CC BY
164
Биология
Вестник Нижегородского усниверситета им. Н.И. Лобачевского, 2008, № 6, с. 118-124
УДК 544.723.212:546.3:547.995.12
СОРБЦИЯ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ ВЫСШИМИ ГРИБАМИ И ХИТИНОМ РАЗНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ В ОПЫТАХ IN VITRO
© 2008 г. М.Е. Маркова г, В.Ф. Урьяш г, Е.А. Степанова г, А.Е. Груздева 2,
Н.В. Гришатова 2, В.Т. Демарин 3, А.Н. Туманова 3
1 Нижегородский госуниверситет им. Н.И. Лобачевского 2 ЗАО «Биофит», г. Нижний Новгород 3НИИ химии Нижегородского госуниверситета им. Н. И. Лобачевского
ltch@ichem. unn. rn
Поступила к редакцию 25.09.2008
Изучена сорбция некоторых тяжелых металлов из растворов их солей высшими грибами и хитином разного происхождения в опытах in vitro. Сопоставление сорбционной способности изученных объектов позволяет рекомендовать наиболее эффективный энтеросорбент в качестве средства профилактики негативного воздействия тяжелых металлов на организм человека, а также агента, доставляющего биологически активные вещества, полученные сверхкритической флюидной экстракцией, к органу-мишени.
Ключекые слока: тяжелые металлы, сорбция, энтеросорбенты, хитин, грибы, in vitro.
Введение
Проблема загрязнения биосферы тяжелыми металлами в настоящее время особенно значима. Тяжелые металлы являются распространенными компонентами выбросов транспорта и многих предприятий различных отраслей промышленности. Путем миграции по пищевым цепям эти металлы попадают в организм человека, вызывая единовременные или хронические отравления и приводя к серьезным нарушениям процессов обмена веществ и жизненно важных функций организма.
Тяжелые металлы оказывают повреждающее действие на разных структурных уровнях организма и трудно выводятся, поэтому актуальной проблемой является поиск эффективных энтеросорбентов, способных снизить их аккумуляцию в организме человека и оказывающих на него «мягкое» биологическое воздействие. Такими свойствами обладают сорбенты из природных продуктов, среди которых особое место занимает полисахарид хитин, благодаря таким его уникальным свойствам, как биосовместимость, биодеградируемость, нетоксичность и бактерицидность [1]. Хитин является основным структурным компонентом клеточных стенок грибов, наружных покровов ракообразных и насекомых. По мнению Л.Ф. Горового с соавторами [2, 3], грибы способны аккумулировать тяжелые металлы в количествах, превышающих их содержание в окружающей среде. Кроме то-
го, хитин может выполнять транспортные функции по доставке к органу-мишени биологически активных веществ, полученных, например, сверхкритической флюидной экстракцией [1, 4].
В связи с изложенным целью данной работы являлось изучение сорбции некоторых тяжелых металлов из растворов их солей высшими грибами и хитином разного происхождения в опытах in vitro. Исследование включало в себя изучение сорбции по отдельности цезия, стронция, свинца и кадмия из растворов их солей плодовыми телами гриба вешенки обыкновенной (Pleurotus ostreatus, Fr.), хитином из них, высушенными белыми грибами (Boletus edulis) и продуктом «Биофит» из них, крабовым «кристаллическим» хитином, а также совместной сорбции свинца и кадмия хитином из Pleurotus ostreatus. Сопоставление сорбционной способности изученных объектов позволяет рекомендовать наиболее эффективный энтеросорбент в качестве средства профилактики негативного воздействия тяжелых металлов на организм человека, а также агента, доставляющего биологически активные вещества, полученные сверхкритической флюидной экстракцией, к органу-мишени.
