CC BY
44
4. Бебешко В. Г. Причины развития анемий у подростков, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях, после аварии на ЧАЭС / В. Г. Бебешко, Е. М. Бруслова // Укр. журн. гематологи та трансфузи. - 2001. - № 2. - С. 26-30.
5. Бурлакова Е. Б. Особенности действия малых доз облучения / Е. Б. Бурлакова // Энергия. - 2000. - № 2. - С. 33-39.
References
Hrytsiuk, I. (2000). Avariia na Chornobylskii AES ta zakhvoriuvannia shchytovydnoi zalozy:
[ohliad]. Medytsyna svitu. 4, 200-210. (in Ukrainian). Bebeshko, V. G., Klimenko, V. I. (1996). Krovotvornaya sistema / Chernobyilskaya katastrofa:
tezisyi nauch.-prakt. konf., K., 98-100. (in Russian). Baryahtara, V. G. (1996). Chernobilska katastrofa / za red. V. G. Baryahtara. - K. : Nauk. dumka, 576. (in Ukrainian).
Bebeshko, V. G., Bruslova, E. M. (2001). Prichinyi razvitiya anemiy u podrostkov, prozhivayuschih na zagryaznennyih radionuklidami territoriyah, posle avarii na ChAES / Ukr. zhurn. hematolohii ta transfuzii. 2, 26-30. (in Russian). Burlakova, E. B. (2000). Osobennosti deystviya malyih doz oblucheniya. Energiya. -2, 33-39. (in Russian).
Стаття надшшла до редакцй 19.03.2016
УДК 612.62:612.017.11
Желавський М. М., д. вет. н., професор, Шунш I. М., астрант © ([email protected])
Подтьський державный аграрно-техтчний утверситет, м. Кам 'янець-Подшьський, Украгна
СТАН КЛ1ТИННИХ ФАКТОР1В ЛОКАЛЬНОГО 1МУН1ТЕТУ СЛИЗОВО1 ОБОЛОНКИ П1ХВИ У К1ШОК
У роботi дослгджено стан клтинних фактор1в локального iмунтету слизовог оболонки тхви юшок. За результатами до^дження визначено цитограму та стан протимжробного потенщалу Оксигензалежних механiзмiв фагоцитарного захисту. Встановлено, що цитологiчний склад слизовог оболонки тхви представлений епiтелiальними клтинами та фагоцитами. В пiслятiчковий перiод у мiкропрепаратах в основному домтували базальт, парабазальт, промiжнi, а також суперфщальт еттелюцити, серед фагоцитарних клтин нейтрофтьт гранулоцити. У мжропрепаратах iдентифiковано сегментоядерт мжрофаги з добре вираженими ядром та дрiбнозернистою цитоплазмою. У рiзних полях зору зустрiчались й фагоцитарн клтини з ознаками фiзiологiчного стартня (апоптозу). 1нтенсивтсть протимжробного потенщалу Оксигензалежних механiзмiв в цитохiмiчнiй реакцИ з ттроситм тетразолieм знаходився на I та II рiвнях реактивностi, що е одним iз тформативних критерпв при оцтюванш параметрiв гомеостазу клтинног ланки локального iмунiтету.
Ключов1 слова: кШки, слизова оболонка тхви, локальний iмунiтет, клтинна ланка, фагоцити, iмуноцитохiмiя, Оксигензалежш мехатзми захисту, протимжробний потенщал.
УДК 612.62:612.017.11
Желавский Н. Н., © д. вет. н., профессор, Шунин И. Н., аспирант,
Подольский государственный аграрно-технический университет, г. Каменец-Подольский, Украина
СОСТОЯНИЕ КЛЕТОЧНЫХ ФАКТОРОВ ЛОКАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ВЛАГАЛИЩА У КОШЕК
© Желавський М. М., Шунш I. М., 2016
32
В работе исследовано состояние клеточных факторов локального иммунитета слизистой оболочки влагалища кошек. По результатам исследования изучено цитограму и состояние противомикробного потенциала Оксигензависимых механизмов фагоцитарной защиты. Определено, что цитологический состав слизистой оболочки влагалища представлен эпителиоцитами и фагоцитами. В послетечковый период в микропрепаратах в основном доминировали базальные, парабазальные, промежуточные, а также и суперфициальные эпителиальные клетки, нейтрофильные гранулоциты. В микропрепаратах идентифицировано сегментоядерные микрофаги с хорошо выраженными ядром и мелкозернистой цитоплазмой. В разных полях зрения встречались также фагоцитарные клетки с признаками физиологического старения (апоптоза). Интенсивность противомикробного потенциала Оксигензависимых механизмов в цитохимической реакции с нитросиним тетразолием находился на I и II уровнях реактивности, что является одним из информативных критериев при оценке параметров гомеостаза клеточного звена местного иммунитета.
