CC BY
83
Оригинальная статья / Original article УДК 628.355
DOI: http://dx.doi.org/10.21285/2227-2925-2019-9-2-302-312
Состав микробного сообщества активного ила в процессах совместной биологической и реагентной очистки сточных вод
© Л.М. Сибиева*, И.А. Дегтярева***, А.С. Сироткин*, Э.В. Бабынин***
* Казанский национальный исследовательский технологический университет, г. Казань, Республика Татарстан, Российская Федерация
** Татарский НИИАХП - обособленное структурное подразделение ФИЦ КазНЦ РАН, г. Казань, Республика Татарстан, Российская Федерация *** Казанский (Приволжский) федеральный университет, г. Казань, Республика Татарстан, Российская Федерация
Резюме: Целью работы являлась оценка влияния различных реагентов (традиционных - FeCl3, Al2(SO4)3, и инновационных - Biokat P 500 и Nanofloc), применяемых совместно с биологической очисткой сточных вод для коагуляции компонентов сред и микробных суспензий, на количественный и видовой состав микроорганизмов активного ила. Проведены моделирование процессов совместной биологической очистки сточных вод с реагентными препаратами, культивирование образцов активного ила и их посев на селективные питательные среды для выявления числен -ности различных физиологических групп микроорганизмов, определение таксономической прина д-лежности колоний азотфиксирующих и фосфатмобилизующих бактерий. Изменения в биоценозе активного ила оценены по таким агрономически важным группам микроорганизмов, как диазо-трофные, фосфатмобилизующие, актинобактерии, микромицеты и др. Установлено, что применение реагентных препаратов совместно с биологической очисткой сточных вод в большинстве случаев приводит к снижению численности этих микроорганизмов. Экспериментально подт-верждено значительное снижение количества микроорганизмов в образцах активного ила с традиционным реагентом Al2(SO4)3; вторым по степени подавления является FeCl3. Показано, что препарат Nanofloc, несмотря на угнетение многих изучаемых групп микроорганизмов, спо -собствует увеличению количества диазотрофов, а Biokat P 500 приводит к наименьшим отрицательным последствиям для численности и состава микроорганизмов активного ила. При идентификации доминирующих азотфиксирующих и фосфатмобилизующих бактерий методом про-теомного анализа установлено, что контрольный вариант (без воздействия реагентов на ми к-робное сообщество) представлен культурами бактерий Klebsiella oxytoca, Pseudomonas putida, Acinetobacter johnsonii, Rhodococcus erythropolis. Указанные микроорганизмы известны широкой значимостью для экологии и биотехнологии. В опытных вариантах преобладают: при добавлении хлорида железа - K. oxytoca, инновационных реагентов - по две культуры: с Biokat P 500 - Enterobacter ludwigii и Aeromonas veronii; с Nanofloc - Enterobacter cloacae и R. erythropolis. Наличие нескольких доминирующих видов бактерий, в том числе не относящихся к видам азотфиксато-ров или фосфатмобилизаторов, может указывать на синтрофный характер сообществ активного ила.
Ключевые слова: биологическая очистка сточных вод, микробный активный ил, реагентные препараты, протеомный анализ
Информация о статье: Дата поступления 12 октября 2018 г.; дата принятия к печати 7 июня 2019 г.; дата онлайн-размещения 28 июня 2019 г.
Для цитирования: Сибиева Л.М., Дегтярева И.А., Сироткин А.С., Бабынин Э.В. Состав микробного сообщества активного ила в процессах совместной биологической и реагентной очистки сточных вод // Известия вузов. Прикладная химия и биотехнология. 2019. Т. 9, N 2. С. 302-312. DOI: 10.21285/22272925-2019-9-2-302-312
Composition of activated sludge microbial community used in the combined biological and chemical wastewater treatment
© Liniza M. Sibieva*, Irina A. Degtyareva***, Alexander S. Sirotkin*, Edward V. Babynin***
* Kazan National Research Technological University, Kazan, Republic of Tatarstan, Russian Federation ** Tatar Research Institute of Agrochemistry and Soil Science, Federal Research Center, Kazan Scientific Center of the Russian Academy of Sciences, Kazan, Republic of Tatarstan, Russian Federation *** Kazan Federal University, Kazan, Republic of Tatarstan, Russian Federation
Abstract: This article compares conventional (FeCl3, Al2(SO4)3) and innovative (Biokat P 500 и Nanofloc) reagents used in the combined biological and chemical wastewater treatment for coagulating medium components and microbial suspensions. In this study, we aimed to assess the effect of these reagents on the quantitative and species composition of microorganisms present in activated sludge. To that end, we modelled the processes of the combined biological and chemical wastewater treatment; cultivated samples of activated sludge and transferred them to selective media in order to establish the number of different physiological groups of microorganisms; as well as determined the taxonomic identity of bacterial colonies (nitrogen-fixing and phosphate-mobilizing bacteria). Changes in the biocoenosis of activated sludge were assessed for such agronomically important groups of microorganisms as diazotrophs, phosphate-mobilizing bacteria, actinobac-teria, micromycetes, etc. It is established that combined biological and chemical wastewater treatment in most cases leads to a decrease in the number of these microorganisms. A notable decrease in the number of microorganisms in activated sludge samples containing a conventional reagent Al2(SO4)3 is experimentally confirmed. FeCl3 is shown to be the second most effective reagent in this respect. It is demonstrated that Nanofloc, despite inhibiting many studied groups of microorganisms, contributes to an increase in the number of diazotrophs; whereas the use of Biokat P 500 leads to the least negative consequences in terms of the number and composition of microorganisms present in activated sludge. In the course of identifying predominant nitrogen-fixing and phosphate-mobilizing bacteria via proteomic analysis, it is established that the following bacterial cultures are present in the control sample: Klebsiella oxytoca, Pseudomonas putida, Acineto-bacter johnsonii, Rhodococcus erythropolis. These microorganisms are known for playing a significant role in ecology and biotechnology. Following addition of FeCl3 to the test samples, only one bacterial culture (K. oxytoca) was found to be predominant; whereas addition of innovative reagents resulted in two predominant bacterial cultures (Biokat P 500 - Enterobacter ludwigii and Aeromonas veronii; Nanofloc - Enterobacter cloacae and R. erythropolis). The presence of several dominant bacterial species, belonging to other groups than nitrogen-fixing or phosphate-mobilizing bacteria, may indicate the syntrophic nature of activated sludge communities.