Материалы и методы исследования
Объектами наших исследований служили плодовые тела гриба вешенки обыкновенной
(Pleurotus ostreatus, класс Basidiomycetes) в ис-
ходном сыром и высушенном состояниях. Грибы были выращены в условиях теплицы Лесным технологическим центром «Биом» (г. Н. Новгород) на экспериментальной базе Нижегородской государственной сельскохозяйственной академии. По нашим данным, в сырой и высушенной биомассе грибов вешенки содержалось соответственно 93 и б мас.% воды. Определение содержания воды в биологических объектах проводили по методике [5]. Хитин из биомассы Pl. ostreatus выделяли по «холодной» методике [б], усовершенствованной нами [7-9]. Для этого высушенную биомассу грибов измельчали и просеивали через сито. Отбирали фракцию с размером частиц < 0.5 мм. Деминерализацию измельченной биомассы проводили действием на нее 5% водного раствора HCl в массовом соотношении 1:12. Смесь перемешивали в течение 1-1.5 часов, пока шло газовыде-ление. Полученный осадок промывали дистиллированной водой до нейтральной реакции. Затем воду из образца отфильтровывали, осадок промывали ацетоном и диэтиловым эфиром до тех пор, пока смыв с растворителем не становился прозрачным. Сушили образец в вакууме
0.б Па в течение 3-б часов. Для депротеиниро-вания остаток обрабатывали 5%-м водным раствором NaOH в массовом соотношении 1:12 с добавлением 0.5% додецилсульфата натрия. Раствор с осадком периодически перемешивали. Через 5-б часов его разбавляли дистиллированной водой в количестве, равном массе щелочного раствора. Затем осадок, как и после стадии деминерализации, промывали дистиллированной водой до нейтральной реакции, обезвоживали, промывали ацетоном и эфиром. Сушили хитин при 343 К в вакууме 0.б Па в течение 4 часов. Выход хитина составлял ~20 мас.% из шляпок и ~25 мас.% из ножек грибов.
Элементный анализ различных партий хитина, выполненный на анализаторе CHN-1 чешского производства по методике, описанной в [10], показал, что качественный и количественный состав повторяющегося звена его макромолекулы (C8H13O5N) соответствует формульному (С-47.3%; Н-б.4%; О-39.4%; N^.9%) с погрешностью 0.5%. Эксперименты, проведенные методом дифференциального термического анализа [9], показали, что в воздушно-сухом хитине содержится 11 мас.% воды, а полное обезвоживание его происходит при 428±4 К.
«Кристаллический» хитин (ТУ б44-14-170-89), предоставленный Центром «Биоинженерия» РАН, выделен из панцирей крабов путём деминерализации и депротеинирования. Степень
деацетилирования хитина равна 2-4%, молекулярная масса его 1.4-106, содержание воды в воздушно-сухом хитине 5.5 мас.%.
Исследовали высушенную биомассу белых грибов (Boletus edulis) и порошкообразный продукт из них, полученный в ЗАО «Биофит» (г. Н. Новгород) по запатентованной методике [11] путем криогенного измельчения в шаровой мельнице предварительно высушенных белых грибов. По нашим данным, в воздушно-сухом продукте криопорошка из биомассы белых грибов содержалось 3.4 мас.%, а в высушенной биомассе Boletus edulis - 9.4 мас.% сорбционной воды.
В качестве одного из методов анализа тяжелых металлов в исходных образцах был выбран атомно-эмиссионный [12]. Предел обнаружения составлял 1.540-6 мас.%. Относительное стандартное отклонение при определении содержания металлов атомно-эмиссионным методом не превышало 0.15.
Другим методом спектрального анализа был атомно-абсорбционный [13]. Его использовали при определении сорбционной способности изучаемого образца. Погрешность определения массы металла на спектрометре производства фирмы Регкт-Е1шег модели 603 составила 10%. Относительное стандартное отклонение равнялось 0.05.
