CC BY
15УДК:616.092:612.017.1:577.114:616.248-07
СОСТОЯНИЕ АНТИЭНДОТОКСИНОВОГО ИММУНИТЕТА У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ И ПЕРЕКРЕСТНОГО
СИНДРОМА АСТМА-ХОБЛ
Белоглазов В. А., Гордиенко А. И., Попенко Ю. О.
Кафедра внутренней медицины №2, Медицинская академия имени С. И Георгиевского
ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет имени В. И Вернадского», 295006, бульвар Ленина, 5/7, Симферополь, Россия
Для корреспонденции: Белоглазов Владимир Алексеевич, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой внутренней медицины №2 Медицинской академии имени С. И. Георгиевского ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет имени В. И. Вернадского», E-mail: biloglazov@mail.ru
For correspondence: Beloglazov V.A., Dr.Sci.Med., head of the department of Internal Medicine #2 Medical Academy of V. I. Vernadsky Crimean Federal University, E-mail: biloglazov@mail.ru Information about authors:
Beloglazov V.A., hptt://orcid.org/0000-0001-9640-754X Gordienko A.I., hptt://orcid.org/0000-0002-1475-6138 Popenko Yu.O., hptt://orcid.org/0000-0001-8375-6388
РЕЗЮМЕ
Целью исследования - изучение состояния системных и местных АЭТ-связующих систем, оценка экспрессии рецептора TLR-4 на моноцитах и гранулоцитах периферической крови и их эндотоксин-связывающего потенциала этих клеток у больных среднетяжелой и тяжелой персистирующей бронхиальной астмой и больных БА-ХОБЛ перекрестный синдром (СПАБХ). В исследование было включено 109 больных с диагнозом среднетяжелой и тяжелой астмой, находившихся на амбулаторном лечении основного заболевания. 40 больных из которых имели характерные признаки БА и ХОБЛ. Все больные были разделены на три клинические группы: 1-ю группу вошли больные среднетяжелой БА; во 2-ю группу были включены больные тяжелой БА; в 3 клиническую группу были включены больные СПАБХ. У больных всех клинических групп зарегистрировано повышение сывороточного АЭТ-IgM относительно уровня нормы на фоне неизмененного уровня АЭТ-IgG. В тоже время уровень АЭТ-IgA в 1- й и 2-й группе достоверно не отличался от диапазона нормы, в то время как в 3-й группе данный показатель был достоверно выше нормы. У больных 1-й, 2-й и 3-й групп в индуцированной мокроте выявлена высокая напряженность мукозального иммунитета, что проявлялось в повышенном уровне секреторного АЭТ-^А и общего секреторного IgA. Во всех клинических группах было зарегистрировано достоверное повышение СРБ в сравнении с нормальным показателем. В 1, 2 и 3 клинических группах уровень экспрессии TLR-4 на гранулоцитах ниже диапазона нормы. Во всех клинических группах экспрессия TLR-4 моноцитами выше величины данного показателя в норме. ЭТ-связывающий потенциал моноцитов и гранулоцитов у больных не выходит за пределы диапазона нормы.
Ключевые слова: антиэндотоксиновый иммунитет, перекрестный синдром БА-ХОБЛ, воспаление, бронхиальная астма.
STATE ANTI-ENDOTOXIN IMMUNITY IN PATIENTS WITH ASTHMA AND ASTHMA-COPD
OVERLAP SYNDROME
Beloglazov V. A., Gordienko A. I., Popenko Yu. O.
Medical Academy of V. I. Vernadsky Crimean Federal University, Simferopol, Russia
SUMMARY
The aim of our investigation was to determine the state of systemic and local AET-binding systems, expression of the receptor TLR-4 on monocytes and granulocytes of peripheral blood and endotoxin-binding capacity of these cells in patients with moderate to severe asthma and patients with asthma-COPD overlap syndrome (ACOS). 109 patients with moderate to severe asthma were examined receiving outpatient treatment of the underlying disease. 40 patients of which had the characteristics of asthma and COPD. All patients were divided into three clinical groups: Group 1 included patients with moderate asthma; Group 2 included patients with severe asthma; Group 3 included patients with ACOS. In all clinical groups the level of anti-ET Ig M were increased in comparison with donors, though, the level of anti-ET IgG was normal. At the same time concentration of anti-ET IgA in Group 1 and Group 2 was not significantly different from the normal level, while in Group 3 it was significantly higher than normal. In addition, the level of C- reactive protein was higher in all groups. It was found, that in all groups the level of expression of TLR4 on granulocytes was reduced in comparison with donors. On the other hand, the level of expression of TLR4 on monocytes was increased in all patients, while the endotoxin binding potential was normal.