Keywords: biological wastewater treatment, microbial activated sludge, reagents, proteomic analysis
Information about the article: Received October 12, 2018; accepted for publication June 7, 2019; available online June 28, 2019.
For citation: Sibieva L.M., Degtyareva I.A., Sirotkin A.S., Babynin E.V. Composition of activated sludge microbial community used in the combined biological and chemical wastewater treatment. Izvestiya Vuzov. Pri-kladnaya Khimiya i Biotekhnologiya [Proceedings of Universities. Applied Chemistry and Biotechnology]. 2019, vol. 9, no. 2, pp. 302-312. (In Russian). DOI: 10.21285/2227-2925-2019-9-2-302-312
ВВЕДЕНИЕ
Во всем мире проблема переработки различных отходов народного хозяйства стоит чрезвычайно остро. К одним из наиболее трудно утилизируемых отходов относятся осадки сточных вод (СВ), которые являются неотъемлемым следствием механической, физико-химической и биологической стадий процесса очистки сточных вод [1]. Биологическая обработка СВ основана на формировании микробного сообщества активного ила (АИ), способно-
го использовать загрязняющие вещества в качестве субстрата. При этом образуются хлопьевидные скопления - флокулы или агрегаты, которые отделяются от обработанных СВ во вторичных отстойниках, откуда иловая субстанция разделяется на два потока: возвратный (циркулирующий) ил, попадающий вновь в аэрационную систему очистки, и избыточный АИ, направляемый на утилизацию [2].
Избыточный АИ представляет особый интерес в качестве потенциального сырья для полу-
чения биоудобрений. Во-первых, он составляет 50-70% всех осадков СВ [3]. Во-вторых, в отличие от первичного осадка свежий АИ не имеет неприятного запаха и, как правило, обладает меньшей токсичностью [2]. В-третьих, он богат органическими и биогенными веществами, микро-и макроэлементами, такими как фосфор, азот, кальций, магний, железо и др. [2]. Аи характеризуется и богатым микробиологическим составом, представленным многообразием функционально значимых групп [2, 4].
Биоценоз Аи состоит из бактерий, актино-бактерий, плесневых грибов, дрожжей, а также водорослей, простейших, личинок насекомых, рачков и др. Основное разрушение органических загрязнений осуществляется бактериями, количество которых в 1 м3 ила составляет около 21014 [2]. Бактериальные сообщества сооружений очистки СВ, эксплуатируемые в различных конфигурациях в разных географических точках, являются схожими, что обусловлено аналогичными жизненными стратегиями в системе АИ [5].
К настоящему времени проведены исследования многих технологически значимых групп микроорганизмов для очистки СВ, таких как нитрифицирующие бактерии, окисляющие аммоний и нитрит (доминирующими среди них являются ШгоЬэ&вг spp. и Шгозососсиз spp.), фосфа-таккумулирующие, пенообразующие бактерии, анаммокс-бактерии, а также другие планкто-мицеты и метаногенные археи [4].
Технологии очистки СВ включают не только биологические методы, но и физико-химические, с применением коагулянтов и флокулянтов. Эти вещества химической природы позволяют удалить соединения фосфатов, улучшают седиментацию взвешенных частиц в отстойниках, повышают эффективность обезвоживания и служат средством кондиционирования осадков СВ [5].
В настоящее время в составе реагентных препаратов используются наночастицы, комбинируются вещества различной природы. При этом схемы внесения реагентов могут быть различными - в первичные или вторичные отстойники, а также непосредственно в биологическую систему аэротенков [5]. Внесение коагулянтов и флокулянтов в аэротенки приобретает все большее распространение в связи с тем, что происходит интенсификация процесса очистки СВ при меньшем применении реагента, что достигается благодаря активному перемешиванию [6, 7].
В случае внесения реагентов в АИ следует помнить, что химические вещества могут стать причиной угнетения развития микроорганизмов. Так, присутствие в водной среде соединений железа в количестве, превышающем 0,5 мг/л, приводит к ингибированию эндогенного дыхания АИ [8]. Анализ функционирования очистных сооружений с применением соединений алю-
миния в качестве коагулянтов показал, что остаточные концентрации металла в количестве более 40 мг/л приводят к значительной потере окислительной активности аэробного АИ и снижению скорости эндогенного дыхания биоценоза до 28,0%. Обнаружено ингибирующее влияние на АИ флокулянтов на основе полиакрила-мида, обусловленное присутствием в таких продуктах примесей (мономеров, побочных продуктов полимеризации и др.) [8]. В некоторых работах (например, [8]) выявлена оптимальная дозировка инновационного реагента Biokat P500, при которой повышается эффективность очистки СВ и удовлетворительно протекают биологические процессы в АИ. При повышении дозы реагента происходит снижение активности окислительно-восстановительных ферментов АИ, ухудшение процессов нитрификации вследствие закисления среды ниже рН 6,02. Подобные исследования встречаются редко, и в основном они посвящены влиянию реагентов на процессы биохимического окисления или влиянию металлов на монокультуры микроорганизмов. Недостаточно внимания уделено изучению изменений, происходящих в микробиологическом сообществе АИ в результате реагентного воздействия в процессах очистки сточных вод и дальнейшей утилизации избыточной биомассы активного ила и микроорганизмов в его составе в качестве биоудобрения, что определяет актуальность настоящих экспериментальных исследований.
Цель работы заключалась в исследовании влияния реагентных препаратов, используемых в технологиях совместной биологической и реагентной очистки сточных вод, на микробный состав активного ила.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Объектами исследований являлись активный ил, отобранный из биологических очистных сооружений г. Зеленодольска (Республика Татарстан); традиционные коагулянты FeCl3 и Al2(SO4)3 в дозах 160 и 120 мг/л соответственно; инновационные комплексные реагенты компании VTA Biokat P 500 и Nanofloc в виде основных (готовых) растворов в количестве 100 и 75 мкл/л соответственно.
Инновационные реагентные препараты имеют следующие характеристики:
- реагент VTA Biokat P 500 - коагулянт-флокулянт, состоящий из коагулянта хлорида железа (II) и флокулянтов (полиалюминия гид-роксихлорида и эпихлоргидрин-диметиламина сополимера), представляет собой жидкость желтого или зеленого цвета плотностью 1,3 г/см3, pH = 1,0, хорошо растворяется в воде. Реагент используется для дефосфатации СВ, а также для осаждения взвешенных частиц;
- реагент VTA Nanofloc - коагулянт на основе наноструктурированного железа с высокой
плотностью положительного заряда - жидкость зеленовато-коричневого цвета плотностью около 1,2 г/см3, pH = 1,0. Применение реагента в процессе очистки СВ определяется необходимостью интенсивного осаждения взвешенных частиц, а также дополнительного удаления фосфатов.