Для изучения способности образцов сорбировать катионы металлов из водных растворов их солей (CsNO3, Sr(NO3)2, Pb(NO3)2, CdSO4) применяли разработанную нами методику, подробно описанную в работах [14-16]. Она заключалась в том, что создавались условия (рН, время, интенсивное перемешивание), приближающиеся к процессу переваривания пищи в желудке и кишечнике человека. В работе [2]
было показано, что анионы NO- и SO^ незначительно влияют на сорбцию свинца и кадмия.
Массовую долю катионов металлов, сорбированных изучаемыми образцами в отдельном опыте (юг-, мас. %), рассчитывали по формуле:
юг- = 100 • mt / mj ,
где mt - масса сорбированного металла, г; mj -масса металла, введенного в раствор, г.
Относительная погрешность величины юг-составила 10%. Массовую долю ионов металлов, сорбированных образцом (юср, мас.%), определяли как среднее значение всех опытов, проведенных для этого продукта [17]. Результаты представлялись в виде X ± S, где X - среднее арифметическое, S - ошибка среднего арифметического.
Результаты и их обсуждение
Определенное нами предварительно содержание металлов в высушенной биомассе вешенки, хитине из нее, а также пересчитанное на исходные, с 90 мас.% воды, грибы представлено в табл. 1. Как видно из табл. 1, количество меди, кадмия, свинца и цинка в высушенной биомассе грибов (мг/кг сорбента), в пересчете на исходную сырую биомассу, меньше ПДК (Си - 10.0, Cd - 0.1, РЬ - 0.4, Zn - 20.0 [18]). Обработки, которым подвергаются грибы при выделении из них хитина, приводят к снижению количества металлов в последнем, причем в разной степени. Сильнее всего уменьшается содержание ванадия (в 67 раз), а количество селена практически не изменяется.
Полученные экспериментальные результаты по сорбции тяжелых металлов высушенной и сырой биомассой грибов Р1. ostreatus представ-
лены в табл. 2, а усредненные значения - в табл. 3. Как видно из табл. 3, сухая биомасса Р1. ostreatus поглощала введенные в водный раствор металлы в количестве 24-76% от массы исходного металла. При этом средняя масса сухого остатка после проведения опыта составила 51% от первоначальной массы грибов (табл. 2). Из табл. 2 видно, что сырая биомасса Р1. ostreatus (90 мас.% воды) подвергается более сильному гидролизу, поэтому доля сухого остатка от твердого вещества, содержащегося в исходных грибах, составляет ~34%, и их способность сорбировать Sr, Cd и РЬ ниже, чем у сухих грибов. Во всех проведенных экспериментах отделение твердого остатка проводили фильтрованием под вакуумом. В наших предыдущих работах [14-16] было показано, что существует корреляция между массой сухого остатка продукта из растительного сырья и его способностью сорбировать свинец и кадмий из
Таблица 1
Содержание ряда металлов в сухой (I), сырой (II) биомассе гриба Р1 ostreatus и хитине (III) из них, мг/(кг сорбента)
Металл Си Мп Fe V Cd РЬ Сг Sn Cs Sr Se Zn
I 0.6 0.4 100 20 0.3 3.0 0.8 0.4 0.5 0.5 3.5 37.5
II 0.06 0.04 10 2.0 0.03 0.3 0.08 0.04 0.05 0.05 0.35 3.75
III 0.3 0.2 5.0 0.3 0.08 0.3 0.5 0.3 0.4 0.3 3.0 15
Таблица 2
Сорбция металлов из растворов их солей сухой, сырой биомассой гриба Р1. ostreatus
и хитином из него
Соль Масса вводимой соли, г Масса вводимого металла, г Масса сорбента, г Масса сухого остатка,г Масса сорбированного металла, г ю,, мас.%