Ключевые слова: кошки, слизистая оболочка влагалища, локальный иммунитет, клеточное звено, фагоциты, иммуноцитохимия, Оксигензависимые механизмы, в противомикробный потенциал.
UDC 612.62:612.017.11
Zhelavskyi M., Doctor of Veterinary Science, Professor, Shunin I., Post-graduate student
State Agrarian and Engineering University in Podilya, Kamyanets-Podilsky, Ukraine
CELL FACTORS' CONDITION OF LOCAL IMMUNITY OF VAGINAS MUCOSA
IN CATS
The state of cellular factors of local immunity of the mucous membrane of the cats vagina was studied in this work. The study identified cytogram condition and antimicrobial potential of Oxygen-dependent phagocytic mechanisms of protection. It was stated that cytological composition of the vaginal mucosa was presented by epithelial cells and phagocytes. Horny basal, parabasal, intermediate and superfitial epitheliocytes and neutrophil granulocytes were dominating in specimens in the interestrus period. Segmentonuclear microphagal cells with clear core fine cytoplasm were identified in specimens. Phagocytic cells with signs of physiological aging (apoptosis) were seen in various fields. The intensity of the antimicrobial potential of Oxygen-dependent mechanisms of cytochemical reaction with nitroblue tetrazolium while located on the first and second levels of reactivity, which is one of the criteria in the evaluation parameters of homeostasis cellular link of local immunity.
Key words: cats, mucous membrane of vagina, local immunity, cellular chain, phagocytes, cytochemistry, Oxygen-dependent mechanism, antimicrobial potential.
Вступ. Становления iMyHHoro захисту тварин ввдбуваеться на рангах етапах перiодiв 1хнього фшогенетичного розвитку [1, 2]. Система iMymoro iMyrnTeTy оргашв розмноження у шшок переставлен! клггинною та гуморальною ланкою захисту. Функцюнальний стан та регулящя репродуктивное' системи тварин регулюеться не лише нервовою та ендокринною системою, але й тдпорядкована складним мехашзмам iмyнних реакцш, що здшснюеться тд впливом цитокшв, пептидiв, медiаторiв тощо [35].
Клггинна ланка локального iмyнiтетy представлена фагоцитами та лiмфоцитарними клггинами. У сучасних лггературних джерелах вггчизняних та закордонних дослвднишв наведет дат про стан клггинних факторiв локального iмyнiтетy оргашв розмноження тварин [2, 3], проте змiни парамет^в гомеостазу в рiзнi перюди 1'х ввдтворно! здатносп носять лише фрагментарний характер, що робить за
33
необхвдне для глибокого вивчення цих аспектов в iмунологil репродукци [5, 8]. Саме тому метою наших дослвджень було вивчення стану клгтинних факторiв локального iмунiтету слизово! оболонки пiхви у кшок.
Матерiали i методи. Ктшко-експериментальш дослiдження проводили на шшках (п=23) рiзних порiд вiком вiд 3 до 7 рошв. Локальний iмунiтет визначали за параметрами Оксигензалежних механiзмiв захисту фагоцитарних клiтин [8]. При цьому у мiкропрепаратах визначали загальну кшьшсть реактивних фагоцитарних клiтин та ступеневий прояв !х протимiкробного потенщалу в iмуноцитохiмiчних реакцiях [5]. При статистичному дослiдженнi користувались пакетом прикладних програм Statistica
V 10.
