CC BY
37
EFFECTS OF UHF THERAPY ON LYMPHOCYTE-PLATELET ADHESION AND IL-1B, TNFA, IL-4 CONTENTS IN PATIENTS WITH CHRONIC VEIN INSUFFICIENCY
I. V Nardina, D.B. Nardin, Yu.A. Vitkovsky (Chita State Medical Academy)
^e aim was to study the lymphocyte-platelet adhesion in patients with chronic vein insufficiency, ^e study was performed in 66 patients, who were divided in 2 groups, 35 patients received 10 procedures of Ultra High Frequency (UHF) therapy, 31 — conservative therapy only, It was established that lymphocytes’ ability to form contacts with platelets decreased in patients with chronic vein insufficiency and IL-1 p, TNFa, IL-4 concentrations increased. UHF therapy stimulated the lymphocyte-platelet adhesion, IL-4 production and decreased the IL-1 p, TNFa levels,
ЛИТЕРАТУРА
1. Витковский Ю.А.. Кузник Б.И.. Солпов А.В. Феномен лимфоцитарно-тромбоцитарного розетко-образования // Иммунология. — 1999. — № 4. — С. 35 — 37.
2. Витковский Ю.А.. Солпов A.B.. Кузник Б.И. Влияние цитокинов на лимфоцитарно-тромбоцитар-ную адгезию // Медицинская иммунология. — 2002.-Т.4, № 2. — С. 135-136.
3. Витковский Ю.А.. Солпов A.B.. Шенкман Б.З.. Кузник Б.И. Влияние интерлейкинов 1ß, 2, 10 и 16 на взаимодействие лимфоцитарно-тромбоцитар-ных агрегатов с экстрацеллюлярным матриксом // Иммунология. — 2006. — № 3. — С. 141-143.
4. Витковский Ю.А.. Кузник Б.И.. Солпов A.B. Патогенетическое значение лимфоцитарно-тромбо-цитарной адгезии // Медицинская иммунология. — 2006. — Т. 8. — № 5 — 6. — С. 745 — 753.
5. Киричук В.Ф.. Семенова С.В.. Паршина С.С. и др Влияние сочетанного воздействия лазера и ЭМИ КВЧ диапазона на некоторые показатели системы свертываемости крови у больных острым инфарктом миокарда // Миллиметровые волны в медицине. Сборник статей. Под ред. Н.Д. Девяткого, О.В. Бецкого. Т. 1. — М.,1991. — С. 225-228.
6. Кузник Б.И.. Витковский Ю.А.. Солпов А.В. Адгезивные молекулы и лейкоцитарно-тромбоцитар-ные взаимодействия // Вестник гематологии. — 2006. — т. II. — № 2. — С. 42 — 55.
7. Солпов А.В. Влияние про— и противовоспалительных цитокинов на лимфоцитарно-тромбоцитар-
Hyro aflre3Mm // 3a6anKanbCKMM MeflM^HCKMM BecTHMK — 2002. — №1. — C. 14-17.
8. Connoe A.B. BnnflHMe ^tokmhob Ha ÆMM^o^Tap-HO-TpoM6o^TapHyro aflre3Mro // TpoM6o3, reMOCTa3, peo-norafl. -2002.— № 1.-C. 34-36.
9. Hepemnoe B.A., Tycee E№. MMMyHonorafl Bocnane-hma: ponb ^tokmhob // Mefl. MMMyHonorafl. — 2001. — T.3. — C. 361 — 368.
10. Browder T., Folkman J., Pirie-Shepherd S. ^e hemostatic system as a regularor of angiogenesis. // J. Biol. Chem. — 2000. — vol. 275. — P. 1521-1524.
11. Shenkman B., Brill G., Solpov A. CD4+ lymphocytes require platelet for adhesion to immobilized fibronectin in flow: Role of (CD29)-, P^ (CD18) related integrins and non-integrin receptors // Cellular Immunology. — 2006. — vol. 242 (1). — P. 52 — 59.
12. Solpov A., Shenkman B., Vitkovsky Yu., et al. Platelets enhance CD4+ lymphocyte adhesion to extracellular matrix under flow conditions: Role of platelet aggregation, integrins, and non-integrin receptors // Thrombosis and Haemostasis. — 2006. — vol. 95. — P. 815-821.