Сухая биомасса гриба Р1. ostreatus
$г(Ы03)2 0.0193 0.0080 3.0282 1.45 0.0033 42
0.0019 0.0008 1.0526 0.53 0.0003 38
CsNO3 0.0191 0.0130 3.000 1.62 0.0029 22
0.0038 0.00265 1.000 0.52 0.0007 26
CdSO4 0.0195 0.0105 3.000 1.50 0.0042 40
РЬ(№03)2 0.0197 0.0123 3.000 1.52 0.0093 76
Сырая биомасса гриба Р1. ostreatus
Sr(NOз)2 0.0200 0.0083 10.0007 0.31 0.0021 25
CsNO3 0.0199 0.0136 5.9133 0.22 0.0027 20
0.0045 0.0031 8.0310 0.30 0.00074 24
CdSO4 0.0204 0.0110 10.0035 0.31 0.0030 27
РЬ(№Э3)2 0.0200 0.0125 4.7105 0.15 0.0050 40
0.0040 0.0025 8.3251 0.28 0.00115 46
Хитин из гриба Р1. ostreatus
Sr(NOз)2 0.0196 0.0081 1.7900 1.29 0.0035 43
0.0041 0.0017 1.8005 1.26 0.00076 45
0.0191 0.0130 1.7990 1.35 0.0026 20
CsNO3 0.0199 0.0136 1.8011 1.22 0.0024 18
0.0041 0.0028 1.8000 1.29 0.00056 20
CdSO4 0.0197 0.0106 1.7989 1.31 0.0085 80
0.0199 0.0108 1.7993 1.28 0.0088 82
РЬ(№Э3)2 0.0197 0.0123 1.7991 1.24 0.0101 82
0.0196 0.0123 1.7998 1.30 0.0106 86
растворов их солей. Чем больше масса сухого остатка, тем выше сорбционная способность продукта. Хитин из биомассы Р1. ostreatus лучше, чем сухая биомасса грибов, сорбирует свинец и кадмий (табл. 3). Масса сухого остатка у хитина из Р1. ostreatus также выше и составляет 71%. При этом сорбция цезия у всех трех продуктов в пределах погрешности определения одинаковая и наименьшая по сравнению с другими изученными металлами. В работе [1] не обнаружена сорбция хитином катионов натрия и наблюдается слабая сорбция катионов калия. Таким образом, можно констатировать, что у щелочных металлов при увеличении порядкового номера в периодической таблице Д.И. Менделеева сорбция их хитином увеличи-
вается. Как следует из табл. 2, 3, сорбция увеличивается в ряду Cs < Sr < Cd < РЬ. Аналогичную последовательность при сорбции свинца и кадмия хитин-целлюлозным материалом наблюдали авторы [19]. По их мнению, основным механизмом является хемосорбция. Т.Л. Залев-ская и А.К. Баев [20] также считают, что взаимодействие биомассы плодовых тел вешенки с ионами металлов происходит за счет хелатооб-разования.
В работе [21] при изучении сорбции ионов металлов (Ка, Mg, Са, Си и А1) древесной целлюлозой было обнаружено, что одновалентные ионы разрыхляют упорядоченную структуру целлюлозы, а двух- и трехвалентные, напротив, ее стабилизируют. Как видно из полученных
Таблица 3
Усредненные значения массовой доли металлов (юср), сорбированных сухой, сырой биомассой гриба
Р1 ostreatus и хитином из него
Соль | CsNO3 | Sr(NO3)2 1 CdSO4 Pb(NO3)2
Сухая биомасса гриба Pl. ostreatus
юср, мас.% 1 24±2 | 40±2 | 40±4 76±7
Сырая биомасса гриба Pl. ostreatus
юср, мас.% | 22±2 | 25±2 | 27±3 43±3
Хитин из гриба Pl. ostreatus
юср, мас.% | 19±1 | 44±1 | 81±1 84±2
Таблица 4
Данные опытов по определению способности хитина из гриба Р1 ostreatus сорбировать совместно свинец
и кадмий из водного раствора их солей
Соль Масса вводимой соли, г Масса вводимого металла, г Масса сорбента, г Масса сухого остатка, г Масса сорбированного металла, г ю,-, мас.%
Pb(NO3)2 +CdSO4* 0.005 0.005 0.0031 0.0027 1.7990 1.30 0.0026 0.0012 83 44
Pb(NO3)2 0.005 0.0031 1.8005 1.26 0.0023 73
+CdSO4** 0.005 0.0027 0.0013 48
* Фильтрование под вакуумом. ** Центрифугирование.