Key words: anti-endotoxin immunity, asthma-COPD overlap syndrome, inflammation, asthma.
В клинической практике около 15-20% больных c бронхообструктивным синдромом имеют диагностические критерии, как хронической об-
структивной болезни легких (ХОБЛ), так и бронхиальной астмы (БА), что побудило научные общества GINA и GOLD в 2014 г. подготовить и опу-
бликовать документ «Diagnosis of diseases of chronic airflow limitation: asthma, COPD and asthma-COPD overlap syndrome», который освещал проблему «перекрестного синдрома БА-ХОБЛ» (ПСБАХ) [1,2,3]. Наличие ПСБАХ приводит клинического течения и вызывает трудности у клинициста, как в диагностическом аспекте, так и лечебном. Поэтому влияние на точеки интегральных механизмов патогенеза ПСБАХ может позволить модифицировать течение этого синдрома.
Известно, что эндотоксин (ЭТ) в условиях патологии является одним из мощных индукторов провоспалительных реакций местного и системного характера [4]. Из литературных данных известно, что ХОБЛ ассоциируется с повышением ЭТ в бронхоальвеалярном лаваже. А так же доказана роль ЭТ в патогенезе и течении БА. В месте с тем воздействие ЭТ на организм зависит во многом от состояния ЭТ-связующих систем [5].
Целью исследования было изучение состояния системных и местных АЭТ-связующих систем, оценка экспрессии рецептора TLR-4 на моноцитах и гранулоцитах периферической крови и их эндо-токсин-связывающего потенциала этих клеток у больных среднетяжелой и тяжелой персистирую-щей бронхиальной астмой и больных СПАБХ.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
В исследование было включено 109 больных в возрасте от 18 до 60 лет (63 женщины и 46 мужчин) с диагнозом среднетяжелой и тяжелой астмой, находившихся на амбулаторном лечении основного заболевания. 40 больных из которых имели характерные признаки БА и ХОБЛ (средний возраст - 45±2,4).
Таким образом, все больные были разделены на три клинические группы. В 1-ю группу вошли больные среднетяжелой БА - 42 человека (38,5%). Пациенты 1 клинической группы получали комбинированную терапию: сальметерол в дозе 50-100 мкг/сут и флютиказон пропионат в дозе 500-750 мкг/сут. Во 2-ю группу были включены больные тяжелой БА - 27 человек (24,8%). Пациенты 2 клинической группы получали комбинированную терапию: сальметерол в дозе 100 мкг/сут и флюти-казон пропионат в дозе 1000 мкг/сут. В 3 клиническую группу были включены больные СПАБХ - 40 человек (36,7%). Пациенты 3 клинической группы получали комбинированную терапию: флютиказон пропионат 500-1000 мкг и сальметерол 100 мкг в сутки. Контрольную группу составили 23 здоровых донора.
Уровни антиэндотоксиновых антител классов А, М, G (соответственно АЭТ-IgÄ, АЭТ-IgM, АЭТ-IgG) в сыворотке крови определяли методом
твердофазного ИФА. В качестве антигена использовали ЛПС грамотрицательной энтеробактерии Escherichia coli K30 (09:К30:Н12), выделенной из бактериальной биомассы методом водно-феноль-ной экстракции и дополнительно очищенный от примесей РНК обработкой цетилтриметиламония бромидом (CTAB, Serva). Содержание секреторного АЭТ-IgA (АЭТ-sIgA) и общего секреторного IgA (sIgA) в индуцированной мокроте оценивали с помощью метода твердофазного ИФА по протоколам, разработанным в лаборатории клинической иммунологии ЦНИЛ Крымского государственного медицинского университета им. С.И.Георгиевского [6]. Индуцированную мокроту получали в соответствии с рекомендациями Европейского респираторного Общества [7].
