УДК 619:612:017.636.2:576.8
Турко 1.Б., Семанюк В.1., Пеленьо Р А., Куляба О.В., Турко Я.1., Верхолюк М.М. ©
Лъв\всъкий нацюналънийутеерситет еетеринарногмедицини та бютехнологт
Iмет С.З.Тжицъкого
ДЕЯК1 ОСОБЛИВОСТ11МУННОГО СТАТУСУ ТВАРИН, 1НФ1КОВАНИХ В1РУСОМ ЛЕЙКОЗУ ВЕЛИКО! РОГАТО! ХУДОБИ НА ФОН1 НЕЗБАЛАНС0ВАН01 ГОД1ВЛ1
Дослгджено особливостей быкового обмту та ¡муттету у кор1в при лейкоз/ за незбалансованог годгвлг тварин. Встановлено особливост1 динамжи загалъного бтка, быкових фракцш, гмуноглобулшв, Т- / В-л1мфоцыт1в у кор1в при порушент цукрово-протетового ствв1дношення рацюну та тфжувант в1русом лейкозу.
Ключое1 слова: корова, лейкоз, гоЫвля, кров, ¡муттет.
Вступ. Лейкоз велико! рогато! худоби належить до хвороб, як1 характеризуемся хрошчним переб1гом \ пухлинною природою. При цьому збшьшуеться частота виникнення геномних порушень в органах \ тканинах оргашзму, як1 можуть бути причиною пщвищення р1вня як соматичного мутагенезу, так \ мутагенезу в генеративних кл1тинах. Таким чином була сформована теор1я в1русно-генетичного походження злояюсних пухлин, у тому числ11 лейкозу (3,7).
Слщ зауважити, що будь-яка теор1я про природу захворювання стае науково обгрунтованою лише тод1, коли вона дае вщповщь не лише на питания етюлоги, але й на питания мехашзму виникнення хвороби та реакцп макрооргашзму на дш чужорщних агент1в (1,2).
3 ще! точки зору вивчення метабол1чних та ¿мунних процеав в оргашзм1 кор1в уражених в1русом лейкозу велико! рогато! худоби, а саме гуморального та кл1тинного ¿муштету, сприятиме розкриттю бюлопчних мехашзм1в захисту вщ ще! хвороби (4,5,6).
Особливо! уваги заслуговуе з'ясування цього питания за умов порушення балансу год1вл1 та у динамщ розвитку шфекцшного процесу.
Метою роботи було встановлення особливостей гемопоезу, бшкового метабол1зму, гуморального I кл1тинного ¿муштету тварин за р1зного цукрово-проте!нового стввщношення та впливу цього фактору на захворювашсть тварин лейкозом.
Матер1али 1 методи дослщження. Тварин хворих на лейкоз виявляли серолопчним методом, дослщжуючи сироватку кров1 в реакци ¿мунодифузп (Р1Д) з наступним пщтвердженням д1агнозу шляхом проведения гематолопчних дослщжень.
© Турко 1.Б., Семанюк В.1., Пеленьо Р А., Куляба О.В., Турко Я.1., Верхолюк М.М., 2012
353
Дослщження проводились в два етапи. На I еташ вивчали вплив збалансованосп год1вл1 за цукрово-протешовим сшввщношенням на захворювашсть тварин лейкозом. На II етат було сформовано 3 групи тварин:
1) контрольну групу тварин формували корови, в сироватщ кров1 яких у реакци ¿мунодифузи не було виявлено антитш проти в1русу лейкозу \ як1 знаходились на незбалансованому рацюш;
2) перша дослщну групу утворювали позитивно реагуюч1 в Р1Д тварини, яю знаходились на незбалансованому рацюш;
3) друга дослщна група складалась ¿з серопозитивних кор1в, як1 знаходились на збалансованому рацюш.
Окр1м гематолопчних (визначення вмюту еритроциив, гемоглобшу, лейкоцит1в та л1мфоцит1в) проводили також бюх1м1чш та цитолопчш дослщження кров1 з метою встановлення вмкту окремих показник1в гуморального та кл1тинного ¿муштету, а саме: вмют загального бшку визначали рефрактометрично; бшков1 фракци - методом електрофорезу в агаровому \ пол1акриламщному гелях, р1вень Ig A, Ig G, Ig M методом дискретного осадження, актившсть кл1тинного ¿муштету методом спонтанних та ¿мунних розеток.