Таблица 5
Данные опытов по определению способности крабового «кристаллического» хитина сорбировать отдельно свинец и кадмий из водного раствора их солей
Соль Масса вводимой соли, г Масса вводимого металла, г Масса сорбента, г Масса сухого остатка, г Масса сорбированного металла, г ю,-, мас.% юcр, мас.%
Pb(NO3)2* 0.0173 0.0108 0.9998 0.91 0.0094 87 81±6
Pb(NO3)2* 0.0101 0.0063 1.0018 0.91 0.0051 81
Pb(NO3)2** 0.0165 0.0103 1.0011 0.83 0.0077 75
3CdS048Н20* 0.0175 0.0077 1.0001 0.89 0.0065 84 79±5
3CdS048Н20** 0.0182 0.0079 1.0005 0.79 0.0058 74
* Фильтрование под вакуумом.
** Центрифугирование.
нами данных, для хитина наблюдается обратная картина. Как показали проведенные нами калориметрические исследования, хитин из биомассы Pl. ostreatus обладает менее упорядоченной структурой, чем целлюлоза [7, 9, 22].
Нами была изучена также совместная сорбция Pb и Cd из растворов их солей хитином из биомассы Pl. ostreatus (табл. 4). При этом отделение твердого остатка проводили двумя методами - фильтрованием под вакуумом и центрифугированием. Получили, что доля сорбированного свинца уменьшается не сильно (78±5 мас.%), а кадмия - существенно (46±2 мас.%). Ранее нами [14-16] было показано, что при совместной сорбции Pb и Cd криопорошками «Биофит» из растительного сырья количество связанного свинца увеличивалось, а кадмия уменьшалось.
Было исследовано также влияние источника хитина на его способность сорбировать по отдельности свинец и кадмий из водных растворов их солей в опытах in vitro. Для этого взяли крабовый «кристаллический» хитин. По нашим калориметрическим данным [7-9, 22] он имеет более упорядоченную структуру по сравнению с грибным хитином. Об этом свидетельствуют также данные работы [4]. Полученные результаты представлены в табл. 5. Как видно из табл. 5, крабовый «кристаллический» хитин сорбирует из растворов солей 81±6 мас.% свинца и 79±5 мас.% кадмия. Масса твердого остатка после обработки составляет около 87% от
исходной массы сорбента, что свидетельствует о меньшей степени его гидролиза по сравнению с грибным хитином. Таким образом, по сорбционной способности свинца и кадмия хитин из различных источников различается незначительно. По-видимому, возможное снижение сорбционной способности у более упорядоченного крабового хитина компенсируется большей массой твердого остатка после его гидролиза в кислой и щелочной среде.
В литературе имеются указания [2, 3] на то, что хитин связывает ионы металлов в результате комплексообразования, ионного обмена или поверхностной сорбции, т.к. в его макромолекуле присутствуют карбоксильные, гидроксильные и ацетамидные группы. Способность хитина к комплексообразованию объясняется высокой электронодонорной способностью атомов азота и кислорода. Проведенный в работе [23] методом молекулярной механики при использовании программы Нурег^ет расчет процесса комплексообразования хитина со свинцом показал, что минимальным значением потенциальной энергии (-125.9 кДж/моль) обладает хелатный комплекс, образованный атомом свинца, кислородом гидроксильной группы при С-3 и эфирным кислородом в пиранозном цикле.