Отбор проб был произведен с линии возвратного АИ в зимний период (февраль 2017 г.). Концентрация АИ составляла 4,9 г/дм3 по сухому веществу. Модельная установка состояла из пяти емкостей АИ с принудительной аэрацией, одна из которых выступала в качестве контроля, остальные являлись опытными. В каждую из опытных емкостей вносили соответствующий реагентный препарат в количествах, принятых для эффективного осаждения и удаления фосфатов из СВ на основании результатов предварительных исследований [7]. После 24 ч экспозиции образцов АИ со сточной водой производили выявление численности различных физиологических групп микроорганизмов посевом образцов АИ на селективные агаризо-ванные питательные среды: гетеротрофных бактерий - на мясо-пептонном агаре, азотфик-сирующих - на среде Эшби, денитрифицирующих - на среде Гильтая, фосфатмобилизую-щих - на среде Муромцева, актинобактерий и бактерий, использующих минеральные формы азота, - на крахмало-аммиачном агаре, микро-мицетов - на среде Чапека и др.1. Численность микроорганизмов определяли в 1 см3 АИ и выражали в колониеобразующих единицах (КОЕ). Определение родового состава доминирующих
микромицетов проводили по принятым мето-
2
дикам .
После диагностики микроорганизмов по морфологическим признакам была выполнена последующая идентификация методом масс-спектрометрического анализа белковых экстрактов, который осуществляли с помощью время-пролетного MALDI масс-спектрометра microflex (Bruker Daltonik GmbH, Германия) с использованием программы Flex Control. Пробоподго-товку суточных культур исследуемых микроорганизмов проводили методом прямого нанесе-
1 Звягинцев Д.Г., Асеева И.В., Бабьева И.П., Мирчинк Т.Г. Методы почвенной микробиологии и биохимии: учеб. пособие. М.: Изд-во МГУ, 1991. 304 с. / Zvyagintsev D.G. Aseeva I.V., Bab'eva I.P., Mirchink T.G. Metody pochvennoi mikrobiologii i biokhimii [Methods of soil microbiology and biochemistry]. Moscow: Moscow State University Publ., 1991, 304 p.
2 Определитель патогенных и условно-патогенных грибов / Саттон Д., Фотергилл А., Ринальди / пер. с англ. К.Л. Тарасова и Ю.Н. Ковалева; под ред. И.Р. Дорожковой. М.: Мир, 2001. 470 с. / Satton D., Fotergill A., Rinaldi M. Determinant of pathogenic and conditionally pathogenic fungi. Moscow: Mir Publ., 2001, 468 p.
ния по стандартному протоколу [9]. Идентификацию, запись, обработку и анализ масс-спектров проводили с помощью программы BioTyper RTC. Предварительно готовили раствор матрицы HCCA (а-циано-4-гидроксикоричная кислота). В пробирку с порционной HCCA матрицей (Bruker Daltonik GmbH, порционная (8255344), Германия) добавили 250 мкл стандартного OS раствора (50,0% ацетонитрил, 47,5% mQ, 2,5% трифторуксусной кислоты). Перемешивали полученный раствор HCCA матрицы на лабораторной мешалке Vortex V-1 plus при комнатной температуре до полного растворения сухого вещества. Затем инкубировали на ультразвуковой бане Bransonic Е-1200 в течение 5 мин. Полученный раствор HCCA матрицы хранили в холодильнике Indesit Bia20 при температуре -20 °С. Выделенные колонии определенных типов наносили тонким слоем на 3 ячейки стальной масс-спектрометрической мишени, затем добавляли 1 мкл раствора матрицы HCCA и высушивали на воздухе. В качестве калибровочного стандарта и положительного контроля использовали тест-стандарт белкового экстракта Escherichia coli (Bruker Daltonik GmbH (8255343), Германия). Процедуру калибровки и проверки выполняли на ячейке планшета, содержащей образец бактериального тест-стандарта. Масс-спектрометрический анализ осуществляли при функционировании прибора (времяпролетный MALDI масс-спектрометр microflex (Bruker Daltonik GmbH, Германия) в линейном позитивном режиме со следующими параметрами: напряжение Ion Source 1 (IS1) -20,0 кВ; Ion Source 2 (IS2) - 18,05 кВ; напряжение на фокусирующей линзе - 6,00 кВ; частота лазера - 60 Гц. Параметры работы прибора оптимизировали для диапазона отношения массы иона к его заряду (m/z) от 2000 до 20000. Заключение о таксономической принадлежности выделенных доминирующих диазотроф-ных и фосфатмобилизующих колоний по результатам процедуры протеомного анализа выполняли в том случае, если значения индекса совпадения (параметр score value, SV) были 1,7 или выше, так как значения менее этой величины считаются недостоверным результатом [10].
Статистическую обработку результатов проводили с помощью электронных таблиц Excel.
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
Формирование микробного сообщества АИ обусловлено его адаптацией к составу сточных вод, поступающих на очистные сооружения [2, 4]. Характеристика поступающей сточной воды в период отбора проб активного ила приведена в табл. 1. Сведения о поступивших СВ на очистные сооружения в целом соответствуют сред-несезонным значениям.
Таблица 1
Характеристика поступающих сточных вод
Table 1
Characteristic of incoming wastewater
Показатель Значение Показатель Значение Показатель Значение
Т, °С РН 3 Взвеш. в-ва, мг/дм БПК5, мгО/г 12-14 7,70-7,80 155,00-464,00 397,20-467,30 БПК20, мгО/г ХПК, мгО/г Хлориды, мг/дм3 N-NO3", мг/дм3 460,80-542,10 723,60-993,00 103,40-131,10 0,22-47,10 N-NH4+, мг/дм3 N-NO2", мг/дм3 Нефтепродукты,мг/дм3 P-PO43"мг/дм3 43,40-48,00 0,68-1,43 0,97-1,10 4,40-5,08
Как видно из данных, представленных в табл. 1, СВ отличались высоким содержанием нитратов и органических веществ. Соотношение БПКполн/ХПК составляло 0,47-0,55, что определило целесообразность применения биохимической очистки с использованием микроорганизмов АИ. СВ характеризовалась нейтральным рН и температурой, достаточной для протекания биологических процессов ее очистки.