Выраженность системного воспаления оценивали по концентрации С-реактивного белка (С-РБ), которую определяли высокочувствительным методом твердофазного ИФА («сэндвич»-вариант) с использованием биотин-стрептавидиновой системы усиления сигнала [8].
Для оценки уровня экспрессии TLR-4 моноцитами и гранулоцитами периферической крови (ПК) использовали моноклональные антитела (МКА) Anti-Human CD284 (TLR4), конъюгированные с фикоэритрином (Clone HTA125, eBioscience Inc., USA). Окрашивание образцов крови проводили в соответствии с рекомендациями производителя указанных МКА; последующий анализ проводили с помощью проточного лазерного цитофлуюриметра PASIII и программного обеспечения Partec FloMax V.2.4d (Partec GmbH, Munster, Germany). Уровень экспрессии TLR-4 на моноцитах и гранулоцитах выражали в виде логарифма среднего значения интенсивности флуоресценции для данного типа клеток (MFI). Эндотоксин-связывающий потенциал (ЭТ-СП) моноцитов и гранулоцитов периферической крови определяли методом проточной лазерной флуорометрии и выражали в условных единицах (усл.ед.) [8].
Все полученные результаты подвергнуты статистической обработке с использованием авторской программы «MedStat» (серийный №MS0011) ДНПП ТОВ «Альфа», г.Донецк. Полученные результаты представлены в виде медианы и интерк-вартильного размаха - Ме (25-75-й процентили). Для проверки статистических гипотез использовали непараметрический критерий Крускала—Уол-лиса.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Состояние гуморального антиэндотоксиного иммунитета у больных среденетяжелой и тяжелой БА и СПАБХ приведены в таблице 1.
Таблица 1
Уровень антиэндотоксиновых антител классов А, М, G и С-реактивного белка в сыворотке крови
больных БА и СПАБХ
Показатель Контрольная группа, п = 23 1-я группа, п = 42 2-я группа, п = 27 3-я группа, п=40
АЭТ-1§Л, ед. опт. плотн. 0,130 (0,107-0,187) 0,200 (0,153-0,245) р >0,05 0,181 (0,134-0,225) р >0,05 0,293 (0,231-0,396) р<0,01 Р23 <0,01
АЭТ-^М, ед. опт. плотн. 0,095 (0,051-0,247) 0,182 (0,143-0,363) р<0,05 0,222 (0,148-0,339) р<0,05 0,514 (0,347-0,690) р<0,01 Р2, 3<0,01
АЭТ-1§0, ед. опт. плотн. 0,606 (0,431-0,894) 0,712 (0,506-0,989) р >0,05 0,657 (0,49-1,068) р >0,05 0,502 ( 0,387-0,610) р >0,05 рг <0,05
Уровень С-РБ, мг/л 0,20 (0,11-0,4) 2,46 (1,40-6,90) р <0,01 2,88 (1,61-6,90) р <0,01 1,69 (1,18 -2,98) р <0,01 Рг ,2,3>0,05
Примечание: р - достоверность различий с контрольной группой: р1 - достоверность различий между 1 и 2 группами, р2 - между 1 и 3 группами, р3 — между 2 и 3 группами.
Согласно данным таблицы уровень АЭТ-1дЛ в 3-й группе был достоверно выше нормального (полученного в контрольной группе) в 2,2 раза, в 1-й и 2-й группах различий с нормой по данному показателю не выявлено. Между 1 и 2 группами различий не зарегистрировано, но было зарегистрировано достоверное повышение данного показателя в 3-й группе по сравнению с 1-й и 2-й группами. Содержание АЭТ-1дМ было повышенным во всех группах больных по сравнению с нормой: в первой группе в 1,9 раз, во 2-й в 2,3 раз,в 3-й группе в 5,4; между 1 и 2 группами различий не зарегистрировано, в 3 -й группе данный показатель был достоверно выше чем в 1-й и 2-й группами. При
сравнении сывороточных концентраций АЭТ-1дО у больных 1-й, 2-й и 3-й групп с нормой достоверных различий не определено. При этом выявлены и межгрупповые различия: уровень АЭТ-1дО был отмечен ниже у больных 3-й группы чем у больных 1-й и 2-й групп. Установлено повышение концентрации С-РБ в всех клинических группах больных в первой группе в 12,3 раз, во 2-й в 14,4 раз, в 3-й группе в 8,5 раз. Межгрупповых различий не зарегистрировано.