13. Solpov A. Platelets enhance CD4+ lymphocyte adhesion to extracellular matrix: role of CD40 ligand and P-selectin glycoprotein ligand / A. Solpov, B. Shenkman, Yu. Vitkovsky, B. Kuznik // TpoM6o3, reMOCTa3 m peono-rMfl. — 2004. — № 4. — C. 25 — 27.
14. Verheul H.M.W., Hoekman K., Lukx-de Bakker S. et al. Platelet: Transporter of vascular endothelial growth factor // Clinical.Can.Res. — 1997. — vol. 3. — P. 2187 — 2190.
© ИЗАТУЛИН В.Г., БУЛАНКИНА И.А., АРСЕНТЬЕВА Н.И., ЛЕБЕДИНСКИЙ В.Ю., МАЛЫШЕВ В.В. — 2007
СОПОСТАВИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ИЗМЕНЕНИЙ СТРУКТУР КОЖИ И ИХ БИОМЕХАНИЧЕСКИХ СВОЙСТВ
В ДИНАМИКЕ ТЕРМИЧЕСКОГО ВОСПАЛЕНИЯ
В.Г. Изатулин, И.А. Буланкина, Н.И. Арсентьева, В.Ю. Лебединский, В.В. Малышев (Иркутский государственный медицинский университет, ректор — д.м.н., проф. И.В. Малов, кафедра гистологии, цитологии и эмбриологии, зав. — д.б.н., проф. Л.С. Васильева, кафедра анатомии человека, зав. — к.м.н., доц. Т.И. Шалина; Научный центр реконструктивной и восстановительной хирургии ВСНЦ СО РАМН, директор — член-корр. РАМН, проф. Е.Г. Григорьев)
Резюме. Проведенное исследование показало, что динамика изменений морфофункциональных свойств и биомеханических характеристик структур кожи при термическом воспалении разной степени имеет как общие закономерности, так и особенности развития, определяемые интенсивностью воздействия альтерирующего фактора. Изучение напряженно-деформированных состояний структур кожи посредством измерения внутрикожного давления позволяет не только проследить динамику воспалительного процесса, но и является интегративным показателем различной степени повреждения её структур, что дает возможность, в последующем, своевременно корректировать тактику лечебных манипуляций.
Ключевые слова: термический ожог, морфология, биомеханика структур кожи.
В динамике развития воспалительной реакции любого генеза происходит последовательная смена альтеративных и пролиферативных процессов в органе [2, 3, 4], которые активнейшим образом влияют на его биомеханические (напряжённо-деформированные состояния) характеристики и изменяют обе составляющие (твердое и жидкостное) вну-трикожного давления (ВКД). Их взаимодействие и определяет его суммарную величину [5, 6]). Однако, в доступной литературе, мало работ по сопоставительному изучению динамики морфологических и биомеханических изменений структур кожи при термическом ожоге и выяснению их взаимосвязи, что не позволяет разработать эффективные и адекватные способы экспресс-оценки и диагностики её морфофункционального состояния с целью коррекции лечебного процесса.
Материалы и методы
Работа выполнена на 141 беспородном белом крысе-самце массой 130-150 граммов. У 132 животных моделировались очаги воспаления (1, 2, 3«а», 3«б», 4 степени ожога) путем воздействия термического фактора: под эфирным наркозом на кожу спины наносили наконечником паяльника по 2 симметричных ожога с расстоянием 2 см друг от друга, время воздействия соответственно
0,5сек., 1сек., 2сек., 4сек., 8сек. при 1=250°С [7]). Девять интактных животных служили контролем. Животных выводили из эксперимента путем декапитации через 1, 12 часов и 1, 3, 5, 7, 10, 15, 30 суток. Условия содержания и обращения с экспериментальными животными соответствовали «Правилам проведения работ с использованием экспериментальных животных», утвержденных приказом М3 СССР № 755 от 12.08.1977г.