Результаты учета численности микроорганизмов Аи представлены в табл. 2.
При использовании реагентов наблюдалось значительное снижение численности доминирующей группы гетеротрофных микроорганизмов: в пробах с традиционными реагентами FeCl3 - на 42,5% и Al2(SO4)3 - на 41,3%, с инновационными Biokat P 500 - на 14,4% и Nanofloc - на 34,1%. Уменьшение количества гетеротрофов свидетельствует о чувствительности АИ к воздействию реагентов.
Известно, что химические вещества, попадая в АИ, приводят к изменениям структуры хлопьев и кислородного распределения внутри них, способствуют значительному удалению из
водной среды фосфатов и частичному выведению других веществ из надиловой жидкости [6, 11-13]. Снижение численности гетеро-трофов могло быть также связано с недостаточным разрушением агрегированных хлопьев. Ранее было установлено, что максимальная агрегация хлопьев происходила при добавлении реагента Nanofloc [12]. С другой стороны, инги-бирование микроорганизмов могло быть вызвано токсическим действием ионов железа и алюминия в составе реагентных препаратов [14, 15].
Отмечено, что максимальное подавление численности гетеротрофов происходило в образцах с традиционными коагулянтами (см. табл. 2), что может быть обусловлено тем, что для достижения должного эффекта дефосфатации и седиментации АИ соли железа и алюминия вносили в пробы в большем количестве, чем препараты Biokat P 500 и Nanofloc. Согласно исследованиям И.В. Бабушкиной с соавторами [14] наночастицы железа в низких концентрациях могли оказывать ростстимулирующий эффект, а в высоких - приводить к ингибирова-нию микроорганизмов.
Таблица 2
Численность микроорганизмов активного ила
Table 2
Number of microorganisms in activated sludge
CP
ro m
ы ы р ы р о т ы м ер и
ы р о а ио и
ф е о т а з и и, Ï-& р е
о р т о р е ы н ю о р о та с к и ф к и -& и р л и ю о м и р ф £ а 2 Ф уы з ьлз ьнл л азота кте го ю о н
т е С т о т и т а Б пос лар ис рен и м и икт Ак
з а н е d ф с о ©
■106 КОЕ/см3
Контроль АИ+FeCh АИ+Al2(SO4)з АИ+Biokat P 500 АИ + Nanofloc
16,70 9,60 9,80 14,30 11,00
0,62 0,64 0,34 0,40 0,76
2,50 2,50 2,50 2,50 2,50
2,53 1,35 1,50 2,04 1,73
8,75 1,25 0,90 1,70 1,50
1,00 0,10 0,05 0,24 0,11
Примечание. Различия в численности микроорганизмов разных групп между контрольным и опытными вариантами эксперимента достоверны при Р < 0,05
При исследовании численности азотфикси-рующих микроорганизмов в образце с Al2(SO4)3 установлено их ингибирование (до 45,2%), что вызвано, по-видимому, токсическим действием ионов алюминия [16]. Следствием ингибирую-щего действия этого металла, вероятно, стало также увеличение аммонийного азота в среде в результате отмирания биомассы, что могло послужить дополнительной причиной снижения азотфиксирующей способности микроорганизмов [15, 17]. В пробе с препаратом Biokat P 500, способствующим улучшению массопереноса кислорода в микробных агрегатах [13], было отмечено уменьшение численности диазотрофов на 35,5%, что, возможно, обусловлено ингиби-рующим действием кислорода на нитрогеназу азотфиксаторов [18]. В варианте с хлоридом железа не выявлено заметных изменений в численности диазотрофов по сравнению с контролем. Только при использовании реагентного препарата нового поколения Nanofloc наблюдали увеличение количества микроорганизмов этой группы на 22,6%. Стимулирование роста диазотрофов могло быть связано с наличием наночастиц железа, которые являются кофактором фермента нитрогеназы [19].
Следует также отметить, что некоторые ге-теротрофы в составе активного ила могут осуществлять как процесс окисления органических веществ в аэробных условиях, так и денитрифи-кацию в отсутствие кислорода [2, 20]. Денитри-фикаторы используют нитраты как конечные акцепторы электронов при окислении органических или неорганических субстратов для получения энергии [21]. Значительное количество микроорганизмов этой группы в нашем эксперименте было обусловлено высоким содержанием нитратов в поступивших СВ (см. табл. 1).
В контрольной пробе АИ отмечали достаточно высокую численность фосфатмобилизую-щих микроорганизмов ввиду высокого содержания легкоокисляемых для микроорганизмов органических веществ в СВ. Многие исследователи [22, 23] считают, что развитию микроорганизмов этой группы способствует наличие легкодоступных источников углерода в среде.
При добавлении реагентов наблюдали уменьшение численности фосфатмобилизую-
щих микроорганизмов: с FeCl3 - на 46,6%, с Al2(SO4)3 - на 40,7%, с Biokat P 500 - на 19,4%, с Nanofloc - на 31,6%. По-видимому, это связано с удалением из среды фосфатов под воздействием реагентов. Наибольшее снижение численности этих микроорганизмов при применении традиционных реагентов могло быть обусловлено высокой степенью удаления фосфатов из среды, а также ингибирующим действием ионов металлов.
При учете бактерий, использующих минеральные формы азота, и актинобактерий наблюдали уменьшение их численности во всех вариантах с реагентами. Максимальное ингиби-рование этих микроорганизмов отмечали в пробах с FeCl3 и Al2(SO4)3.
Комплексный состав доминирующих микро-мицетов в образцах АИ представлен в табл. 3.
При анализе состава доминирующих микро-мицетов было установлено, что использование традиционных реагентов не приводит к изменению качественного состава АИ, который сопоставим с контрольным вариантом (Mucor, Penicillium, Aspergillus, Trichoderma). Однако количество грибов при добавлении Al2(SO4)3 увеличилось на 40,0%, в то время как при добавлении FeCl3 их численность была сопоставима с контролем (1,60 103 и 1,53103 КОЕ/см3 соответственно).
Необходимо отметить, что в вариантах с инновационными реагентами обнаружены только грибы р. Trichoderma, количество которых было разным - при внесении Biokat P 500 оно возрастало на 55,0% (3,40103 КОЕ/см3), а при добавлении Nanofloc - снижалось на 51,0% (0,75103 КОЕ/см3).