Состояние мукозального антиэндотоксиного иммунитета у больных среденетяжелой и тяжелой БА и СПАБХ приведены в таблице 2.
Таблица 2
Уровень общего секреторного ^ и антиэндотоксинового секреторного ^ в индуцированной
окроте у больных БА и СПАБХ
Показатель Контрольная группа, п = 23 1-я группа, п = 42 2-я группа, п = 27 3-я группа, п = 40
Общий ед. опт. плотн. 31,10 (15,00-41,80) 57,9 (37,70-160,60) р <0,05 63,8 (36,40-219,1) р <0,05 196,32 (103,3-274,2) р <0,01 Р23 <0,01
АЭТ-з1§Л, ед. опт. плотн. 0,037 (0,030-0,053) 0,174 (0,131-0,225) р <0,01 0,157 (0,096-0,223) р <0,01 0,295 (0,215-0,453) р <0,01 Р23 <0,01
Примечание: р - достоверность различий с контрольной группой: р1 - достоверность различий между 1 и 2 группами, р2 - между 1 и 3 группами, р3 - между 2 и 3 группами.
Из представленной таблицы видно, что показатели мукозального иммунитета увеличивались по сравнению с нормой во всех исследуемых группах: уровень общего з^А в первой и 2-й группах в 2,2 раза, в 3-й группе в 6,3 раза; уровень АЭТ-з^А в первой и 2-й группах в 5,3 раза, а в 3-й группе в 8 раз. Межгрупповых различий по этим показателям в 1-й и 2-й группах не выявлено, в то время как
в 3-й группе данные показатели были достоверно высше чем в остальных группах (р<0,01).
Результаты проведенного исследования по определению экспрессии ТЬК.-4 моноцитами и гранулоцитами периферической крови, и эндоток-син-связывающий потенциал этих клеток у больных бронхиальной астмой и СПБАХ представлены в таблице 3.
Таблица 3
Экспрессия TLR-4 моноцитами и гранулоцитами периферической крови и эндотоксин-связывающий потенциал этих клеток у больных бронхиальной астмой и СПБАХ
Показатель Контрольная группа, п = 23 1-я группа, п = 42 2-я группа, п = 27 3-я группа, п=40
Экспрессия ТЬЯ-4 на гранулоцитах, МИ 2,61 (2,36-2,70) 1,05 (0,92-1,11) р<0,01 р1 >0,01 1,35 (1,32-1,62) р<0,01 1,11 (1,03-1,36) р<0,01
Экспрессия ТЬЯ-4 на моноцитах, МИ 1,10 (0,95-1,28) 2,74 (2,37-2,85) р<0,01 р} >0,05 2,62 (2,28-3) р<0,01 р3>0,05 2,85 (2, 54-3) р<0,01 р2>0,05
ЭТ-СП грануло-цитов, (усл.ед.) 1,06 (1,04-1,12) 1,07 (1,04-1,14) р >0,05 р1 >0,05 0,98 (0,92-1,1) р >0,05 р3>0,05 1,10 (1,00-1,13) р >0,05 р2>0,05
ЭТ-СП моноцитов, (усл.ед.) 1,66 (1,37-2,02) 1,75 ( 1,66-2,06) р >0,05 р1 >0,05 1,75 ( 1,56-1,79) р >0,05 р3>0,05 1,75 (1,59-1,83) р >0,05 р2>0,05
Примечание: достоверность различий между показателями обозначена следующим образом: р - по сравнению с группой здоровых доноров, р1 - между 1 и 2 группами, р2 - между 1 и 3 группами, р3 - между 2 и 3 группами.
При анализе полученных данных видно, что во всех исследованных группах больных выявлено достоверное снижение экспрессии ТЬК.-4 гранулоцитами ПК по сравнению с нормой (р<0,01). При этом у больных с тяжелой БА (2-я группа) уровень экспрессии ТЬК.-4 на гранулоцитах ПК был достоверно выше р<0,01, чем у больных со средне-тяжелой БА (1-я группа,) и больных СПБАХ (3-я группа). Кроме того, у больных из 1, 2 и 3 групп зарегистрировано достоверное повышение уровня экспрессии ТЬК.-4 моноцитами ПК по сравнению с нормой в среднем в 2,5 раза (р<0,01). В тоже время различия по данному показателю между 1, 2 и 3 группами больных не выявлены (р>0,05). ЛПС-СП моноцитов и гранулоцитов ПК у больных всех клинических групп достоверно не отличался от величины данного показателя у здоровых доноров (р>0,05), статистически значимые различия по данному показателю между указанными группами больных также не обнаружены (р>0,05).