Исследование морфофункциональных свойств кожи осуществлялось комплексом методов, включавшим: гистологическое изучение (окраски: гематоксилин-эозином, пикрофуксином по Ван-Гизон и на коллаген по М.К. Васильцову [1]); морфометрию. У каждого экспериментального животного измерение ВКД осуществлялось как перед опытом, так и при выведении животных из эксперимента. В центре трех очагов измеряли ВКД, а четвёртый — брали для гистологического исследования. Материал обработан с применением программ Microsoft Excel 2000, использовался корреляционный анализ по С...у... t-критерий Стьюдента. Критичекий уровень значимости при проверке гипотез р<0,05.
Результаты и обсуждение
При изучении очага термического ожога были выявлены четкие и последовательные изменения морфофункционального состояния структур кожи в различные сроки и периоды течения воспалительного процесса.
Так, при морфологическом исследовании кожи при ожоге 1-й степени выявлено разрушение ядер зернистого и шиповатого слоев эпидермиса, полнокровие капилляров, повышение относи-
тельного объёма основного вещества, единичные кровоизлияния в сосочковом слое дермы. Эти изменения структур влияют на величину ВКД и к 1-му часу от начала эксперимента она повышается на 30 — 40%, что достоверно (Р < 0,05) выше её значений в контроле. В дальнейшем, величина ВКД снижается и к концу 3-х суток достигает контрольных цифр.
Морфологические изменения при ожоге 2й степени более выражены и характеризуются большей отёчностью и гиперемией кожи. Реакция тканей на воздействие альтерирующего фактора уже распространяется и на сетчатый слой дермы. Гистологически выявляется слабо оксифильная жидкость между ростковым и вышележащими слоями кожи. Изучение биомеханических свойств кожи при этой степени ожога выявило более значимое повышение величины ВКД (1-й час от начала термического воздействия) на 40 — 50%, что достоверно (Р < 0,05) превышает значения этого показателя не только в контроле, но и при ожоге 1-й степени. В последующем (3-и сутки) величина показателя снижается на 30 — 40% , а нормализация его происходит к концу 7-х суток эксперимента.
При ожоге 3-й «а» степени микроскопически дерма кожи выглядит полнокровной и отечной. На момент травмы отмечается гибель эпидермиса. В дальнейшем, верхние слои кожи подвергаются некрозу, что сопровождается их инфильтрацией большим количеством нейтрофильных лейкоцитов. На 7-е сутки воспалительной реакции кожа превращается в тонкую «корочку», покрытую струпом. На 5-10 сутки эксперимента наблюдается уменьшение сосудистых реакций и снижение посттравматического отека (табл. 1), показатели относительного объема основного вещества достоверно не различаются. К 10-м суткам воспаления выявляется максимальное увеличение клеточных элементов, количество которых в последующем (к 30-м суткам) уменьшается до значений в контроле. 3начимое увеличение относительного объема со-единительно-тканных волокон отмечается только на 30 сутки и связано с формированием грубого рубца. Величина ВКД (1-й час) ещё более (р < 0,05) повышалась на 50-70% по сравнению с контролем. В дальнейшем, она снижается (3-и сутки) на 4050%. Однако, в последующие сроки воспаления её характеристики друг от друга достоверно не отличаются, находятся на одном уровне и к концу эксперимента (30-е сутки) достоверно (р < 0,05) превышают данные в контроле на 20-30%.