Таким образом, отмечена достаточно высокая чувствительность АИ к воздействию реагентов. В целом изучаемые химические препараты способствуют снижению численности микроорганизмов Аи, только коагулянт нового поколения Nanofloc стимулирует рост диазотрофных бактерий. Существенное ингибирование микроорганизмов различных физиологических групп характерно для проб с Al2(SO4)3. Добавление в АИ инновационного реагента Biokat P 500 приводит к менее негативным последствиям на состав микробного сообщества по сравнению с традиционными коагулянтами.
Вариант Количество, • 103 КОЕ/см3
Контроль 1,53 ± 0,06
АИ + FeCl3 1,60 ± 0,05
АИ + Ab(SO4)3 2,13 ± 0,09
АИ + Biokat P 500 3,40 ± 0,12
АИ + Nanofloc 0,75 ± 0,03
Таблица 3
Количественный состав микроскопических грибов в образцах активного ила
Table 3
Quantitative composition of micromycetes in activated sludge
По результатам процедуры протеомного анализа колоний определена таксономическая принадлежность доминирующих диазотрофных и фосфатмобилизующих бактерий. Контрольный образец АИ без добавления реагентов был представлен Klebsiella oxytoca, Pseudomonas putida, Acinetobacter johnsonii, Rhodococcus erythropolis. В опытных вариантах активного ила с хлоридом железа доминировали только K. oxytoca, с Biokat P 500 - Enterobacter ludwigii и Aeromonas veronii, с Nanofloc - Enterobacter cloacae и R. erythropolis. Образец АИ с Al2(SO4)3 отличался самым большим числом диагностируемых микроорганизмов: Klebsiella pneumoniae ssp. pneumoniae, Aeromonas caviae, E. ludwigii и Microbacterium lacticum.
В результате анализа диазотрофов были выявлены K. oxytoca и M. lacticum. Во многих работах отмечено, что K. oxytoca обладает азотфиксирующей и фосфатрастворяющей способностью [24, 25], а бактерии M. lacticum являются углеводородокисляющими микроорганизмами [26].
Среди фосфатмобилизующих микроорганизмов были обнаружены P. putida, R. Erythro-polis, A. johnsonii, E. ludwigii, E. cloacae, A. veronii, A. caviae. Бактериальные культуры R. erythropolis и P. putida являются широкораспространенными организмами, имеющими большое экологическое и биотехнологическое значение благодаря их широкому метаболическому разнообразию и множеству уникальных ферментативных возможностей, в том числе и способности к со-либизированию фосфорных соединений [27]. Бактерии A. johnsonii отличаются способностью к поглощению избыточного фосфата из СВ, аккумуляции его в виде полифосфата в аэробных условиях и высвобождению его при наступлении анаэробных условий [28]. Представители рода Aeromonas способны участвовать в биодеградации ксенобиотиков [29], A. caviae продуцируют метаболиты, которые ингибируют развитие почвенных патогенов растений [25, 30], K. pneu-moniae ssp. pneumoniae, E. ludwigii и E. cloacae обитают в кишечнике человека и относятся к условно патогенным микроорганизмам, штаммы E. ludwigii способны к деградации углеводородов и эффективно колонизируют ризосферу и саженцы растений [31].
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Использование коагулянтов и флокулянтов остается неотъемлемым способом повышения эффективности седиментации, удаления из СВ фосфатов, тяжелых металлов, улучшения
1. Fytili D., Zabaniotou A. Utilization of sewage sludge in EU application of old and new methods -a review // Renewable and Sustainable Energy Reviews. 2008. Vol. 12. No. 1. P. 116-140.
обезвоживания осадков. При этом аккумуляция компонентов реагентов в АИ воздействует на его химический и микробиологический составы. В связи с тем, что АИ циркулирует в системе очистки СВ и выводится из нее, оказывая влияние на окружающую среду, выбор и концентрация реагентов должны быть основаны не только на изучении эффективности физико-химических процессов, но и на оценке их влияния на биологические системы активного ила.
В условиях острого (краткосрочного) опыта в результате воздействия разового внесения реагентов отмечено уменьшение численности культивированных микроорганизмов. При этом значительное снижение количества микроорганизмов характерно для образцов АИ с традиционным реагентом Al2(SO4)3, вторым по степени подавления является FeCl3. Препарат Nanofloc, основным компонентом которого являются на-ночастицы железа, несмотря на угнетение многих изучаемых групп микроорганизмов, способствует увеличению количества диазотро-фов. По сравнению с традиционными коагулянтами Biokat P 500 приводит к наименьшим отрицательным последствиям для численности и состава микроорганизмов АИ.
В ходе проведенных исследований получены экспериментальные данные о микробном составе АИ, находящегося под воздействием представленных выше реагентов, и выявлена таксономическая принадлежность доминирующих фосфатмобилизующих и азотфиксирую-щих бактерий. В АИ обнаружены такие агрономически значимые группы микроорганизмов, как азотфиксирующие, фосфатмобилизующие, актинобактерии, микромицеты р. Trichoderma и др. Протеомный анализ колоний диазотрофных и фосфатмобилизующих бактерий выявил наличие в АИ таких микроорганизмов, как Klebsiella oxytoca, Pseudomonas putida, Acinetobacter johnsonii, Rhodococcus erythropolis, имеющих экологическую и биотехнологическую ценность.
В результате протеомного анализа колоний диазотрофных и фосфатмобилизующих групп было выявлено нескольких доминирующих видов бактерий (Microbacterium lacticum, Acinetobacter johnsonii, Enterobacter ludwigii, Aeromonas veronii, Aeromonas caviae, Enterobacter cloacae, Klebsiella pneumoniae ssp. Pneumonia), для которых не обнаружена способность к фиксации азота или растворению фосфатов, что может указывать на синтрофный характер исследованного сообщества активного ила.
ЕСКИЙ СПИСОК
2. Жмур Н.С. Технологические и биохимические процессы очистки сточных вод на сооружениях с аэротенками. М.: АКВАРОС, 2003. 512 с.
3. Гуляева И.С., Дьяков М.С., Савинова Я.Н.,
Русакова В.А., Глушанкова И.С. Анализ и обоснование методов обезвреживания и утилизации осадков сточных вод биологических очистных сооружений // Вестник Пермского национального исследовательского политехнического университета. Охрана окружающей среды, транспорт, безопасность жизнедеятельности. 2012. N 2. С. 18-32.