Из грибов могут быть приготовлены ценные биологически активные добавки к пище (БАД). Эти БАД способны выполнять роль энтеросорбентов. Поэтому нами была изучена сорбция
Таблица 6
Содержание металлов в сухой биомассе грибов Boletus edulis (I) и криопорошке «Биофит» из них (II), мг/(кг сорбента)
Металл Cu Mn Fe V Cd Pb Cr Sn Cs Sr Se Zn
I 2.8 25 30 0.4 0.4 0.5 1.4 0.3 60 2.0 15 120
II 2.5 20 10 0.3 0.1 0.3 1.0 0.2 35 0.6 3.9 15
Таблица 7
Сорбция свинца и кадмия из растворов их солей сухой биомассой грибов Boletus edulis и криопорошком «Биофит» из них
Соль Масса вводимой соли, г Масса вводимого металла, г Масса сорбента, г Масса сухого остатка, г Масса сорбированного металла, г ю,-, мас.% юср, мас.%
Сухая биомасса Boletus edulis
Pb(NO3)2 0.0300 0.0152 0.0188 0.0095 1.8005 1.7989 1.14 1.03 0.0081 0.0048 43 51 47±4
CdSO4 0.0298 0.0161 1.7993 1.07 0.0103 64 62±2
0.0168 0.0091 1.8007 1.05 0.0055 60
Криопорошок «Биофит» из Boletus edulis
Pb(NO3)2 0.0304 0.0190 1.7989 0.94 0.0112 59 58±1
0.0151 0.0094 1.7997 0.87 0.0054 57
CdSO4 0.0301 0.0162 1.8003 1.01 0.0105 65 59±4
0.0156 0.0084 1.8006 0.93 0.0044 53
свинца и кадмия биомассой белых грибов (Boletus edulis) и криопорошком «Биофит» из них. Определенное нами содержание металлов в воздушно-сухих грибах Boletus edulis и криопорошке «Биофит» из них представлено в табл. б. Как видно из табл. б, содержание меди, цинка, свинца и кадмия в воздушно-сухих Boletus edulis в пересчете на сырую биомассу с 90 мас.% воды меньше ПДК [18]. Криообработка снижает содержание тяжелых металлов в продукте. Полученные результаты по сорбции по отдельности свинца и кадмия высушенной биомассой Boletus edulis и криопорошком «Биофит» представлены в табл. 7. Среднее значение сорбции криопорошком «Биофит» из Boletus edulis составляет для свинца 58, для кадмия 59 мас.%. Как видно из табл. 7, продукт «Биофит» из Boletus edulis хорошо и практически одинаково сорбирует свинец и кадмий из раствора. Он несколько больше сорбирует свинца, чем высушенные Boletus edulis. Таким образом, на сорбцию кадмия криогенная обработка не влияет, а сорбция свинца увеличивается на ~11%. Масса остатка, получающегося при моделировании процессов, происходящих в желудке и кишечнике человека, составляет для криопорошка «Биофит» ~52%, а для Boletus edulis 59 мас.% от массы исходного продукта. Это свидетельствует о том, что криогенная обработка облегчает гидролиз продукта и, вероятно, улучшает переваривание грибов в желудочно-кишечном тракте человека.
Криопорошок «Биофит» из Boletus edulis сорбирует больше кадмия и меньше свинца по сравнению с сухой биомассой Pl. ostreatus (табл. 3, 7). Таким образом, наиболее хорошими сорбентами из изученных нами являются грибной и крабовый хитин.
Необходимо отметить еще одну особенность грибов. В них был обнаружен селен (табл. 1, б). Причем в грибах Pl. ostreatus его содержание составляет 3.5, а в Boletus edulis - 15 мг/(кг продукта). Он также сохраняется в хитине (3.0 мг/кг) и криопорошке «Биофит» (3.9 мг/кг) из них. Проведенные специальные опыты по определению количества селена в криопорошке «Биофит» из Boletus edulis показали, что при кислотно-щелочном гидролизе данного продукта от 50 до 70% содержащегося в нем Se переходит в раствор. По данным [24], адекватный уровень потребления селена человеком составляет 70 мкг/сутки. Поэтому как грибы, так и продукты их них могут служить поставщиками в организм человека такого ценного микроэлемента, как селен.