ОБСУЖДЕНИЕ
Таким образом, нами было зарегистрировано повышенный уровень АЭТ-1дА. Известно, что специфический АЭТ-1дА является строительным материалом для формирования АЭТ-з^А. Повышение концентрации сывороточного 1дА рассматривается как его участие в формировании периферического мукозального иммунного ответа на аллерген [9].
Уровни сывороточного АЭТ-1дО у больных во всех клинических группах не отличались от нормы, что свидетельствует об антительном нор-мореспондерном ответе на ЭТ [10]. Антительный нормореспондерный ответ на ЭТ может означать либо как повышенное потребление данных антител на нейтрализацию чрезмерного поступления ЭТ в системный кровоток на оси кишечник - портальный кровоток, либо о преобладании местного (ингаляционного) воздействия ЭТ окружающей среды, о чем свидетельствует повышенный уро-
вень секреторного АЭТ-1дЛ. В то же время повышение концентрации в крови АЭТ-1дМ косвенно свидетельствует о наличии системной антигенемии (эндотоксинемии) [11].
Нами был зарегистрирован повышенный уровень СРБ, что потенциально может отражать выраженность системного воспаления [12]. Полученные нами данные подтверждают важную патогенетическую роль ЭТ в патогенезе БА и СПБАХ.
Согласно наших данных, была выявлена высокая выраженность мукозального АЭТ-иммуните-та у всех исследуемых больных, что проявлялось в повышенном уровне секреторного АЭТ-1§Л и общего з^Л, в то время у больных 3-й группы отмечались достоверно выше уровени секреторного АЭТ-^Л, общего б^Л и сывороточного АЭТ-^Л по сравнению с больными 1-й и 2-й групп. Из этого следует, что полученные нами данные свидетельствует о воздействии чрезмерного эндотокси-нового стимула на уровне слизистых оболочек и данная дисфункция антиэндотоксиннового иммунитета отражает тяжесть и длительность течения заболевания.
В литературе высокий уровень з^Л рассматривается как отражение интенсивного антигенного стимула на слизистые оболочки при высоком уровне гуморального антительного ответа. Например, повышенные уровни общего з1дЛ и АЭТ-з1дЛ были выявлены у больных неспецифическим язвенным колитом и больных с болезнью Крона [13]. При этих заболеваниях регистрируется повышение транслокации ЭТ во внутренние среды организма и мукозальный барьер, по данным авторов, функционально не способен предотвратить ЭТ-агрессию [13]. По нашему мнению, несостоятельность мукозального АЭТ-иммунитета может быть связана как с самой молекулой АЭТ-з1дЛ (низкая аффинность к ЭТ), так и с нарушением слизистого барьера на уровне межэпителиальных соединений, в результате чего резко возрастает кишечная проницаемость по отношению к различным ксенобиотикам, включая ЭТ. При не контролированном течении заболевания ЭТ-агрессия может быть также связана с усилением шунтового кровотока (минуя печень, через портокавальные анастомозы) за счет активации симпатической нервной системы и применения значительных доз в2-симпатомиметиков [14]. 2
При анализе данных был зарегистрирован увеличенный уровень экспрессии ТЬК.-4 моноцитами ПК у больных всех 3-х клинических групп, что потенциально повышает вероятность ЭТ-зависимой активации данных клеток и может быть одной из важных причин поддержания хронического низкоинтенсивного воспаления у таких пациентов. Известно, что чрезмерное попадание ЭТ во внутреннюю среду организма может быть обусловлено
целым рядом факторов, включая хроническое поражение слизистых оболочек и нарушение слизистого барьера на уровне межэпителиальных соединений, в результате чего резко возрастает кишечная проницаемость по отношению к различным ксенобиотикам, включая и ЭТ [14].
