CC BY
72
СИБИРСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ ЖУРНАЛ № 32008 (выпуск 1)
УДК 612.017.1:616.216.1-002
О.А. Коленчукова*'**, А.А. Савченко*'**,
A.Г. Борисов*, С.А. Кузнецов*, Н.А. Бородина*,
B.С. Отто***
E-mail: [email protected]
СОСТОЯНИЕ ИММУННОГО СТАТУСА И МЕТАБОЛИЗМА ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ ОСТРЫМ И ХРОНИЧЕСКИМ ГАЙМОРИТАМИ
* Гу нии медицинских проблем севера сО рАМн; ** сибирский Федеральный университет, г красноярск;
*** красноярский краевой центр крови № 1
ВВЕДЕНИЕ
Патогенез гнойных воспалений околоносовых пазух сложен, а причины не всегда ясны, что вызывает затруднение в их лечении, частые рецидивы и осложнения. Острый гайморит является наиболее частым осложнением острой респираторной вирусной инфекции и стоит на одном из первых мест среди хронических заболеваний ЛОР-органов. в ряде случаев гаймориты отличаются упорным течением и трудно подаются консервативному лечению [1, 2]. Общая тенденция к росту воспалительных заболеваний слизистой оболочки полости носа и околоносовых пазух связана со снижением иммунореактивности населения. С другой стороны, хронические воспалительные реакции также способны нарушать функции иммунной системы [1, 3].
Целью данного исследования является оценка изменений, происходящих в иммунно-метаболическом статусе у больных хроническим гайморитом в стадии обострения и у больных острым гайморитом.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Под наблюдением находились 43 больных хроническим гайморитом (ХГ) в возрасте от 18 лет до 45 лет в острый период заболевания и 38 человек с острым гайморитом (ОГ). Тяжесть заболевания оценивалась с учетом выраженности клинических симптомов, а также на основании гематологических изменений периферической крови. Контрольную группу составили 32 практически здоровых человека аналогичного возрастного диапазона.
Популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов крови оценивали с помощью метода непрямой иммунофлуоресценции с использованием моноклональных антител к CD3, CD4, CD8, CD16, CD72, HLA-DR (ТОО «Сорбент» г. Москва). Определение иммуноглобулинов А, М и G проводили методом радиальной иммунодиффузии в геле по Ман-
чини. Концентрацию циркулирующих иммунных комплексов (ЦиК) определяли по общепринятой методике.
Определение активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах крови проводили биолюминесцентным методом [4]. Данным методом определялась активность следующих ферментов: глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г6ФДГ), глице-рол-3-фосфатдегидрогеназы (Г3ФДГ), малик-фермента (НАДФМДГ), НАД- и НАДН-зависимой реакции лактатдегидрогеназы (ЛДГ и НАДН-ЛДГ), НАД- и НАДН-зависимой реакции малатдегидро-геназы (МДГ и НАДН-МДГ), НАДФ- и НАДФН-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДФГДГ и НАДФН-ГДГ), НАД- и НАДН-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДГДГ и НАДН-ГДГ), НАДи НАДФ-зависимых изоцитратдегидрогеназ (НАДиЦДГ и НАДФиЦДГ, соответственно) и глу-татионредуктазы (ГР). Активность дегидрогеназ в лимфоцитах крови выражали в ферментативных единицах (1 Е=1 мкмоль/мин [5]) на 104 клеток.
Описание выборки производили с помощью подсчета медианы (Ме) и интерквартального размаха в виде 25 и 75 процентилей (С25 и С75). Проверку гипотезы о статистической значимости различий исследуемых параметров проводили с помощью критерия Манна-Уитни. Статистическую обработку результатов осуществляли с помощью пакета прикладных программ Statistica 6.0 (StatSoft Inc., 2001).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
в результате исследования показателей иммунного статуса обнаружено, что у лиц с хроническим гайморитом наблюдалось увеличение процентного содержания HLA-DR. При этом выявлено снижение показателей процентной концентрации лимфоцитов и абсолютного содержания CD3+-, CD4+-, CD8+-лимфоцитов, а также наблюдалось увеличение процентного содержания CD72+-лимфоцитов (табл.1). в группе лиц с острым гайморитом при анализе клеточного звена иммунитета не выявлено статистически значимых различий с группой контроля.
При сравнительном анализе показателей иммунного статуса в группах больных с ОГ и ХГ обнаружено увеличение процентной концентрации CD72+-лимфоцитов в группе больных ХГ относительно группы с ОГ. При исследовании гуморального звена иммунной системы у лиц с хроническим гайморитом обнаружено статистически значимое снижение показателей, характеризующих относительный уровень синтеза ig А.
в группе больных острым гайморитом обнаружено снижение концентрации ig А и показателя, характеризующего относительный уровень синтеза ig А в сыворотке крови относительно группы контроля. При этом наблюдается увеличение ЦиК относительно контрольной группы.
КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Примечание: Р1 - статистически значимые различия с контрольной группой; Р2 - статистически значимые различия с группой больных хроническим гайморитом.