Заключение
В результате проведенных исследований было показано, что наиболее хорошими сорбентами из изученных нами являются грибной и крабовый хитин, поэтому их можно рекомендовать в качестве наиболее эффективных энтеросорбентов тяжелых металлов, а также агента, доставляющего биологически активные вещества, полученные сверхкритической флюидной экстракцией, к органу-мишени в организме человека.
Наблюдается увеличение сорбции в ряду Cs < Sr < Cd < Pb высушенной, сырой биомассой грибов Pl. ostreatus и хитином из них. Изучение совместной сорбции хитином из Pl. ostreatus показало, что доля сорбированного свинца уменьшается не сильно, а кадмия - существенно (в 1.8 раза), т.е. между металлами существует конкуренция.
Криогенная обработка при получении биологически активной добавки к пище «Биофит» из грибов Boletus edulis облегчает гидролиз продукта и, вероятно, улучшает переваривание грибов в желудочно-кишечном тракте человека.
Проведенные исследования показали, что в грибах Pl. ostreatus и Boletus edulis содержится селен, соответственно 3.5 и 15 мг/(кг продукта). Он также сохраняется в хитине (3.0 мг/кг) и криопорошке «Биофит» (3.9 мг/кг) из них. Поэтому данные продукты могут служить поставщиками селена в организм человека.
Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ по гранту № 08-03-97052р_поволжье_а.
Список литературы
1. Маслова Г.В. Теория и практика получения хитина электрохимическим способом // В кн.: Хитин и хитозан: Получение, свойства и применение / Под ред. К.Г. Скрябина, Г.А. Вихоревой, В.П. Варламова. М.: Наука, 2002. С. 24-43.
2. Горовой Л.Ф., Косяков В.Н. Сорбционные свойства хитина и его производных // Там же. С. 217-246.
3. Косяков В.Н., Велешко И.Е., Яковлев Н.Г. и др. Сорбция радионуклидов хитиновыми сорбентами различного происхождения // Матер. 7-й Междунар. конф. «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана». СПб.: ВНИРО, 2003. С. 320-323.
4. Феофилова Е.П. Ключевая роль хитина в образовании клеточной стенки грибов // В кн.: Хитин и хитозан: Получение, свойства и применение / Под ред. К.Г. Скрябина, Г.А. Вихоревой, В.П. Варламова. М.: Наука, 2002. С. 91-111.
5. Препараты биологические сухие. Методы определения влажности. ГОСТ 24061-89. 1990.
6. Гамзазаде А.И., Скляр А.М., Рогожин С.В. Некоторые особенности получения хитозана // Высо-комолек. соедин. 1985. Т. А27, № 6. С. 1179-1183.
7. Урьяш В.Ф., Кокурина Н.Ю., Маслова В.А. и др. Калориметрическое исследование хитина из грибов и его смесей с водой // Вестник ННГУ. Серия Химия. Нижний Новгород: ННГУ, 1998. Вып. 1. С. 165-170.
8. Урьяш В.Ф. Термодинамика хитина и хитоза-на // В кн.: Хитин и хитозан: Получение, свойства и применение / Под ред. К.Г. Скрябина, Г.А. Вихоревой, В.П. Варламова. М.: Наука, 2002. С. 119-129.
9. Урьяш В.Ф. Химическая термодинамика биологически активных веществ и процессов с их участием. Дис... доктора химич. наук. Н. Новгород: НИИ химии ННГУ, 2005. 390 с.
10. Методы количественного органического элементного микроанализа / Н.Э. Гельман, Е.А. Терентьева, Т.М. Шанина и др. М.: Химия, 1987. 296 с.