Выявленное нами снижение уровня экспрессии TLR4 на гранулоцитах ПК может косвенно указывать на преимущественную активацию этих клеток ЭТ через другие типы ЭТ-распознающих рецепторов - макрофагальный скавенджер-рецеп-тор (SR-A), макрофагальный рецептор маннозы, в2-интегрины (CD11a,b,c/CD18), участвующих в процессе распознавания патоген-ассоциирован-ных молекулярных структур (pathogen-associated molecular patterns - РАМР) и инициирующих фагоцитоз. В тоже время наши исследования показали, что у больных ЭТ-СП гранулоцитов достоверно отличается от нормальной величины этого показателя. Следовательно, при избыточном попадании ЭТ в организм больных на гранулоцитах присутствует достаточное количество активных ЭТ-связывающих рецепторов, способных вызвать активацию этих клеток. Из проведенного нами исследования становится очевидной необходимость проведения дальнейших комплексных исследований, направленных на разработку подходов по целенаправленному управлению активацией или блокированием ЭТ-связывающих рецепторов у данной категории больных.
ВЫВОДЫ
1. У больных всех клинических групп зарегистрировано повышение сывороточного АЭТ-IgM (p <0,01) относительно уровня нормы, что отражает активную транслокацию ЭТ (ингаляционного и кишечного происхождения) во внутренние среды организма на фоне неизмененного уровня АЭТ-IgG. Самый высокий уровень АЭТ-IgM был выявлен у больных 3-й клинической группы. В то же время уровень АЭТ-IgA в 1- й и 2-й группе достоверно не отличался от диапазона нормы, но в 3-й группе данный показатель был достоверно выше нормы в 2,2 раза (p <0,05).
2. У больных 1-й, 2-й и 3-й групп в индуцированной мокроте выявлена высокая интенсивность мукозального иммунитета, что проявлялось в повышенном уровне секреторного АЭТ-^А (p<0,01) и общего секреторного IgA (p<0,01). Во всех клинических группах было зарегистрировано достоверное повышение СРБ в сравнении с нормальным показателем.
3. В 1, 2 и 3 клинических группах уровень экспрессии TLR-4 на гранулоцитах ПК ниже диапазона нормы. Во всех клинических группах экспрессия TLR-4 моноцитами ПК в 2,5 раза выше величины данного показателя в норме (p<0,01).
4. ЭТ-связывающий потенциал моноцитов и гранулоцитов ПК у больных не выходит за пределы диапазона нормы (р>0,05).
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Global initiative for asthma: Diagnosis of diseases of chronic airflow limitation: asthma, COPD and asthma-COPD overlap syndrome. Режим доступа: http:// www.ginasthma.org
2. Global initiative for chronic obstructive lung disease diagnosis: Diagnosis of diseases of chronic airflow limitation: asthma, COPD and asthma-COPD overlap syndrome. Режим доступа: http:// www. goldcopd.org
3. Белевский А.С. Синдром перекреста бронхиальной астмы и хронической обструктивной болезни легких (по материалам совместного документа рабочих групп экспертов GINA и GOLD)// Пульмонология. 2014; 2: 12- 19.
4. Thorne P.S., Kulhankova K., Yin M. et al. Endotoxin exposure is a risk factor for asthma: the national survey of endotoxin in United States housin // Am J Respir Crit Care Med. 2005; 172:1371-1377.
5. Яковлев М.Ю. Кишечный эндотоксин и вос-паление//Дерматология. Национальное руководство. Краткое издание. 2013:(8);70.
6. Гордиенко А.И. Использование твер дофаз-ного иммуноферментного анализа для определения общего и антиэндотоксинового секреторного IgA человека // Таврическ. мед.-биол. Вестн. 2009;12 (3(47)):82-89.
7. Paggiaro P.L., Chanez P., Holz O., Ind P.W., Djukanovic R., Maestrelli P., et-al. Sputum induction // Eur Respir J. 2002;22(Suppl. 37):3-8.
8. Гордieнко A.I., Бшоглазов В.О., Бакова А.А. Високочутливий iмуноферментний метод кшьюсного визначення вмкту С-реактивного бшка в кровЬ шформацшний лист про но-вовведення в системi охорони здоров'я. К.: УКРМЕДПАТЕНТШФОРМ, 2010;139: 4.
9. Moller C., Dreborg S., Ferdousi H.A. et al. Pollen immunotherapy reduces the development of asthma in children with seasonal rhinoconjunctivitis (the PAT-study) // J Allergy Clin Immunol. 2002;109 (2):251-256.
