CC BY
62
УДК 612.128+547.79
СОСТОЯНИЕ МЕТАБОЛИЗМА БЕЛЫХ КРЫС ПОД ВЛИЯНИЕМ СМЕСИ НИТРОБЕНЗОФУРОКСАНОВ
Каримова Р.Г.
ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: ферменты, сыворотка крови, крысы, оксид азота, фуроксаны.
Key words: ferment, blood serum, rats, nitric oxide, furoksans.
Оксид азота принимает участие в регуляции метаболических реакций [1]. Установлено, что смесь 5,7-дихлор-4,6-
динитробензофуроксана, 5,7-дихлор-6-нитробензофуроксана и 5,7-
дихлор-4-нитробензофуроксана (тримиксан) повышает активность нитроксидергической системы, так как является экзогенным источником оксида азота (NO) [2]. В связи с этим вызывает интерес изменение характера метаболизма в организме при многократной активации нитроксидергической системы. Интенсивность и направленность обмена веществ определяется концентрациями ферментов сыворотки крови.
Исходя из этого, целью наших исследований является определение динамики изменения аланинаминотрансферазы (АЛТ),
аспартатаминотрансферазы (АСТ), лактадегидрогеназы,
креатинфосфокиназы, общей альфа-амилазы и глюкозы при длительном поступлении тримиксана в организм.
Материалы и методы исследования. Исследования проведены на 20 белых нелинейных крысах обоего пола живой массой 220-250 г, разделенных на четыре группы. Животным первой группы ежедневно вводили дистиллированную воду внутрижелудочно в объеме 3 мл (контроль), крысам второй группы - тримиксан один раз в сутки в течение 30 дней в виде 0,1% суспензии в дозе 1 мг/кг.
Концентрацию аланин- и аспартатаминотрансферазы,
лактатдегидрогеназы, креатинфосфокиназы, общей альфа-амилазы определяли спектрофотометрическим кинетическим методом с использованием наборов Ranbox, глюкозы - глюкозооксидазным методом до введения и на 10-й, 20-й и 30-й дни эксперимента. Статистическую обработку результатов эксперимента проводили с использованием критерия Стьюдента.
Результаты исследований. У интактных крыс концентрация общей альфа-амилазы в крови составляет 475,95±29,16 Е/л, глюкозы - 7,07±0,35 ммоль/л. В контрольной группе животных, получавших ежедневно
дистиллированную воду внутрижелудочно в объеме 3 мл, концентрация изучаемого фермента снижается в 1,2 раза (396,91±7,96 Е/л против 475,95±29,16 Е/л, Р=0,06) на десятый день эксперимента. Тенденция к снижению сохраняется и на 20-й день (400,39±59,54 Е/л против 475,95±29,16 Е/л до введения). На тридцатый день исследований отмечается обратная картина: активность общей альфа-амилазы
повышается в 1,21 раза на уровне тенденции (575,73±9,00 Е/л против 475,95±29,16 Е/л до введения). Поскольку на 10-й день эксперимента концентрация глюкозы была снижена в 1,4 раза (5,04±0,42 ммоль/л против 7,07±0,35 ммоль/л, Р=0,02) мы можем сделать вывод о том, что на ежедневное введение дистиллированной воды с предварительной фиксацией и введением зонда в желудок организм крыс отвечает повышением утилизации глюкозы в тканях. Diego M.A. et al. (2005) сообщают о том, что раздражение кожных рецепторов стимулирует активность парасимпатической нервной системы [3], следовательно, ежедневная фиксация в течение 30 дней способствует активации парасимпатических центров и повышению анаболизма углеводов. На 20-й день эксперимента сохраняется аналогичная картина, но менее выраженная, что свидетельствует о проявлении компенсаторных реакций организма. Гиперамилаземия, отмечаемая на 30-й день эксперимента, по-видимому, связана со сниженной концентрацией глюкозы в крови (5,81±0,31 ммоль/л против 7,07±0,35 ммоль/л, Р=0,06) в течение длительного времени, на что организм отвечает повышением количества фермента.
Концентрация щелочной фосфатазы у интактных крыс составляет 339,39±20,93 Е/л и остается неизменной до десятого дня эксперимента. Тенденция к его снижению отмечается на 20-й и 30-й дни введения (285,76±27,54 Е/л и 280,11±25,66 Е/л против 339,39±20,93 Е/л до введения).
В контрольной группе животных концентрация лактатдегидрогеназы на десятый день эксперимента составляет 416,44±24,67 Е/л против 362,20±17,24 Е/л до введения, а после 20-го дня введения наблюдается тенденция к снижению (330,01±41,71 Е/л против 362,20±17,24 Е/л) при возврате на исходный уровень к тридцатому дню. Лактатдегидрогеназа является ферментом конечной реакции гликолиза, чем и объясняется повышение ее количества на 10-й день эксперимента при снижении количества общей альфа-амилазы сыворотки крови.