Результати дослщжень. Серолопчними дослщженнями на лейкоз в РЩ 196 кор1в було видшено 14 позитивно реагуючих тварин, що становить 7,1% всього погол1в'я. Анал1зуючи результати дослщження сироватки кров1 в Р1Д протягом 2 роюв, загальний вщсоток видшення позитивно-реагуючих тварин зменшився з 9,9% до 7,1%. Одним ¿з фактор1в тако! динамши, ймов1рно, можна вважати пщвищенням резистентност1 тварин з причини нормал1зацп год1вл1, зокрема цукрово-бшкового сшввщношення, яке, як вщомо впливае на засвоювашсть бшюв корму, а отже \ на трансформацию 1х в ¿мунш глобулши -фактори гуморально! резистентност1 тварин.
В результат! гематолопчних дослщжень позитивно реагуючих в РЩ кор1в встановлено (табл.1) що, вмют еритроципв у кров1 дослщжуваних кор1в виявився найвищим у тварин, не шфшованих в1русом лейкозу ВРХ, { становив 6,9 млн/мкл, що вщповщае ф1зюлопчнш нормг
Таблиця 1.
Результати гематолопчних дослщжень ¡нфжованих в1русом лейкозу кор1в
Показники
я «
и «
ч О
Реагування кор1в в Р1Д
Р1Д (-)
тварини
Р1Д (+) тварини (незбалансований _рацюн)_
Р1Д (+) тварини (збалансований рацюн)
Еритроцити
млн/мкл
6,9+0,2
5,9+0,2 *
6,5+0,1 *
Гемоглобш
г/л
114,6+2,0
96,0+3,2 *
106,1+3,1 *
Лейкоцита
тис/мкл
9,3+0,5
13,8+0,7 *
16,4+0,6 **
.Шмфоцити
%
56,1+2,7
80,0+4,0 *
90,1+3,9 ***
У кор1в, шфжованих в1русом лейкозу ВРХ, що перебували на збалансованому рацюш, вмют еритроцит1в знижувався до 6,5 млн/мкл \ виявився найнижчим у кор1в , що перебували на незбалансованому рацюш до
354
5,9 млн/мкл (р<0,05). Кшьккш змши концентраци еритроци'пв знайшло свое вщображення1 у вмкт! гемоглобшу.
Змши в кшькост! еритроци'пв та гемоглобшу супроводжувались зворотними змшами в кшькост1 лейкоциив.
За результатами бюх1м1чних дослщжень встановлено пщвищення з 71,1 г/л до 78,0 г/л р1вня загального бшку сироватки кров1 у кор1в при балансуванш за цукрово-протешовим сшввщношенням (2 дослщна група), що, ймов1рно, характеризуе прискорення бшоксинтетичних процеав, обумовлених кращим засвоенням бшка корму.
Зростання вмкту загального бшку у тварин 2 дослщно! групи вщбуваеться як за рахунок альбуммв, що виконують функцш резервного пластичного бшка, так { глобулмв вщповщно на 10,3% { 9,5%.
Згщно з даними дослщження вмюту глобулшових фракцш за результатами горизонтального електрофорезу в агаровому гел1 основш змши вщбуваються у фракщях бета- та гамма-глобулЫв. Так, у кор1в, що утримувались на збалансованому за цукрово-протешовим сшввщношенням рацюш (2 дослщна група), вмкт гамма-глобулмв виявився вищим на 14,3% (р<0,01) пор1вняно з контролем. Встановлеш особливост1 пщтверджують припущення про бшьш активне засвоення бшюв корму, як1 значною м1рою сприяють синтезу ¿мунних бшюв, пщвищуючи тим самим резистентшсть тварин. Пщтвердженням стимулювання ¿мунних реакцш е особливост1 динамжи вмкту бшюв бета-глобулшово! фракци, до складу яких входить комплемент, який, як вщомо, бере участь в ¿мунних реакщях.