Результати дослщжень. Мехашзми локального захисту оргашв розмноження не постiйнi, а змiнюються впродовж всього онтогенетичного розвитку тварин та мають сво! особливостт у рiзнi перiоди !х ввдтворно! здатносп. Клiтиннi фактори локального iмунiтету представленн цiлою низкою iмунокомпетентних клiтин серед яких нейтрофiльнi гранулоцити являються ушверсальною популящею реактивних фагоцитiв. Нин все бшьше також з'являеться шформацп [2, 3] i про роль епiтелiальних клiтин у забезпеченнi мiсцевого iмунного захисту.
При цитологiчному дослiдженнi мшропрепарапв встановлено, що в тслятгчковий перюд цитологiчний склад представлений епiтелiальними клгтинами та нейтрофiльними гранулоцитами. У мшропрепаратах вiзуалiзувались промiжнi епiтелiальнi клiтини, як мали добре виражену цитоплазму та ядро.
« \\
Рис. 1 Базальна епiтелiальна кл^ина. Нейтральний червоний х 250 Рис. 2. Суперфiцiальна кератинiзована епiтелiальна клiтина. Нейтральний червоний х 250 Рис. 3. Нейтрофшьний гранулоцит, (а) гранули диформазану. Нейтральний червоний. х 250
З iнших клiтин епiтелiального походження виявляли значну кшьшсть базальних, парабазальних та промiжних епiтелiоцитiв, а також зустрiчались ороговiлi суперфiцiальнi епiтелiальнi клiтини з деструктивними змiнами у ядрi та цитоплазмi («обламки кттин»), що вiдображало стан гормонального профшю стадп статевого циклу шшок (рис. 1, 2). З фагоцитарних клгтин в мазках в основному виявляли нейтрофши. Мшрофаги при цьому мали певн морфологiчнi вiдмiнностi вiд полiмофоядерних нейтрофiльних гранулоцитiв (клiтин) периферичного русла. У мшропрепаратах ми iдентифiкували сегментоядерш клiтини з добре вираженими ядром та дрiбнозернистою цитоплазмою. У рiзних полях зору зустрiчались й нейтрофшьш клiтини з ознаками фiзiологiчного старiння (апоптозу). Здебiльше вiзуалiзувались мiкрофаги з ткнозом та фрагментащею ядра.
Вченими встановлено чiткий зв'язок м1ж ктькютю нейтрофiлiв та ризиком виникнення запально! патологи у килок (ендометрит, тометра тощо). Тому за останими даними [2, 3, 5] нейтрофiльнi гранулоцити розглядаються, як одн з головних ефекторiв запалення, як запускають каскад iмунобiологiчних реакцш. Нейтрофiлоцити мiстять у цитоплазматичних гранулах протимiкробнi ферменти (еластаза, катепсин, кисла та
34
лужна фосфатаза, колагеназа, лiзоцим, мieлопероксидаза) та екскретують у позаклгтинний проспр щлу низку бактерицидних речовин, що дiють згубно на мiкроорганiзми. Цитохiмiчна реактивнiсть фагоцитарних клiтин супроводжуеться зростанням споживання Оксигену через гексозомонофосфатний шунт та активiзацiï НАДФ-оксидази в результат чого фагоцитарна клгтина виробляе велику кшьшсть активних форм Оксигену (суперокисний анiон, перпдроль та iн.). Мiкрофаги при цьому здатнi фагоцитувати та елiмiнувати не лише мшроби, що загинули «на пол бою», а й iншi зруйнованi клiтиннi елементи, метаболiти i медiатори запалення, що е надзвичайно важливе значення у формуваннi локального iмунного гомеостазу.
Проведеними цитохiмiчними до^дженнями виявлено, що бiльшiсть нейтрофiльних гранулоципв проявляють Оксигензалежнi механiзми протимiкробного потенщалу. Протимiкробний потенцiал нейтрофiльних мiкрофагiв при цьому знаходився на I та II рш цитохiмiчноï реактивностi (рис. 3). Частка НСТ+ нейтрофшв з цитоплазматичними гранулами диформазану при цьому становила в межах вiд 11 до 18 %, а цитолопчне ствввдношення ФЕ1 0,47-0,64.
Висновки.
1. Цитолопчний склад слизовоï оболонки тхви шшок залежить вiд стадiï статевого циклу.
