMS FOR THE DIAGNOSIS OF INFECTIOUS AVIAN DISEASES

IN VETERINARY LABORATORIES

Shastin P.N., Trofimova E.N.

Summary

The aim of this work is the development of standard time for diagnosis of the diseases of birds by enzyme immunoassay. It was conducted 67 photos of the day, 87 timing and fotohronometra observations. The research was conducted on the basis of the Udmurt veterinary diagnostic center, the Chuvash Republican veterinary laboratory of the Tatar interregional veterinary laboratory Republican veterinary laboratory of the Republic of Tatarstan by the conventional method study and work measurement veterinary professionals. For serological studies by ELISA were selected blood serum in a volume of from birds - not less than 0,5 ml should be delivered to the laboratory no later than days from the date of collection of blood under the condition of storage of the serum at a temperature of 4 to 6°C. In the Tatar interregional veterinary laboratory noted an increase in research of avian diseases by ELISA, for 5 years in 3,5 times. This is due to the expansion of studies 7 subjects of the Russian Federation. In the Republican veterinary laboratory of the largest volume of research conducted in 2012 - 2400. In the Chuvash Republican veterinary laboratory, there is a tendency of increasing the volume of research, in 2011 - 1856, 2015 - 5426. The growth amounted to 2.9 times. In the Udmurt veterinary diagnostic center the least amount of research carried out in 2011, the highest in 2013 - 3887. In the state organization of the Tatar interregional veterinary laboratory in the average of 5 years produced 7190,6 studies on viral diseases of birds by enzyme immunoassay; BU UR Udmurt veterinary diagnostic center - 2493; BU in the Czech Republic Chuvash Republican veterinary laboratory - 2528,8; GBU Republican veterinary laboratory of the Republic of Tatarstan - 1588,4 research.

УДК 636.592:612.017.12

МОРФОГЕНЕЗ ФАБРИЦИЕВОЙ БУРСЫ У ИНДЕЕК ПРИ ПРИМЕНЕНИИ НОРМОТРОФИНА

Щукарева Е. А. - аспирант Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана

Ключевые слова: индейки, Нормотрофин, фабрициева бурса, развитие.

Key words: turkey, Normotrophin, bursa of Fabricius, development.

Иммунокомпетентные органы по степени функциональной активности подразделяют на центральные и периферические [1, 2].

Фабрициева бурса относится к центральным органам иммунной системы.

Согласно данным многих авторов, к моменту рождения, бурса морфологически сформирована, этот орган участвует в выработке гуморального иммунитета и относятся к органам В - системы [3,4,7]

Многочисленными исследованиями доказано, что Нормотрофин влияет на повышение продуктивности животных и птиц, а также на их развитие в постэмбриональный период, улучшает гематологические показатели [5, 6, 8].

Цель нашего исследования определить влияние Нормотрофина на морфогенез фаб-рициевой бурсы в процессе роста и развития

индеек тяжелого кросса Hybrid - Converter.

Материалы и методы исследования.

В начале эксперимента было сформировано 2 группы индеек (контроль и опыт) по 40 особей в каждой. Опытной группе вводили Нормотрофин 3 раза на 1, 3 и 7-е сутки жизни.

Материалом для исследования служили фабрициева бурса индеек от суточного до 120 дневного возраста. Органы отбирали у птиц контрольной и опытной групп сразу после убоя и фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина.

Для исследования микроструктуры готовили продольные и поперечные срезы органов по общепринятым методикам, с последующим окрашиванием гематоксилином и эозином по рецептуре Майера.

Результаты исследований. У суточных индюшат складчатость фабрициевой бурсы выражена четко. В фолликулах про-