Показатели клеточного и гуморального иммунитета у лиц с
гайморитом (Ме; С25-С75)
Таблица 1 хроническим и острым
Показатели Группа контроля, п=32 Хронический гайморит, п=43 Острый гайморит, п=38
1 2 3
Лейкоциты, 109/л 5,75 (5,00-6,15) 6,02 (4,75-7,15) 5,78 (5,02-7,75)
Лимфоциты, % 42,0 (34,1-50,2) 31,0 (17,0-44,0), Р1<0,05 36,5 (18,0-46,0)
Лимфоциты 109/л 2,47 (1,74-3,01) 1,76 (1,11-2,96) 2,01 (1,21-2,84)
CD3+, % 68,2 (64,1-70,0) 63,0 (60,0-70,0) 66,0 (60,0-74,0)
CD3+, 109/л 1,61 (1,17-2,07) 1,08 (0,72-1,70), Р1<0,05 1,40 (0,75-2,01)
CD4+, % 43,0 (37,0-47,0) 38,0 (31,0-44,0) 38,0 (34,0-45,0)
CD4+, 109/л 0,90 (0,68-1,29) 0,57 (0,42-0,89), Р:<0,01 0,74 (0,45-1,23)
CD8+, % 26,0 (25,0-30,0) 24,5 (20,0-31,0) 24,5 (20,0-31,0)
CD8+, 109/л 0,58 (0,47-0,83) 0,45 (0,22-0,71), Р;<0,05 0,49 (0,27-0,85)
CD16+, % 18,0 (15,0-23,0) 18,5 (15,0-21,0) 17,5 (14,0-21,0)
CD16+, 109/л 0,43 (0,33-0,57) 0,32 (0,20-0,48) 0,37 (0,18-0,64)
CD72+, % 11,0 (10,0-14,0) 17,5 (14,0-20,0), Р:<0,001 15,0 (11,0-18,0), Р2<0,05
CD72+, 109/л 0,26 (0,18-0,38) 0,28 (0,17-0,46) 0,25 (0,15-0,47)
% 14,0 (11,0-19,0) 20 (16,0-25,0), Р1<0,01 18 (13,0-23,0)
109/л 0,34 (0,23;0,50) 0,41 (0,32-0,63) 0,50 (0,36-0,71)
CD4+/CD8+ 1,59 (1,44-1,74) 1,52 (1,11-1,95) 1,60 (1,05-2,16)
^ А, г/л 1,62 (1,31-2,68) 1,31 (1,00-1,88) 1,31 (0,87-1,73), Р1<0,01
^ М, г/л 1,05 (0,31-1,31) 0,82 (0,54-1,33) 1,26 (0,82-1,54)
^ ^ г/л 9,91 (6,68-12,12) 7,35 (6,51-10,04) 7,97 (6,59-10,64)
^ A/CD72+, нг/клетку 8,14 (5,27-10,75) 3,90 (2,19-7,93), Р:<0,01 4,24 (2,27-8,76), Р^0,002
^ М^72+, нг/клетку 3,78 (1,21-7,58) 2,72 (1,72-4,46) 3,84 (1,46-7,63)
^ G/CD72+, нг/клетку 37,36 (25,03-54,55) 26,52 (14,51-51,38) 28,26 (17,04-53,12)
ЦИК, о.е. 15,01 (6,02-28,11) 16,02 (8,00-48,05) 18,00 (11,50-76,00), Р1<0,05
При определении особенностей метаболизма при ОГ и ХГ было обнаружено снижение таких ферментов, как Г6ФДГ - ключевого фермента пентозофос-фатного цикла, нарабатывающего интермедиаты для реакций макромолекулярного синтеза [6] и МДГ фермента, характеризующего интенсивность субстратного потока по циклу трикарбоновых кислот [5], что позволяет предположить у больных в лимфоцитах крови уменьшение интенсивности аэробного дыхания и обменных процессов в митохондриальном компарт-менте (табл. 2).
Низкая активность НАДФН-ГДГ (восстановительное аминирование 2-оксоглутарата) свидетельствует о понижении оттока субстратов с цикла трикарбоновых кислот на реакции аминокислотного обмена в лимфоцитах у лиц с ОГ. Наблюдаемое повышение активности НАДФМДГ в группах больных, возможно, необходимо в целях компенсации недостаточности метаболических реакций в цикле Кребса в качестве шунтирования ряда ферментативных реакций ли-
монного цикла. Особенностью метаболизма лимфоцитов у больных ХГ является увеличение активности Г3ФДГ. Этот фермент, характеризует уровень переноса продуктов липидного катаболизма на реакции анаэробного окисления глюкозы [5, 7]. Следовательно, у больных с ХГ увеличена субстратная стимуляция гликолиза, что также может определяться сниженным уровнем субстратного потока по гликолитическому пути. У больных ХГ относительно группы больных с ОГ имеет место увеличение активности аэробной реакции ЛДГ, которая определяет недостаточную способность лимфоцитов больных с ОГ метаболизи-ровать эндогенный лактат и, в целом, в связи с инги-бированием гликолиза ведет к понижению уровня наработки пирувата.