2. Клгтинш фактори локального iмунного захисту органiв розмноження у шшок представлена в основному нейтрофшьними гранулоцитами. Частка мiкрофагiв, як проявили протимшробну реактивнiсть iз залученням Оксигензалежних механiзмiв в пiслятiчковий перiод коливаеться в межах ввд 11 до 18 %, а фагоцитарно-епiтелiальний iндекс становить 0,47-0,64.
3. Оцiнювання параметрiв iмунного захисту репродуктивних органiв мае важливе значення в системному до^дженш iмунного статусу тварин, а також стануть iнформативними дiагностичними критерiями ранньоï дiагностики патологiй.
Перспективи подальших дослщжень: Подальшi науковi пошуки i експериментальш дослiдження будуть спрямованi на визначення функцiональних параметрiв клiтинноï та гуморально1' ланки локального iмунiтету репродуктивних оргашв у тварин.
Л1тература
1. Ветеринарне акушерство, пнеколопя та бiотехнологiя вщтворення тварин з основами андрологiï [Яблонський В. А., Хомин С. П., Калиновський Г. М., Харута Г. Г., Харенко М. I., Завiрюха В. I., Любецький В. Й.] ; за ред. В. А. Яблонського та С. П. Хомина: шдруч. [для подготовки фахiвцiв навч. закл. III-IV рiвнiв акредитацiï]. — Вшниця : Нова книга, 2006. — 592, [1] с.
2. Turner M. L. Immunity and inflammation in uterus / M. L.Turner, G. D. Haley, I. M. Sheldon // Reprod. Dom Anim. — 2012. — Suppl. 4. — P. 402—409.
3. Cowell and Tyler's Diagnostic Cytology and Hematology of the Dog and Cat / A. C. Valenciano, L. C. Rick. — [4rd Edn]. — St. Louis, Mo. : Mosby Elsevier, 2014. — 608 р.
4. Sheldon I. M. Innate immunity in human endometrium and ovary / I. M. Sheldon, J. J. Bromfield // Am. J. Reprod. Immunol. — 2011. — Vol. 66 (Suppl. 1). — P. 63 —71.
5. Яблонський В. А. Апоптоз та його значення в регуляци шунного гомеостазу оргатзму тварин (огляд лггератури та власних дослвджень) / В. А. Яблонський, М. М. Желавський // Науковий вюник ветеринарно1 медицини: збiрник наукових праць Бшоцерювського нацюнального аграрного утверситету. — 2014. — Вип. 13 (108). — С. 9— 13.
6. BSAVA Manual of Canine and Feline Reproduction and Neonatology / G. England, Angelika von Heimendahl. — [2rd Edn]. — London : BSAVA, 2010. — 240 p.
7. Фiзiологiя та патолопя розмноження дрiбних тварин [Харенко М. I., Хомин С. П., Кошевой В. П., Стефаник В. Ю., Стоцький О. Г., Паращенко I. В., Чекан О. М., Лазоренко А. Б., Вощенко I. Б., Харенко А. М., Даншова Т. М.] ; тд заг. ред. М. I. Харенка : навч. поабник [для тдготовки фахiвцiв навч. закл. III-IV рiвнiв акредитаци]. — Суми : ВАТ Сумська обласна друкарня : Козацький вал, 2005. — 554, [1] с.
8. Желавський М. М. Стан апоптозу iмунокомпетентних клгтин периферично1 кровi корiв за субклiнiчного маститу / М. М. Желавський // Збiрник наукових праць
35
Нацюнального ушверситету бюресурав i природокористування Украши. — Кшв, 2014. — Ч. 4. — С. 11—12.
References
Yablonsky, V. A., Khomyn, S. P., Kalynovsky, H. M., Kharuta, H. H., Kharenko, M. I., Zaviriukha, V. I., Liubetskyi, V. I. (200б). Veterynarne akusherstvo, hinekolohiia ta biotekhnolohiia vidtvorennia tvaryn z osnovamy androlohii. za red. V. A. Yablonskoho ta S. P. Khomyna: pidruch. [dlia pidhotovky fakhivtsiv navch. zakl. III-IV rivniv akredytatsii]. — Vinnytsia: Nova knyha, 592, [1]. (in Ukrainian). Turner, M. L., Haley, G. D., Sheldon, I. M. (2012). Immunity and inflammation in uterus /
Reprod. Dom Anim. 4, 402—409. Valenciano, A. C., Rick, L. C. (2014). Cowell and Tyler's Diagnostic Cytology and Hematology of
the Dog and Cat / — [4rd Edn]. — St. Louis, Mo. : Mosby Elsevier, 608. Sheldon, I. M., Bromfield, J. J. (2011). Innate immunity in human endometrium and ovary / Am. J.