Вщносно змш у концентраци р1зних груп ¿муноглобулмв встановлено, що при збалансуванш рацюну за цукрово-протешовим сшввщношенням значною м1рою реагують ¿муноглобулши класу G1 та G2, на що також вказуе загальне пщвищення р1вня бшюв посттрансфериново! зони при електрофорез1 в пол1акриламщному гел1 з 24,2 г/л до 26,2 г/л (р<0,001).
В результат! дослщжень ¿муноглобулшового спектру сироватки кров1 кор1в встановлено деяк1 законом1рност1, обумовлеш як шф1куванням тварин в1русом лейкозу, так \ р1внем цукрово-протешового сшввщношення. Перш за все, вщм1чено зростання р1вня загально! кшькост1 ¿муноглобулмв (мал. 1) з 20,7 г/л у тварин контрольно! групи до 22,6 г/л у кор1в, яю позитивно реагували в Р1Д при незбалансованому рацюш. При збалансованому рацюш р1вень ¿муноглобулЫв зростав ще на 4,8%.
Анал1зуючи фракцшний склад ¿муноглобулмв, встановлено, що змши в концентраци загально! кшькосп ¿муноглобулшв проходять в основному за рахунок ¿муноглобулш1в класу G. Слщ вщзначити, що у тварин, яю позитивно реагували в Р1Д при незбалансованому рацюш, вмют ¿муноглобулмв класу G зрю на 10,1% I становив 19,7 г/л. При балансуванш рацюну р1вень ¿муноглобулЫв класу G в сироватщ кров1 зростае до 12,8%.
Враховуючи даш л1тератури про важливу роль ¿муноглобулмв класу G в опсошзуючих реакщях та процесах фжсаци комплементу, як1 е обов'язковими в ход1 нейтрал1заци антигешв, зокрема в1русних, стае зрозумшою под1бна
355
динамжа р1вня ¿муноглобулмв класу О сироватки кров1 кор1в, шфжованих в1русом лейкозу.
Мал.1 Р1вень загально1*кшькост1 ¡муноглобулш1в сироватки кров1 дослщних ко|Нв (г/л)
контрольна Р1Д(+) Р1Д(+)
незбалансований збалансований
При балансуванш цукрово-протешового стввщношення рацюну вщзначаеться подальше зростання р1вня ще! фракцп ¿муноглобулЫв, що, очевидно, е результатом актив1заци бшкового метабол1зму та зростання процеав засвоення бшюв корму.
Вщсутшсть достов1рних змш в динамщ ¿муноглобулмв клаЫв А \ М при шфшуванш в1русом лейкозу, ймов1рно, пояснюеться даними л1тератури про основну участь ¿муноглобул1ну класу А в процесах нейтрал1заци токсишв, а ¿муноглобулшу класу М в процесах аглютинаци та л1зування. Вказаш ж процеси ¿мунного захисту в основному вдаграють роль у протибактершному ¿муштетг
Зростання ж вм1сту цих клаЫв ¿муноглобулмв при балансуванш рацюну за цукрово-протешовим сшввщношенням, враховуючи покращення засвоення бшюв корму та бшкового метабол1зму в цшому, вказуе на стимуляцш ¿мунних реакцш оргашзму.
В результат! дослщжень кл1тинних фактор1в ¿муштету було встановлено кореляцшний зв'язок у кшькост1 Т- \ В-л1мфоцит1в та шфжовашстю в1русом лейкозу ВРХ.
356
Суттеве зростання р1вня як Т-л1мфоцит1в, так \ В-л1мфоцит1в встановлено в обох дослщних трупах, незважаючи на незбалансовашсть рацюну за цукрово-протешовим стввщношенням (мал.2).
Мал.2 Р1вень Т- 1 В-л1мфоцит1в кров1 кор1в, ¡нфжованих в1русом лейкозу ВРХ (тис/мкл)
контрольна Р1Д(+) Р1Д(+)
незбалансований збалансований
В Т-л1мфоцити □ В-л1мфоцити
Слщ наголосити позитивний корелятивний зв'язок в динамщ1 В-л1мфоцит1в та ¿муноглобулмв. Пояснюючи такий взаемозв'язок варто вщм1тити, що л1мфоцитарна система генеруе \ поставляв до периферичних л1мфо!дних оргашв В-л1мфоцити трьох тишв, здатних вщповщно забезпечувати накопичення плазматичних кл1тин, що продукують антитша - IgM, IgG або клаЫв.