4. Каллистова А.Ю., Пименов Н.В., Козлов М.Н., Николаев Ю.А., Дорофеев А.Г., Асеева В.Г., Грачев В.А., Менько Е.В., Берестовская Ю.Ю., Но-жевникова А.Н., Кевбрина М.В. Изучение микробного состава активных илов московских очистных сооружений // Микробиология. 2014. T. 83. N 5. C. 615-625.
5. Zhang T., Shao M.-F., Ye L. Pyrosequencing reveals bacterial diversity of activated sludge from 14 sewage treatment plants // The ISME Journal. 2012. Vol. 6. No. 6. P. 1137-1147.
6. Кобелева Й.В., Сироткин А.С, Кирилина Т.В., Сибиева Л.М., Гадыева А.А. Совместная биологическая и физико-химическая очистка сточных вод с применением инновационного дефосфо-тирующего реагента. Часть 2. Оценка биологических процессов очистки сточных вод // Вестник Казанского технологического университета. 2016. Т. 19. N 16. С. 133-135.
7. Сибиева Л.М., Сироткин А.С., Кобелева Й.В., Гадыева АА. Эксплуатационные свойства активного ила в технологиях совместной биологической и реагентной обработки сточных вод и утилизации осадков // Вестник Казанского технологического университета. 2016. Т. 19. N 8. С. 142-144.
8. Никифорова Л.О., Белопольский Л.М. Влияние тяжелых металлов на процессы биохимического окисления органических веществ: теория и практика. М.: Бином. Лаборатория знаний, 2010. 78 с.
9. Scott J.S., Sterling S.A., To H., Seals S.R., Jones A.E. Diagnostic performance of matrixassisted laser desorption ionisation time-of-flight mass spectrometry in blood bacterial infections: a systematic review and meta-analysis // Infectious Diseases. 2016. Vol. 48. No. 7. P. 530-536.
10. Loonen A.J.M., Jansz A.R., Stalpers J., Wolffs P.F.G., Van den Brule A.J.C. Comparative study using phenotypic, genotypic and proteomics methods for identification of coagulase-negative staphylococci // European Journal of Clinical Microbiology and Infectious Diseases. 2012. Vol. 31. No. 7. P. 1575-1583.
11. Новаков И.А., Навроцкий А.В., Дряби-на С.С., Малышева Ж.Н., Липатов С.В. Исследование структурообразования дисперсий активного ила в процессах уплотнения и флокуляции // Известия ВолгГТУ. 2007. Т. 5 (31). Вып. 4. С. 116-119.
12. Кобелева Й.В., Сироткин А.С., Вдовина Т.В., Петрова Е.В., Вознесенский Э.Ф., Мифта-хов И.С. Морфологический анализ активного ила в совместной биологической и реагентной
очистке сточных вод // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю.А. Овчинникова. 2017. Т. 13. N 2. С 17-23.
13. Кобелева Й.В., Кирилина Т.В., Сибиева Л.М., Сироткин А.С. Оценка кислородного баланса в процессах совместной биологической и реагентной очистки сточных вод // Вестник Казанского технологического университета. 2015. Т. 18. N 12. С. 191-193.
14. Бабушкина И.В., Бородулин В.Б., Коршунов Г.В., Пучиньян Д.М. Изучение антибактериального действия наночастиц меди и железа на клинические штаммы Staphylococcus aureus // Саратовский научно-медицинский журнал. 2010. Т. 6. N 1. С. 11-14.
15. Шугалей И.В., Гарабаджиу А.В., Илюшин М.А., Судариков А.М. Некоторые аспекты влияния алюминия и его соединений на живые организмы // Экологическая химия. 2012. Т. 21. N 3. С. 172-186.
16. Illmer P., Marschall K., Schinner F. Influence of available aluminium on soil microorganisms // Letters in Applied Microbiology. 1995. Vol. 21. No. 6. P. 393-397. DOI: https://doi.org/10.1111/j. 1472-765X.1995.tb01090.x
17. Wood M. A mechanism of aluminium tox-icity to soil bacteria and possible ecological implications // Plant and Soil. 1995. Vol. 171. Issue 1. P. 63-69.
18. Алексеева Л.С., Тюпа Д.В., Калёнов С.В., Панфилов В.И. Выделение и идентификация компонентов азотфиксирующего сообщества гранулированного аэробного активного ила, адаптированного к стрессу // Успехи в химии и химической технологии. 2014. Т. 28. N 4. С. 121-124.
19. Hu Y.L., Ribbe M.W. Historic Overview of Nitrogenase Research. Methods in Molecular Biology // Nitrogen Fixation. 2011. P. 3-7.
20. Juretschko S., Loy A., Lehner A., Wagner M. The microbial community composition of a nitrify-ing-denitrifying activated sludge from an industrial sewage treatment plant analyzed by the full-cycle rRNA // System. Appl. Microbiol. 2002. No. 25. P. 84-99.
21. Thomsen T.R., Kong Y., Nielsen P.H. Ecophysiology of abundant denitrifying bacteria in activated sludge // FEMS Microbiology Ecology. 2007. Vol. 60. No. 3. P. 370-382.
22. Mujahid T.Y., Subhan S.A., Wahab A., Masnoon J., Ahmed N., Abbas T. Effects of different physical and chemical parameters on phosphate solubilization activity of plant growth promoting bacteria isolated from indigenous soil // Journal of Pharmacy and Nutrition Sciences. 2015. Vol. 5. No. 1. P. 64-70.
23. Musarrat J., Khan Md.S. Factors affecting phosphate-solubilizing activity of microbes: current status // Phosphate solubilizing microorganisms. 2014. P.63-85.
24. Temme K., Zhao D., Voigt C.A. Refactoring the nitrogen fixation gene cluster from Klebsiel-
la oxytoca // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2012. Vol. 109. No. 18. P. 7085-7090.
25. Chung H., Park M., Madhaiyan M., Sesha-dri S., Song J., Cho H., Sa T. Isolation and characterization of phosphate solubilizing bacteria from the rhizosphere of crop plants of Korea // Soil Biology and Biochemistry. 2005. Vol. 37. No. 10. P. 1970-1974.
26. Jha P.N., Kumar A. Endophytic colonization of Typha australis by a plant growth - promoting bacterium Klebsiella oxytoca strain GR-3 // Journal of Applied Microbiology. 2007. Vol. 103. No. 4. P. 1311-1320.
27. Hamamura N., Olson S.H., Ward D.M. Inskeep W.P. Microbial population dynamics associated with crude-oil biodegradation in diverse soils // Appl. Environ. Microbiol. 2006. Vol. 72. No. 9. P.6316-6324.