Концентрация креатинфосфокиназы в крови интактных крыс -449,39±20,93 Е/л. В контрольной группе животных, получавших ежедневно дистиллированную воду внутрижелудочно, отмечается тенденция к повышению концентрации изучаемого фермента на десятый день эксперимента (462,23±12,55 Е/л против 449,39±20,93 Е/л), которая сменяется снижением в 1,09 раза (Р=0,08) к 30-му дню. Известно, что сывороточная концентрация креатинфосфокиназы снижается при
снижении тонуса мышц, при слабой мышечной активности, исходя из чего можно предположить что повышение тонуса парасимпатической нервной системы также способствует снижению концентрации креатинфосфокиназы в сыворотке крови.
Концентрация АСТ в крови крыс - 100,96±6,42 Е/л. На 20-й день эксперимента в контрольной группе животных отмечается тенденция к повышению концентрации АСТ (118,14±9,42 Е/л против 100,96±6,42 Е/л до введения), а к 30-му дню она сменяется тенденцией к снижению - до 93,38±1,24 Е/л.
В сыворотке крови интактных белых крыс концентрация АЛТ составляет 58,45±3,05 Е/л. В контрольной группе животных на десятый день эксперимента отмечается тенденция к снижению концентрации фермента (39,76±9,00 Е/л против 58,45±3,05 Е/л до введения). На 20-й день концентрация АЛТ снижается в 1,26 раза (Р=0,025), к 30-му тенденция к снижению сохраняется.
Коэффициент Де Ритиса, как показатель типа метаболизма, у крыс контрольной группы повышается в 1,54 раза (2,65±0,43 против 1,72±0,02 до введения, Р=0,09), на 20-й день - в 1,48 раза (Р=0,04), а к 30-му - на уровне тенденции (1,89±0,19 против 1,72±0,02 до введения). Высокий коэффициент Де Ритиса за счет снижения концентрации АЛТ в сыворотке крови на 10-й и 20-й дни эксперимента свидетельствует о том, что в клетке происходит торможение периферических путей обмена (гликолиза, цикла Кори и т.д.) при неизменных центральных путях обмена веществ. Этот факт является дополнительным доказательством активации процессов анаболизма и, следовательно, парасимпатической нервной системы в организме при ежедневной фиксации животных.
Для оценки общего состояния и направленности течения обменных процессов определили индекс ферментемии. У крыс контрольной группы индекс ферментемии на десятый день эксперимента повышается в 1,23 раза на уровне тенденции (4,00±0,42 против 3,25±0,12до введения), на 20-й день - в 1,3 раза (Р=0,1), а к 30-му дню показатель возвращается к исходному уровню (3,27±0,22). Повышение индекса ферментемии свидетельствует об аэробном сдвиге клеточного метаболизма за счет снижения активности анаэробных механизмов.
При ежедневном введении тримиксана на 10-й день эксперимента концентрация общей альфа-амилазы снижается в 1,36 раза (359,72±20,59 Е/л против 490,4±11,62 Е/л, Р=0,005), на 20-й день - в 1,45 раза (Р=0,004), на 30-й день - в 1,38 раза (416,66±18,34 Е/л против 575,73±9,00 Е/л, Р=0,001) по сравнению с исходным уровнем. Известно, что оксид азота ограничивает выброс симпатических медиаторов [4]. Из установленных ранее фактов о том, что введение тримиксана повышает образование оксида азота в организме, можно сделать вывод, что гипоамилаземия при введении тримиксана объясняется снижением тонуса симпатической и
повышением тонуса парасимпатической нервной систем. Это подтверждается и снижением концентрации глюкозы в крови при введении тримиксана на 10-й день в 1,72 раза (Р=0,0001), на 20-й день - в 1,15 раза (Р=0,04), на 30-й день - в 1,11 раза (Р=0,02).
Десятый день введения тримиксана характеризуется тенденцией к повышению концентрации общей щелочной фосфатазы по сравнению с исходным уровнем (368,38±7,03 Е/л против 347,46±26,81 Е/л), которая сохраняется и на 20-й день (в 1,16 раза выше исходного уровня). На 30-й день исследований содержание щелочной фосфатазы снижается в 1,63 раза (213,5±22,06 Е/л против 347,46±26,81 Е/л до введения, Р=0,02). Оксид азота является физиологическим регулятором метаболизма кальция [5], повышает освобождение его из депо, чем и объясняется снижение концентрации щелочной фосфатазы - фермента остеобластов в ответ на длительное введение тримиксана в организм.