Reprod. Immunol. Vol. 66 (Suppl. 1), 63 —71. Yablonsky, V. A., Zhelavsky, M. M. (2014). Apoptoz ta yoho znachennia v rehuliatsii imunnoho homeostazu orhanizmu tvaryn (ohliad literatury ta vlasnykh doslidzhen) / Naukovyi visnyk veterynarnoi medytsyny: zbirnyk naukovykh prats Bilotserkivskoho natsionalnoho ahrarnoho universytetu. 13 (108), 9 — 13. (in Ukrainian). BSAVA Manual of Canine and Feline Reproduction and Neonatology / G. England, Angelika von
Heimendahl. — [4rd Edn]. — London : BSAVA, 2010. — 240 p. Kharenko, M. I., Khomyn, S. P., Koshevoi, V. P., Stefanyk, V. Iu., Stotskyi, O. H., Parashchenko, I. V., Chekan, O. M., Lazorenko, A. B., Voshchenko, I. B., Kharenko, A. M., Danilova, T. M. (2005). Fiziolohiia ta patolohiia rozmnozhennia dribnykh tvaryn; pid zah. red. M. I. Kharenka: navch. posibnyk [dlia pidhotovky fakhivtsiv navch. zakl. III-IV rivniv akredytatsii]. — Sumy: VAT Sumska oblasna drukarnia: Kozatskyi val, 554, [1]. (in Ukrainian). Zhelavsky, M. M. (2014). Stan apoptozu imunokompetentnykh klityn peryferychnoi krovi koriv za subklinichnoho mastytu / Zbirnyk naukovykh prats Natsionalnoho universytetu bioresursiv i pryrodokorystuvannia Ukrainy. — Kyiv, 4, 11—12. (in Ukrainian).
Стаття надтшла до редакци 19.03.2016
УДК 615.03;615.18
Жила М. I., к. вет. н., П'ятничко О. М., к. с.-г. н., Шкодяк Н. В., к. вет. н. ©
Державный науково-дослгдний контрольный тститут ветпрепарат1в та кормових добавок, м. Льв1в, Украгна
КОНТРОЛЬ ЯКОСТ1 ГЕНЕРИЧНИХ ВЕТЕРИНАРНИХ Л1КАРСЬКИХ ЗАСОБ1В
У статтг подано основн принципи та методи контролю генеричних ветеринарних лжарських засобгв. Вимоги до генеричних препарат1в - в1дпов1дн1сть стандартам якостг, ефективностг та безпечностг на р1вт оригтальних лжарських засобгв. Генеричнг препарати повинт демонструвати бгоеквгваленттсть, щоб засвгдчити про те, що вони дтть в органгзмг так само, як i оригтальний препарат, мають однакову бюдоступтсть i при призначенш в однаковш дозi забезпечують ефективтсть i безпечтсть. Визначення бiоеквiвалентностi генеричного лжарського засобу по вiдношенню до оригтального, in vivo, полягае у визначенн швидкостi й ступеня всмоктування оригтального препарату та генерика при використанн в однакових дозах i лжарських формах на пiдставi визначення концентрацИ' в рiдинах i тканинах оргатзму. Для певних препаратiв до^дження фармацевтичног еквiвалентностi, можна замтити вивченням порiвняльног ктетики розчинення in vitro за процедурою «бювейвер» -розчинення генеричного та референтного препаратiв у трьох середовищах. Для оцтки ефективностi та безпечностi генеричного ветеринарного препарату проводиться клтчне випробування - наукове до^дження на цтьових видах тварин, згiдно
© Жила М. I., П'ятничко О. М., Шкодяк Н. В., 2016
36