Таблииа № 1
Изменения относительного объема структур кожи при термическом воспалении 3 «а» степени (в %)
Сроки Основное вещество Соед,- тканные клетки Соед,- тканные волокна Сосуды кожи Производные кожи
Контроль 28,92+0,95 20,0+0,56 35,5+0,83 5,0+0,56 10,5+0,64
1 час 38,4+0,2 22,0+0,26 31,0+0,45 3,6+0,27 4,4+0,34
12час 35,3+0,32 24,3+0,47 30,6+0,32 3,8+0,31 4,6+0,32
1сут 33,1+0,79 26,1+0,52 30,0+0,25 5,5+0,23 4,7+0,24
3 сут 25,0+0,6 32,0+0,39 33,3+0,33 4,7+0,24 5,0+0,23
5 сут 28,4+0,46 34,5+0,26 30,0+0,25 3,3+0,17 3,6+0,15
7 сут 26,4+0,29 36,5+0,32 29,7+0,28 3,3+0,17 4,2+0,16
10 сут 28,0+0,35 47,8+0,31 24,5+0,25 3,0+0,19 3,0+0,17
15 сут 26,1+0,32 36,4+0,26 28,6+0,28 4,2+0,16 4,7+0,15
30 сут 27,0+0,32 23,3+0,22 38,9+1,06 4,4+0,34 6,4+0,32
Mopфoлoгичecкaя ^pram oжoгa 3-й «б» сте-нєни єщє бoлee выpaжeнa и нaблюдaeтcя нeкpoз нє толь^ энидepмиca, нo и вcex cлoëв кoжи. K 7-м cyткaм m гpaницe нeкpoтизиpoвaннoй дepмы c нoдлeжaщими ткaнями pacнoлaгaeтcя лей^ци-тapный вaл c бoльшим кoличecтвoм фибpoблa-cтoв. Cнycтя 30 cyтoк oт нaчaлa экcнepимeнтa нeкpoтичecкиe мaccы нoлнocтью oтxoдят. Ha днє цeнтpaльныx oтдeлoв pa^i oтмeчaeтcя фибpoзный экccyдaт. Бoльшaя чacть paны нoкpытa 5-7 cлoями peгeнepиpyющeгo энитeлия. В нoдлeжaщeй шеди-нитeльнoй ткaни выявляeтcя бoльшoe кoличecтвo фибpoблacтoв и нлoтнo yнaкoвaнныx кoллaгeнo-вых вoлoкoн. Hoвooбpaзoвaннaя coeдинитeльнaя ткaнь бедт cocyдaми, нpидaтки кoжи в нєй oTOy^ cтвyют. Измepeниe ВKД в нaчaлe экcнepимeнтa (l-й чac) выявляeт eщë бoльшиe eë вєличиньі нo cpaв-нєнию c oжoгoм 3-й «a» cтeнeни и их нpeвышeниe нa 70 — 90% иcxoдныx знaчeний. В дaльнeйшeм (le cyтки), нaблюдaeтcя cнижeниe eë вєличиньі, xoтя oнa дocтoвepнo (p < 0,05) выше дaнныx нpи oжoгe 3-й «a» cтєнєни. Ha нpoтяжeнии нєpиoдa нpoлифe-paции oни нo cpoкaм экcнєpимєнтa мєжду coбoй дocтoвєpнo не paзличaютcя. Oднaкo, к ^нцу 30-х cyтoк экcнepимeнтa величин ВKД дocтoвepнo (P <
0,05) нoвышaeтcя нa 30 — 40%, нpeвышaя знaчeния кaк в кoнтpoлe, тaк и нpи oжoгe 3-й «a» ^енени.
Пpи oжoгe 4 стенени мopфoлoгичecкиe изменения ^жи нaибoлee выpaжeны, xapaктepизyютcя нeкpoтизaциeй вcex eë cлoëв и нoдлe-жaщиx oбpaзoвaний. Oни зaвepшaютcя oбpaзoвaниeм бoлee гpyбoгo pyбцa. В т-чaлe вocнaлитeльнoгo нpoцecca (l-й чac) величин ВKД дocтигaлa мaкcимaльныx знaчeний — бoлee 90% oт нapaмeтpoв eë в кoнтpoлe. В нocлeдyющeм, om тосте-нeннo yмeньшaлacь, xoтя к 30-м cyткaм экcнepимeнтa eщë cyщecтвeннo нpeвы-шaлa eë знaчeния в кoнтpoлe нa 40-50%.