Висновки.
1. Вщсоток тварин шфжованих в1русом лейкозу ВРХ був майже у 2 рази вищий за умови незбалансованосп год1вл1 за цукрово-протешовим стввщношенням, пор1вняно з тваринами, де год1вля була збалансована.
2. У РЩ-позитивних кор1в спостер1гаеться тенденщя до зниження кшькост1 еритроцит1в та гемоглобшу у кров1 з одночасним в1рогщним зростанням вмкту лейкоцит1в зокрема, л1мфоцит1в.
3. 1снуе тюний позитивний корелятивний зв'язок м1ж засвоенням бшюв корму, що значною м1рою обумовлюеться цукрово-протешовим
357
сшввщношенням, i такими показниками бшкового обмшу як загальний бшок, бета- та гамма-глобулши (¿муноглобулши), трансферини, пост-трансферини;
4. Наявшсть Bipycy лейкозу ВРХ в макрооргашзм1 спричиняе динам1чш змши i бшковому статус1, яю безпосередньо пов'язаш з цукрово-протешовим сшввщношеня рацюну.
5. При нормал1заци цукрово-протешового сшввщношення пщвищуеться резистентшсть тварин, на що вказуе зростання синтезу ¿мунних бшюв клаЫв G, А, М, обумовленого бшьш активним засвоення бшюв корму.
6. Проел щковуеться ткний корелятивний зв'язок м1ж вмютом ¿муноглобулшу класу G i наявшетю Bipycy лейкозу ВРХ в оргашзм1 тварин.
7. Наявшсть Bipycy лейкозу в оргашзм1 спричиняе актив1зування кл1тинного ¿муштету, який безпосередньо регуляторно пов'язаний з б1осинтетичними процесами ¿мунних 61лк1в.
Л1тература
1. Гаврилова Г.А., Макаров Ю.А., Бахметьев C.B. Диагностика лейкоза крупного рогатого скота// Ветеринария.- 2004.- №1.- С.20-23.
2. Диагностика и профилактика лейкоза крупного рогатого скота/ Р.Ф. Галеев, A.A. Руденко, Ф.Р. Валиев, P.P. Абубакиров// Практик.- 2003.- №7-8.-С.43-50.
3. 1нфекц1йн1 хвороби тварин/ Б.Ф. Бессарабов, А.А., G.C. Воронш та ¿н; П1д ред. А.А. Сидорчука. - М.: Колос, 2007.- 671с.
4. Крикун В.А. Лейкоз крупного рогатого скота и иммунологическая толерантность// Ветеринария.- 2002.- №6.- С.7-9.
5. Магер С.Н., Храмцов В.В. Краткий аналитический обзор приоритетных фундаментальных исследовании в области ветеринарной экологии и лейкозологии// Сибирский вестник сельскохозяйственных наук.-№2.- 2005.-C.124-126.
6. Шипицин А.Г., Схатум А.К. Патоморфология при лейкозе крупного рогатого скота// Ветеринария.- 2005, №9.- С.11-12.
7. Шкаева H.A., Бурдаков В.А. Лейкоз крупного рогатого скота на территории Южного Урала// Ветеринария.- 2005, №9.- С.9-10.
Summary
Turko I., Semanyuk V., Pelenyo R., Kulyaba O., Turko Ya., Verholyuk M.
Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies named
after S.Z.Gzhytskyj
SOME FEATURES OF IMMUNE STATUS OF ANIMALS INFECTED WITH BOVINE LEUKOSIS BACKGROUND UNBALANCED ON FEEDING
The features of protein metabolism and immunity in cows with leukemia by unbalanced feeding of animals. The peculiarities of the dynamics of total protein, protein fractions, immunoglobulins, T- and B-lymphocytes in cows under violation of the sugar-protein ratio of diet and infection with a virus leukemia.
Рецензент - д.б.н., професор Маслянко Р.П.
358