28. Chen Y.P., Rekha P.D., Arun A.B., Shen F.T.,
Lai W.-A., Young C.C. Phosphate solubilizing bacteria from subtropical soil and their tricalcium phosphate solubilizing abilities // Applied Soil Ecology. 2006. Vol. 34. No. 1. P. 33-41.
29. Satyanarayana T. Microbial diversity: current perspectives and potential applications. New Delhi: I. K. International Publ. Pvt Ltd, 2005. 1133 p.
30. Inbar J., Chet I. Evidence that chitinase produced by Aeromonas caviae is involved in the biological control of soil-borne plant pathogens by this bacterium // Soil Biology and Biochemistry. 1991. Vol. 23. No. 10. P. 973-978.
31. Yousaf S., Afzal M., Reichenauer T.G., Brady C.L., Sessitsch A. Hydrocarbon degradation, plant colonization and gene expression of alkane degradation genes by endophytic Enterobacter ludwigii strains // Environmental Pollution. 2011. Vol. 159. No. 10. P. 2675-2683.
REFERENCES
1. Fytili D., Zabaniotou A. Utilization of sewage sludge in EU application of old and new methods - a review. Renewable and Sustainable Energy Reviews. 2008 vol. 12, no. 1, pp. 116-140.
2. Zhmur N.S. Tekhnologicheskie i biohimich-eskie processy ochistki stochnykh vod na sooru-zheniyakh s aerotenkami [Technological and biochemical processes of wastewater treatment at structures with aerotanks]. Moscow: AKVAROS Publ., 2003, 512 p.
3. Gulyaeva I.S., D'yakov M.S., Savinova YA.N., Rusakova V.A., Glushankova I.S. Analysis and justification of methods for neutralization and recycling of sewage sludge from biological treatment plants. Vestnik Permskogo natsional'nogo issledovatel's-kogo politekhnicheskogo universiteta. Okhrana okruzhayushchei sredy, transport, bezopasnost' zhiznedeyatel'nosti. 2012, no. 2, pp. 18-32. (In Russian)
4. Kallistova A.Yu., Pimenov N.V., Kozlov M.N., Nikolaev Yu.A., Dorofeev A.G., Aseeva V.G., Grachev V.A., Men'ko E.V., Berestovskaya YU.YU., Nozhevnikova A.N., Kevbrina M.V. Study of the microbial composition of activated sludge from the Moscow wastewater treatment. Mikrobiologiya. 2014, vol. 83, no. 5, pp. 615-625. (In Russian)
5. Zhang T., Shao M.-F., Ye L. Pyrosequenc-ing reveals bacterial diversity of activated sludge from 14 sewage treatment plants. The ISME Journal. 2012, vol. 6, no. 6, pp. 1137-1147.
6. Kobeleva I.V., Sirotkin A.S, Kirilina T.V., Sibieva L.M., Gadyeva A.A. Joint biological and physicochemical wastewater treatment using innovative dephosphating reagent. Part 2. Evaluation of biological wastewater treatment processes. Vestnik Kazanskogo tekhnologicheskogo universiteta. 2016, vol. 19, no. 16, pp. 133-135. (In Russian)
7. Sibieva L.M., Sirotkin A.S., Kobeleva I.V., Gadyeva A.A. Operational properties of activated sludge in technologies for combined biological and reagent waste water treatment and utilization of
precipitate. Vestnik Kazanskogo tekhnologicheskogo universiteta. 2016, vol. 19, no. 8, pp. 142-144. (In Russian)
8. Nikiforova L.O., Belopol'skii L.M. Vliyanie tyazhelykh metallov na protsessy biokhimicheskogo okisleniya organicheskikh veshchestv: teoriya i praktika [Influence of heavy metals on the processes of biochemical oxidation of organic substances: Theory and practice]. Moscow: Binom. Laboratoriya znanii, 2010, 78 p.
9. Scott J.S., Sterling S.A., To H., Seals S.R., Jones A.E. Diagnostic performance of matrixassisted laser desorption ionisation time-of-flight mass spectrometry in blood bacterial infections: a systematic review and meta-analysis. Infectious Diseases. 2016, vol. 48, no. 7, pp. 530-536.
10. Loonen A.J.M., Jansz A.R., Stalpers J., Wolffs P.F.G., Van den Brule A.J.C. Comparative study using phenotypic, genotypic and proteomics methods for identification of coagulase-negative staphylococci. European Journal of Clinical Microbiology and Infectious Diseases. 2012, vol. 31, no. 7, pp. 1575-1583.
11. Novakov I.A., Navrotskii A.V., Dryabina S.S., Malysheva ZH.N., Lipatov S.V. Investigation of the structure formation of dispersions of activated sludge in compaction and flocculation processes. Izvestiya Volgogradskogo gosudarstvennogo tekhnicheskogo universiteta. 2007, vol. 5 (31), issue 4, pp. 116-119. (In Russian)
12. Kobeleva I.V., Sirotkin A.S., Vdovina T.V., Petrova E.V., Voznesenskii EH.F., Miftakhov I.S. Morphological analysis of activated sludge in the joint biological and reagent sewage treatment. Vestnik biotekhnologii i fiziko-khimicheskoi biologii im. Yu.A. Ovchinnikova. 2017, vol. 13, no. 2, pp. 17-23. (In Russian)
13. Kobeleva I.V., Kirilina T.V., Sibieva L.M., Sirotkin A.S. Evaluation of the oxygen balance in the processes of joint biological and reagent wastewater treatment. Vestnik Kazanskogo tekhnologicheskogo
universiteta. 2015, vol. 18, no. 12, pp. 191-193. (In Russian)
14. Babushkina I.V., Borodulin V.B., Korshunov G.V., Puchin'yan D.M. Comparative study of antibacterial action of iron and copper nanoparticles on clinical Staphylococcus aureus strains. Saratovskii nauchno-meditsinskii zhurnal. 2010, vol. 6, no. 1, pp. 11-14. (In Russian)
15. Shugalei I.V., Garabadzhiu A.V., Il'yushin M.A., Sudarikov A.M. Some aspects of effect of aluminium and its compounds on living organisms. Ekologi-cheskaya khimiya. 2012, vol. 21, no. 3, pp. 172-186. (In Russian)
16. Illmer P., Marschall K., Schinner F. Influence of available aluminium on soil microorganisms. Letters in Applied Microbiology. 1995, vol. 21, no. 6, pp. 393-397. DOI: https://doi.org/10.1111/j. 1472-765X.1995.tb01090.x
17. Wood M. A mechanism of aluminium tox-icity to soil bacteria and possible ecological implications. Plant and Soil. 1995, vol. 171, issue 1, pp. 63-69.