11. Груздева А.Е., Потемкина Е.В., Гришато-ва Н.В., Крот А.Р. Способ получения пищевой добавки из растительного сырья. Пат. РФ № 2110194 от 10.05.98. Приоритет от 03.06.97.
12. Спектральный анализ чистых веществ / Под ред. Х.И. Зильбернштейна. СПб.: Химия, 1994. 336 с.
13. Прайс В. Аналитическая атомно-абсорбционная спектроскопия. М.: Мир, 1976. 355 с.
14. Урьяш В.Ф., Груздева А.Е., Плетнева Н.Б. и др. Изучение процесса сорбции свинца и кадмия рядом продуктов из растительного сырья // Химия, технология и промышленная экология неорганических соединений: Сб. науч. тр. Пермь: ПГУ, 1999. Вып. 2. С. 56-59.
15. Урьяш В.Ф., Степанова Е.А., Гришатова Н.В. и др. Исследование процесса сорбции тяжелых металлов пищевыми добавками «Биофит» // Вестн. ННГУ. Сер. Биология. Н. Новгород: ННГУ, 2004. № 3(5). С. 85-91.
16. Степанова Е.А., Урьяш В.Ф., Силкин А.А. и др. Исследование сорбции и выведения свинца биологически активными добавками к пище в опытах т
vitro и in vivo // Поволжский экологический журнал. 2005. № 1. С. 71-75.
17. Батунер Л.М., Позин М.Е. Математические методы в химической технике. М.; Л.: Госхимиздат, 1953. 447 с.
18. Гигиенические требования к качеству и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов. СанПин 2.3.2.560-76. 1976. 75 с.
19. Dao Zhou, Lina Zhang, Jinping Zhou, Shenlian Guo. Cellulose/chitin beads for adsorption of heavy metals in aqueous solution // Wuhan Univ. J. Natural Sci. 2004. V. 9. P. 301-312.
20. Залевская Т.Л., Баев А.К. Взаимодействие ионов меди(П), свинца(П) и ртути(П) с биомассой гриба вешенки обыкновенной // Координационная химия. 1996. Т. 22, № 6. С. 499-501.
21. Смирнова Л.Г. Синтез, исследование и применение адсорбентов на основе целлюлозы для концентрирования ионов металлов // Каталог реф. и статей Междунар. форума «Аналитика и аналитики». Воронеж: ВГТА, 2003. Т. 2. С. 521.
22. Урьяш В.Ф., Кокурина Н.Ю., Ларина В.Н. и др. Зависимость термодинамических и сорбционных свойств хитина и хитозана от их происхождения и степени упорядоченности // Матер. 9-й Ме-ждунар. конф. «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана». М.: ВНИРО, 2008. С. 113-115.
23. Солодовник Т.В., Унрод В.И., Минаев Б.Ф., Пахарь С.А. Теоретическое исследование механизма комплексообразования в системе хитин - Pb(II) // Матер. 8-й Междунар. конф. «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана». М.: ВНИРО, 2006. С. 130-132.
24. Методические рекомендации МР 2.3.1.1915-04. Рациональное питание. Рекомендуемые уровни потребления пищевых и биологически активных веществ. М.: Госсанэпиднадзор РФ, 2004. С. 21.
SORPTION OF HEAVY METALS BY HIGHER FUNGI AND CHITIN OF DIFFERENT ORIGIN IN IN VITRO EXPERIMENTS
M.E. Markova, V.F. Uryash, E.A. Stepanova, A.E. Gruzdeva, N.V. Grishatova,
V. T. Demarin, A.N. Tumanova
The sorption of some heavy metals from solutions of their salts by higher fungi and chitin of different origin in in vitro experiments has been studied. The comparison of sorption ability of the objects studied makes it possible to recommend the most efficient enterosorbent as a preventive agent against negative effects of heavy metals upon the human organism as well as an agent delivering biologically active substances prepared by supercritical fluid extraction to a target organ.