Пoлyчeнныe peзyльтaты нoкaзывaют, чтo динaмикa изменений мopфoфyнк-циoнaльныx cвoйcтв и биoмexaничecкиx xapaктepиcтик cтpyктyp кoжи нpи oжoгe paзнoй cтeнeни имеет кaк oбщиe зaкoнoмepнocти, тaк и ocoбeннocти paзвития, oнpeдeляeмыe интенотв-нocтью вoздeйcтвия aльтepиpyющeгo фaктopa (pиc. l);
1) чем отльнее oжoг, тем бoлee выpaжeны мop-фoлoгичecкиe изменения cтpyктyp кoжи в зoнe то-paжeния не толь^ нa мoмeнт eгo вoзникнoвeния, то и в динaмикe paзвития вocнaлeния, тем бoль-ших знaчeний дocтигaeт вeличинa ВKД;
2) нpи oжoгax l-й и 2-й cтeнeни (без to^o-тичecкиx изменений в зoнe нoвpeждeния) ^py^ тypa кoжи в ^нце нaблюдeния нpaктичecки не oтличaeтcя oт eë cтpoeния в интaктныx yчacткax, a вeличинa ВKД вoзвpaщaeтcя к иcxoдным зтче-ниям cooтвeтcтвeннo к кoнцy 3-х и 7-х cyтoк эк^ нepимeнтa;
3) oжoги 3-й и 4-й cтeнeни, coнpoвoждaющиecя нeкpoзoм кoжныx нoкpoвoв paзличнoй выpaжeн-нocти, имеют выpaжeннyю нpoлифepaтивнyю фaзy вocнaлитeльнoгo нpoцecca, xapaктepизyютcя знaчимым втopичным нoвышeниeм величин вну-тpикoжнoгo дaвлeния в зoнe нoвpeждeния — в не-pиoд фopмиpoвaния гpyбoгo фибpoзнoгo pyбцa.
Cлeдyeт oтмeтить, чтo нepecтpoйкa мopфoлoги-
чecкиx cвoйcтв и биoмexaничecкиx xapaктepиcтик cтpyктyp кoжи в дитамике oжoгoвoгo нpoцecca cинxpoнизиpoвaнa c нapacтaниeм интeнcивнocти вoздeйcтвия aльтepиpyющeгo фaктopa, имеет xa-paктepныe зaкoнoмepнocти изменений и oнpeдe-ленную взaимocвязь между ними.
Ta^ coнocтaвитeльнoe изучение взaимocвязи cтpyктypныx нepecтpoeк кoжи нpи oжoгe 3 «a» стене-ни c изменением величин ВЕД в нepиoд aльтepaции выявилo нaибoлee cильнyю нoлoжитeльнyю cвязь (r=0,69±0,26) eгo c увеличением oтнocитeльнoгo o6^ eмa ocнoвнoгo вeщecтвa ^бл. 2). Изменение orao-cитeльныx oбъeмoв cocyдoв, coeдинитeльнo-ткaн-ных клeтoк и вoлoкoн нocит xapaктep cлaбoй или отльтой oбpaтнoй взaимocвязи. В нepиoд нpoли-фepaции выявляeтcя cильнaя нoлoжитeльнaя взa-имocвязь eгo c увеличением oтнocитeльнoгo o6^ eмa ocнoвнoгo вeщecтвa (r=0,65±0,26) и шедини-тeльнo-ткaнныx клеток (r=0,54±0,32). Изменения oтнocитeльнoгo oбъeмa вoлoкoн и cocyдoв имели cpeднюю oбpaтнyю взaимocвязь (тaбл. 2). Вмecтe c тем, нpи выяcнeнии взaимoзaвиcимocти изменения изyчaeмыx нoкaзaтeлeй нa вceм нpoтяжeнии вocнaлитeльнoгo нpoцecca выявлeнa cильнaя нo-лoжитeльнaя cвязь тoлькo между oтнocитeльным oбъeмoм ocнoвнoгo вeщecтвa и вeличинoй ВKД (r=0,75±0,l5), c ocтaльными нapaмeтpaми oтмe-чaeтcя cлaбaя или cpeдняя oтpицaтeльнaя cвязь (тaбл. 2).
Cлeдoвaтeльнo, динaмикa изменения coдep-жaния ocнoвнoгo вeщecтвa в нepиoд aльтepaции oбycлaвливaeт xapaктep и выpaжeннocть тост-тpaвмaтичecкoгo oтeкa и в ocнoвнoм, oнpeдeляeт изменение величин ВKД. В нepиoд нpoлифepaции вecoмый вклaд в изменение ВВД внocит увеличение oтнocитeльнoгo oбъeмa не тoлькo шедини-тeльнo-ткaнныx клeтoк, нo и ocнoвнoгo вeщecтвa, чтo, вepoятнo, cвидeтeльcтвyeт o не нoлнoй зaвep-шeннocти вocнaлитeльнoгo нpoцecca.