18. Alekseeva L.S., Tyupa D.V., Kalenov S.V., Panfilov V.I. Isolation and identification of nitrogen-fixing community components of aerobic granular activated sludge adapted to stress. Uspekhi v khimii i khimicheskoi tekhnologii. 2014, vol. 28, no. 4, pp. 121-124. (In Russian)
19. Hu Y.L., Ribbe M.W. Historic Overview of Nitrogenase Research. Methods in Molecular Biology. Nitrogen Fixation. 2011, pp. 3-7.
20. Juretschko S., Loy A., Lehner A., Wagner M. The microbial community composition of a nitri-fying-denitrifying activated sludge from an industrial sewage treatment plant analyzed by the full-cycle rRNA. System. Appl. Microbiol. 2002, no. 25, pp. 84-99.
21. Thomsen T.R., Kong Y., Nielsen P.H. Ecophysiology of abundant denitrifying bacteria in activated sludge. FEMS Microbiology Ecology. 2007, vol. 60, no. 3, pp. 370-382.
22. Mujahid T.Y., Subhan S.A., Wahab A., Masnoon J., Ahmed N., Abbas T. Effects of different physical and chemical parameters on phosphate solubilization activity of plant growth promoting bac-
Критерии авторства
Сибиева Л.М., Дегтярева И.А., Сироткин А.С., Бабынин Э.В. выполнили экспериментальную работу, на основании полученных результатов провели обобщение и написали рукопись. Сибиева Л.М., Дегтярева И.А., Сироткин А.С., Ба-бынин Э.В. имеют на статью равные авторские права и несут равную ответственность за плагиат.
Конфликт интересов
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
teria isolated from indigenous soil. Journal of Pharmacy and Nutrition Sciences. 2015, vol. 5, no. 1, pp. 64-70.
23. Musarrat J., Khan Md.S. Factors affecting phosphate-solubilizing activity of microbes: current status. Phosphate solubilizing microorganisms. 2014,pp.63-85.
24. Temme K., Zhao D., Voigt C.A. Refactoring the nitrogen fixation gene cluster from Klebsiella oxytoca. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2012, vol. 109, no. 18, pp. 7085-7090.
25. Chung H., Park M., Madhaiyan M., Sesha-dri S., Song J., Cho H., Sa T. Isolation and characterization of phosphate solubilizing bacteria from the rhizosphere of crop plants of Korea. Soil Biology and Biochemistry. 2005, vol. 37, no. 10, pp. 1970-1974.
26. Jha P.N., Kumar A. Endophytic colonization of Typha australis by a plant growth - promoting bacterium Klebsiella oxytoca strain GR-3. Journal of Applied Microbiology. 2007, vol. 103, no. 4, pp. 1311-1320.
27. Hamamura N., Olson S.H., Ward D.M. Inskeep W.P. Microbial population dynamics associated with crude-oil biodegradation in diverse soils. Appl. Environ. Microbiol. 2006, vol. 72, no. 9, pp.6316-6324.
28. Chen Y.P., Rekha P.D., Arun A.B., Shen F.T., Lai W.-A., Young C.C. Phosphate solubilizing bacteria from subtropical soil and their tricalcium phosphate solubilizing abilities. Applied Soil Ecology. 2006, vol. 34, no. 1, pp. 33-41.
29. Satyanarayana T. Microbial diversity: current perspectives and potential applications. New Delhi: I. K. International Publ. Pvt Ltd, 2005, 1133 p.
30. Inbar J., Chet I. Evidence that chitinase produced by Aeromonas caviae is involved in the biological control of soil-borne plant pathogens by this bacterium. Soil Biology and Biochemistry. 1991, vol. 23, no. 10, pp. 973-978.
31. Yousaf S., Afzal M., Reichenauer T.G., Brady C.L., Sessitsch A. Hydrocarbon degradation, plant colonization and gene expression of alkane degradation genes by endophytic Enterobacter ludwigii strains. Environmental Pollution. 2011, vol. 159, no. 10, pp. 2675-2683.
Contribution
Liniza M. Sibieva, Irina A. Degtyareva, Alexander S. Sirotkin, Edward V. Babynin carried out the experimental work, on the basis of the results summarized the material and wrote the manuscript. Liniza M. Sibieva, Irina A. Degtyareva, Alexander S. Sirotkin, Edward V. Babynin have equal author's rights and bear equal responsibility for plagiarism.
Conflict of interests
The authors declare no conflict of interests regarding the publication of this article.
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ
Сибиева Линиза Мансуровна, СЕН
аспирант кафедры промышленной биотехнологии,
Казанский национальный исследовательский технологический университет, e-mail: liniza8@gmail.com
Дегтярева Ирина Александровна,
д.б.н., главный научный сотрудник,
Татарский НИИАХП - обособленное структурное
подразделение ФИЦ КазНЦ РАН,
Казанский национальный исследовательский
технологический университет,
e-mail: peace-1963@mail.ru.
Сироткин Александр Семенович,
д.т.н., профессор, заведующий кафедрой промышленной биотехнологии, Казанский национальный исследовательский технологический университет, e-mail: asirotkin66@gmail.com
Бабынин Эдуард Викторович,
к.б.н., доцент кафедры генетики, Институт фундаментальной медицины и биологии, Казанский (Приволжский) федеральный университет, e-mail: еdward.b67@mail.ru
AUTHORS' INDEX
Liniza M. Sibieva,®
Postgraduate Student of the Department
of Industrial Biotechnology,
Kazan National Research Technological University
e-mail: liniza8@gmail.com
Irina A. Degtyareva,
Dr. Sci. (Biology),Chief Researcher, Tatar Research Institute of Agrochemistry and Soil Science, Federal Research Center, Kazan Scientific Center of the Russian Academy of Sciences, Kazan National Research Technological University, e-mail: peace-1963@mail.ru.
Alexander S. Sirotkin,
Dr. Sci. (Engineering), Professor, Head of the Department of Industrial Biotechnology, Kazan National Research Technological University, e-mail: asirotkin66@gmail.com
Edward V. Babynin,
Ph.D. (Biology), Associate Professor,
Department of Genetics,
Institute of Fundamental Medicine and Biology,
Kazan Federal University,
e-mail: edward.b67@mail.ru