10. Гордиенко А.И., Бакова А.И., Химич Н.В., Белоглазов В.А. Уровни естественных антител к липополисахаридам энтеробактерий у постоянных доноров республики Крым // 1мунолопя та алерголопя. 2003; (4):31-36.
11. Радзiвiл П.М., Бшоглазов В.О. Аналiз показниюв антиендотоксинового iмунiтету хворих на грамнегативну позагосттальну та госттальну пневмонп з летальним результатом // Вкник на-укових дослщжень. 2008;52(3):35-37.
12. Simpson J.L., Grissell T.V., Douwes J. et al. Innate immune activation in neutrophilic asthma and bronchiectasis // Thorax. 2007;62 (3):211-218.
13. Currie C.G., McCallum K., Poxton I.R. Mucosal and systemic antibody responses to the lipopolysaccharide of Escherichia coli O157 in health and disease // J Med Microbiol. 2001;50 (4):345-354. Аниховская И.А., Опарина О.Н., Яковлева М.М. и др. Кишечный эндотоксин как универсальный фактор адаптации и патогенеза общего адаптационного синдрома // Физиол. Чел. 2006;32(2):.87-9
REFERENCES
14. Global initiative for asthma: Diagnosis of diseases of chronic airflow limitation: asthma, COPD and asthma-COPD overlap syndrome. Режим доступа: http:// www.ginasthma.org
15. Global initiative for chronic obstructive lung disease diagnosis: Diagnosis of diseases of chronic airflow limitation: asthma, COPD and asthma-COPD overlap syndrome. Режим доступа: http:// www. goldcopd.org
16. Belevsky A.S. Asthma-COPD overlap syndrome (based on a joint document of the working groups of experts GINA and GOLD) // Pulmonology. 2014; 2: 12- 19.
17. Thorne P.S., Kulhankova K., Yin M. et al. Endotoxin exposure is a risk factor for asthma: the national survey of endotoxin in United States housin // Am J Respir Crit Care Med. 2005; 172:1371-1377.
18. Yakovlev M.Yu. Intestinal inflammation and endotoxin // Dermatology. National leadership. Quick Edition. 2013: (8) 70.
19. Gordienko A.I. The use of ELISA for the determination of total and secretory IgA human antiendotoxic // Tauride. med.-biol. Vestnik. 2009; 12 (3 (47)): 82-89.
20. Paggiaro P.L., Chanez P., Holz O., Ind P.W., Djukanovic R., Maestrelli P., et-al. Sputum induction // Eur Respir J. 2002;22(Suppl. 37):3-8.
21. Gordienko AI, Bilohlazov VA, Bakova A.A. Highly sensitive immunoassay method for the quantitative determination of C-reactive protein levels, a newsletter on innovation in health care. K .: UKRMEDPATENTINFORM 2010; 139: 4.
22. Möller C., Dreborg S., Ferdousi H.A. et al. Pollen immunotherapy reduces the development of asthma in children with seasonal rhinoconjunctivitis (the PAT-study) // J Allergy Clin Immunol. 2002;109 (2):251-256.
23. Gordienko A.I., Bakova A.I., Khimich N.V., Beloglazov V.A. The levels of natural antibodies to lipopolysaccharides of Enterobacteriaceae from permanent donors Republic of Crimea // Immunology and Allergology. 2003; (4): 31-36.
24. Radziwill P.M., Bilohlazov V.A. Analysis of antiendotoxin immunity of patients with gram-negative
nosocomial pneumonia and outhospital pnemonia // Bulletin of scientific research. 2008; 52 (3): 35-37.
25. Simpson J.L., Grissell T.V., Douwes J. et al. Innate immune activation in neutrophilic asthma and bronchiectasis // Thorax. 2007;62 (3):211-218.
26. Currie C.G., McCallum K., Poxton I.R. Mucosal and systemic antibody responses to the
lipopolysaccharide of Escherichia coli O157 in health and disease // J Med Microbiol. 2001;50 (4):345-354.
27. Anihovskaya I.A., Oparin O.N., Yakovlev M.M. et al. Intestinal endotoxin as a universal factor of adaptation and pathogenesis of general adaptation syndrome // Fiziol. Pers. 2006; 32 (2) :. 87-91.