У крыс, получавших тримиксан (1 мг/кг), на 10-й день эксперимента концентрация лактатдегидрогеназы повышается на уровне тенденции (371,35±2,46 Е/л против 365,74±17,71 Е/л), которая сохраняется и на 20-й день, а в заключительный день исследований содержание лактатдегидрогеназы повышено в 1,51 раза (552,39±116,92 Е/л против 365,74±17,71 Е/л до введения, Р=0,02). После введения тримиксана, также как и у крыс контрольной группы, содержание лактатдегидрогеназы отрицательно коррелирует с содержанием общей альфа-амилазы (г = -1).
Ежедневное поступление в организм тримиксана на 10-й день сопровождается повышением концентрации креатинфосфокиназы по сравнению с исходным уровнем (460,04±5,51 Е/л против 432,23±5,51 Е/л, Р=0,03), а на 20-й и 30-й дни - в 1,24 раза и 1,06 раза ниже исходного уровня (Р=0,075). Следовательно, концентрация креатинфосфокиназы снижается при поступлении в организм доноров оксида азота.
Концентрация АСТ у крыс, получавших ежедневно тримиксан, в течение эксперимента не изменяется. Концентрация АЛТ на 10-й день эксперимента не изменяется по сравнению с исходным уровнем. На 20-й день - концентрация АЛТ повышается в 1,54 раза (Р=0,001), на 30-й день -снижается в 1,28 раза (Р=0,06) по сравнению с уровнем, отмеченным на 20й день.
Коэффициент Де Ритиса при ежедневном введении тримиксана на 10-й день эксперимента повышается в 1,2 раза на уровне тенденции, на 20й день - снижается в 1,31 раза (Р=0,03), на 30-й день отмечается тенденция к снижению в 1,22 раза по сравнению с исходным уровнем. Введение тримиксана сопровождается повышением активности периферических путей обмена, тогда как активность цикла трикарбоновых кислот остается неизменной.
У крыс, получавших тримиксан, на 10-й день эксперимента индекс ферментемии повышается в 1,08 раза на уровне тенденции, на 20-й день -
снижается в 1,24 раза (Р=0,06), а на 30-й день - в 1,32 раза (Р=0,03) по сравнению с исходным уровнем. Следовательно, введение тримиксана сопровождается анаэробным сдвигом клеточного обмена веществ.
Таким образом, при длительном поступлении в организм тримиксана - донора оксида азота обмен веществ клетки сдвигается в сторону анаболизма (анаэробная ферментемия).
ЛИТЕРАТУРА: 1. Салей А. П., Вашанов Г. А, Мещерякова М. Ю. Роль оксида азота в регуляции гемодинамических показателей и метаболических функций печени // Вестник ВГУ. Серия: Химия. Биология. Фармация. - 2009. - № 9. - С. 129-135. 2. Каримова Р.Г., Гарипов Т.В. Нитроксидергическая система: влияние препаратов фуроксанового ряда // Ветеринарная медицина домашних животных. Сборник статей. - Казань, 2009. - С. 85-88. 3. Diego M.A., Field T., Hemandez-Reif M. J. Vagal activity, gastric motility, and weight gain in massaged preterm neonates // Pediatr. -2005. - Vol. 147. - P. 50-55. 4. Ивашкин В.Т., Драпкина О.М. Клиническое значение оксида азота и белков теплового шока. - М., 2001. - 88с. 5. Ковалев И.В., Баскаков М.Б., Капилевич Л.В.. Медведев М.А. Роль оксида азота в регуляции электрической и сократительной активности гладких мышц // Бюллетень сибирской медицины - 2004. - № 1 - С. 12-20.
СОСТОЯНИЕ МЕТАБОЛИЗМА БЕЛЫХ КРЫС ПОД ВЛИЯНИЕМ СМЕСИ
НИТРОБЕНЗОФУРОКСАНОВ
Каримова Р. Г.
Резюме
Изучен ферментный состав крови белых крыс при ежедневном в течение 30 дней введении тримиксана (1 мг/кг) - соединения,
повышающего активность нитроксидергической системы. Установлено, что поступление в организм тримиксана сдвигает обмен веществ в сторону анаболизма.
RATS' METABOLISM CONDITION UNDER THE INFLUENCE OF NITROBENZOFUROXAN
Karimova R.G.
Summary
Enzymatic blood composition of white rats was investigated in the process of daily trimixan (1mg/kg) introduction for 30 days. It is a compound raising the activity of nitroxidergic system. It is established that trimixan makes metabolism move towards anabolism.