Таким образом, у больных хроническим гайморитом обнаружены более выраженные изменения иммунного статуса, чем у больных острым гайморитом. Состояние метаболизма лимфоцитов при гайморитах характеризуется снижением активности МДГ, но при
О.А. Коленчукова, А.А. Савченко и др. СОСТОЯНИЕ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ПРИ ГАЙМОРИТАХ
Таблица 2
Активность НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ (мкЕ) в лимфоцитах крови у больных хроническим и острым гайморитом (Ме; С25-С75)
Фермент Группа контроля, n=32 Хронический гайморит, n=43 Острый гайморит, n=38
1 2 3
Г6ФДГ 2,14 (0,56-10,75) 2,30 (0,07-10,72) 0,29 (0,03-4,03), Pj<0,05
Г3ФДГ 0,01 (0,01-0,93) 1,04 (0,01-2,12), Pj<0,05 0,12 (0,01-1,15)
ЛДГ 6,90 (1,93-16,75) 11,80 (4,91-18,67) 5,61 (1,13-13,33), P2<0,05
НАДФМДГ 0,06 (0,01-9,62) 1,28 (0,01-19,87), Pj<0,01 1,33 (0,02-17,47), Pj<0,05
НАДФГДГ 0,01 (0,001-0,01) 0,01 (0,01-0,16) 0,01 (0,01-0,11)
НАДФИЦДГ 1,14 (0,01-11,3) 0,95 (0,01-3,61) 0,79 (0,01-2,22)
МДГ 54,50 (13,31-153,46) 7,94 (1,07-27,51), Pj<0,001 6,17 (0,01-41,19), Pj<0,01
НАДГДГ 9,52 (0,05-31,31) 2,09 (0,01-9,14) 3,04 (0,01-30,46)
НАДИЦДГ 0,01 (0,01-1,96) 0,04 (0,01-5,39) 0,19 (0,01-1,71)
НАДН-ЛДГ 3,24 (0,01-12,14) 12,47 (0,01-36,44) 3,36 (0,01-85,66)
НАДН-МДГ 38,46 (9,96-107,66) 48,34 (12,72-87,94) 62,19 (10,19-111,31)
ГР 1,53 (0,61-4,41) 0,99 (0,01-7,43) 1,45 (0,01-11,1)
НАДФН-ГДГ 4,55 (0,26-10,68) 6,39 (0,01-40,91) 7,47 (0,11-44,05), Pj<0,05
НАДН-ГДГ 7,71 (3,38-29,38) 3,19 (0,21-28,26) 3,75 (0,63-11,04)
Примечание: Р1 - статистически значимые различия с контрольной группой; Р2 - статистически значимые различия с группой больных хроническим гайморитом.
ХГ также наблюдается повышенный уровень катабо-
лических процессов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Сединкин А.А. Острое воспаление слизистой оболочки носа и околоносовых пазух//Вестник оториноларингологии. - 2000. - № 3. - С. 6-11.
2. Игнатьева Г.А. Иммунная система и патология (лек-ция)//Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 1997. - № 4. - С. 26-37; - 1998. - № 1.
- С. 35-42.
3. Крюков А.И., Жуховицкий В.Г. Гнойно-воспалительные заболевания уха, горла, носа и верхних дыхательных путей: актуальность проблемы и пути решения// Вестник оториноларингологии. - 2004. - № 1. - С. 3-4.
4. Савченко А.А., Сунцова Л.И. Высокочувствительное определение активности дегидрогеназ в лимфоцитах периферической крови биолюминесцентным методом// Лаб. дело. - 1989. - № 11. - С. 23-25.
5. Берёзов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия,. - М.: Медицина, 1998. - 704 с.
6. Park I., Choe S.C., Choi A.H. et al. Increase in Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase in Adipocytes Stimulates Oxidative Stress and Inflammatory Signals//Diabetes.
- 2006. - Vol. 55. — P. 2939-2949.
7. Ikemoto A. Glycolysis and Glutamate Accumulation into Synaptic Vesicles. Role of glyceraldehydes phosphate dehydrogenase and 3-phosphphoglycerate kinase//J Biol Chem. - 2003. - Vol. 278, № 8. - P. 5929-5940.
iMMUNE STATUS AND LYMPHOCYRES METABOLiSM iN ACUTE AND CHRONiC MAXiLLARY SiNUSiTES PATiENTS
O.A. Kolenchoukova, A.A. Savchenko, A.G. Borisov, S.A. Kouznetsov, N.A. Borodina, V.S. Otto
SUMMARY
The aim of the study e was the assessment of changes which occur in immune system of patients having chronic and acute maxillary sinusites. Population and subpopulation structure of blood lymphocytes was estimated by indirect immunofluorescence method. Concentration of immunoglobulins was investigated by radial immune diffusion method. NAD(P)-de-pendent dehydrogenase was defined in lymphocytes using bioluminescent method. Immune insufficiency was revealed in patients having acute and chronic maxillary sinusitis in the setting both general and specific changes of metabolic enzymes activity in blood lymphocytes.
Key words: acute and chronic maxillary sinusitis, immune status, metabolism of lymphocytes.