Taким oбpaзoм, нpoвeдeннoe иccлeдoвaниe (pиc.l) нoкaзaлo, чтo изучение нaнpяжeннo-дe-фopмиpoвaнныx cocтoяний cтpyктyp кoжи нpи oжoгe нocpeдcтвoм измepeния ВKД нoзвoляeт не тoлькo нpocлeдить динaмикy вocнaлитeльнoгo нpoцecca, нo и являeтcя интeгpaтивным нoкaзaтe-лем paзличнoй cтeнeни нoвpeждeния eë cтpyктyp. Этo дaeт вoзмoжнocть, в нocлeдyющeм (c yчeтoм нoлyчeнныx дaнныx), cвoeвpeмeннo ^ppe^^ poвaть (cтaвя бoлee тoчный лoкaльный диaгнoз) тaктикy лечебных мaнинyляций. C иcнoльзo-вaниeм нoлyчeнныx peзyльтaтoв иccлeдoвaния paзpaбoтaны и нoлyчeны 5 нaтeнтoв и нoлoжи-тельных peшeний нo зaявкaм m нpeднoлaгaeмыe изoбpeтeния.
Taблuua N 2
Взaимocвязь динaмики величин ВKД c изменениями oтнocитeльнoгo oбъємa cтpyктyp тежи в oчaгє тєpмичєcкoгo вocнaлєния (3 «a» стенень)
Bce cpoки Пеpиoд aльтеpaции Пеpиoд пpoлифеpaции
Ocнoвнoе в-вo r=O,75±O,l5 r=O,69±O,26 r=O,65±O,26
Клетки г^і^ЗЗ r=-O,12±O,49 r=O,54±O,З2
Boлoкнa r^O^O^ r=-O,61±O,З1 r=-O,48±O,З4
Cocyды r^-O^O^l r=-O,64±O,З r=-O,41±O,42
Пpoизвoдные кoжи r=-O,46±O,28 r=-O,58±O,ЗЗ r=-O,Ol±O,5
з2
THE COMPARATIVE ANALYSIS IN CHANGES OF STRUCTURES OF A SKIN AND THEIR BIOMECHANICAL PROPERTIES IN DYNAMICS OF A THERMAL INFLAMMATION
V.G. Izatulin, I.A. Bulankina, N.I. Arsenteva, V.J. Lebedinski], V.V. Malyshev (Irkutsk State Medical University)
Carried out research has shown, that dynamics of changes in morfeofunctional properties and biomechanical characteristics of structures of a skin at a thermal inflammation of a different degree has both the general laws, and the features of development defined by intensity of influence of alterating factor. Studying the intense-deformed conditions of structures of a skin by means of measurement of intraskin pressure allows not only to track dynamics of inflammatory process, but also is integrative parameter of a various damage rate of its structures that enables, in the subsequent, in due time to correct tactics of medical manipulations.
ЛИТЕРАТУРА
1. Васильцов М.К. Метод полуколичественного определения содержания коллагена в гистологических препаратах // Материалы областной научно-практической конференции стоматологов. — Иркутск, 1971. — С. 69-70.
2. Изатулин В.Г. Пролактин в механизмах формирования воспалительно-репаративных процессов при экстремальных состояниях: Автореф. дис. ... докт. мед. наук. — Иркутск, 2000. — 37с.
3. Корваял Х.Ф., Паркс Д.Х. Ожоги у детей: Пер. с англ. — М.: Медицина, 1990. — 512с.
4. Кожа (строение, функция, общая патология и терапия) / Под ред. А.М. Чернуха, Е.П. Фролова. — М.: Медицина, 1982, 336с.
5. Лебединский В.Ю., Шурыгин М.Г., Дудкин В.В. Внутримиокардиальное давление (природа, способы измерения и регистрации). — Иркутск, 1991. — 76с.
6. Макаров А.К., Белохвостиков Ю.П. Регистрация и моделирование тканевого давления в нормальных и патологически измененных органах. — Иркутск: Изд-во ИГМИ, 1987. — 150с.
7. Сорокин А.А., Лебединский В.Ю. Тканевое давление в оценке воспалительной реакции кожи при термическом ожоге // Управление морфогенезом тканей и органов в процессах адаптации. — Иркутск. — 1989. — Ч.
1. — С. 118-119.
